Sinirbilimde Aptamer Uygulamaları Bölüm 1

Soyut:

Engelliliğin başlıca nedeni olan nörolojik hastalıklar, küresel sağlık camiasının büyük ilgisini çekmektedir.

Sinir sistemi insan vücudunun önemli bir parçasıdır. İnsanın algısından, düşünmesinden, hareketinden, psikolojisinden ve duygularından sorumludur. Ancak bazı kişilerin hafızasını etkileyen nörolojik sorunları olabilir. Sinir sistemi hastalıkları, merkezi sinir sistemi ve periferik sinir sistemindeki felç, Parkinson hastalığı, Alzheimer hastalığı gibi patolojik değişiklikleri ifade eder. Bu hastalıklar hafızayı etkiler, ancak hepimiz aktif yöntemlerle bunların üstesinden gelebiliriz. Geliştir onu.

Birincisi felç. İstatistiklere göre her yıl milyonlarca insan felç geçiriyor ve en sık görülen semptomlardan biri hafıza kaybıdır. İnme vücuda çok zarar verir çünkü beynin oksijen ve kan sağlayan kısımlarını etkiler. Ancak egzersiz yaparak ve yeme alışkanlıklarımızı değiştirerek felçleri önleyebiliriz. Örneğin, uygun egzersiz, normal kiloyu korumak ve sağlıklı beslenme, felç riskini etkili bir şekilde azaltabilir ve böylece daha iyi hafızayı koruyabilir.

Sırada Parkinson hastalığı var. Bu, nöronların ölümünden kaynaklanan bir hareket bozukluğu hastalığıdır. Hareketin yanı sıra Parkinson hastalığı hafızayı da etkileyebilir. Çalışmalar çoğu hastanın hafıza kaybı da dahil olmak üzere bilişsel bozukluklar geliştirdiğini göstermektedir. Ancak hastalar hastalığın ilerlemesini geciktirmek için düzenli profesyonel tedavi ve rehabilitasyon eğitimi almak gibi çeşitli önlemler alabilirler. Müzik dinlemek, okumak ve yeni beceriler öğrenmek gibi hobilere sahip olmak da beyni rahatlatmada ve hafızanın iyileşmesine yardımcı olabilir.

Son olarak Alzheimer hastalığı var. Hafıza kaybının en belirgin ve yaygın semptomlardan biri olduğu bilişsel bozulmaya neden olan bir hastalıktır. Ancak Alzheimer hastalığı da iyileşebilen bir hastalıktır. Araştırmalar egzersiz yapmanın, sağlıklı beslenmenin, yeni beceriler öğrenmenin ve gönüllülüğün hastalığın ilerlemesini yavaşlatmaya ve hafızayı geliştirmeye yardımcı olabileceğini gösteriyor.

Belleğimizi geliştirmek için nörolojik hastalıkları önlemek ve tedavi etmek için her zaman olumlu bir tutum sergilemeli ve aktif yöntemler kullanmalıyız. Etkilensek bile direncimizi ve hastalıkla mücadele yeteneğimizi geliştirmek için çeşitli önlemler alabiliriz. Devam ettiğimiz sürece hafıza kaybını önlemek ve tedavi etmek için daha iyi, daha sağlıklı bir yol bulacağız. Hafızayı geliştirmemiz gerektiği görülebilir ve Cistanche Deserticola hafızayı önemli ölçüde geliştirebilir çünkü Cistanche Deserticola, hafızayı geliştirmek de dahil olmak üzere birçok benzersiz etkiye sahip geleneksel bir Çin tıbbi malzemesidir. Cistanche Deserticola'nın etkinliği, tanik asit, polisakkaritler, flavonoid glikozitler vb. dahil olmak üzere içerdiği çok sayıda aktif bileşenden gelir. Bu bileşenler, çeşitli yollarla beyin sağlığını geliştirebilir.

Kısa süreli hafızayı geliştirmek için Bil'e tıklayın

Bir milyardan fazla insan şu nörolojik rahatsızlıklardan birinden muzdariptir: demans, epilepsi, felç, migren, menenjit, Alzheimer hastalığı, Parkinson hastalığı, multipl skleroz, amiyotrofik lateral skleroz, Huntington hastalığı, prion hastalığı veya beyin tümörleri. Bu hastalıkların birçoğunun tanı ve tedavi seçenekleri sınırlıdır.

Küçük ve immünojenik olmayan, kimyasal olarak değiştirilmesi kolay nükleik asit molekülleri olan aptamerler, bu ihtiyaçları karşılamak için potansiyel teşhis ve teragnostik uygulamalar sunar.

Bu derleme, dünya çapında giderek ciddi sağlık sorunlarına neden olan nörolojik bozuklukların gelecekteki teşhis ve tedavileri için umut vaat eden aptamerlerin uygulanmasına yönelik öncü çalışmaları kapsamaktadır.

Anahtar Kelimeler: aptamer; sinir bilimi; nörolojik hastalıklar; nörolojik bozukluklar; nörotoksinler; kanser.

1. Giriş

Aptamerler, hedef moleküllerine yüksek özgüllük ve afinite ile bağlanabilecekleri benzersiz üç boyutlu (3D) yapılara katlanabilen tek sarmallı DNA, RNA veya sentetik XNA molekülleridir [1,2].

Aptamer seçimine yönelik bir yaklaşım 1990 yılında üç ayrı grup tarafından gerçekleştirildi [3-5]. Yöntem artık Üstel Zenginleştirme (SELEX) yoluyla Ligandların Sistematik Evrimi olarak biliniyor. O zamandan bu yana, birçok aptamer temel bilim alanlarında kullanılmak üzere seçilmiştir ve giderek artan sayıda aptamer, tedavi, teşhis ve görüntüleme uygulamaları için yeterince geliştirilmemektedir [6-10].

SELEX yöntemi, Darwinci evrimi in vitro olarak simüle eder. Birkaç seçim turu içerir ve her turdan sonra "en uygun" oligonükleotidlerin (oligolar) üstel amplifikasyonu gerçekleştirilir.

Geleneksel SELEX'in bir turu sırasıyla üç adım içerir (1) istenen hedef molekülü, daha sonraki polimeraz zincir reaksiyonları (PCR'ler) için şablon olacak sabit sekanslı terminal bölgeleriyle çevrelenmiş, merkezi 20-60 nükleotitlik rastgele dizili bir oligo havuzuyla inkübe edin. ),(2) hedefe başarılı bir şekilde bağlanan havuzdaki oligoları yakalar ve (3) yakalanan oligoları, sırasıyla oligo, DNA veya RNA tipine bağlı olarak PCR veya ters transkripsiyon-PCR (rt-PCR) ile amplifiye eder.

Nükleik asit havuzunun, arzu edilen hedef olmadan boş bir destekleyici matris üzerinden veya hedef molekülle yapısal olarak ilişkili olabilecek bir veya daha fazla başka molekülle birlikte destekleyici matris üzerinden geçirildiği karşı seçim turları da dahildir.

Karşı seçimde, destekleyici matrisi veya yapısal olarak ilgili molekülleri bağlamayan oligolar yakalanır ve daha fazla SELEX turu boyunca devam ettirilir.

Karşıt seçim, (1) destekleyici matrisle, (2) yapısal olarak hedefle ilişkili analoglar veya moleküllerle veya (3) biyolojik matriste (serum gibi) yüksek konsantrasyonlarda bulunan moleküllerle etkileşime giren oligoları ortadan kaldırmak gibi birçok amaç için gerçekleştirilir. veya doku ekstraktı) seçilen aptamerin işlev göreceği.

Karşı seçimin temel amacı, diğer potansiyel moleküler rakiplere göre istenen hedef için aptamer özgüllüğünü arttırmaktır. Geleneksel SELEX'in yanı sıra, yakın zamanda geliştirilen yapı anahtarlamalı SELEX de popüler hale geliyor [11-13].

Bu yaklaşımda, oligoların hedefle etkileşime girdiklerinde yapılarını değiştirmeleri ve tamamlayıcı bir yakalama dizisinden ayrılmaları gerekir. Bu, seçilen aptamerlerin ligand bağlanması üzerine yapılarının değişmesini sağlar. Tablo 1'de özetlendiği gibi CE-SELEX, Cell-SELEX ve in-vivo SELEX dahil olmak üzere diğer alternatif SELEX yöntemleri geliştirilmiştir.

Daha da karmaşık teknikler geliştirmek için farklı SELEX prosedürlerini birleştirmek oldukça mümkündür. Aptamerler SELEX tarafından seçildikten sonra, hepsi olgunlaşma olarak adlandırılabilecek çeşitli yaklaşımlarla özelliklerini ve ilgilerini geliştirmek üzere daha da modifiye edilirler.

Aptamerlerin seçilmesi ve olgunlaştırılmasında dikkate alınması gereken birkaç husus vardır. Birincisi, aptamerlerin yapıları ve aptamer-hedef etkileşimleri sıcaklıktan ve iyonlar, iyon gücü ve pH dahil olmak üzere tampon bileşenlerinden etkilenir.

Dolayısıyla SELEX tasarımında en önemli noktalardan biri aptamer moleküler hedefinin bulunacağı ve aptamer ile hedef arasında etkileşimin gerçekleşeceği seçim sırasında ortamın (biyolojik matriks veya tuz/tampon bileşimi) taklit edilmesidir.

Uygun tampon bileşimlerinin ve inkübasyon sıcaklıklarının seçilmesi, seçilen aptamerlerin uygulanacağı koşullar altında optimum performans göstermesini sağlayacaktır [4,30-32].

İkincisi, DNA ve RNA aptamerleri nükleaz saldırıları için potansiyel hedefler olduğundan aptamer stabilitesinin iyileştirilmesi gerekebilir. Bu durum özellikle RNA için geçerlidir çünkü 20OH grubu, ribonükleazlar tarafından hidroliz için nükleik asit omurgasındaki fosfata elektrofilik saldırıda kullanılır.

Bu nedenle RNA, yüksek sıcaklıklara ve pH'a DNA'dan daha duyarlıdır. Aptamerler, bu duyarlılığın üstesinden gelmek için seçim sonrası kimyasal modifikasyonlarla olgunlaştırılabilir. Ancak bu tür modifikasyonlar, aptamerin özgüllüğünü ve/veya afinitesini kaybetmesine neden olabilir.

Bu nedenle, SELEX sırasında değiştirilmiş nükleotidlerin dahil edilmesi genellikle daha iyidir. Olası birçok aptamer modifikasyonu Tablo 2'de listelenmiştir.

Çoğu virüsü, hücreyi, bakteriyi, proteini, toksini ve peptidi yüksek afiniteyle seçici olarak bağlayan aptamerler seçilebilir [45-48]. Aktivitede gözle görülür bir kesinti olmadan birkaç kez kullanılabilirler. Başka bir deyişle, daha sonra kullanılmak üzere hedeflerinden ayrılabilirler.

Buna karşılık antikorlar, işlevselliklerini kaybetmeden önce yalnızca birkaç kez kullanılabilir. Nükleik asit aptamerleri ayrıca özellikle yüksek sıcaklıklarda antikorlardan ve enzimlerden daha stabil olacak şekilde olgunlaştırılabilir [2].

Üstelik bir aptamerin bu dizisi bilindiğinde, kimyasal sentezi ve homojenliğe kadar saflaştırılması oldukça tekrarlanabilir ve ucuzdur. Bu özellikler aptamerlere algılama birimlerinin bileşenleri olarak antikorların yerini alma potansiyeli verir [49].

Aptamer yapılarının esnekliği ve bir aptamer dizisinin bölgelerini tamamlayıcı oligolarla "maskeleme" yetenekleri, aptamerlerin antikorlara kolaylıkla adapte edilemeyen birçok sensör platformuna dahil edilmesine izin veren sinyalleşme seçenekleri sağlar. Bu özellikler aptamer bazlı biyosensör gelişimini motive eder [50-52].

Tanı için yeni araçlar geliştirmek, biyosensör alanındaki en göze çarpan alanlardan biridir; birçok araştırmacı, erken tanı ve hassas tıp elde etmek için kolay, etkili ve daha ucuz yöntemler yaratma arayışındadır.

Aptamerlerin biyosensörlere ("aptasensörler" olarak adlandırılır) dahil edilmesi 1990'larda kök saldı.

Biyotanıma elemanları olarak aptamerlerin erken bir örneği, homojen bir analizde insan nötrofil elastazına karşı floresan etiketli aptamerleri kullanan optik bir biyosensördür [53].

O zamandan bu yana, çoğu katı destekler üzerinde aptamerler ve elektrokimyasal, optik, mekanik ve akustik sinyaller içeren birçok aptasensör tasarımı türü rapor edilmiştir [45,54-56]. Bazı örnekler bu makalenin ilerleyen kısımlarında ele alınacaktır.

Aptamerler tedavide de uygulanmıştır. Yarı ömürlerin artmasına ve farmakokinetiğin iyileşmesine neden olan modifikasyonlar, bazı aptamerleri klinik uygulama için iyi seçenekler haline getirir. Antikorlarla karşılaştırıldığında aptamerler çok daha az immünojeniktir ve bunların eylemleri ters tamamlayıcı oligonükleotidler tarafından inhibe edilebilir (Munzar ve diğerleri, 2019).

Bu önemli özellikler aptamerlerin terapötik olarak geliştirilmesini önermektedir. Vasküler endotelyal büyüme faktörünü (VEGF) seçici olarak tanıyan Macugen (pegaptanib sodyum), terapötik bir ajan olarak onaylanan ilk aptamerdi (Tobin, 2006).

O zamandan bu yana, birçok aptamer, küçük hücreli akciğer kanseri, von Willebrand faktörüne bağlı bozukluk, anjiyomlar ve renal hücreli karsinomlar gibi tıbbi durumların tedavisi için test edilen klinik deneylerin farklı aşamalarına ulaştı [51,57-60].

Aptamerlerin diğer bir potansiyel terapötik uygulaması dağıtım sistemlerini içerir [61,62]. Bu sistemlerde etkili sonuçlar elde etmek için aptamerlerin hücre yüzeyi proteinlerini doğal formlarında tanıması gerekir.

Cell-SELEX, doğal formlarında saflaştırılması sıklıkla zor olan hücre yüzeyi proteinlerine karşı seçim yapmak üzere geliştirilmiştir [63]. As hücre yüzey proteinini tanıyan bir aptamer, aptamere bağlı bir kargoyu içselleştirmek için reseptörü birlikte kullanabilir. Bu yöntemle, aptamerler öncelikle in vivo olarak hedeflenebilen tek bir hücre tipinde eksprese edilen reseptörlere seçilebilir [57].

Örneğin, anti-PSMA (prostata özgü membran antijeni) aptamerleri, siRNA'ların farelerdeki veya kültürlenmiş hücrelerdeki tümörlere iletilmesi için geliştirildi [62,64-66].

Sinirbilimde aptamerlerin kullanımı, çok geniş bir potansiyel uygulama alanına sahip olmasına rağmen, şimdiye kadar sınırlı olmuştur. Aptamerlerin Alzheimer hastalığı (AD), Parkinson hastalığı (PD), Creutzfeldt-Jakob hastalığı, motor nöron hastalıkları ve Huntington hastalığı dahil olmak üzere merkezi sinir sistemi (CNS) yapısının ve fonksiyonunun kaybına yol açan nörodejeneratif hastalıklar için olası tedavi seçenekleri olduğu rapor edilmiştir. hastalığı(HD) (Şekil 1). Şu anda dünyada yaklaşık 50 milyon insan demansla karşı karşıyadır ve bunun küresel sağlık maliyeti yılda bir trilyon ABD dolarına yakındır.

Bu da demansı toplumumuz için en büyük tıbbi ve ekonomik sorunlardan biri haline getirmektedir [67]. Ayrıca Birleşmiş Milletler ve Dünya Sağlık Örgütü'ne göre 65 yaş üstü dünya nüfusunun 2050 yılına kadar iki katına çıkacağı tahmin ediliyor.

Bu nedenle yaşa bağlı nörodejeneratif hastalıklar, tanı ve tedavi için artan harcamalar gerektirecektir [67].

Erken tanı ve yeni terapötik uygulamaları kolaylaştıracak yöntemlere yönelik bu kritik talepler, aynı zamanda altta yatan bazı komplikasyonlara da çözüm olabilecek aptamerler tarafından karşılanabilir [68,69].

Aptamerler, beyin görüntüleme teknolojileri (MRI, PET vb.), nörotransmiter görselleştirmesi, teşhis ve beyin tümörleri ve diğer beyinle ilgili hastalıkların tedavisindeki uygulamalar için geliştirilmektedir. Bu yaklaşımların çoğunda aptamerler, PET görüntüleme için flor-18 gibi radyotraktörlerle etiketlenir [70]. Bu derlemede aptamerlerin beyin görüntüleme ve sinir hastalıklarına uygulanmasındaki başarıları ve zorlukları tartışacağız.

2. Moleküler Tespit

2.1. Nörotoksin Tespiti
Nörotoksinler, kimyasal olarak çeşitli farmakolojik olarak aktif bileşiklerden oluşan bir gruptur. Organizmaların sinir sistemleri üzerinde belirgin biyolojik etkiler gösterirler ancak kimyasal yapıları ve etki mekanizmaları bakımından farklılık gösterirler.

Aksiyon potansiyellerini değiştirirler ve sinir uyarılarının iletilmesine müdahale ederler. Bunların insan sağlığına ve çevresel etkilere yönelik risklerini doğru bir şekilde değerlendirmek için, bunların doğru şekilde tanımlanmasına yönelik yeterince hassas tekniklerin kullanılması esastır.

Nükleik asit aptamerleri, bu toksinlerin su ve biyolojik numunelerdeki varlığını yüksek hassasiyet ve seçicilikle doğrulamak için kullanılmıştır [71]. Botulinum nörotoksinlerinin (Botulinum A, E), saksitoksin, brevotoksin, paraquat ve tetrodotoksinin aptasensörler tarafından doğru şekilde tanımlandığını gösteren çalışmalar rapor edilmiştir.

Botulinum nörotoksinleri (BoNT'ler) en ölümcül nörotoksinler arasındadır ve potansiyel olarak biyoterörizm ajanları olarak kullanılabilir. BoNT'ler için hassas, etkili ve gerçek zamanlı bir tespit sistemine olan kritik ihtiyacı karşılamak amacıyla, DNA aptamerlerini botulinum nörotoksini tip E'ye (BoNT-E) karşı izole etmek için sol-jel bazlı bir SELEX kullanıldı [47].

Beşinci turdan sonra aptamerkandidat dizileri yeni nesil dizileme (NGS) ile analiz edildi ve yüksek frekanslı aptamerler karakterize edildi. Bu aptamer ailelerinde aptamerBT5.6, BoNT-E için 53 nM Kd'lik yüksek bir afinite gösterdi ve bir grafenoksit platformu üzerinde immobilize edildi. Bu sensör, BoNT-E için 0,83 nM tespit limitini (LoD) gösterdi.

Brevotoksinler (BTX'ler) ve saksitoksinler, nörolojik kabuklu deniz ürünleri zehirlenmesine (NSP) neden olan deniz nörotoksinleridir. BTX'ler yüksek toksisite ve hızlı NSP başlangıcı ile karakterize edilir. Analizleriyle ilgili teknik zorluklar, araştırmacıları bu güçlü nörotoksinler için alternatif, etkili ve ucuz tespit yöntemleri aramaya teşvik etmiştir.

Bu amaçla, seçilen DNA aptamerlerinin elektrokimyasal empedans spektroskopisi (EIS) ve floresans kullanılarak karakterize edildiği BTX-2'yi tespit etmek için bir elektrokimyasal aptasensör geliştirildi.

BTX-2 için 42 nM afiniteye sahip aptamer BT10, 95 pM BTX-2 tespit limiti sergileyen, etiketsiz, rekabetçi impedimetrik bir biyosensöre dahil edildi.

Bu aptasensör, bir kabuklu deniz hayvanı matrisinin varlığında güvenilir bir yanıtla, katkılı bir kabuklu deniz ürünü ekstraktındaki BTX-2'yi tespit edebilmiştir [72]. Deniz nörotoksinlerinin ikinci sınıfı olan saksitoksin, halk sağlığı açısından önem taşıyordu.

Halihazırda uygulanan sistemlerin teknik ve etik sorunları nedeniyle uygun alternatiflerin geliştirilmesi için yeni çalışmalara ihtiyaç duyulmuştur. Bu ihtiyacı karşılamak için etiketsiz bir optik biyokatman interferometri rekabetçi aptasensörü geliştirildi. Biyosensörün saksitoksin için 1,66 nM'lik bir tespit limiti vardır ve yüksek derecede seçicilik ve hassasiyet, iyi stabilite ve hızlı tespit kabiliyetine sahiptir [73].

Deniz toksinlerine benzer şekilde, yılan ısırması sonucu salınan nörotoksinler de en güçlü ve öldürücü toksinler arasındadır. Ne yazık ki, kan pıhtılaşması testlerine ve klinik semptomlara dayanan geleneksel yılan ısırığı teşhisi doğru bir teşhis sağlayamaz. Ayrıca antikor performansının seriye bağlı varyasyonları bunların teşhiste kullanımını karmaşık hale getirir.

Bir -Tox-FL aptamerinin yüksek afiniteli kesik versiyonu, orijinal olarak Bungarus multicinctus'un bungarotoksinine ( -Tox-T2) karşı seçilmiş olup ana -Tox-FL'den (18) daha yüksek afiniteye (Kd=2.8 nM) sahiptir. nM), enzime bağlı aptamer tahlil formatında uygulandı.

Bu kurulumda, -Tox-T2 aptamer, 2 ng kadar az ham zehirde -toksini tespit edebildi ve bu da Bungarus caeruleus zehirinin tespiti için potansiyelini ortaya koydu [74].

2.2. Nörotransmiter Tespiti

Beynin fonksiyonel karmaşıklığını araştırmak için nörotransmitter aktivitelerin ve sinyal yollarının izlenmesi kullanılabilir. Nörotransmiterler hücreler arasında bilgi aktarımı için gereklidir ve epilepsi, Parkinson hastalığı (PD) ve Alzheimer hastalığı (AD) gibi nörolojik bozukluklarda anahtar rol oynarlar.

Çeşitli çalışmalarda, dopamin, epinefrin veya serotonine özgü aptamerler, in vivo ve in vitro nörotransmitter tespiti için aptamer bazlı biyosensörler geliştirmek amacıyla kullanılmıştır [75].

Bir katekolamin nörotransmitteri olan dopamin (DA), insan metabolizmasını, kardiyovasküler ve böbrek sistemi fonksiyonlarını düzenler. Çeşitli nörodejeneratif hastalıkların, özellikle PD'nin, DA'nın anormal metabolizması ile doğrudan ilişkili olduğu gösterilmiştir [76].

Bu nedenle biyolojik sistemlerde DA tespiti için oldukça hassas ve seçici biyosensörlerin geliştirilmesi önemlidir. DA'ya karşı ilk RNA aptameri olan dopa2, DA'ya Kd=2.8 nM tarafından temsil edilen bir afinite ile bağlandı [77].

Bu aptameri kullanarak, grafen-polianilin kompozit film bazlı etiketsiz bir elektrokimyasal aptasensör, 1,98 pM'lik bir LoD ile insanlık dışı DA'nın varlığını başarıyla tespit etti [78]. Daha yeni bir çalışmada, sensör olarak bir DNA aptamerinden ve dönüştürücü olarak sazan derisi kollajen grafen oksit (GCSC-GO) kompozitinden oluşan başka bir DA aptasensörü geliştirildi.

Kompozit ultra-sonikasyon yoluyla hazırlandı ve kızılötesi (IR) ve Raman spektroskopisi, atomik kuvvet mikroskobu ve EIS ile karakterize edildi. Bu sistem kollajene aptamer immobilizasyonunu ve ardından diferansiyel darbe voltametrisini içeriyordu.

Her ne kadar aptasensör, 2 pM'lik önceki sensörle karşılaştırıldığında, 0.75 nM'lik daha yüksek bir LoD gösterse de, DA'ya aşırı yakın ilişkili bileşikler için yüksek seçicilik gösterdi ve %10 serum varlığında DA'yı doğru bir şekilde ölçtü [79].

Serbest etiketli, yüksek hassasiyetli ve seçiciliğe sahip çeşitli moleküllerin analizi için yakın zamanda aptamerli bir mikro konsol dizisi sensörü rapor edildi. Sensör, tiyollenmiş DA aptamerleri ile modifiye edilmiş 12 mikrokantilever dizisinden oluşur ve mikrokantilever yüzeyinde DAaptamer'i tamamlayıcı olan bir DNA dizisi ile konjuge edilmiş altın nanoparçacıklarını (AuNP) kullanır.

Başlangıçta DA aptameriyle hibritlenen AuNP-DNA konjugatları, aptamer DA'ya bağlandığında salınır; bu da dizinin yüzey stresini yaklaşık 15 kat artırır ve sapmayı artırır.

Sistem, 77 nM LoD ile 0,5 ila 4 µM DA aralığında doğrusal yanıta sahiptir. Spesifikliği, L-DOPA'yı da içeren 12 yapısal ve fonksiyonel analogla gösterilmiştir; bunların hiçbiri sapma başlatmamıştır [80].

For more information:1950477648nn@gmail.com