Yeni Bir Beyazlatıcı Ajan Olarak Antioksidan Grafen Oksit Nanoribbon Mikroftalmi İle İlişkili Transkripsiyon Faktörü İle İlgili Melanogenez Mekanizmasını Engeller

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ÖZ:İçindemelaninsentez süreci, oksidatif reaksiyonlar önemli bir rol oynar ve oksidatif stresi azaltarak melanin üretimini engellemek için iyi bir stratejidir. Fulleren ve türevleri veya kompleksleri, güçlü serbest radikal süpürücüler olarak kabul edildi ve ayrıca keşfetmek için çok katmanlı sp2nanokarbon uyguladık.melaninsentezi inhibe edici mekanizmalar. Bu çalışmada, düzenleme için çok duvarlı karbon nanotüpler (MWCNT'ler), kısa tip MWCNT'ler, grafen oksit nanoşeritler (GONR'ler) ve kısa tip GONR'ler gibi yeni nanomalzemeler kullandık.melaninüretme. Sonuçlar, GONR'lerin hücre içi ve hücre dışı oksidatif stres analiz platformlarında diğerlerinden daha iyi anti-oksidatif yeteneklere sahip olduğunu gösterdi. GONR'lerin oksijen içeren fonksiyonel gruplara sahip olduğunu önerdik. 2',7'-diklorodihidrofloresein diasetat tahlilinde, GONR'nin metal iyonlarını süpürücü reaktif oksijen türlerine şelatlayabildiğini öğrendik. Moleküler içgörü görünümünde, bu nanomalzemelerin mikroftalmi ile ilişkili transkripsiyon faktörü ile ilgili gen ifadelerini azaltarak melanin sentezini aşağı regüle ettiğini ve protein ifadelerinde benzer sonuçlar olduğunu gözlemledik. Özetlemek gerekirse, GONR'ler bir roman olarak potansiyel bir ajandır.antioksidanve cilt beyazlatıcı kozmetoloji malzemesi.

cistanchemelanin oluşumunu inhibe

1. GİRİŞ

Deri, insan vücudunun dış yüzeyini kaplayan organdır. Arayüz çevre ile temas halinde olduğundan, deri tabakası vücudu patojenlere karşı korumada, aşırı su kaybını önlemede, vücut ısısını düzenlemede vb. önemli bir rol oynar. Melanositler, deri epidermisinin bazalmembranında büyür ve hücresel içeriğin yüzde 5 ila yüzde 10'unu oluşturur. İnce, uzun, flama benzeri dendritlere ve dallanmalara sahip tek hücreli "bezler" olarak karakterize edilirler. Melanositler, yakın çevrelerindeki epidermal hücrelerde hareket ederek, her bir melanositin etrafında bir epidermal hücreler kümesi oluşturur. Cildin yaşlanmasının birçok iç ve dış nedeni vardır ve bu faktörlerden biri güneş ışığından gelen ultraviyole (UV) radyasyondur.1 UV'ye maruz kalma sırasında, ciltteki reaktif oksijen türleri (ROS) seviyeleri oksidatif stres olarak bilinen çarpıcı biçimde artar.Çeşitli çevresel toksisite faktörleri aynı zamanda pestisitler, karbon tetraklorür, ağır metaller, aromatik aminler ve partikül madde 2.5(PM2.5) gibi cilde oksidatif stresi artırır.2 Biyokimyasal mekanizmada, hücre içi oksidanlar enzimatik olmayan sistemden üretilir ve onları ROS, melanogenez yolunu tetikler.

ROS'a ek olarak, gen ekspresyonu, inflamasyon, endokrin değişiklikleri ve pigment alımı dahil olmak üzere melanin üretimini etkileyen birçok faktör vardır.1 Melanin üretiminin ilk adımlarında, tirozinaz, tirozini feomelanin ve eumelanine katalize etmede rol oynar. Her iki pigmentin üretim mekanizmaları da benzerdir, bunlar arasında L tirozin ile 3,4-dihidroksi-L-fenilalanin (L-DOPA)'ya hidroksilasyon ve dopakinona L-DOPA oksidasyonu dahildir. Bir sonraki adımda, dopamin, mikroftalmi ile ilişkili transkripsiyon faktörü (MITF) tarafından düzenlenen tirozinazla ilişkili protein 1(TRP-1) ve tirozinazla ilişkili protein 2 (TRP-2) inmelanozom tarafından oksitlenir. oluşturmak üzeremelanin.Son olarak, melanin stratumcorneum içinde olgunlaşır ve çökeltilir.4,5 Bunlar bazal tabakanın komşu keratinositlerine nüfuz eder ve DNA'larını herhangi bir UV kaynaklı mutasyon veya modifikasyondan korur. olgunlaşmışmelaninmelanozomlar içindeki keratinositlere6−9 aktarılır ve sonunda uzun süreli bir pigmentasyona yol açar. Mercimek, çiller ve kahverengi/siyah noktalar bazen erkeklerde ve kadınlarda sosyal sorunlara neden olur. Oksidatif stresi bloke etmek veya tetirozinaz aktivitesini bastırmak, hiper-pigmentasyon ve dermatolojik bozukluklar sendromunu aşağı regüle etmek için bir stratejidir.antioksidanlarROS'un neden olduğu hiper-pigmentasyonları ve hücresel hasarı iyileştirir.10,11 Bu nedenle sentezlenen anti-oksidatif bileşiklerin cilt bakımı uygulamalarında birçok biyofonksiyonel uygulaması vardır.

Fullerene (C60), karbon nanotüp (CNT), grafen ve grafen nanoribbon (GNR), dünya çapında geniş çapta araştırılan dört çeşit sp2 nanokarbondur.12 Fulleren ve türevleri veya kompleksleri, uzun süredir güçlü serbest radikal süpürücüler olarak kabul edilmektedir. Yodoh et al. katabolik stres kaynaklı dejenerasyona karşı koruyucu bir ajan olarak suda çözünür C60 kullanmıştır. Injac et al. C60(OH)24'ün güçlü olduğu sonucuna vardıantioksidanoksidatif stres çok yüksek olduğunda bileşik. Okuda et al. C60 komplekslerinin NO aracılı hücre hasarını önleyebileceğini öne sürdü.13,14 Tong ve ark. C60 komplekslerinin artan süperoksit seviyelerinin neden olduğu beyinle ilgili hastalıkları tedavi etmek için umut verici adaylar olabileceğini gösterdi. Aslında, bir Japon şirketi 2006 yılında kozmetik kullanım için güçlü antioksidan aktiviteye sahip fullerenleri tanımladı. Lucente Schultz ve ark. fonksiyonelleştirilmiş tek duvarlı CNT'lerin (SWCNT'ler) oksijen radikali süpürebilirliğinin, dendritik C60.15−19Fenoglio ve ark. çok duvarlı CNT'lerin (MWCNT'ler) harici bir hidroksil veya süperoksit radikal kaynağı ile temas halinde dikkate değer bir radikal süpürme kapasitesine sahip olduğunu gözlemlediler.20 Yoğunluk fonksiyonel teorisi hesaplamaları ayrıca serbest radikal süpürücüler olarak bir SWCNT modelini ortaya çıkardı. 2004'te Novoselov ve diğerleri, ilk olarak grafenin güçlü bir ambipolarelektrik etki sergilediğini ve elektronik uygulamalar için umut verici olabileceğini gösterdiler.21 Bunu takiben, grafenin Dirac denklemi ile tanımlanan 2 boyutlu parçacıklar için ayırt edici elektronik özelliklere sahip olduğunu göstermeye devam ettiler. 22,23 Çığır açan bu iki makaleden bu yana, grafen tabanlı araştırmalara giderek daha fazla ilgi gösterildi.24−30 Örnek, Qiu et al. 2014 yılında, grafen oksit ve birkaç katmanlı grafenin önemli ölçüde sergilediğini gösterdiantioksidanaktivite ve çeşitli biyomoleküler molekülleri oksidasyondan koruyabilir.31Han ve ark. 2007'de deneysel olarak GNR'lerin enerji açığının şerit genişliğini değiştirerek litografi işlemi sırasında kontrol edilebileceğini gösterdi.32 Dört nanokarbon arasında en az ilgiyi GNR'ler aldı. Bildiğimiz kadarıyla, grafen oksit nano şeritlerin (GONR'ler) antioksidan özellikleri hakkında çok az araştırma vardır.31,33 Bu nedenle, bu çalışmada MWCNT'leri, kısa MWCNT'leri, GONR'leri ve kısa GONR'leri dikkatlice hazırladık ve bunların antioksidan özelliklerini ve ilgili sonuçlarını sistematik olarak karşılaştırmayı amaçladık. .

2. SONUÇLAR VE TARTIŞMA

2.1. MWCNT'lerin ve GONR'lerin morfolojisi.

Figure 1a shows the low- and high-magnification transmission electron microscopy (TEM) images of MWCNTs and short MWCNTs. Following acidic cutting under ultrasonication, the length of MWCNTs could be shortened from >10 μm ila2−3 μm. Aynı zamanda nitrik asit uygulamasının düz boru yüzeylerini pürüzlendirdiği gözlemlendi. Yüksek büyütmeli resimde bazı çentikler ve düzensiz şekiller görüntüleniyor. Ayrıca, mikrodalga reaksiyonları yoluyla MWCNT'ler ve kısa MWCNT'ler kullanılarak sırasıyla GONR ve shortGONR elde edilir. Ayrıca GONR ve kısa GONR'nin düşük ve yüksek büyütmeli TEM resimlerini de gösterdik. Büyük boylamasına açma ve küçük yatay kesme nedeniyle, GONR'lerin MWCNT'lerden daha kısa olduğu görülüyor. Öte yandan, yüksek büyütmeli resimler, MWCNT'lerinkinden daha büyük çaplar, yani 0.11-0,18 μm GONR gösterdi ve bu da açma işleminin başarılı olduğunu gösteriyor. Benzer şekilde, kısa GONR'ler, kısa MWCNT'lerden daha kısa uzunluk ve daha büyük çap sergilemiştir. Yeni sıkıştırma açma işlemimizin hava kompresöründe, GONR'lerin ince katmanlı yapıları, daha kalın merkezi MWCNT'leri korurken 250 W'lık aynı mikrodalga gücü için ilk raporda elde ettiğimizden daha azdı.12 Bu, çekirdek kabuk MWCNT/GONR heteroyapısının daha büyük olasılıkla yeni süreçte tüm mikrodalga güçlerinde tamamen açılmış nanoşerit yapısı yerine görünür. Önceki çalışmalarımızdaki kısa GONR ile karşılaştırmak için34, daha yüksek mikrodalga gücü şeritlerin yanlarında daha fazla çentik oluşturdu ve güzel düzgün şeritler oluşturmadı. Şekil 1a'da iki farklı türde Cu ızgara kullandığımıza dikkat edin. Yeterli uzunluktaki MWCNT'ler ve GONR'ler için, karbon ile stabilize edilmiş bir lacey formvarlı Gu ızgarası (ürün no. 01881-F, Ted Pella, Inc., ABD) kullanıldı. Lacey karbon filmindeki açık delikler, nano karbonlar ve karbon film arasında örtüşen bir aktarım görüntüsünü engelledi. Koyu gri ağlar, lacey karbon filmine aittir. Bununla birlikte, kısa MWCNT ve kısa GONR için karbonla stabilize edilmiş formvarlı Gu ızgarası (ürün no. 01800-F, Ted Pella, Inc., ABD) gerekliydi. Bunun nedeni, lacey karbon filmindeki büyük deliklerin, kısa MWCNT ve kısa GONR'yi verimli bir şekilde tutmak için sorunlara neden olmasıdır. Şekil 1'de gösterildiği gibi, kısa MWCNT'lerin ve kısa GONR'lerin altındaki açık gri kontrast, hafif bir karbon tabakasıdır. Bu karbon katmanları, ısı ve elektrik iletme özellikleri aracılığıyla elektron ışınına maruz kalan formvar filmi stabilize etti.

2.2. MWCNT'lerin ve GONR'lerin Yapıştırma Konfigürasyonları.

Dört nanokarbonun Raman spektrumları Şekil 1b'de sunulmuştur; GONR'lerin D bandı, açma işleminden sonra MWCNT'lerinkinden daha yüksekti. Bu, MWCNT'lere kıyasla daha yüksek oksidasyon seviyesine ve daha fazla sayıda GONR kenar yapısına bağlandı. Bu fenomen aynı zamanda 2011.12'de gözlemlediğimize benzerdir. Yüksek grafitizasyon seviyesi nedeniyle, MWCNT'lerin G bandı en düşük tam genişlikte maksimum sayıya sahipti. Dört nanokarbonun ID/IG oranları 0.076, 0.502, 0.483 ve 0.700 idi. Kısaca, azalan uzunluk ve yüzey oksidasyonu, kusur seviyesini artırmış ve böylece ID/IG oranlarını daha yüksek hale getirmiştir. D' piki tüm kusurlu grafenlerde bulunur ve bir kalite ölçüsü olarak görülür.35 Şekil 1b'de gösterildiği gibi, dört spektrumdaki D' pikleri ya kesme ya da açma işleminden sonra daha belirgin hale gelir ve bu da onların tahribatlı süreçler olduğunu düşündürür. birçok kusur. Şekil 1c,ddört nanokarbonun X-ışını fotoelektron spektroskopi spektrumlarını göstermektedir. Görünüşe göre, D' piki kısa GONR'ler için en net olanıdır. Şekil 1c'de gösterildiği gibi, KMnO4'ün asidik bir ortamda güçlü oksidasyon kabiliyeti nedeniyle O seviyesi önemli ölçüde yüzde 7,6'dan (MWCNT'ler) yüzde 19,9'a (GONR'ler) yükseldi. Öte yandan, O seviyesi MWCNT'den kısa MWCNT'lere yüzde 0,8 biraz arttı. Önemli olarak, kısa GONR için en yüksek O seviyesi yüzde 38,3'tür; bu, nano şeritlerin uçlarının oksijen fonksiyonel grupları eklemenin düzlemsel sp2 yüzeylerinden daha kolay olacağını ima eder. Hem MWCNT'lerin hem de kısa MWCNT'lerin açma işleminden sonra daha büyük tam genişlikte yarı maksimum sayı ve C1s tepelerinin yüksek bağlanma enerjisine kayma, Şekil 1d'de gösterilmektedir. Grafen oksitler için, yüksek bağlanma enerjisindeki çözülmüş tepeler taraf C−C(CC), C−O,CO ve COOH bağlarına atanabilir.36 2013'te GONR (200W)'yi karakterize ettik37 ve sonuçlar bu çalışma sonuçlarına benzerdi.Bu çalışma sonucuna varıldı. Tüpten şeride dönüşüm sırasında daha fazla oksijen içeren fonksiyonel grupların üretildiği anlamına gelen Raman spektrumları fenomeni (Şekil 2).

2.3. MWCNT'lerin ve GONR'lerin Anti-oksidatif Özellikleri.

2.3.1. 1,1-Difenil-2-pikrilhidrazil Serbest Radikal Süpürme Aktivite Deneylerinin Belirlenmesi.

1,1-Difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) serbest radikal süpürme aktivitesi,antioksidanantioksidan kapasiteyi tespit etmek için uygulanan platform; dört nanokarbon için sonuçlar Tablo 2'de açıklanmıştır. DPPH testinde, pozitif kontrol olarak 100 μM konsantrasyonda C vitamini kullanılmıştır. MWCNT'lerin, kısa MWCNT'lerin, GONR'lerin ve kısa GONR'lerin anti-oksidatif aktivitelerini test etmek için, özellikleri ölçmek için 1, 5 ve 10 mg/L'lik dozajlar reaksiyon çözeltisine inkübe edildi. MWCNT'ler, kısa MWCNT'ler, GONR'ler ve kısa GONR'ler 1{{20}} mg/L'de (19.2 ±0.3, 12.1 ± 0.3, 26.8 ± 0.3 ve 30.0) orta düzeyde engelleyici yeteneklere sahipti. ± yüzde 0.4), bastırma için ise 100 μM'de (yüzde 93.4 ± 0.1) Çad vitamini benzer bir durum.

2.3.2. İyon-Şelasyon Aktivitesi Deneyi.

Oksidatif stres durumu içinde, ferrozin, kantitatif olarak ölçülmek üzere Fe2 plus ile bir kompleks geliştirebilir. Kenetleme aracılarının varlığında, kompleks bozulur ve demir iyonlarının Fe2 plus kompleksinin koyu kırmızı renginden azalmasına neden olur. Pozitif kontrol olarak EDTA kullandık. Tablo 2, MWCNT'lerin, kısa MWCNT'lerin, GONR'lerin ve kısa GONR'lerin 10 mg/L (29.2 ± {{10}}.8, 28.7 ± 0) şelatlama aktivitesine sahip olduğunu göstermektedir. 7, 69.7 ± 0.6 ve 68.9 ± 0.3 yüzde), pozitif kontrol 100 uM'de benzer bir koşula sahipti (yüzde 93.4 ± 0.1).

2.3.3. Demir-Azaltıcı Antioksidan Güç Ölçümü.

Ferrik indirgeme potansiyeli testi, Fe(III)-ferrisiyanür kompleks sentezini ölçmek için kullanılan basit ve güvenilir bir testtir. Bu tahlilde, demirli Fe(III)-TPTZ kompleksini üreten dört nano karbonun indirgeme gücü, çözeltinin renginin sarıdan yeşile ve maviye değişmesiyle saptandı. Tablo 2, MWCNT, kısa MWCNT, GONR ve kısa GONR'nin indirgeme güçlerinin 10 mg/L'de optik yoğunluk (OD) 1.11, 1.13, 1.15 ve 1.11 olduğunu göstermektedir.

2.3.4. MWCNT'ler ve GONR'ler, Hücre İçi ROS Birikimini Engeller.

Birçok rapor, ROS'un hücre zarları ve nükleer zarlar dahil olmak üzere hücre zarlarının yapısal bütünlüğünü bozarak hücre hasarına ve normal fonksiyon kaybına yol açtığını göstermiştir.38-40 Ek olarak, ROS ayrıca melanin oluşturan tirozinazı katalize eden önemli faktörlerden biridir ve ROS üretiminin inhibisyonu, aşağı regüle etmek için iyi bir stratejidirmelanin synthesis. In this study, we used the 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA) staining assay to analyze the intracellular oxidative stress level in MWCNT and GONR treatment cells. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induced oxidative stimulations in MWCNT and GONR groups and was used as a negative control.41 When the concentration of PMA was 20 ng/mL, it induced oxidative stress, increasing the value to 38%; after treating GONRs and MWCNTs, the levels of ROS were downregulated to the normal level. The data showed that both materials inhibited oxidative stress levels, and the anti-oxidative effect of GONRs was higher than that of MWCNTs (Figure 3). Table 1 shows a similar consequence list. We contended that there are three reasons for our new findings: first, the order of solubility of these materials was as follows: short GONRs > GONRs >kısa MWCNT'ler > MWCNT'ler, bu, kısa GONR'lerin temas alanının en büyük olduğu anlamına gelir, bu nedenle ROSscavenging için üstündür. İkincisi, GONR'ler ve MWCNT'ler, ekleme oluşumu veya elektron transferi yoluyla ROS elektriğini yok edebilen sp2-karbon yapılarıydı.42antioksidan etkilernanoşerit yapılarının sayısı, nanotüp yapılarınınkinden daha iyiydi, bu nedenle nanoşeritler, nanotüplere göre elektron transferini daha kolay hale getiriyor. Son olarak, Şekil 1b'de, GONR sp2-karbon bölgesinin MWCNT'lerden daha fazla oksijen fonksiyonel grubu içerdiğini, karboksilik asit gruplarının metal iyonlarını şelatlayabildiğini ve hidroksil gruplarının ROS'u temizlemek ve melanin üretimini inhibe etmek için bir H-donörü olabileceğini gözlemliyoruz.

2.4. İnsan Dermal Fibroblast Hücrelerinde Tedavi Edilen MWCNT'lerin ve GONR'lerin Sitotoksisitesi.

{{0}}(4,5-Dimetilt-triazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür (MTT) yöntemi sitotoksik değerlendirmek için uygulandı. GONR'lerin Hs68 hücreleri üzerindeki özellikleri (Şekil 3) ve hücreler, 1, 5 ve 10 ug/mL'lik farklı dozlarda kültürlendi. MWCNT'nin hücre canlılıklarının sırasıyla yüzde 1, 5 ve 10 mg/L konsantrasyonlarda yüzde 100,7 ± 3,7, 99,8 ± 4,9 ve yüzde 94.1 ± 4,7 olduğunu inceledik; kısa MWCNT için canlılıklar aynı sırayla hesaplandı ve yüzde 93,9 ± 2,2, 86,4 ± 3,0 ve yüzde 98,9 ± 2,1 olarak bulundu. B16−F10 hücrelerinin yüksek konsantrasyonlarda inkübe edildiğini ve Hs68 hücrelerinin hücre sağkalımının yüzde 80'den fazla olduğunu gözlemledik, bu da MWCNT ve kısa MWCNT'nin insan dermal fibroblast hücreleri üzerinde toksik etkisi olmadığını düşündürdü. GONR ve kısa GONR'nin hücre canlılıkları 86.24 ± 2.1, 90.87± 3.5, 88.58 ± 2.5, 89.03 ± 3.6, 90.71 ± 2.8 ve yüzde 90.64 ±2.5 idi. Ayrıca Şekil 4a'da GONR ve shortGONR'nin HS68 hücreleri üzerinde fark edilebilir bir sitotoksik etkiye sahip olmadığı belirtilmektedir. Önceki raporlarda, test edilmemiş nanomalzemelerin kozmetik amaçlarla kullanılması şüpheli olarak değerlendirilebilirdi43,44 ve bu genellikle nanopartiküller hücrelere girdikten sonra DNA'nın saldırısından kaynaklanıyordu. Sitotoksisite testinden sonra, materyallerimizin normal cilt hücrelerinde toksisiteye neden olmadığını bulduk. Nanomateryaller hücrelere girdikten sonra, nanomalzemelerin oksidatif stresi azaltarak ve metal iyonlarını şelatlayarak sadece melanin üretimini engellediği ve mitokondri veya DNA'ya zarar vermediği, yani MWCNT'lerin ve GONR'lerin kullanılmasının güvenli olduğu sonucuna vardık.

2.5. B16−F10Hücresel Tirozinaz Aktivitesinde ve Melanin İçeriğinde İki Tip MWCNT ve GONR.

İçindemelaninsentez yolunda, tirozinaz kritik bir rol oynar. Tirozinaz, bir dizi biyokimyasal reaksiyon yoluyla eumelanin ve feomelanin'i oksitler ve oluşturur. GONR'lerin ve MWCNT'lerin tirozinaz aktivitelerini inhibe edip etmediğini ve melanin üretiminde bir azalmaya neden olup olmadığını belirlemek için B16−F10 hücrelerinde tirozinaz aktivitesini analiz ettik. MWCNT'lerin ve kısa MWCNT'lerin 10 mg/L'de tirozinaz aktivitesini yaklaşık yüzde 17,1 ve yüzde 23 oranında inhibe ettiğini bulduk. GONR'ler ve kısa GONR'ler, başka bir GONR'ye kıyasla aynı konsantrasyonlarda tirozinaz aktivitesini baskılayarak daha iyi bir etkiye sahipti. Ayrıca doza bağımlı bir şekildeydiler ve Şekil 4b'de gösterildiği gibi tetirozinaz aktivitesinin yüzde 49.8'ini ve yüzde 44,7'sini inhibe ettiler.

melanininsan vücudunda vazgeçilmez bir pigmenttir, ancak melaninin aşırı ekspresyonu genellikle bir dizi hastalığı tetikler. Daha önceki çalışmalarda, Xiao ve ark. benzer bir malzeme, bir fulleren nanoparçacık olan Radikal Sünger'i anti-melaninaj maddesi olarak kullandı.45 Bazı iyi sonuçlar elde edildi; yaklaşık yüzde 20'simelaninüretimi engellenebilir. Verimliliğini artırmak için, Şekil 4c ve 5'te gösterildiği gibi, melaninin inhibisyon hızını ve moleküler mekanizmasını ölçmek için test materyalini daha da geliştirdik. MWCNT'ler ve kısa MWCNT'ler, melanin içeriğini 17,6 ± 5,5 ve 13.2 ± 0 azalttı. 10 mg/L'de ve doza bağlı bir şekilde yüzde 2. GONR'ler ve kısa GONR'ler, 10 mg/L'de değerleri güçlü bir şekilde yüzde 32,0 ±2,3 ve yüzde 35,3 ± 3,4'e indirdi. Deneysel sonuçlar, dört türün de melanin sentezini engelleyebileceğini ve GONR'lerin daha güçlü bir etkiye sahip olduğunu gösterdi. Öte yandan, kısa GONR'nin melanin üretimini engellemede daha iyi bir etkiye sahip olduğunu da gözlemledik. Kısa GONR'lerin daha fonksiyonel gruplara sahip olduğu ve metal iyonları katalizli tirozinazı etkili bir şekilde önleyebildiği ve ayrıca melanin üretimini engellediği sonucuna vardık (Şekil 2). Tablo 1'de, metal iyon şelatlayıcı kısa tipin çabasının normal tipten daha yüksek olduğunu gözlemliyoruz; bu, bu kısa GONR'lerin potansiyel olarak kozmetik alanında cilt bakım maddeleri olarak uygulanabileceği anlamına gelir.

2.6. MWCNT'lerin ve GONR'lerin Mekanizması B16−F10 Hücresel Melanin İçeriğini Engelledi.

Hücreler, protein ekspresyonunu düzenleyerek dış oksidatif strese yanıt verir. B16−F10 hücreleri c-myc gen ekspresyonunu arttırır ve oksidatif seviyeleri azaltmak için AMPK'yi yukarı regüle eder46 ve bu çalışmada MITF, moleküler melanin sentezi sinyal yolunu düzenleyen tirozinazın spesifik bir transkripsiyon faktörüdür.47−49 Şekil 5a'da, MWCNT'ler ve GONR'ler oksidatif stresi azaltarak mikroftalmi ile ilişkili transkripsiyon faktörünü aşağı regüle eder ve ardından aşağı akış geni TRP-1 ve TRP-2 da aşağı regüle edilir. Protein seviyesi için, MWCNT'lerin ve GONR'lerin MITF ile ilişkili melanogenez yolunu aşağı regüle ettiği ve sonundamelaniniçerik (Şekil 5b).

vücut geliştirme

3. DENEYSEL MATERYAL VE YÖNTEMLER

3.1. MWCNT'lerin ve GONR'lerin hazırlanması.

GONR'leri yapmak için ilgili süreç önceki bir makalede rapor edilmiştir.12MWCNT (0.05 g) 9:1 H2SO4/H3PO4 içinde askıya alınmış ve güç ayarlı bir mikrodalga reaktörü (CEM-Discover) ile işlenmiştir. 2 dakika için 250 W'da. Çözeltilere KMnO4 (0.25 g) ilave edildikten sonra, çözeltiler 65 derecede 4 dakika boyunca aynı mikrodalga gücüyle işlendi12 Daha sonra bu işlemi bir hava kompresörü kullanarak 8 dakikalık daha kısa bir ikinci aşama mikrodalga süresi kullanarak değiştirdik. Burada, işlem sırasında mikrodalga reaktörünün sıcaklığını kontrol etmek için hava kompresörü kullanılmaktadır. Mikrodalga gücü ön testlerde 250 W olarak ayarlandı.

3.2. Kısa MWCNT'lerin ve Kısa GONR'lerin hazırlanması.

Kısa GONR yapmak için ilgili süreç önceki makalemizde rapor edilmiştir.34 Asidik işlem süresi 8 saat olarak seçilmiştir. Mikrodalga gücü 250 W'a ayarlandı, bu GONR'leri almakla aynı.

3.3. DPPH Radikal Temizleme Etkinliği.

DPPH, örneklerin süpürme kapasitesine ve antioksidasyon özelliklerine karar vermek için sıklıkla kullanılmıştır.50 DPPH, serbest radikal analite aktarılırsa rengi mordan sarıya değiştiren mor bir reaktiftir. Çözeltiye uygun konsantrasyonlarda pozitif anti-oksidatif numuneler eklendi ve numuneler 517 nm'de 30 dakika analiz edildi. Sayısını ölçmek için test örneklerinin yanı sıra kalan DPPH yüzdelerini kullandık.antioksidanlarönceki DPPH radikallerini azaltmak için gereklidir. Pozitif kontrol olarak 100 μM'de C vitamini kullanıldı. Süpürme aktivitesi (yüzde) şu şekilde ölçüldü:

3.4. Metal-Şelasyon Aktivitesi.

Metal iyonu lipid aşırı oksidasyonuna neden olan faktördür ve Fe2 plus en çok etkileyen iyonlardan biridir.50 Farklı konsantrasyonlarda nano biyomateryaller (1 μL), 2mM FeCl2·4H2O içeren bir 96-kuyu plakasına yüklendi ( 10 μL) ve ardından ferrozine (5mM, 20 μL) yüklendi. Karışım, 69 μLmenthol ile tamamen karıştırıldı ve oda sıcaklığında 10 dakika tutuldu. Daha sonra örnek reaksiyon çözeltisi 562 nm'de gözlendi. EDTA, 100 uM'de pozitif kontrol olarak kullanıldı ve metal şelatlama aktivitesi hesaplama formülü, eşitlik 1'e dayanıyordu.

3.5. Gücü azaltmak.

İndirgeme gücünün hesaplanması önceki bir çalışmaya dayanmaktadır.50 Önce 2.5 μL grafen malzemeleri PBS tamponu (67 mM, pH 6.8) ve K3Fe(CN)6(2.5 μL, yüzde 20 ) ile karıştırıldı ve ardından 50 derecede 20°C'de inkübe edildi. dk. Daha sonra yüzde 10 trikloroasetik asit (160 µL) reaktiflerle karıştırılarak 300g'de 20 dakika santrifüj edildi. Absorpsiyon uzunluğu, 25 μL FeCl3(yüzde 2) ile karıştırıldıktan sonra 700 nm'de belirlendi. 100 uM'de bütillenmiş hidroksianisol (BHA) kullanıldı.

3.6. Hücre Proliferasyon İncelemeleri.

İnsan dermalfibroblast hücre çizgisi HS68, hücre proliferasyonunun oranını analiz etmek için kullanıldı. HS68, yüzde 10 cenin sığır serumu ve yüzde 1 penisilin ve streptomisin karışımı içeren Dulbecco'nun modifiye Eagle ortamında (DMEM) inkübe edildi.50,51 Farklı konsantrasyonlarda numunelerle muamele edildikten sonra hücre proliferasyon oranını saptamak için MTT uyguladık. 8000 hücre 96-kuyucuklu plakalara ekildi ve 24 saat numunelerle işleme tabi tutuldu. Süpernatant solüsyonu çıkarıldı ve MTT solüsyonunu 2 saat 37 derecede kültürlemek için kullandık. İnkübasyondan sonra MTT içeren ortam taşındı ve dimetil sülfoksit (DMSO) ile çözüldü. Çözelti OD 590nm'de okundu ve oran, eq 1 ile hesaplandı.

3.7. Hücresel Melanin İçeriğinin Değerlendirilmesi.

Önceki tahlile dayalı küçük modifikasyonlarla bir yöntem kullandık.52,53 Bioresource Collection and Research Center'dan (BCRC, CRL 6323, Hsinchu,Taiwan) B16−F10 hücre topakları 2.0 N NaOH karışımı içinde çözüldü ve yüzde 10 DMSO. Numune daha sonra 1 saat boyunca 90 derecede ısıtıldı ve berraklaştırılmış süpernatantı elde etmek için 10,{11}}g'de 10 dakika daha santrifüjlendi. bumelaninsayım, süpernatantın OD'si 475 nm'de izlenerek belirlendi.

3.8. B16−F10 Hücresel Tirozinaz Aktivitesi.

B16−F10 hücresel tirozinaz aktivitesi için, bazı modifikasyonlarla önceki çalışmaya atıfta bulunduk.50 Hücreler, her bir oyukta 105 hücrede kültürlenmiş 12-kuyu plakalarıydı. Örneklerle yapılan tedavilerden sonra hücreler, 3 saat boyunca yüzde 1 Triton X-100/PBS ve 2 mML-tirozin (50 uL) içinde parçalandı. İnkübasyondan sonra ortamı çıkardık ve OD 590 nm'de absorbansı okuduk. Thetirozinaz aktivite formülü denklem 1 ile hesaplandı.

3.9. DCFDA Boyama ile ROS Tespiti.

Önceki çalışmaya istinaden,54 1.2 1.105 B16−F10 hücreleri,6-kuyu plakalarına ekildi ve çeşitli konsantrasyonlarda numunelerle işlendi. Hücreler PBS içinde süspanse edildi ve daha sonra 37 derecede 30 dakika boyunca fenol olmayan kırmızı DMEM içinde DCFDA (5 uM) ile yüklendi. DCFDA'nın floresan sinyalini saptamak için akış sitometresi (Guava, Merck, Almanya) kullanıldı. DCFDA'nın uyarma ve emisyon dalga boyları sırasıyla 488 ve 535 nm idi.

3.10. Kantitatif Gerçek Zamanlı Polimeraz Zincir Reaksiyonu.

Lin ve arkadaşlarının yöntemlerini izledik. (2018).1Gerçek zamanlı kantitatif ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonu (qRT-PCR), özel bir primer-prob tojenat floresansından oluşuyordu. 7500 qRT-PCRSystem (Applied Biosystems, ABD) kullanarak her döngüyü algılayan bir floresan algılama tekniği kullandı. Serbest bırakılan floresan miktarına dayalı olarak döngüyü tespit etti ve ardından üretilen içerik için her döngünün ürünü hesaplandı ve bu da gerçek zamanlı nicel amaçlara ulaşılmasıyla sonuçlandı. Üretici tarafından verilen talimata göre akciğer dokusunun tam bir RNA'sını çıkarmak için Trizol (Invitrogen, ABD) kullanıldı. Daha sonra, DNA üretmek için bir ters transkripsiyon kiti (Takara, Japonya) kullanıldı. Tablo 1'de listelenen primerlerin kullanıldığı qRT-PCR'de, ilk önce numune, tek bir DNA zinciri oluşturmak üzere ısıtıldı; daha sonra çift sarmallı bir DNA (dsDNA) oluşturmak için bir primer bağlanması gerçekleşti, ardından SYBR Green dsDNA birleştirildi, bunun için SYBR green plus reaktif kiti (Roche, Basel, Swiss) kullanıldı, bu da floresan salınımı ile sonuçlandı. Elde edilen ürün, bir floresan algılama sisteminden geçirildi. Floresan sinyallerinin tespiti, her döngünün uzama veya tavlama aşaması sırasında gerçekleşti; tespitten sonra, tespit edilen floresan yoğunlukları tarafından numune içerikleri geri itildi.55 Hedef genlerin ekspresyon seviyeleri, 2−ΔΔCt yöntemi kullanılarak -tubulin seviyelerine normalleştirildi. .

anti-oksidasyon için cilt üzerinde cistanche beyazlatma etkisi

3.11. Western Blot Testi.

B16−F10 hücreleri, proteaz inhibitörleri içeren bir radyoimmünopresipitasyon tahlil tamponu (Thermo Scientific Co., ABD) ile gece boyunca 4 derecede lize edildi. Protein miktarını ölçmek için bisinkoninik asit protein tahlil kiti (BCA, Sigma-Aldrich Corp., ABD) kullanıldı. Örnek proteinler yüzde 10 sodyumdodesil sülfat-poliakrilamid jel üzerinde ayrıldı ve apoliviniliden diflorür (PVDF) membranına (Pall LifeScience, Ann Arbor, MI, ABD) aktarıldı. PVDF membranı bir blokaj tamponu (Thermo Scientific) ile 1 saat bloke edildi ve gece boyunca 4 derecede spesifik primer antikor ile inkübe edildi. Daha sonra membran Tris-tamponlu salin Tween 20 tamponu ile iki kez yıkandı ve sekonder antikorlarla 1.5 saat inkübe edildi. Bundan sonra, zar kemilüminesans saptama reaktiflerine (Thermo Scientific) daldırıldı ve bir MiniChemi Chemiluminescenceimager (Beijing Sage Creation Science, Çin) ile analiz edildi. Antikor kaynakları arasında tavşan anti-MITF, tavşan anti-TRP-1, tavşan anti-TRP-2 ve -aktin (Thermo Scientific) bulunur.

3.12. Malzeme Analizi.

Nanokarbonun morfolojisini gözlemlemek için TEM (JEOL JEM-1230, 100 kV) kullanıldı. Nanokarbonun rezonans modlarını kontrol etmek için Amicro Raman spektrometresi (PTT, RAMaker) uygulandı. Bileşim analizini belirlemek için X-ışınıfotoelektron spektroskopisi (XPS, Kratos Axis Ultra DLD) ölçümleri de yapıldı.

3.13. İstatistiksel analiz.

Tüm numuneler ve standart deneyler en az üç kez tekrarlandı. Tema değerlerinin ortalamasını ± standart sapmayı istatistiksel olarak karşılaştırmak ve ifade etmek için Öğrenci t-testini uyguladık.

4. SONUÇLAR

Özetlemek gerekirse, kısa GONR'nin çoklu biyofonksiyonel özelliklerinden dolayı cilt bakımı üretimi için potansiyel bir malzeme olduğunu gözlemledik (Şekil 6). Sonuçlar, nanokarbonun hücre dışı ve hücre içi antioksidan olarak rol oynadığını gösterdi. Bu arada, nanokarbon tirozinaz aktivitesini inhibe etti vemelaniniçerik ve pigment hücrelerinde ciddi bir yaralanmaya neden olmadı. Bu çalışma, dört tip nanokarbonun anti-melanogenez fonksiyonlarını belirledi; gelecekteki çalışmalar, melanin olgunlaşması, taşınması ve birikimi ile ilgili spesifik gen ve protein ifadeleri üzerinde bu bileşiklerin mekanizmasını inceleyecektir.

cistanche bienfaits

REFERANSLAR

(1) Lin, L.-C.; Chen, C.-Y.; Kuo, C.-H.; Lin, Y.-S.; Hwang, BH; Wang, TK; Kuo, Y.-H.; Wang, H.-MD 36H: Antimelanogenez için Yeni Bir Potent İnhibitör. Oksit. Med. Hücre. Uzun Ömür 2018,2018, 6354972.

(2) Li, R.; Qiu, X.; Xu, F.; Lin, Y.; Fang, Y.; Zhu, T. Havadaki İnce Partikül Maddenin (PM2.5) Hepatosit İnsülin Direnci Üzerindeki In Vitro Makrofaj Aracılıklı Etkileri. ACS Omega 2016, 1, 736−743.

(3) Siz, Y.-J.; Wu, P.-Y.; Liu, Y.-J.; Hou, C.-W.; Wu, C.-S.; Wen, K.-C.; Lin, C.-Y.; Çan, H.-M. Sesamol, C57BL/6 Fare Derisinde Ultraviyole Radyasyonuna Bağlı Hiperpigmentasyon ve Hasarı Engelledi.Antioksidanlar 2019, 8, 207.

(4) Hseu, Y.-C.; Cheng, K.-C.; Lin, Y.-C.; Chen, C.-Y.; Chou, H.-Y.; Ma, D.-L.; Leung, C.-H.; Wen, Z.-H.; Wang, H.-M. Arbutin, PTU veya Kojik Asit ile Kombine Linderanolid B'nin Tirozinaz İnhibisyonu Üzerindeki Sinerjistik Etkileri. Kör. Eczacılık Biyoteknoloji. 2015, 16, 1120-1126.

(5) Bae-Harboe, Y.-SC; Park, H.-Y. Tirozinaz: kutanöz pigmentasyon için merkezi bir düzenleyici protein. J. Yatırım. Dermatol. 2012, 132,2678−2680.

(6) Rezapour-Laktoz, A.; Yeganeh, H.; Ostad, SN; Gharibi, R.; Mazaheri, Z.; Ai, J. Yara pansuman ve hücre yaprağı transplantasyonu için ısıya duyarlı poliüretan/siloksan membran: In vitro ve in-vivo çalışmalar. Anne. bilim Müh., C 2016, 69, 804-814.

(7) Boo, Kozmetikte Aktif Bir Bileşen Olarak YC p-Kumarik Asit: Antimelanojenik Etkilerine Odaklanan Bir İnceleme.Antioksidanlar 2019, 8, 275.

(8) Awan, F.; İslam, MS; Mayıs.; Yang, C.; Şi, Z.; Berry, RM;Tam, Kozmetik Formülasyonda Fotokatalitik Aktivite ve UV Korumasını Kontrol Etmek için KC Selüloz Nanokristal-ZnO Nanohibritleri.ACS Omega 2018, 3, 12403−12411.

(9) Cristina Negritto, M.; Valdez, C.; Sharma, J.; Rosenberg, C.; Selassie, Mayada X Fenoller Tarafından İndüklenen CR Büyüme İnhibisyonu ve DNA Hasarı: Kantitatif Bir Yapı-Aktivite İlişkisi Çalışması. ACS Omega 2017, 2, 8568−8579.

(10) Hamelin, M.; Hemmati, S.; Varma, K.; Veisi, H. Greensynthesis, Pistacia Atlantica özü kullanarak goldnanopartiküllerin antibakteriyel, antioksidan ve sitotoksik etkisi. J. Tayvan Enst. Kimya Müh. 2018, 93, 21-30.

(11) Meneses-Gutierrez, CL; Herna ́ ndez-Damia ́ n, J.; Pedraza- ́Chaverri, J.; Guerrero-Legarreta, İ.; Tellez, DI; Jaramillo-Flores, M. ́E. Enzimatik Oksidasyonla Üretilen Kateşinler ve Resveratrol Oligomerlerinin Antioksidan Kapasitesi ve Sitotoksik Etkileri, T24İnsan İdrar Mesane Kanseri Hücrelerine Karşı. Antioksidanlar 2019, 8, 214.

(12) Sun, C.-L.; Chang, C.-T.; Lee, H.-H.; Zhou, J.; Wang, J.; Sham,T.-K.; Pong, W.-F. Askorbik asit, dopamin ve ürik asidin elektrokimyasal tespiti için bir çekirdek-kabuk MWCNT/GONR heteroyapısının mikrodalga destekli sentezi. ACS Nano 2011, 5, 7788−7795.

(13) Lin, T.-E.; Lu, Y.-J.; Sun, C.-L.; Seç, H.; Chen, J.-P.; Lesch, A.;Girault, HH Hayvan ve İnsan Dokularında Biyobelirteçlerin ve Enjekte Edilen Nanomalzemelerin Dağılımının Haritalanması için Yumuşak Elektrokimyasal Problar. Ange. Kimya, Int. Ed. İngilizce 2017, 56, 16498-16502.

(14) Okuda, K.; Hirota, T.; Hirobe, M.; Nagano, T.; Mochizuki, M.;Nishino, T. Çeşitli suda çözünür G60 türevlerinin sentezi ve süperoksit söndürme aktiviteleri. Fullerene Sci. Teknoloji. 2000, 8.127-142.

(15) Lucente-Schultz, RM; Moore, VC; Leonard, AD; Fiyat, BK; Kosynkin, DV; Lu, M.; Partha, R.; Conyers, JL; Tur, JMAantioksidan tek duvarlı karbon nanotüpler. J. Am. Kimya Soc. 2009,131, 3934−3941.

(16) Injac, R.; Perse, M.; Obermajer, N.; Djordjevic-Milic, V.;Prijatelj, M.; Djordjevic, A.; Cerar, A.; Strukelj, B. Meme karsinomlu sıçanlarda doksorubisin kaynaklı hepatotoksisitede fulleren C60(OH)24'ün potansiyel hepatoprotektif etkileri. Biyomalzemeler 2008, 29, 3451−3460.

(17) Tong, J.; Zimmerman, MC; Li, S.; Yi, X.; Luxenhofer, R.; Ürdün, R.; Kabanov, AV Nöronal alım ve fulleren (C60)-poli(2-oksazolin)snanoformülasyonunun hücre içi süperoksit süpürme. Biyomalzemeler 2011, 32, 3654−3665.

(18) Yugioh, K.; Shishido, K.; Murayama, H.; Yano, M.; Matsubayashi, K.; Takada, H.; Nakamura, H.; Masuko, K.; Kato, T.;Nishioka, K. Suda çözünür C60 fulleren, kondrositkatabolik aktivitenin aşağı regülasyonu ve hastalık gelişimi sırasında kıkırdak dejenerasyonunun inhibisyonu yoluyla osteoartritte eklem kıkırdağının dejenerasyonunu önler. Artrit Rheum. 2007, 56, 3307−3318.

(19) Takada, H.; Mimura, H.; Xiao, L.; İslam, RM; Matsubayashi, K.; İto, S.; Miwa, N. Yenilikçi Anti-Oksidan: Fullerene (INCI #:7587) Ciltte "Radikal Sünger" gibidir. Üstün Yaşlanma Karşıtı ve BeyazlatıcıKozmetik Bileşen Olarak Yüksek Güvenlik, Kararlılık ve Potansiyel. Fullerenes, Nanotubes, Carbon Nanostruct.2006, 14, 335−341.

(20) Fenoglio, İ.; Greco, G.; Tomatis, M.; Müller, J.; Raymundo Pinero, E.; Beguin, F.; Fonseca, A.; Nagy, JB; Lison, D.; Fubini, B. ́Yapısal kusurlar, çok duvarlı karbon nanotüplerin akut akciğer toksisitesinde önemli bir rol oynar: fizikokimyasal yönler. Kimya Res.Toksikol. 2008, 21, 1690-1697.

(21) Novoselov, KS; Geim, AK; Morozov, SV; Jiang, D.; Zhang, Y.; Dubonos, SV; Grigorieva, IV; Firsov, AA Atomik olarak ince karbon filmlerde elektrik alan etkisi. Bilim 2004, 306, 666−669.

(22) Novoselov, KS; Geim, AK; Morozov, SV; Jiang, D.; Katsnelson, MI; Grigorieva, IV; Dubonos, SV; Firsov, AA Grafen içinde kütlesiz Dirac fermiyonlarının iki boyutlu gazı. Doğa 2005,438, 197−200.

(23) Zhou, X.; Wei, Y.; O, Q.; Boy, F.; Zhang, Q.; Zhang, H. Oktaklorodibenzo-p-dioksin tespiti için MALDI-TOF-MS matrisi olarak kullanılan indirgenmiş grafen oksit filmleri. Kimya Komün. 2010, 46,6974−6976.

(24) Zhao, W.; Taraftar, S.; Xiao, N.; Liu, D.; Tay, YY; Yu, C.; Sim, D.; Huang, HH; Zhang, Q.; Boy, F.; Ma, X.; Zhang, H.; Yan, Q. Geliştirilmiş termoelektrik özelliklere sahip esnek karbon nanotüp kağıtları.Energy Environ. bilim 2012, 5, 5364−5369.

(25) Wang, Z.; Wu, S.; Zhang, J.; Chen, P.; Yang, G.; Zhou, X.; Zhang, Q.; Yan, Q.; Zhang, H. Elektrokimyasal indirgeme ve hidrazin buharı indirgeme ile elde edilen tek katmanlı indirgenmiş grafen oksit filmler üzerinde karşılaştırmalı çalışmalar. Nano Ölçekli Araş. Lett. 2012, 7, 161.

(26) Liang, X.; Fu, Z.; Chou, SY Grafen transistörleri, büyük gofret üzerindeki cihaz aktif alanlarında transfer baskısı ile üretilmiştir. Nano Lett.2007, 7, 3840−3844.

(27) Sun, X.; Liu, Z.; Welsher, K.; Robinson, JT; Goodwin, A.;Zaric, S.; Dai, H. Hücresel görüntüleme ve ilaç dağıtımı için nano-grafen oksit. Nano Res. 2008, 1, 203−212.

(28) Chen, W.; Xiao, P.; Chen, H.; Zhang, H.; Zhang, Q.; Chen, 3D Çapraz BağlantılıMonolitik Grafen Ağı ile Y.Polimerik Grafen Toplu Malzemeler. reklam Anne. 2019, 31, 1802403.

(29) Chen, D.; Feng, H.; Li, J. Grafen oksit: hazırlama, işlevselleştirme ve elektrokimyasal uygulamalar. Kimya Rev. 2012,112, 6027−6053.

(30) Ranjan, P.; Agrawal, S.; Sinha, A.; Rao, TR; Balakrishnan, J.; Thakur, AD Ölçeklenebilir Uygulamalar için Düşük Maliyetli, Patlayıcı Olmayan GrafenOksit Sentezi. bilim 2018, 8, 12007.

(31) Qiu, Y.; Wang, Z.; Owens, ACE; Kulaots, İ.; Chen, Y.; Kane,AB; Hurt, RH Grafen bazlı malzemelerin Antioksidan kimyası ve oksidasyon koruma teknolojisindeki rolü. Nano ölçekli 2014, 6.11744−11755.

(32) Han, MY; Özyılmaz, B.; Zhang, Y.; Kim, P. Grafen nanoşeritlerinin enerji bant aralığı mühendisliği. Fizik Rev. Lett. 2007, 98,206805.

(33) Souza, JP; Mansano, AS; Venturini, FP; Santos, F.; Zucolotto, V. Zebra balıklarının grafen okside alt ölümcül maruziyet ve geri kazanımından sonra antioksidan metabolizması. Balık Fizyolü. Biyokimya. 2019,45, 1289-1297.

(34) Sun, C.-L.; Çok.; Wu, J.-J. Parkinson hastalığının gelişmiş biyobelirteç tespiti için kısa grafenoksit nano şeritlerin sentezi. Biyosens. Biyoelektron. 2015, 67, 327-333.

(35) Kral, AAK; Davies, BR; Noorbehesht, N.; Newman, P.; Kilise, TL; Harris, AT; Razal, JM; Minett, AI Grafen oksit ve Türevlerinin Karakterizasyonu için Yeni Bir RamanMetrik. 2016, 6, 19491.

(36) Hsu, H.-C.; Gösterilen İ.; Wei, H.-Y.; Chang, Y.-C.; Du, H.-Y.; Lin,Y.-G.; Tseng, C.-A.; Wang, C.-H.; Chen, L.-C.; Lin, Y.-C.; Chen, K.-H. CO2'den metanol dönüşümü için umut verici bir fotokatalizör olarak grafen oksit. Nano ölçekli 2013, 5, 262−268.

(37) Lin, L.-Y.; Evet, M.-H.; Tsai, J.-T.; Huang, Y.-H.; Sun, C.-L.;Ho, K.-C. Potansiyel bir süper kapasitör malzemesi olarak yeni bir çekirdek kabuklu çok duvarlı karbon nanotüp @ grafenoksit nanoşerit heteroyapısı J. Mater. Kimya 2013, 1, 11237−11245.

(38) Yin, H.; Xu, L.; Porter, NA Serbest radikal lipid peroksidasyonu: mekanizmalar ve analiz. Kimya Rev. 2011, 111, 5944−5972.

(39) Tung, C.-H.; Chang, J.-H.; Hsieh, Y.-H.; Hsu, J.-C.; Ellis, AV; Liu, W.-C.; Yan, R.-H. Foto- ve elektro-katalizli su arıtma işlemleri arasında hidroksil radikal verimlerinin karşılaştırılması. J. Tayvan Enst. Kimya Müh. 2014, 45, 1649-1654.

(40) Ohshima, H.; Yoshie, Y.; Auriol, S.; Gilbert, I. Flavonoidlerin antioksidan ve pro-oksidan etkileri: nitrik oksit, peroksinitrit ve nitroksil anyon tarafından indüklenen DNA hasarı üzerindeki etkiler. Serbest Radikal Biol. Med.1998, 25, 1057-1065.

(41) Chou, H.-Y.; Lee, C.; Pan, J.-L.; Wen, Z.-H.; Huang, S.-H.; Lan,C.-W.; Liu, W.-T.; Saat, T.-C.; Hseu, Y.-C.; Hwang, B.; Cheng, K.-C.; Wang, H.-M. HaematococcusPluvialis'ten Zenginleştirilmiş Astaksantin Özü, Hücre Proliferasyonunu Artırmak için Büyüme Faktörü Salgılarını Artırır ve İnsan Dermal Fibroblastlarında Kollajen Üretimini Artırmak için MMP1 Bozulmasını İndükler. Int. J. Mol. bilim 2016, 17.955.

(42) Bitner, BR; Marcano, DC; Berlin, JM; Fabian, RH; Cherian, L.; Culver, JC; Dickinson, BEN; Robertson, CS; Paul, RG; Kent, TA; Tur, JM Antioksidan karbon partikülleri, travmatik beyin yaralanmasını takiben serebrovasküler disfonksiyonu iyileştirir. ACSNano 2012, 6, 8007−8014.

(43) Liao, C.; Li, Y.; Tjong, S. Grafen Nanomalzemeler: Sentez, Biyouyumluluk ve Sitotoksisite. Int. J. Mol. bilim 2018, 19, 3564.

(44) Kong, H.; Wang, L.; Zhu, Y.; Huang, Q.; Fan, C. Culturemedium ile ilişkili, karbon nanomalzemelerin sitotoksisitesi üzerine fizikokimyasal görüşler. Kimya Araş. Toksikol. 2015, 28, 290−295.

(45) Xiao, L.; Matsubayashi, K.; Miwa, N. İnsan melanositlerinde ve cilt dokularında tirozinaz ekspresyonunun aşağı regülasyonu yoluyla UVA kaynaklı melanogenez üzerinde suda çözünür polimerle sarılmış fulleren türevinin inhibitör etkisi. Kemer Dermatol. Araş. 2007, 299,245-257.

(46) Kfoury, A.; Amaro, M.; Collet, C.; Sordet-Dessimoz, J.; Giner, MP; Christen, S.; Moco, S.; Leleu, M.; Leval, L.; Koch, U.; Trump, K.; Sakamoto, K.; Beermann, F.; Radtke, F. AMPKoksidatif stresi baskılayarak c-Myc-pozitif melanom hücrelerinin hayatta kalmasını destekler. EMBO J. 2018, 37, No. e97673.

(47) Hseu, Y.-C.; Cheng, K.-C.; Lin, Y.-C.; Chen, C.-Y.; Chou, H.-Y.; Anne, D.-L.; Leung, C.-H.; Wen, Z.-H.; Wang, H.-M. Arbutin, PTU veya KojicAcid ile Kombine Linderanolide B'nin Tirozinaz İnhibisyonu Üzerindeki Sinerjistik Etkileri. Kör. Eczacılık Biyoteknoloji. 2015, 16.1120-1126.

(48) Lee, S.; Kim, J.; Şarkı, H.; Seok, J.; Hong, S.; Boo, Y. Luteolin7-Sülfat, CREB ve MITF Aracılı Tirozinaz İfadesinin İnhibisyonu Yoluyla Melanin Sentezini Azaltır. Antioksidanlar 2019, 8, 87.

(49) Duval, C.; Cohen, C.; Chagnoleau, C.; Flouret, V.; Bourreau, E.; Bernard, F. Yeniden yapılandırılmış bir cilt modeli kullanılarak gösterildiği gibi dermal fibroblast pigmentasyonunun anahtar düzenleyici rolü: foto yaşlanmanın etkisi. PLoS One 2014, 9, No. e114182.

(50) Li, P.-H.; Chiu, Y.-P.; Shih, C.-C.; Wen, Z.-H.; Ibeto, LK;Huang, S.-H.; Chiu, CC; Anne, D.-L.; Leung, C.-H.; Chang, Y.-N.;Wang, H.-MD Equisetum ramosissimumExtract'ın Biyofonksiyonel Aktiviteleri: Oksidasyon, Melanom ve Melanogenez'e Karşı Koruyucu Etkiler. Oksit. Med. Hücre. Uzun Ömür 2016, 2016, 2853543.

(51) Liang, C.-H.; Chan, L.-P.; Ding, H.-Y.; Yani, EK; Lin, R.-J.; Wang, H.-M.; Chen, Y.-G.; Chou, T.-H. Origanum vulgare kaynaklı 4-(3,4-Dihidroksibenzoiloksimetil)fenil-O- -d-glukopiranozitin Serbest Radikal Temizleme Aktivitesi ve Oksidatif Hasara Karşı Koruması. J. Agric. Gıda Kimyası 2012, 60, 7690−7696.

(52) Wang, H.-M.; Chen, C.-Y.; Wen, Z.-H. İnsan tirozinazını hedefleyerek in vitro ve in vivo tarama sistemleriyle Cinnamomum SubGenius'tan melanogenez inhibitörlerinin belirlenmesi. Exp.Dermatol. 2011, 20, 242−248.

(53) Wang, Y.-C.; Huang, X.-Y.; Chiu, C.-C.; Lin, M.-Y.; Lin, W.-H.; Chang, W.-T.; Tseng, C.-C.; Wang, H.-MD B16F10 hücrelerinde Phyllanthus Emblica meyve özü tozu yoluyla melanogenezin engellenmesi. Gıda Biosci. 2019, 28, 177-182.

(54) Panchuk, RR; Skorokhyd, NR; Kozak, YS; Lehka, LV; Moiseenok, AG; Stoica, RS Doksorubisin tedavisi altındaki B16 melanom taşıyan farelerde selenometiyonin ve D-pantherinin doku koruyucu aktivitesi, bunların ROS temizleme potansiyeli ile bağlantılı değildir. Hırvat. Med. J. 2017, 58, 171.

(55) Wang, H.-MD; Chen, C.-C.; Huynh, P.; Chang, J.-S. Kozmetiklerde alg kullanma potansiyelini keşfetmek. Biyorezör. Technol.2015, 184, 355−362