Kenya'daki Yabani Cistanche Senegalensis'in Kapsamlı Tanımlanması ve Kimyasal Analizi: Morfoloji, DNA Barkodlama ve Fitokimya

2. DNA Barkodlama ile Moleküler Tanımlama

Yabani doğanın moleküler tanımlanmasıKenya'dan Cistanche örneklerive bunların konukçu bitkileri, ITS2F/ITS3R ve psbA-trnH olmak üzere iki çift primer kullanılarak gerçekleştirildi [11]. Her iki Kenya yabani Cistanche örneği başarıyla eşleştirildi.Cistanche tubulosaGeleneksel Çin Tıbbı DNA barkodlama sisteminde %96,7 dizi benzerliği vardır. GenBank veri tabanındaki diziler birden fazla türle eşleşti ve türlerle %100 benzerlik gösterdi.Cistanche senegalensis ve %98'in üzerinde benzerlikCistanche tubulosa. Konakçı bitki, Geleneksel Çin Tıbbı DNA barkodlama sistemindeki herhangi bir kayıtla eşleşmedi ancak Amaranthaceae türleri ile yüksek benzerlik (%97,55) sergiledi.Sericocomopsis hildebrandtiiGenBank'ta.

İlişkiyi daha da açıklığa kavuşturmak için, en benzerCistanche senegalensispsbA-trnH dizisi (Erişim: LT715293) ve ITS2 dizisi (Erişim: LT715483), dört Çin Cistanche türünün ITS2 ve psbA dizileriyle birlikte GenBank'tan indirildi. Filogenetik ağaçlar MEGA X yazılımı kullanılarak oluşturuldu (bkz. Şekil 3). Şekil 3'te gösterildiği gibi, Kenya yabani Cistanche örnekleri (K1, K2) aynı dalda kümelenmektedir.Cistanche senegalensis0-0,0016 genetik uzaklığa sahip, bu da aynı türe ait olabileceklerini gösteriyor. Buna karşılık, dört Çin Cistanche türünden farklı dallara düşüyorlar, bu da türler arası önemli farklılıklara işaret ediyor. Nispeten, K1, K2 ve arasındaki filogenetik mesafeCistanche tubulosanispeten yakın (0,0089–0,0098), uzaklık iseCistanche Deserticolaçok daha büyüktür (0,1193–0,2961). Bu, Kenya'daki vahşi Cistanche'nin daha yakından ilişkili olduğunu gösteriyor.Cistanche tubulosa, ortak bir ataya işaret ediyor, ancak farklı çevresel baskılar ve evrimsel süreçler nedeniyle daha sonra farklılaşıyor.

 

 

Cistanche tubulosa

3. Farklı Cistanche Örneklerinde Etkin Maddelerin İçeriğinin Belirlenmesi ve Parmak İzi Analizi

Yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC), Çin'in yanı sıra iki Kenya yabani Cistanche örneğinde beş feniletanoid glikozit ve beş sakarit alkolün içeriğini aynı anda belirlemek için kullanıldı.Cistanche tubulosaVeCistanche Deserticola(bkz. Tablo 1 ve 2).

Feniletanoid glikozitler ile ilgili olarak, ekinakosid ve akteozid tüm Cistanche örneklerinde sürekli olarak yüksek seviyelerde bulunmuştur; bu da bunların Çin Farmakopesinde işaretleyici bileşikler olarak seçilmelerinin gerekçesini desteklemektedir. Özellikle,Cistanche senegalensisKenya'dan elde edilen türler, onu Çin Cistanche türlerinden ayıran ve Kenya Cistanche'nin karakteristik bir özelliği olarak hizmet edebilen önemli ölçüde daha yüksek bir tubulosid A içeriği sergiledi.

Toplam sakarit alkol içeriği açısından,Cistanche Deserticolaher ikisinden de çok daha yüksek seviyeler gösterdiCistanche tubulosaVeCistanche senegalensis. Betain tespit edilmediCistanche tubulosafruktoz, mannitol ve glikoz içerikleri benzer olmasına rağmenCistanche Deserticola, çok daha düşük bir sakaroz içeriği hariç. Tersine,Cistanche senegalensistespit edilebilir betain içeriyordu ancak glikoz içermiyordu ve diğer sakarit alkollerin seviyeleri de Çin Cistanche türlerinden oldukça farklıydı.

Cistanche tubulosa Taze Kök

Şimdi iletişime geçin Çin'deki cistanche çiftçilerini tanıyın

 

 

 

Tablo 1 Cistanche bitkilerindeki beş feniletanoid glikozidin içeriği (%, n=3, ortalama ± SD). GH: C. tubulosa; HM: C. Deserticola; "-" algılanmadığını gösterir

Örnek kimliği	Menşei	Büyüme formu	Toplama tarihi	Ekinekozit	Tubulosid A	Akteozit	İzoakteozit	2'-Asetillakteosid	Toplam
GH1	Yutian, Sincan	Ekili	2023.11	9.47 ± 0.070	0.63 ± 0.003	4.34 ± 0.032	1.43 ± 0.007	0.11 ± 0.001	15.98
GH2	Yutian, Sincan	Ekili	2023.11	13.31 ± 0.347	0.64 ± 0.012	4.34 ± 0.032	1.33 ± 0.07	0.17 ± 0.001	19.52
GH3	Yutian, Sincan	Ekili	2023.11	24.64 ± 0.043	0.84 ± 0.014	5.75 ± 0.091	2.06 ± 0.038	0.06 ± 0.003	33.35
HM1	Turpan, Sincan	Ekili	2023.11	1.93 ± 0.094	0.04 ± 0.003	0.15 ± 0.026	0.03 ± 0.006	0.02 ± 0.001	2.17
HM2	Turpan, Sincan	Ekili	2023.11	2.76 ± 0.140	0.05 ± 0.003	0.16 ± 0.018	0.03 ± 0.004	0.03 ± 0.001	3.05
HM3	Turpan, Sincan	Ekili	2023.11	2.44 ± 0.174	0.06 ± 0.004	0.15 ± 0.008	0.03 ± 0.002	0.02 ± 0.001	2.69
K1	Kenya	Vahşi	2023.08	3.83 ± 0.027	2.69 ± 0.034	2.70 ± 0.27	0.27 ± 0.003	0.74 ± 0.001	10.23
K2	Kenya	Vahşi	2023.08	1.46 ± 0.018	1.51 ± 0.001	0.15 ± 0.001	0.08 ± 0.001	0.03 ± 0.001	3.23

---

Tablo 2 Cistanche bitkilerindeki şeker alkolleri ve betain içerikleri (%, n=3, ortalama ± SD)

Örnek kimliği	Menşei	Büyüme formu	Toplama tarihi	Betain	Fruktoz	Mannitol	Glikoz	Sakaroz	Toplam
GH1	Yutian, Sincan	Ekili	2023.11	-	11.66 ± 0.084	5.56 ± 0.112	5.45 ± 0.054	2.29 ± 0.042	24.96
GH2	Yutian, Sincan	Ekili	2023.11	-	8.75 ± 0.061	4.94 ± 0.159	3.34 ± 0.081	1.70 ± 0.092	18.73
GH3	Yutian, Sincan	Ekili	2023.11	-	9.44 ± 0.107	5.09 ± 0.089	4.31 ± 0.455	1.80 ± 0.149	20.29
HM1	Turpan, Sincan	Ekili	2023.11	6.62 ± 0.136	7.60 ± 0.119	3.22 ± 0.049	3.55 ± 0.150	23.18 ± 0.425	44.16
HM2	Turpan, Sincan	Ekili	2023.11	6.46 ± 0.105	7.82 ± 0.104	4.82 ± 0.038	4.98 ± 0.104	28.57 ± 0.449	52.65
HM3	Turpan, Sincan	Ekili	2023.11	6.65 ± 0.148	8.29 ± 0.159	3.90 ± 0.084	4.88 ± 0.009	26.90 ± 0.629	50.62
K1	Kenya	Vahşi	2023.08	9.41 ± 0.021	5.31 ± 0.333	7.06 ± 0.045	-	8.44 ± 0.102	30.22
K2	Kenya	Vahşi	2023.08	6.29 ± 0.034	-	-	-	-	6.29

---

Not:
"-" algılanmadığını gösterir.
GH =Cistanche tubulosa, HM =Cistanche Deserticola, K=Kenya vahşiCistanche.

 

Farklı bölgelerden alınan Cistanche örneklerinin kromatografik parmak izleri Şekil 4'te gösterilmiş, parmak izi benzerlik analizi sonuçları ise Tablo 3'te sunulmuştur. Kenya yabani Cistanche örneği K1 ile GH1–GH3 örnekleri arasındaki benzerlik (Cistanche tubulosaÇin'den) 0,785 ila 0,899 arasında değişirken, HM1–HM3 örnekleriyle benzerlik (Cistanche DeserticolaÇin'den) 0,630 ila 0,745 arasında değişiyordu. Kenya'dan gelen K2 numunesi için, GH1–GH3 numuneleriyle benzerlik 0,840 ila 0,859 ve HM1–HM3 numuneleriyle benzerlik 0,775 ila 0,824 idi. Bu sonuçlar, Kenya yabani Cistanche'sinin kimyasal bileşiminin Çin'dekine daha benzer olduğunu göstermektedir.Cistanche tubulosadahaCistanche Deserticola.

 

Şekil 4 Kenya'daki yabani Cistanche'nin ve Sincan'da yetiştirilen C. tubulosa ve C. Deserticola'nın parmak izi kromatogramları

 

Tablo 3 Cistanche örneklerinin benzerlik değerlendirmesinin sonuçları

Örnek	K1	K2	HM1	HM2	HM3	GH1	GH2	GH3	Referans
K1	1	0.881	0.647	0.745	0.630	0.899	0.834	0.785	0.852
K2	0.881	1	0.783	0.824	0.775	0.859	0.854	0.840	0.875
HM1	0.647	0.783	1	0.988	1	0.887	0.950	0.975	0.945
HM2	0.745	0.824	0.988	1	0.985	0.946	0.986	0.997	0.983
HM3	0.630	0.775	1	0.985	1	0.876	0.942	0.969	0.937
GH1	0.899	0.859	0.887	0.946	0.876	1	0.987	0.967	0.988
GH2	0.834	0.854	0.950	0.986	0.942	0.987	1	0.996	0.999
GH3	0.785	0.840	0.975	0.997	0.969	0.967	0.996	1	0.993
Referans	0.852	0.875	0.945	0.983	0.937	0.988	0.999	0.993	1

---

Not: K1, K2: Kenya yabani Cistanche'si; HM1–HM3:Cistanche DeserticolaTurpan, Sincan'dan; GH1–GH3: *

 

Tartışma

Kenya, zengin bitki çeşitliliğine ve bitkileri tıbbi amaçlarla kullanma konusunda uzun süredir devam eden bir geleneğe sahiptir. Bununla birlikte, birçok Afrika bitkisi üzerinde taksonomi, kimya ve farmakoloji açısından yapılan araştırmalar sınırlı kalmakta, bu da birçok değerli şifalı bitkinin gözden kaçırılmasına ve yeterince araştırılmamasına neden olmaktadır. Cistanche'nin Kenya'da yaygın olarak dağıtıldığını öne süren raporlar olmasına rağmen [15], ülkede tıbbi kullanımına ilişkin herhangi bir kayıt mevcut değildir. Kenya'daki Cistanche kaynaklarının durumunu ve tıbbi değerini açıklığa kavuşturmak için araştırma ekibimiz bir saha araştırması gerçekleştirdi ve şunları buldu:Cistanche senegalensisGüneybatı Kenya'da yaygın olarak dağıtılmaktadır. Cistanche'nin yerel çiçeklenme dönemleri Mart'tan Mayıs'a ve Ekim'den Aralık'a kadardır. Anketimiz ağustos ayında yapıldığından sadece iki örnek toplayabildik. Bu sınırlamaya rağmen, yabani Kenya Cistanche türlerini morfolojik, histolojik ve DNA moleküler analizleri yoluyla belirledik ve kimyasal bileşimlerini belirleyerek Kenya'daki Cistanche kaynaklarının korunmasına ve geliştirilmesine destek sağladık.

Cistanche Deserticola

 

Kenya yabani Cistanche'nin etli sapı düzleştirilmiş ve silindiriktir;Cistanche Deserticolagörünüş olarak, ancak iğ biçimli kökten önemli ölçüde farklıCistanche tubulosa. Kenya yabani Cistanche'sinin enine kesiti, dağınık damar demetlerini göstermektedir; bu durum, bu durumla tutarlıdır.e özellikleriCistanche tubulosa. Ancak anter tabanıCistanche tubulosaKeskin bir ucu olmayan küt ve yuvarlaktır, bu özellik vahşi Kenya Cistanche'sinde yoktur [1,7]. ITS2 ve psbA-trnH sekans analizine dayanarak, Kenya yabani Cistanche'nin muhtemelenCistanche senegalensisve her iki genetik bölge de Çinlilerle yüksek benzerlik gösteriyorCistanche tubulosa. Önceki raporlar şunu gösteriyorC. senegalensisEsas olarak kuzeydoğu Afrika'daki Senegal'den güneye, Kenya'ya ve güneydoğu Afrika'nın diğer bölgelerine dağıtılmaktadır [15]. Cistanche cinsine ilişkin en yeni ve kapsamlı filogenetik çalışma, onu dört ana sınıfa ayırmaktadır: Doğu Asya, Kuzeybatı Afrika, Güneybatı Asya ve yaygın bir dal. Türler arası hibridizasyon veya coğrafi değişiklikler nedeniyle, yaygın dal düşük filogenetik çözünürlükle karakterize edilir ve bu da türlerin morfoloji ve DNA dizilerine dayalı olarak ayırt edilmesini zorlaştırır. İkisi birdenC. tubulosaVeC. senegalensisbu yaygın sınıfa giriyor ve dört örnek şu şekilde tanımlanıyor:C. tubulosaiçinde bulunduC. senegalensisBu durum, nükleer ITS2 ve kloroplast psbA-trnH dizileri düzeyinde dahi bu ikisi arasında ayrım yapmayı zorlaştırmaktadır [8].

Araştırmaya göre [15],C. senegalensisgibi birçok türü içerir.Süveyda monoika(Amaranthaceae),Salvadora persika(Salvadoraceae),Zygophyllumtürler (Zygophyllaceae) veVachellia tortilis(Fabaceae). Bu çalışmada Kenya yabani Cistanche'nin konağı şu şekilde tanımlandı:Sericocomopsis hildebrandtii(Amaranthaceae), kökleri yerel olarak sıtma, mide ağrısı, hepatit, kabızlık ve diğer rahatsızlıkların tedavisinde etnomedikal olarak kullanılan bir alt çalı veya çalıdır [16,17]. Çin'deki ev sahipleriCistanche DeserticolakatmakHaloksilon ammodendron, H. persicum(her ikisi de Amaranthaceae) veAtriplex canescens(Chenopodiaceae) [18]; Çinlilerin ev sahipleri iseCistanche tubulosaçeşitli türlerdirTamarix(Tamaricaceae). Çin Cistanche türlerinin nispeten sınırlı konukçu yelpazesiyle karşılaştırıldığında,C. senegalensisKenya'da farklı cinslerden daha geniş bir konakçı çeşitliliği kullanılıyor, bu da daha geniş bir ekolojik uyum yeteneğine işaret ediyor.

Her iki örnekC. senegalensisBu çalışmada toplanan beş feniletanoid glikozitin tümünü içeriyordu, ancak seviyeler muhtemelen çiçeklenme aşamasındaki farklılıklar nedeniyle büyük ölçüde değişiyordu. K1 numunesi, bitki topraktan çıkmadan önce toplandı; daha küçük bir gövde ve tüketilmemiş besin rezervleri ile daha yüksek aktif madde içeriği elde edildi; K2 numunesi, önceki çalışmalarla tutarlı olarak, besinlerin tükendiği çiçeklenme döneminde toplandı, bu da daha düşük aktif madde içeriğine yol açtı [19]. K1'deki beş feniletanoid glikozidin toplam içeriği Çin'dekinden daha yüksektiCistanche Deserticolaancak Çince'den daha düşükCistanche tubulosa. Ayrıca K1'deki dört şeker alkolünün ve betain'in toplam içeriği, K1'dekinden daha yüksekti.Cistanche tubulosaama olduğundan daha düşükCistanche Deserticola. Özellikle hem K1 hem de K2 numuneleri nispeten yüksek düzeyde betain içeriyordu; bu, Çin'de daha önce hiç tespit edilmemişti.Cistanche tubulosaancak Çin'de yüksek miktarlarda mevcut olduğu biliniyorCistanche Deserticola[6]. Bir diğer önemli fark, ne K1 ne de K2'nin glikoz içermemesidir, ancak numune boyutunun küçük olması nedeniyle bunun bir karakteristik olup olmadığı belirsizdir.C. senegalensisveya sadece bireysel varyasyon; bu, gelecekte daha fazla örnekle daha fazla doğrulama gerektirecektir.

Özetle, saha araştırması ve araştırma yoluyla bu çalışma, yabani Cistanche'nin Kenya'daki dağılımını tespit etmiş, türlerini şu şekilde açıklamıştır:Cistanche senegalensisve Çinlilerle hem benzerlikler hem de farklılıklar bulduCistanche DeserticolaVeCistanche tubulosa. Bu farklılıklar yetiştirme yöntemlerinden, ekolojik çevreden ve diğer faktörlerden etkilenebilir ve daha fazla araştırma ve izlemeyi gerektirebilir.

 

Referanslar

[1] Çin Farmakopesi Komisyonu. Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi (中华 人民共和国药典) [S]. Cilt 1. 2025 Ed. Pekin: China Medical Science Press, 2025: 319-320.

[2] Tu PF, Jiang Y. Cistanches Herba [J] üzerine klasik literatür araştırmasını güncelleyin. Çin J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2022, 47: 5670-5679.

[3] Fu Z, Fan X, Wang X ve diğerleri. Cistanches Herba: kimyasına, farmakolojisine genel bakış,

[4] Xu CH, Tuerdimaimaiti N, Wang YX, ve diğerleri. Cistanches'te [J] feniletanoid glikozitlerin biyoaktivitesindeki ilerleme. Gıda İlacı (食品与药品), 2023, 25: 261-266.

[5] Song ZH, Lei L,Tu PF. Cistanche Hoffing ve Link [J] bitkilerindeki farmakolojik aktivite araştırmalarındaki ilerlemeler. Chin Tradit Herb Drugs (中草药), 2003, 34: 113-115.

[6] Gao YJ, Jiang Y, Dai F, ve diğerleri. Cistanche Deserticola YC Ma'nın [J] müshil bileşenleri üzerine çalışma. Mod Chin Med (中国现代中药), 2015, 17: 307-310, 314.

[7] Flora Reipublicae Popularis Sinicae Yayın Kurulu, Çin Bilimler Akademisi. Çin Florası (中国植物志) [M]: Cilt 69. Pekin: Science Press, 1999: 86.

[8] Ataei N, Schneeweiss GM, García MA, ve diğerleri. Fotosentetik olmayan parazitik bitki Cistanche'nin (Orobanchaceae) çok odaklı filogenisi, mevcut taksonomiyi çürütür ve morfolojik olarak farklı dört ana dal tanımlar [J]. Mol Filogenet Evol, 2020, 151: 106898.

[9] Nankaya J, Gichuki N, Lukhoba C, ve diğerleri. Kenya masailerinin şifalı bitkileri: bir inceleme [J]. Bitkiler, 2020, 9:44