STAT3/HIF-1 /Glikoliz Ekseni Yoluyla Kronik Prostatitin Cistanche Tabletleri İle İyileştirilmesi Üzerine Mekanistik Çalışma
Nov 11, 2025
Soyut
Bu çalışma terapötik mekanizmayı araştırmaktadır.Cistanche Tabletleri (CT)kronik prostatit tedavisindeSTAT3/HIF-1 /glikoliz sinyal ekseni. Cistanche Tabletlerin etkinliğini değerlendirmek için deneysel otoimmün prostatitin (EAP) bir sıçan modeli oluşturuldu. Erkek Wistar sıçanları rastgele altı gruba ayrıldı (grup başına n=7): kontrol, model, düşük, orta ve yüksek doz CT grupları (sırasıyla 197,2, 591,5 ve 1774,4 mg/kg/gün) ve bir pozitif kontrol grubu (Pusitai, 34,2 mg/kg/gün). Model indüksiyonunu takiben tüm tedaviler ardı ardına dört hafta boyunca uygulandı.
Hematoksilen ve eozin (HE) boyama kullanılarak yapılan histolojik analiz, prostat iltihabını ve glandüler hasarı değerlendirdi. Serum interlökin-8 (IL-8), interlökin-1 (IL-1) ve immünoglobulin G (IgG) seviyeleri ELISA yoluyla ölçüldü. Prostat dokularında fosforile edilmiş STAT3 (p-STAT3), HIF-1, çoklu inositol polifosfat fosfataz 1 (MINPP1) ve heksokinazın (HK) protein ekspresyonu Western blot ve immünohistokimya yoluyla değerlendirildi. Hedeflenmemiş metabolomikler, diferansiyel metabolitleri ve ilişkili metabolik yolları tanımlamak için kullanıldı.
Sonuçlar BT'nin prostattaki patolojik hasarı önemli ölçüde hafiflettiğini gösterdi. ELISA, IL-8, IL-1 ve IgG'nin serum seviyelerinin azaldığını ortaya çıkardı. Western blot ve immünohistokimya, CT'nin MINPP1'i yukarı düzenlerken p-STAT3, HIF-1 ve HK'yi aşağı doğru düzenlediğini gösterdi. Metabolomikler 96 farklı metabolit tanımladı ve CT'nin glikolizi ve araşidonik asit metabolizmasını modüle ederek terapötik etkisini gösterebileceğini ortaya çıkardı.
Çözüm:Cistanche Tabletleri, STAT3'ü hedef alarak, HIF-1 sinyalini baskılayarak ve glikolitik metabolizmayı düzenleyerek iltihabı hafifletebilir ve kronik prostatitin ilerlemesini engelleyebilir.
Anahtar Kelimeler: Cistanche Tabletler; ckronik prostatit; metabolomik; HIF-1 sinyal yolu; glikoliz
Cistanche'nin prostat ve böbrek için faydaları
Cistanche haplarını sepete ekle
Wecistanche Destek Hizmeti-Çin'deki en büyük cistanche ihracatçısı:
E-posta:wallence.suen@wecistanche.com
veya
giriiş
Kronik prostatit, erkeklerde idrar fonksiyon bozukluğu, ağrılı idrara çıkma, aciliyet ve perine rahatsızlığı ile karakterize, yaygın bir ürolojik durumdur. Hastaların yaşam kalitesini önemli ölçüde etkileyen, prostatitin en yaygın türüdür. Çalışmalar Çinli erkeklerde %6,0-32,9 ve uluslararası alanda %2,0-%16,0 oranında bir yaygınlık bildirmektedir. Mevcut Batı tedavileri antibiyotiklere ve NSAID'lere dayanmaktadır, ancak uzun süreli kullanım sıklıkla gastrointestinal yan etkilere yol açmaktadır.
Kronik prostatitin etiyolojisi ve patogenezi karmaşıktır; immün düzensizlik, nöroendokrin dengesizlik ve yaşam tarzı faktörlerini içerir. İmmünolojik anormallikler ve metabolik fonksiyon bozuklukları temel endişe alanları olarak kabul edilir.
Geleneksel Çin Tıbbı (TCM) perspektifinden bakıldığında, kronik prostatit böbrek qi eksikliği, nemli ısı birikimi ve kan stazıyla ilişkilidir.Cistanche TabletlerGeleneksel bir hastane içi formülasyondan türetilen [Onay No. Z04000524], "Cuscuta Hapı" ile birleştirilmiş klasik "Cheng's Bi Xie Fen Qing Yin" formülüne dayanmaktadır. Bu formül aşağıdaki gibi on şifalı bitki içerir:Cistanche Deserticola, Dioscorea, VePoliporus şemsiyeve geleneksel olarak böbreği tonlamak, özü güvence altına almak, idrara çıkmayı teşvik etmek ve bulanıklığı ortadan kaldırmak için kullanılır.
Klinik çalışmalar, Cistanche Tabletlerin prostatit semptomlarını etkili bir şekilde azalttığını ve iyi bir güvenlik profiliyle yaşam kalitesini artırdığını doğrulamıştır. Ancak mevcut araştırmaların çoğu klinik gözlemlere odaklanıyor ve kesin tedavi mekanizmaları belirsizliğini koruyor.
Son kanıtlar, kronik prostatitin, anormal glikolizi ve hipoksi ile indüklenebilir faktör 1'in (HIF-1) aşırı ekspresyonunu içerdiğini ve bu durumun onu tedavi için potansiyel bir hedef haline getirdiğini göstermektedir. Üstelik STAT3 yolunun düzenlenmesi, kronik inflamasyonun ve otoimmün yanıtların kontrol edilmesinde yeni bir strateji olarak ortaya çıkmıştır. Bu çalışma, kronik prostatitte bitkisel formülasyonların kullanımına ilişkin yeni kanıtlar sağlamayı amaçlayan, in vivo deneylere ve metabolomiklere dayalı olarak Cistanche Tabletlerinin terapötik mekanizmasını araştırmaktadır.
Malzemeler ve Yöntemler
1. Malzemeler
Hayvanlar:42 SPF dereceli erkek Wistar sıçanı (190-210 g) Suzhou SPF Bioteknoloji Co., Ltd.'den satın alındı. Hayvanlar standart koşullar altında barındırıldı (20±3 derece, %55±%5 nem, 12 saatlik aydınlık/karanlık döngüsü) ve isteğe bağlı olarak yiyecek ve su sağlandı. Çalışma, Kurumsal Hayvan Etik Kurulu tarafından onaylandı (Onay No. 2023112001).
İlaçlar ve Reaktifler:
Cistanche Tabletler
Pusitai Tabletleri (pozitif kontrol)
Salin, PBS tamponu, Tam Freund Adjuvanı
IL-8, IL-1 ve IgG için ELISA kitleri
Antikorlar: p-STAT3, HIF-1, MINPP1, HK
İkincil antikorlar ve immünohistokimyasal reaktifler
Araçlar:
LC-MS sistemleri (Üçlü TOF 6600, Agilent 1290 Infinity LC)
Yüksek hızlı santrifüj, homojenleştirici, mikroplaka okuyucu ve hassas terazi
2. Yöntemler
2.1 İn Vivo Çalışması
2.1.1 Kronik Prostatit Modeli
Deneysel bir otoimmün prostatit (EAP) modeli, tam Freund adjuvanı ile emülsifiye edilmiş homojenleştirilmiş prostat dokusu kullanılarak indüklendi. Sıçanlara 1. ve 28. günlerde birden fazla bölgeden (ense, kasık ve arka pençeler) deri altı enjeksiyonlar yapıldı. Kontrol farelerine salin enjeksiyonu yapıldı. Model başarısı davranışsal belirtiler ve histopatoloji ile doğrulandı.
2.1.2 Gruplandırma ve Tedavi
Model onaylandıktan sonra sıçanlar rastgele altı gruba ayrıldı: kontrol, model, düşük, orta, yüksek doz CT ve Pusitai grubu. CT orta dozu klinik eşdeğer doza göre ayarlandı. Tedaviler 28 gün boyunca günde bir kez oral yoldan verildi.
2.1.3 Örnek Toplama
Son gün 24 saatlik idrar ve su alımı kaydedildi. Ötenazi sonrasında kan ve prostat dokuları toplandı. Prostat indeksi (prostat ağırlığı/vücut ağırlığı) hesaplandı. Dokular ya formalin içinde sabitlendi ya da daha ileri analizler için sıvı nitrojen içinde donduruldu.
2.1.4 Genel Gözlemler
Modelleme ve tedavi boyunca sıçanlar davranışları, kürk durumu ve genel sağlık açısından izlendi.
2.1.5 Serum Sitokinleri için ELISA
Serum IL-8, IL-1 ve IgG seviyeleri, üreticinin talimatlarına uygun olarak ELISA kullanılarak ölçüldü.
2.1.6 Histopatoloji (HE Boyama)
Formalinle sabitlenmiş prostat dokuları parafine gömüldü ve HE boyama için kesitlere ayrıldı. Mikroskop altında iltihap ve doku hasarı gözlendi.
2.1.7 MINPP1 ve HK için immünohistokimya
Parafin giderme, antijen geri alma, bloklama, birincil ve ikincil antikor inkübasyonu, DAB boyama ve hematoksilen karşı boyama dahil olmak üzere standart IHC prosedürleri takip edildi. Pozitif boyamayı ölçmek için ImageJ yazılımı kullanıldı.
2.1.8 p-STAT3 ve HIF-1 için Western Blot
Dondurulmuş prostat dokuları parçalandı ve protein konsantrasyonları belirlendi. SDS-PAGE ve PVDF membran transferini bloklama, birincil/ikincil antikor inkübasyonu, ECL gelişimi ve ImageJ kullanılarak dansitometri izledi.
2.1.9 İstatistiksel Analiz
Veriler GraphPad Prism 9.5.1 kullanılarak analiz edildi. Sonuçlar ortalama ± SD olarak ifade edildi. Tek yönlü ANOVA ve ardından LSD post hoc testi kullanıldı. P<0.05 was considered statistically significant.
2.2 Serum Metabolomikleri
2.2.1 Numune Hazırlama
Kontrol, model ve orta doz CT gruplarından alınan serum eritildi, soğuk metanol-asetonitril-su ile karıştırıldı, sonikasyona tabi tutuldu ve santrifüjlendi. Süpernatanlar kurutuldu ve LC-MS analizi için yeniden oluşturuldu.
2.2.2 LC-MS Koşulları
Metabolitler, spesifik bir gradyan elüsyon profiline sahip bir UPLC BEH Amid kolonu kullanılarak ayrıldı. Veriler, yüksek hassasiyetli IDA modu kullanılarak hem pozitif hem de negatif iyon modlarında elde edildi.
2.2.3 Veri İşleme
Raw data were converted to .mzML format, processed using XCMS for peak identification, alignment, and normalization. Metabolites with >50% missing values were removed. PCA and PLS-DA were used for multivariate analysis. Significant metabolites were filtered based on VIP >1.0 ve p<0.05, and KEGG pathway enrichment was performed.
Sonuçlar ve tartışma
Cistanche Tabletleri prostat histopatolojik değişikliklerini önemli ölçüde iyileştirdi, inflamatuar sitokinleri azalttı ve STAT3/HIF-1 /glikoliz ekseninde anahtar protein ekspresyonlarını düzenledi. Metabolomikler glikoliz ve araşidonik asit metabolizmasının modülasyonunu ortaya çıkardı; bu da hem antiinflamatuar hem de metabolik düzenleyici mekanizmaları düşündürdü.
Bu bulgular gelişimini desteklemektedir.Cistanche bazlı bitkisel takviyelerKronik prostatit için umut verici bir doğal tedavi olarak, iyi bir güvenlikle çok hedefli düzenleme sunuyor.
