Sıçan Modelinde Cistanche Bazlı Formülasyonun Kronik Bakteriyel Olmayan Prostatit (CNP) Üzerindeki Terapötik Etkilerinin ve Bağırsak Mikrobiyotası ve Metabolomik Aracılığıyla Mekanizmasının Araştırılması

Soyut

dayalı olarakdeneysel otoimmün prostatit (EAP) sıçan modeli, bu çalışma,Cistanche Bazlı Kapsülün (CBC) terapötik etkileri ve altında yatan mekanizmalarhafifletmedekronik bakteriyel olmayan prostatit (CNP). Amaç, gelişimi için klinik öncesi bir temel sağlamaktır.geliştirilmiş bitkisel ilaçlaryönetimi için genişletilmiş endikasyonlarlakronik prostatit ve pelvik ağrı sendromları.

Metodoloji:

Histopatolojik değişikliklersıçan prostat dokusunda değerlendirildihematoksilen-eozin (HE) boyama.

Beyaz kan hücresi infiltrasyonuVelesitin vücut yoğunluğuprostat homojenatlarında mikroskobik olarak değerlendirildi.

Serum seviyelerisüperoksit dismutaz (SOD)Vemalondialdehit (MDA)biyokimyasal analiz kullanılarak ölçüldü.

Enflamatuar sitokinler(TNF- , iNOS, IL-1 , IL-2, IL-6, IL-8 ve IL-10) kullanılarak ölçüldüenzime bağlı immünosorbent tahlili (ELISA).

16S rDNA dizilimideğişiklikleri değerlendirmek için kullanıldı.bağırsak mikrobiyotası.

Hedeflenmemiş metabolomikleraçıklamak için analiz yapıldıCBC'den etkilenen metabolik yollar.

Batı lekesi (WB)modülasyonunu doğrulamak için kullanıldı.SPHK1/S1P1/PI3K/Akt sinyal yolu.

Sonuçlar:

CBC yönetimi önemli ölçüde:

Daha az histolojik hasarprostat dokularına;

Artan lesitin vücut yoğunluğuVelökosit infiltrasyonunda azalma;

Proinflamatuar sitokinlerin azalması(TNF- , iNOS, IL-1 , IL-2, IL-6, IL-8);

Antiinflamatuar sitokin IL-10 arttı;

Geliştirilmiş bağırsak mikrobiyota bileşimiözellikle artanLaktobasilVeBifidobacterium hayvanis, azaltırkenunclassified_f_PrevotellaceaeVeVeillonella;

10 temel metaboliti değiştirdi, içermeksfingozinVeretinoil -glukuronid, etkileyensfingolipid metabolizmasıVeretinol metabolizması;

Aşağı regüle edilmiş SPHK1 ve S1P1 ifadesive engellendiPI3K ve Akt fosforilasyonuprostat dokusunda.

Çözüm:

Cistanche Bazlı Kapsüller (CBC) etkili bir şekildeinflamatuar yaralanmayı iyileştirmekEAP sıçanlarının prostat dokusunda. Mekanizmalar şunları içerebilir:

Bağırsak mikrobiyota disbiyozunun modülasyonu;

Metabolik fonksiyon bozukluklarının düzeltilmesi;

SPHK1/S1P1/PI3K/Akt sinyal yolunun baskılanması.

Bu bulgular potansiyelini desteklemektedir.Cistanche türevi bitkisel formülasyonlarolarakdoğal, çok hedefli terapiiçinkronik bakteriyel olmayan prostatitve gelecek için umut verici bir yön sunuyoruzbitkisel ilaç yeniliği.

Anahtar Kelimeler:

Cistanche bazlı kapsüller; kronik bakteriyel olmayan prostatit; bağırsak mikrobiyotası; metabolomik; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt yolu; prostatit bitkisel tedavisi; doğal antiinflamatuar tedavi; EAP sıçan modeli

 

 

Cistanche bazlı formül çayı

Şimdi al

 

 

Soyut:

Kategori III prostatit olarak da bilinen kronik bakteriyel olmayan prostatit/kronik pelvik ağrı sendromu (CNP/CPPS), yaklaşık olarakTüm prostatit vakalarının %90'ı. Alt idrar yolu rahatsızlığı, pelvik ve perineal ağrı, cinsel işlev bozukluğu ve sıklıkla psikolojik veya nörolojik semptomlarla karakterizedir. Geleneksel Çin tıbbında (TCM), CNP "Jing Zhuo" (seminal bulanıklık) altında sınıflandırılır ve sıklıkla iç nemli ısı, dalak eksikliği veya dalak fonksiyonunu bozan, prostatta nem ve ısı birikmesine yol açan soğuk veya acı ilaçların uzun süreli kullanımı ile ilişkilendirilir.

Antibiyotikler, blokerler ve NSAID'ler de dahil olmak üzere KNP'ye yönelik mevcut Batı farmakolojik tedavileri öncelikle semptom yönetimine odaklanır ve çoğu zaman uzun vadeli etkinlikten yoksundur. Araştırmacılar giderek daha fazlaDaha güvenli ve daha bütünsel bir alternatif olarak bitkisel ilaç.

Cistanche: Gelecek Vaat Eden Bir Bitkisel Aday

Cistanchebilinen geleneksel bir Çin bitkisidir.böbrek tonlayıcı, anti-inflamatuar, bağışıklık modüle edici ve antioksidanözellikleri, çeşitli genitoüriner bozuklukların tedavisinde potansiyel göstermiştir. Modern farmakolojik çalışmalar şunu bildirmektedir:Cistanche Deserticolainflamatuar sitokinleri düzenleyebilir, bağışıklık tepkisini artırabilir ve mikro dolaşımı iyileştirebilir;CNP tedavisi için umut verici aday.

Artan ilgiye rağmen kesinCistanche'ın CNP'yi hafiflettiği mekanizmalar tam olarak anlaşılamamıştır. Son araştırmalar şunu gösteriyorbağırsak mikrobiyota disbiyozuCNP'nin patogenezinde kritik bir rol oynar. Bu nedenle, bu çalışma bir ilacın terapötik etkilerini araştırmaktadır.Cistanche bazlı bitkisel kapsül (CBC)deneysel otoimmün prostatitin (EAP) bir sıçan modeli kullanılarak CNP üzerinde, özelliklebağırsak mikrobiyota bileşimi ve metabolomik değişiklikler.

 

1. Malzemeler ve Yöntemler

1.1 Hayvanlar

30 SPF dereceli erkek Sprague-Dawley (SD) sıçan(300–320g) ve45 SPF dereceli erkek SD faresi(180–200 g), Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd.'den elde edildi.

Standart SPF koşulları altında barındırılır: sıcaklık 25±1 derece, nem %55±5, 12 saatlik aydınlık/karanlık döngüsü.

Hayvan etiği onayı:HUCMS00302159Hubei Çin Tıbbı Üniversitesi Etik Komitesi tarafından verilmiştir.

1.2 İlaçlar ve Reaktifler

Cistanche Bazlı Kapsüller (CBC)(Grup: 20221226) GMP sertifikalı bir bitkisel ilaç şirketinden.

Tamsulosin hidroklorür kapsülleri(pozitif kontrol) Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd.'den satın alınmıştır.

Freund Adjuvanını (CFA) tamamlayınSigma'dan (Almanya).

ELISA kitleriShanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.'den IL-1 , IL-6, IL-8, IL-10, TNF- ve iNOS için.

Oksidatif stres kitleri(MDA, T-SOD), Wuhan Elabscience Bioteknoloji Co., Ltd.'den alınmıştır.

Bağırsak mikrobiyotası DNA ekstraksiyon kitleriVemetabolomik reaktiflerMeiji Biyoteknolojisinden (Şangay).

1.3 Ekipman

Yüksek hızlı santrifüj (Eppendorf, Almanya), UHPLC ve Q-Exaktif HF-X Kütle Spektrometresi (Thermo Fisher Scientific) ve ELISA, PCR, sıralama ve metabolomik analiz için diğer moleküler biyoloji araçları.

2. Deneysel Protokol

2.1 Deneysel Otoimmün Prostatit (EAP) Modelinin İndüksiyonu

2.1.1 Prostat Proteini-CFA Emülsiyonunun Hazırlanması

Donör sıçanlardan prostat dokusu ekstrakte edildi, %0,5 TritonX-100 ile steril salin içerisinde homojenleştirildi ve 20.000 rpm'de 30 dakika boyunca 4 derecede santrifüj edildi.

BCA tahlili kullanılarak protein konsantrasyonu 20 mg/mL'ye ayarlandı.

Protein ekstraktı, CFA ile 1:1 oranında emülsifiye edilerekCNP antijen emülsiyonu.

2.1.2 Aşılama Prosedürü

45 SD sıçan (180±20g) rastgele bölündü ve 10'u normal gruba atandı.

Kalan fareler alındıderi altı çok noktalı enjeksiyonlarkasık, iç uyluk ve sırttaki CNP antijen emülsiyonunun.

Güçlendirici bağışıklama şu tarihte uygulandı:15. Günaynı protokolü takip ediyoruz.

Normal kontrollere salin enjeksiyonu yapıldı.

2.2 Gruplandırma ve Tedavi

Bağışıklamadan sonraki 28. günde, başarılı modelleme histoloji (HE boyama) yoluyla doğrulandı.

Sıçanlar rastgele olarak şunlara atandı:

Normal Kontrol Grubu

Model Grubu

Pozitif İlaç Grubu: Tamsulosin (0,021 mg/kg)

CBC Düşük Doz Grubu: 0,63 g/kg (klinik eşdeğer doz)

CBC Yüksek Doz Grubu: 1,26 gr/kg

Tedavi 30 gün boyunca günde bir kez oral olarak uygulandı.. Kontrol ve model gruplarına salin verildi.

 

 

2.3 Numune Toplama ve Analizi

Son dozdan 24 saat sonra sıçanlara ötenazi uygulandı.

Kan, abdominal aort yoluyla toplandı; serumları ayrılarak -80 derecede saklandı.

Prostat dokuları toplandı, tartıldı ve makroskobik olarak incelendi.

Prostat İndeksi (PI)hesaplandı:
PI=Prostat Islak Ağırlığı / Vücut Ağırlığı

Dokular histoloji için formalinde sabitlendi veya sitokin analizi, Western blotlama, mikrobiyota DNA ekstraksiyonu ve metabolomik için donduruldu.

Sonuç ve Önem

Bu çalışma şunları sağlamayı amaçlamaktadır:klinik öncesi kanıtkullanımı içinCistanche bazlı bitkisel tedavitedavisindekronik bakteriyel olmayan prostatit. Entegre ederekbağırsak mikrobiyota analiziVemetabolomik profil oluşturmaortaya çıkarmaya çalışıyoruzçok hedefli mekanizmalarCistanche'nin anti-inflamatuar ve immünomodülatör etkilerini gösterdiği.

Bu bulgular aşağıdakileri destekleyecektir:Yeni bir bitkisel ilaç olarak Cistanche'nin geliştirilmesiCNP için ve potansiyel olarak yol açabilecekyeni endikasyonlarKlinik uygulaması için.