Pıhtılaşma, Proteazla Aktive Edilen Reseptörler ve Diyabetik Böbrek Hastalığı: ENOS Eksik Farelerden Alınan Dersler

Yüksek yağlı diyet ve eNOS eksikliği diyabetik farelerde TF'yi sinerjistik olarak artırır

Birçok çalışma obezite ile tromboz arasında bir bağlantı olduğunu göstermiştir (Samad ve Ruf 2013). Sınav içinTLR4-NF-kB yolunun yukarı regülasyonumetabolik hastalıkkoşullar TF düzeylerini artırmaktadır (Lv ve ark. 2009; Owens ve ark. 2012; Rogero ve Calder 2018). Ayrıca doymuş yağ asidi palmitat, ROS ve JNK yolağına bağlı mekanizmalar ve hücre dışı histonlar yoluyla histon H3 salınımını indükleyerek monositlerde TF ekspresyonunu artırır (Shrestha ve ark. 2013). Pıhtılaşma, eNOS ve arasındaki ilişkiye odaklanmakdislipidemi, önceki çalışmamız eNOS eksikliğinin ve yüksek yağlı diyetin TF ekspresyonu üzerindeki birleşik etkilerini göstermiştir (Li ve ark. 2010). Çalışmada, eNOS'u olmayan fareler, DM geliştirmek için düşük dozda STZ ile tedavi edildi ve yüksek yağlı bir diyetle beslendi. eNOS ekspresyonunun eksikliği idrar albümin atılımını arttırdı vehistolojik yaralanmalarBunlar yüksek yağlı diyetle daha da şiddetlendi. TF'nin ekspresyonu ve aktivitesi, eNOS ekspresyonu eksikliği ve yüksek yağlı diyet nedeniyle fare böbreklerinde arttı.sinerjik tarz. İlginç bir şekilde, bir glomerüler monosit/makrofaj işaretçisi ile yapılan kolokalizasyon deneyleri, immünoreaktif TF seviyesinde bir artış gösterdi.

TF'ye Karşı Nötralize Edici Antikorlar, eNOS Nakavt Farelerde Diyabetik Böbreklerdeki Enflamasyonu İyileştiriyor

TF'ye bağlı pıhtılaşmadaki artış, artan inflamasyonla ilişkilidir (Witkowski ve ark. 2016). TF'ye bağlı pıhtılaşma sisteminin inhibisyonu iyileştirildiinflamatuar hastalıklarLPS kaynaklı sepsis gibi (Pawlinski ve ark. 2010). DKD'de inflamasyon ve TF arasındaki nedensel bağlantıyı aydınlatmak için, TF'ye karşı nötrleştirici antikorların inflamasyon üzerindeki kısa vadeli etkisini inceledik.diyabetik böbreklereNOS eksikliği olan farelerde (Li ve ark. 2010). Sonuçlar, anti-TF antikorlarının uygulanmasının, TF nötralizasyonundan dört gün sonra fare böbreklerinde Tnfa, Ccl2, Tgfb ve Col4 mRNA gibi inflamasyon ve fibrozla ilişkili genlerin renal ekspresyon seviyelerini belirgin şekilde azalttığını gösterdi.

BÖBREK İŞLEVLERİNE YÖNELİK %25 EKİNAKOSİT VE %9 AKTEOSİT İÇEREN DOĞAL ORGANİK SİSTANŞ EKSTRATINI ALMAK İÇİN BURAYA TIKLAYIN

Wecistanche Destek Hizmeti-Çin'deki en büyük cistanche ihracatçısı:

E-posta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Daha Fazla Özellik İçin Alışveriş Yapın Detaylar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Pıhtılaşma FXa İnhibitörü, eNOS Eksik Diyabetik Farelerde Böbrek Hasarını İyileştiriyor

TF/VIIa'nın aşağısında yer alan pıhtılaşma FXa da PAR'a bağımlı yol yoluyla iltihaplanmaya katkıda bulunur. DKD'deki rolü çeşitli hayvan modellerinde gösterilmiştir. Sumi ve ark. (2011), bir FXa inhibitörü olan fondaparinuksun db/db farelerinde idrar protein düzeylerini, glomerüler hipertrofiyi ve fibrin birikimini azalttığını göstermiştir. eNOS bulunmayan DKD farelerinde FXa inhibisyonunun terapötik etkisi grubumuz tarafından gösterilmiştir (Oe ve ark. 2016). eNOS-/-'ye oral FXa inhibitörü olan Edoxaban (50 mg/kg/gün) uygulandı; Ins2Akita/+ farelerinde üç ay süreyle gözlemlendi ve sonuçlar, mesangial matris proliferasyonu gibi histolojik yaralanmalarda iyileşme gösterdi. Böbreklerdeki inflamatuar genlerin ekspresyon seviyeleri edoksaban ile azaltıldı (Tablo 1). FXa hem PAR1'i hem de PAR2'yi etkinleştirir. FXa aracılı böbrek hasarının mekanizmasını açıklamak için, FXa inhibitörlerinin anti-inflamatuar etkilerinin, FXa inhibitörleri olan PAR2-/- farelerinde ve PAR2-/- farelerinde bulunanlara benzer olduğunu gösterdik. . Bu bulgular, FXa'nın muhtemelen DKD'de PAR{17}}bağımlı bir mekanizma yoluyla iltihaba neden olduğunu ileri sürdü. Buna karşılık redoks yasağı eNOS+/+'da glomerüler hasarı iyileştirmedi; Ins2Akita/+ fareleri, FXa inhibisyonunun terapötik etkisinin tip I'de eNOS'a bağlı hiper pıhtılaşma ile ilişkili olduğunu düşündürmektedirdiyabetik fareler.

DKD'deki Diğer Pıhtılaşma Faktörleri

Çünkü trombin ilerleyen PAR1'i hedef alır.damar iltihabı(Chen ve Dorling 2009),Trombin muhtemelen DKD'yi şiddetlendiriyor. Ancak trombinin DKD patogenezinde koruyucu veya zararlı rolleri gösterilmiştir; düşük dozda trombin (50 pM) önlenirken, yüksek dozda trombin (20 nM) ağırlaştırıldı,glikozun neden olduğu apoptozpodositlerde (Wang ve ark. 2011b). Dabigatran gibi trombin inhibitörlerinin eNOS bulunmayan diyabetik fareler üzerindeki etkileri gelecekte açıklanmalıdır.

Fibrinojen çeşitliinflamatuar durumlar. İlginç bir şekilde, fibrinojenin kısmi azalması veya yokluğu, renal iskemi-reperfüzyon modellerine veya obstrüktif böbrek fibrozuna faydalı olmuştur (Sörensen ve ark. 2011; Craciun ve ark. 2014). eNOS bulunmayan diyabetik farelerde glomerüler fibrin birikimi arttığı için (Nakagawa ve ark. 2007; Li ve ark. 2010; Wang ve ark. 2011a), bu durum onunDKD patogenezidaha fazla araştırmayı hak ediyor.

eNOS Eksik Diyabetik Farelerde PAR1 ve PAR2'nin İfadesi

PAR'ların artan ekspresyonu böbrek hasarı ile ilişkilidir. Biz ve diğerleri, diyabetik nefropati, adenin kaynaklı böbrek hasarı, obstrüktif renal fibrozis ve sisplatin kaynaklı böbrek hasarı olan hayvan modellerinde Par1 ve/veya Par2 mRNA'nın ekspresyon seviyelerinin arttığını gösterdik (Chung ve ark. 2013; Hayashi ve diğerleri). diğerleri 2016; Oe ve diğerleri 2016; Watanabe ve diğerleri 2019). Ayrıca tip II DM modeli olan db/db farelerinde glomerüler PAR2 protein düzeylerinin arttığı görülmüştür (Sumi ve ark. 2011). Diyabetik farelerde PAR ekspresyonu ile eNOS eksikliği arasındaki ilişkiyi gösterdik (Oe ve ark. 2016). Par1 mRNA'nın ekspresyon seviyesi eNOS−/−'de anlamlı derecede yüksekti; Ins2Akita/+ fareleri eNOS−/−'ye göre; Ins2Akita/+ ve DM olmayan fareler. Benzer şekilde Par2'nin ifadesi eNOS-/-'de anlamlı derecede yüksekti; Ins2Akita/+ fareleri, DM olmayan farelere göre. Buna karşılık Par4 mRNA seviyeleri genotipler arasında farklılık göstermedi. eNOS eksikliği DKD'deki inflamasyonu şiddetlendirmektedir (Wang ve ark. 2011a). Proinflamatuar sitokinlerin PAR'ları arttırdığı bildirildiğinden (Nystedt ve ark. 1996), eNOS eksikliğinden kaynaklanan yüksek inflamasyon muhtemelen DKD'de renal Pars ekspresyonunu indükler. Toplu olarak, çalışmalarımızın sonuçları, TF vakasına benzer şekilde PAR1 ve PAR2 ekspresyon seviyelerinin, eNOS olmadığında diyabetik böbreklerde arttığını ortaya koydu (Şekil 2).

PAR2 Silme Düzeltilmiş Diyabetik Böbrek

Azaltılmış eNOS'lu Farelerde Yaralanma

Biz ve diğerleri önceki çalışmalarda PAR2'nin DKD'deki rolünü ele aldık. Par2 silinmesi, eNOS'lu diyabetik vahşi tip Akita farelerinde (Ins2Akita/+) glomerüler hasarı etkilemedi (Oe ve ark. 2016). Ayrıca, PAR2 içermeyen STZ ile indüklenen diyabetik fareler, diyabetik vahşi tip farelere kıyasla albüminüride azalma gösterdi ancak ortalama hedef genişlemesini arttırdı (Waasdorp ve ark. 2017). Toplu olarak bu sonuçlar, DKD'nin erken ve hafif modellerinde böbrek hasarı üzerinde PAR2 inhibisyonunun hiç terapötik etkisi olmadığını veya hafif terapötik etkisinin olmadığını göstermektedir. Buna karşılık, biz, eNOS ekspresyonunun azaldığı diyabetik Akita farelerinde PAR2 eksikliğinin DKD üzerindeki etkilerini gösterdik (eNOS+/-; Ins2Akita/+) (Oe ve ark. 2016). PAR2 eksikliği, idrar albümin atılımı, mesanjiyal genişleme ve GBM kalınlığı düzeylerini önemli ölçüde azalttı. Fare böbreklerinde Tnfa, Tgfb ve Col4 dahil olmak üzere proinflamatuar ve fibrozla ilişkili genlerin ekspresyon seviyeleri de azaldı. Bu bulgular PAR2'nin erken dönemde değil, eNOS eksikliğinin neden olduğu nispeten ilerlemiş diyabetik glomerüler hasarda patojenik olduğunu göstermektedir (Tablo 1).

Azaltılmış eNOS ile Diyabetik Farelerde PAR1 ve PAR2'nin İkili Blokajı

PAR1 ve PAR2'nin işbirliği içinde DKD patogenezine katkıda bulunduğunu gösterdik (Mitsui ve ark. 2020). Bu çalışmada, eNOS (Ins2Akita/+; eNOS+/-) için heterozigot olan erkek tip I diyabetik Akita fareleri, DKD modeli olarak kullanıldı. Bu fareler 4 hafta boyunca araç, PAR1 antagonisti (E5555, 60 mg/kg/gün), PAR2 antagonisti (FSLLRY, 3 mg/kg/gün) veya E5555 + FSLLRY ile tedavi edildi. PAR1 veya PAR2 antagonistinin tek başına uygulanması, bir aracın uygulanmasıyla karşılaştırıldığında mesanjiyal genişleme ve kollajen IV birikimi gibi glomerüler hasarı hafifletti. Hem PAR1 hem de PAR2 inhibisyonunun sinerjistik terapötik etkileri gözlendi ve hem PAR1 hem de PAR2, E5555 + FSLLRY ile bloke edildiğinde, araç uygulamasıyla karşılaştırıldığında idrar albümin-kreatinin oranı önemli ölçüde azaldı. Ayrıca, PAR1 ve PAR2'nin E5555 + FSLLRY tarafından ikili blokajı, mezenjiyal genişleme, glomerüler makrofaj infiltrasyonu ve tip IV kollajen birikimi dahil olmak üzere histolojik hasarı sinerjistik olarak iyileştirdi. Böbreklerdeki inflamasyon ve fibrozla ilişkili genlerin ekspresyon seviyeleri de azaldı (Tablo 1).

PAR1 ve PAR2 agonistlerinin insan endotel hücreleri üzerindeki proinflamatuar etkilerine odaklandık (Mitsui ve ark. 2020). Sonuçlar, hem PAR1 hem de PAR2 agonistleriyle stimülasyonun, MCP1 ve PAI1 mRNA'nın ekspresyon seviyelerini sinerjistik olarak arttırdığını gösterdi. PAR1 agonistinin etkisi bir NF-κB inhibitörü tarafından bloke edilirken PAR2 agonistinin etkisi NF-kB ve MAPK inhibitörleri tarafından bloke edildi. Toplu olarak PAR1 ve PAR2, farklı sinyal yolları yoluyla vasküler inflamasyona ve DKD'ye ortaklaşa katkıda bulunur (Şekil 3).

Çözüm

Bu derlemede diyabetik farelerde pıhtılaşma proteaz-PAR yolu ile eNOS eksikliği arasındaki ilişkiye odaklandık. Düşük eNOS üretimi, DKD'ye zararlı olan hiper pıhtılaşma ve artan PAR sinyallemesi ile bağlantılıdır. Bu bulgular, DKD'nin ileri veya geç evresindeki (örneğin, böbrek yetmezliği ve/veya masif proteinüri ile) patolojik rollerini gösterebilir. Oral FXa inhibitörleri trombozu önlemek için yaygın olarak kullanılmaktadır (Patel ve ark. 2011; Robertson ve ark. 2015). DKD tedavisinde kullanımları umut verici bir seçenektir. Ayrıca atopaxar ve vorapaxar gibi bazı PAR1 antagonistleri akut koroner sendromu önlemek amacıyla antiplatelet tedavide kullanılabilir (Goto ve ark. 2010; Tricoci ve ark. 2012). Ek olarak, PAR2 antagonistlerinin geliştirilmesinde dikkate değer bir ilerleme vardır (Lim ve ark. 2013; Cheng ve ark. 2017; Jiang ve ark. 2018) ve bunlar DKD'li hastaların tedavisinde yeni terapötik seçenekler olabilir.

Teşekkür

Bu çalışma Gonryo Tıp Vakfı tarafından desteklenmiştir. İngilizce dilindeki düzenleme için Editage'e (https://www.editage.com) teşekkür ederiz.

Çıkar Çatışması Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Referanslar

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. & de Boer, IH (2013) Böbrek hastalığı ve tip 2 diyabette artan ölüm riski.J. Am. Sos. Nefrol., 24, 302-308. 

Azushima, K., Gurley, SB & Coffman, TM (2018) Farelerde diyabetik nefropatinin modellenmesi.Nat. Rahip Nephrol., 14, 48-56. Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki,

M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA, Sharma, K., Smithies, O., Susztak, K., ve diğerleri. (2009) Diyabetik nefropatinin fare modelleri.J. Am. Sos. Nefrol., 20, 2503-2512. Camerer, E., Huang, W. ve Coughlin, SR (2000) Proteazla aktifleştirilen reseptör 2'nin faktör VIIa ile doku faktörü ve faktör X'e bağlı aktivasyonu.Proc. Natl. Acad. Bilim. Amerika Birleşik Devletleri, 97, 5255-5260. 

Chen, D. ve Dorling, A. (2009) Akut ve kronik inflamasyonda trombinin kritik rolleri.J. Tromb. Haemost., 7 Ek 1, 122-126. Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. & Harris, RC (2012) Endotelyal nitrik oksit sentaz aktivitesinin iyileştirilmesi, db/db farelerinde diyabetik nefropatinin ilerlemesini geciktirir.Böbrek Uluslararası, 82, 1176-1183. Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, NO, Jazayeri, A., Johansson, P., ve diğerleri. (2017) Proteazla aktifleştirilen reseptör 2'nin allosterik modülasyonuna ilişkin yapısal görüş.

Doğa, 545, 112-115. Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD & Muruve, DA (2013) Epidermal büyüme faktörü reseptörünün proteinazla aktifleştirilen reseptör-2 transaktivasyonu ve dönüştürücü büyüme faktörü- Reseptör sinyal yolları renal fibrozise katkıda bulunur.J. Biol. Kimya, 288, 37319-37331. Coughlin, SR (2005) Hemostaz, tromboz ve vasküler biyolojide proteazla aktifleşen reseptörler.J. Tromb. Haemost., 3, 1800-1814. Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL,

Bijol, V., Humphreys, BD & Vaidya, VS (2014) Fibrinojenin farmakolojik ve genetik tükenmesi böbrek fibrozundan korur.Am. J. Physiol. Böbrek Fizyolü., 307, 

F471- 484. Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Hold sworth, SR & Tipping, PG (2000) Proteazla aktifleştirilen reseptör 1, kresentik glomerülonefritte trombine bağımlı, hücre aracılı böbrek iltihabına aracılık eder.J. Exp. Med., 191, 455-462.