Kronik Böbrek Hastalığı Olan Hastalarda Osteopontin Genetiği: Alman Kronik Böbrek Hastalığı Çalışması Ⅲ

rs4253311; 4:187174683 (KLKB1 dahili)

Kromozom 4 üzerindeki 2. kopyalanmış indeks SNP rs4253311 (MAF=0.50), KLKB1 geninin intronik bir varyantıdır. Yine bu değişkenin gözlenen ilişkiden sorumlu nedensel değişken olup olmadığı bu çalışma tarafından cevaplanamamaktadır. KLKB1, bir serin proteaz olan kallikreine (KAL) aktivasyondan sonra kan pıhtılaşması, fibrinoliz, kinin oluşumu ve inflamasyonun yüzeye bağlı aktivasyonunda rol oynayan tek zincirli bir zimojen olan prekallikreini (PK) kodlar. KLKB1 ile ilişkili hastalıklar arasında PK eksikliği ve malign esansiyel hipertansiyon yer alır [51,52]. PK ve ardından KAL, kallikrein-kinin sisteminin (KKS) bir parçasıdır. KAL'ın ana işlevi bradikinin (BK) salınmasını içerir [53]. Geçmişte yapılan genom çapında ilişkilendirme çalışmaları, KLKB1'de vazoaktif peptitler veya vazoaktif peptitlerin öncülleri (BK [54,55], aktif renin [56], B tipi natriüretik peptit [57], aldosteron/renin oranı [57) ile ilişkili SNP'leri tanımlamıştır. ], orta bölgesel adrenomedullin ve C-terminal-pro-endotelin-1 [58], L-arginin [59]) ve apolipoprotein A IV [60], ancak OPN değil.

Böbrek Sağlığı İçin Organik Takviyeler

Bu genle ilgili yollar arasında kompleman ve pıhtılaşma basamaklarının yanı sıra hücre dışı matriksin yıkımı da yer alır [61,62]. KLKB1'in önemli bir paralogu F11 genidir. Analizimiz, rs4253311 için OPN birleşme sinyali ile F11 için birden fazla dokudaki ekspresyon arasında ortak lokalizasyonları ortaya çıkardığından, rs4253311'in KLKB1 yerine F11'e bağlı olduğu varsayılabilir. İlginç bir şekilde OPN, aktivitesini düzenleyen birçok proteaz bölünme bölgesi içerir [31]. Bazı OPN etkileşim bölgelerinin tamamen işlevsel hale gelebilmesi için başka bir serin proteaz olan trombin tarafından parçalanması gerekir. Buna karşılık OPN, aktivitesini düzenleyen diğer proteazlar için bir substrattır [31]. Vücuttaki inflamatuar süreçlerin olduğu düşünülebilir.KBH hastalarının böbreğiBir yandan aktive edilmiş bir KKS'yi, diğer yandan daha yüksek OPN seviyelerini bir araya getirir, dolayısıyla yeni biyoaktif OPN fragmanlarının KAL tarafından üretilebilmesi makul olabilir.

KLKB1 çevresinde bulunan SNP'lerle yapılan koşullu kolokalizasyon analizleri, ironik bir şekilde F11 geni ve DVT ile eşlenen rs1593 için pozitif sonuçlarla sonuçlandı. DVT, hem genetik hem de çevresel risk faktörlerinden etkilenen ciddi bir hastalıktır, ancak geçmişte DVT riskindeki varyasyonun %60'ı genetik risk faktörlerine atfedilmiştir [63]. DVT'nin genetik çalışmaları, 4q35.2 lokusundaki birçok yaygın SNP'nin DVT ile ilişkili olduğunu bildirmiştir [63]. Bu ortak SNP'ler diğerlerinin yanı sıra KLKB1 ve F11'de lokalize olmuştur [63].

Diğer kolokalizasyon sonuçları, KLKB1'deki OPN lokusu ile 87 plazma proteini arasındaki ilişki sinyallerini gösterdi. Bu proteinler, hastaların plazmasında ve beyin omurilik sıvısında nöronal hücre gövdesi proteinleri açısından zenginleşme gösterdi. Plazma KKS'nin temel efektörü olan BK, sistemik ve lokal olarak (damar duvarı) üretilir ve iki G protein-bağlı reseptör aracılığıyla vasküler tonusu ve altyapıyı etkileyerek parakrin veya otokrin bir şekilde etki eder [64,65]. KKS bileşenlerinin ve özellikle BK'nin, serebrovasküler direnci, damar kapasitesini ve kan-beyin bariyerinin geçirgenliğini düzenleyerek merkezi sinir sisteminde önemli işlevlere sahip olduğu gösterilmiştir. Merkezi sinir sisteminde damar geçirgenliği dengesinin korunması, beyin bütünlüğünün korunması açısından kritik öneme sahiptir. KKS'nin CNS patolojisindeki ilişkileri, aralarında nöropsikiyatrik lupus, Alzheimer hastalığı, şizofreni ve epileptik sendromun da bulunduğu çeşitli hastalık durumlarını içerir [66]. Bu gerçekler, moleküler fonksiyonların zenginleştirme analizi sonuçlarını açıklamaktadır: sinyal reseptör bağlanması yoluyla hormon aktivitesi ve ayrıca reseptör düzenleyici aktivite

rs2731673; 5:176839898 (F12/GRK6 genler arası)

Son olarak, popülasyona dayalı YFS kohortunda kopyalanamayan SNP rs2731673 (MAF=0.25) indeksi, F12 ve GRK6 genleri arasında yer almaktadır. Bu onaylanmama, GWAS'ımızın yanlış pozitif sonucunu gösterse de, replikasyon, KBH hastalarıyla ilgili spesifik bir sonuç olması gibi bilinmeyen bazı nedenlerden dolayı başarısız olmuş olabilir. OPN ve genetik hakkında gerekli verilere sahip başka bir kohortun (popülasyona dayalı veya KBH kohortu) yokluğunda, bunu daha fazla doğrulayamadık. Lokusa en yakın gen, plazma PK ile birlikte temas aktivasyon sistemine ait olan pıhtılaşma faktörü XII'yi kodlayan F12 genidir [67,68]. KAL, faktör XII'yi (faktör XIIa: faktör XII'nin aktif enzimi) aktive edebilir ve bu da PK dahil olmak üzere KKS yoluyla inflamasyonu teşvik eder [69]. KBH hastalarında birleştirilmiş ortak son yol olarak belirgin şekilde daha fazla inflamasyon ve fibroz olduğundanböbrek hastalığıBu içgörülerin ve bağlantıların ilerlemesi, bu konumun daha da doğrulanmasını teşvik edebilir. Enflamatuar süreçler ayrıca, yüksek morbidite ve mortaliteye neden olan aşırı KVH pro'sundan muzdarip olduğu iyi bilinen KVH ve KBH hastalarında da önemli bir rol oynar.

İnsan kardiyovasküler sisteminde OPN öncelikle endotelyal hücrelerde, makrofajlarda ve düz kas kaynaklı köpük hücrelerinde eksprese edilir ve ayrıca arteriyel sistemin insan aterosklerotik plaklarında da tespit edilebilir [70,71]. Akut koroner sendromlu hastalarda kronik koroner sendromlu hastalarda daha yüksek serum OPN düzeyleri bulundu. Koroner arter hastalığı (KAH) hastalarında yüksek OPN düzeyleri, hızlı koroner plak ilerlemesi ve stent içi restenoz ile ilişkilendirilmiştir [72]. OPN'nin KVH'li hastalarda olumsuz sonuçlarla ilişkili olduğu bilinmektedir [73-75], ancak KVH'daki işlevi çeşitlidir. KVH'da OPN'nin akut artışları yara iyileşmesi ve neovaskülarizasyon ile ilişkilidir [76,77]. Ancak kronik olarak artmış OPN, majör olumsuz kardiyovasküler olayların kötü prognozu ile ilişkilidir [78]. GRK6 ise kan basıncının düzenlenmesinde rol oynuyor ve kan basıncının azaldığı tespit edildi.böbrek ifadesispontan hipertansif sıçanlarda da benzer bir mantık sağlamaktadır [79].

Güçlü yönler ve sınırlamalar

Sunulan analizlerin çeşitli güçlü yönleri ve sınırlamaları vardır: İlk olarak, analizlerimiz Avrupa kökenli KBH hasta popülasyonuna ve çoğunlukla düzenli nefrolog bakımı altında KBH evre 3'e dayanmaktadır. Biyolojik mekanizmalar yukarı doğru düzenlenebilirkenbozulmuş böbrek fonksiyonuve dolayısıyla KBH hastalarında daha kolay tespit edilmesi, sonuçların diğer etnik grupların yanı sıra genel popülasyona genellenebilirliğini potansiyel olarak tehlikeye atmaktadır. İkinci olarak, YFS'nin popülasyona dayalı bir kohortunda tanımlanan üç lokustan ikisini çoğaltabildik; bu kohort aynı zamanda OPN'yi ölçmek için bir ELISA tekniği uyguladı ve böylece bulguların bir CKD kohortundan genel popülasyona aktarılma potansiyelini doğruladık. Tekrarlanmayan üçüncü bulguya ilişkin olarak, bu sonucun daha fazla doğrulanması beklenmelidir, çünkü yanlış pozitif olarak kabul edilmesi erken bir sonuç olacaktır. Üçüncü olarak, GCKD çalışmasında serum OPN'si son teknoloji ürünü bir ELISA testi kullanılarak başlangıç ​​örneklerinden ölçüldü. Serumun, kullanılan OPN testinde kullanım için doğrulanmış olmasına rağmen, pıhtılaşma işlemi sırasında trombin tarafından proteolitik parçalanma nedeniyle önerilen numune türü değildir. Buna karşılık, YFS kohortunda plazma örneklerinden OPN ölçümleri elde edildi. Karşılaştırılabilir bir analiz kullanılmış olsa da, KBH hastalarındaki ve YFS katılımcılarındaki seviyeler arasındaki farklar bu nedenle hastalık durumundan daha fazlasıyla açıklanabilir.

Sonuçlar

Serum OPN seviyelerinin bu ilk GWAS'ındabüyük bir CKDkohort, kromozom 4 üzerinde iki kopyalanmış ilişki tespit edildi. SPP1 genine en yakın lokus ve KLKB1 genine haritalanan bir lokus, OPN'yi üretimine ve KKS'ye bağlar. OPN'nin rolünü tam olarak açıklamak için daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.böbrek (pato)fizyolojisive böbrek fibrozisi sırasında KKS ve muhtemelen inflamatuar süreçlerle bağlantılı olarak OPN'nin işlevlerini açıklamak.

Materyal ve yöntemler Etik beyanı AlmancaKronik Böbrek Hastalığı(GCKD) çalışması, Almanya'daki mevcut projeyi de kapsayan katılımcı kurumların tüm Etik Kurulları tarafından onaylandı. Klinik çalışmalar için ulusal sicile tescil edilmiştir (DRKS 00003971; S1 Bilgisi). Tüm katılımcılardan yazılı bilgilendirilmiş onam alındı.

Study population The GCKD study cohort consists of 5,217 adult CKD patients of European ancestry with (i) an eGFR between 30–60 mL/min per 1.73m2 or (ii) an eGFR >Başlangıçta 60 mL/dak/1,73 m2 ve 'açık' albüminüri/proteinüri [20]. Temel ziyarette (2010–2012), eğitimli personel standart bir anket ve fiziksel muayeneler kullanarak veriler elde etti. Biyonumuneler elde edildi, doğrudan işlendi ve daha sonra merkezi bir biyobankada -80˚C'de saklandı [80]. Çalışma prosedürleri ve temel temel bulgular daha önce rapor edilmişti [20,81].