soyut

Arka plan: Panax ginseng, vücudun tüm rahatsızlıkları için harika bir bitkisel ilaçtır. Bu nedenle, "herkes için tedavi" anlamına gelen Panax olarak adlandırılıyor olabilir. Melanin, cildimize rengini veren bir pigmenttir; ancak artan melanin üretimi tümör oluşumuna yol açabilir. Küresel ısınma nedeniyle artan güneş ışığı nedeniyle insanların ultraviyole B radyasyonuna maruz kalması büyük ölçüde artmıştır. Sonuç olarak, tüm cilt renkleri ve tipleri için fotoyaşlanma adı verilen bir fenomen gözlemlenmiştir. Bu fenomenin bir sonucu olarak, başta kollajen olmak üzere hücre dışı matriks proteinleri için bozunma enzimleri olarak görev yapan matris metaloproteinazlar adı verilen bir dizi enzim artarak kollajenin tükenmesine ve erken kırışıklık oluşumuna neden olur.

İlgili araştırmalara göre cistanche, "ömrü uzatan mucizevi bitki" olarak bilinen yaygın bir bitkidir. Ana bileşeni, antioksidan, antienflamatuar ve bağışıklık fonksiyonunun teşviki gibi çeşitli etkilere sahip olan kistanosiddir. Cistanche ve cilt beyazlatma arasındaki mekanizma, cistanche glikozitlerinin antioksidan etkisinde yatmaktadır. İnsan derisindeki melanin, tirozinaz tarafından katalize edilen tirozinin oksidasyonu ile üretilir ve oksidasyon reaksiyonu oksijenin katılımını gerektirir, bu nedenle vücuttaki oksijensiz radikaller melanin üretimini etkileyen önemli bir faktör haline gelir. Cistanche, bir antioksidan olan ve vücuttaki serbest radikallerin oluşumunu azaltabilen ve böylece melanin üretimini engelleyen cistanoside içerir.

Beyazlatma İçin Cistanche Kimyager Deposuna Tıklayın

Daha fazla bilgi için:

david.deng@wecistanche.com WhatsApp:86 13632399501

Yöntemler: Bu nedenle, çalışmamızda in vitro olarak Kore Kırmızı Ginseng (KRG) özütünün melanogenez inhibisyonunu incelemek için murin melanom hücre hattı B16/F10'u ve yapay ultraviyole B'ye maruz kalan HRM-2 tüysüz fareleri kullandık. KRG'nin in vivo etkinliği. Yüzde 3 kırmızı ginseng özlü bir krem ​​hazırladık ve insan cildi üzerindeki etkilerini değerlendirdik.

Çözüm: Bu nedenle, KRG'nin mükemmel bir cilt beyazlatma ve yaşlanma karşıtı ürün olduğu sonucuna vardık.

·2019 Kore Ginseng Derneği. Elsevier BV tarafından sunulan yayıncılık hizmetleri Bu, erişime açık bir makaledir

1. giriiş

Melanin, cilt pigmentasyonundan sorumlu bir bileşiktir ve insan ırkındaki cilt renklerinin çeşitliliği, ciltte bulunan melanin üreten hücrelerin miktarına bağlanabilir [1]. Melanin oluşumundan sorumlu olan sürece melanogenez denir. Bu süreçte, a-melanosit uyarıcı hormon (a-MSH) reseptörüne (yani, melanokortin 1 reseptörü) bağlanır ve cAMP'nin yüksek seviyelerine neden olur; Adenozin Monofosfat (cAMP) tepki elementi bağlayıcı protein, hücre dışı düzenlenmiş kinaz ve protein kinaz B (AKT), bunun bozulmasına neden olur. Bu bozunma nedeniyle, melanogenez sürecindeki hız sınırlayıcı adım (yani, tirozinaz enziminin etkisi, TYR) etkilenir ve aktive olur. TYR, tirozinin melanini oluşturan L-3,4-dihidroksifenilalanine (L-DOPA) dönüştürülmesinden sorumludur. Tirosinaz ile ilgili protein 1 (TRP-1) ve tirozinaz ile ilgili protein 2 (TRP-2), TYR ve MITF'nin aktive edilen ve melanin oluşumunda yer alan diğer aşağı akış faktörleridir. Sonuç olarak, tüm süreç boyunca, deri hücrelerinde melanin üretiminin düzenlenmesinin en önemli bileşeni olan TYR'dir [2-4].

Panax ginseng, birçok faydalı sağlık etkisine sahip olduğu için Doğu Asya'da 1,{1}} yılı aşkın süredir yaygın olarak tüketilen harika bir bitkidir. İçecekler, kapsüller ve tabletler dahil olmak üzere çeşitli formlarda mevcuttur [5,6]. Geçmişte yapılan araştırmalar, çeşitli tümör türlerinin, birçok zihinsel anomalinin, diyabetin, hipertansiyonun, hiperlipideminin ve enflamasyonun [7-13] insidansını azaltmak için kullanıldığında ginseng'in dikkate değer etkilerini ortaya çıkarmıştır. Özellikle Kore yarımadasında ginseng takviyeleri normal bir diyetin parçasını oluşturur. Ticari olarak ginseng, bütün ginseng kökü ekstresi, tekli ginsenoside ekstraktları veya kapsüller şeklinde bulunur. Ginsenosidler, ginseng'in etkili sağlık artırıcı özelliklerinden sorumlu olan, tüm ginseng kökünde bulunan kurucu aktif bileşiklerdir [14].

Tek ginsenosidin melanin üretimi ve melazma üzerindeki etkileri üzerine birçok çalışma yapılmıştır [15]. Bununla birlikte, şu anda hiçbir çalışma, Kore Kırmızı Ginseng (KRG) ekstraktının melanin üretimi üzerindeki anti-melanojenik etkilerini bildirmedi ve özellikle insanlarda cilt beyazlatma ve yaşlanma karşıtı etkilerini incelemedi. Bu nedenle, KRG tarafından in vitro olarak B16/F10 melanom hücre hattında TYR inhibisyonunu ve melanin üretimi inhibisyonunu, bu süreçte yer alan yolların mekanik bir çalışması yoluyla araştırdık. Sonuçlarımız, KRG'nin MITF bozunma yolu yoluyla TYR aktivitesini belirgin şekilde inhibe ettiğini ve melanin içeriğini azalttığını gösterdi. Ayrıca, ultraviyole B (UVB) ışınlanmış tüysüz fare (HRM-2) fotoyaşlanma ve hiperpigmentasyon modelini kullanan in vivo çalışmamız, HRM-2 farelerde melanin üretiminin, KRG uygulaması (150 ve 300mg/kg). Ayrıca, yüzde 3 kırmızı ginseng özlü krem, insanlarda mükemmel kırışık önleme ve cilt beyazlatma özellikleri gösterdi. Böylece, krem ​​olarak KRG ve KRG formülasyonlarının cilt beyazlatıcı ve yaşlanma karşıtı ajanlar olarak kozmetik endüstrisinde faydalı olması gerektiği sonucuna vardık.

2. Malzemeler ve yöntemler

2.1. kimyasallar ve tepkimeler

Dulbecco'nun değiştirilmiş Eagle ortamı (WelGene Co, Kore); fetal sığır serumu (WelGene Co., Kore); streptomisin ve penisilin (Lonza, MD, ABD); TRIzol reaktifi (Invitrogen, Carlsbad, CA, ABD); oligodT, MITF, TYR, TRP-1, TRP-2 ve b-aktin primerleri (Bioneer, Daejeon, Kore)'den temin edildi. 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyumbromür, Sigma-Aldrich'ten satın alındı. MITF, TYR, TRP-1 ve TRP-2 için antikorlar elde edildi (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, Inc., TX, ABD). Mantar TYR ve L-DOPA, Sigma'dan (St. Louis, MO, ABD) satın alınmıştır. Diğer tüm reaktifler yerel analitik derecedeydi.

2.2. örnek hazırlama

2.3. Kırmızı ginseng kreminin stabilitesinin değerlendirilmesi

(1) pH testi

Kırmızı ginseng kreminin pH'ı, 30-günlük deneyin 1, 7, 15 ve 30. Günlerinde ölçüldü. Kırmızı ginseng kreminin pH'ı hafif asidikti ve 30 gün boyunca neredeyse hiç değişiklik göstermedi (Tablo 2).

(2) Renk değişikliği testi

Kırmızı ginseng kreminin renk değiştirme derecesi 1, 7, 15 ve 30. Günlerde ölçüldü. 30- günlük deney süresi boyunca renkte herhangi bir değişiklik gözlenmedi (Ek Şekil 1).

(3) Yama testi

Ginseng kremine alerjik yanıt olup olmadığını kontrol etmek için gönüllülerin dorsal orta sırt bölgesine (1 cm×1 cm) 1 mL kırmızı ginseng kremi uygulandı ve 24 saat sonra cilt reaksiyonu değerlendirildi. Ek Tabloda gösterildiği gibi çeşitli cilt reaksiyonları değerlendirildi. 3A-B ve eritem, ödem veya istenmeyen reaksiyon gözlenmedi. Bu nedenle, bu krem ​​cilt üzerindeki diğer parametreler için ayrıca test edilmiştir. Ayrıca, Ek Tabloda gösterildiği gibi cilt tahrişinin derecesi değerlendirildi. 4, birincil cilt tahriş indeksini elde etmek için.

2.4. Kırmızı ginseng kremi tedavi rejimi ve cildin yağ ve nem içeriği, elastikiyeti ve beyazlaşması üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi

Kırmızı ginseng kreminin cildin yağ içeriği, nem içeriği, esnekliği ve beyazlaması üzerindeki etkilerini değerlendirmek için 1 0 kadın (yaklaşık 40 yaşında, sigara içmeyen, cilt hastalığı veya yüz bakımı öyküsü olmayan) her biri beş kişiden oluşan iki gruba ayrıldı: kırmızı ginseng özü içermeyen kremin uygulandığı kontrol grubu (KRG olmayan) ve kırmızı ginseng özlü kremin uygulandığı deney grubu (KRG ile tedavi edilen grup). Bireylerin sayısı istatistiksel yazılım G*Power 3.1 omicX kullanılarak hesaplandı; anlamlılık katsayısı 0,05, güç 80, grup sayısı 2 ve tekrarlanan ölçüm sayısı 6 idi.

Krem yüzün T bölgesine (1), alında T ortasının üst kısmının 1 cm yukarısında, kaşların arasında, sağ ve sol taraflara 3e5 saniye süreyle uygulandı. U-bölgesi (2), Ek Şekil 2'de gösterildiği gibi, burundan yatay olarak ve gözün kuyruğundan dikey olarak aşağı doğru çizildi. Ölçüm koşullarını standardize etmek için araştırma, 24 C ± 1 C'de ve yüzde 55'te gerçekleştirildi. ± yüzde 10 bağıl nem.

2.5. Hücre kültürü

2.6. Hücresiz TYR inhibisyon testi

Test, daha önce tarif edildiği gibi biraz değiştirilmiş bir protokol kullanılarak yapıldı [3]. Kısaca, 10 mL KRG, bir 96-kuyu plakasına üç kopya halinde yerleştirildi ve buz üzerinde 60 mL 50 mmol/L fosfat tamponu (pH 6.8) ile karıştırıldı. Ardından, her bir oyuğa 20 mL 0.9mg/mL L-DOPA eklendi. Son olarak her kuyucuğa 10 mL mantar TYR eklendi ve plak 27°C'de 10 dakika inkübe edildi. İnkübasyondan sonra dopakrom üretimi, bir mikroplaka okuyucu (Versamax; Molecular Devices, LLC, CA, ABD) kullanılarak 450 nm'de spektrofotometrik olarak ölçüldü; bu deneyde pozitif kontrol olarak kojik asit kullanıldı [16].

2.7. Melanin inhibisyon deneyi

2.8. Hayvan deneyi ve gruplama

2.9. UVB ışınlaması ve fotoyaşlanma indüksiyonu

2.10. HRM-2 farelerde melanin üretimi üzerindeki etki

2.11. Cilt kırışıklığı ölçümü 

UVB'nin neden olduğu cilt yaşlanmasının derecesi, kırışıklık oluşumunun gözlemlenmesi yoluyla ölçülmüştür. Kırışıklıkların oluşumunu değerlendirmek için HRM{{0}} farelerine, 5. Haftada intraperitoneal kloral hidrat enjeksiyonu (0,1 mL yüzde 7 kloral hidrat/25 g fare) ile anestezi uygulandı. • UVB'ye maruz kalma ve örnek işleme önceki bölümde açıklanmıştır. Cilt kırışıklıkları, UVB ışımasından sonra DETAX System II (MIXPAC) ve Double-Stick Disc (3M Healthcare, Almanya) kullanılarak 3., 4. ve 5. Haftalarda değerlendirildi. Double-Stick Disc (DETAX System II püskürtülmüş) fare derisine yapıştırıldı ve 2-3 dakika sonra çıkarıldı. Disk kırışıklıkları, Bissett'in [17] skorlama sistemi ile değerlendirildi: derece 0, kırışık yok; derece 1, birkaç sığ kırışıklık; 2. derece, bazı kırışıklıklar; ve 3. derece, bazı derin kırışıklıklar. Disk çıkarılıp cilt yüzde 70 etanol ile temizlendikten sonra USB Dijital Mikroskop (×400; CE FOROHS, Çin) kullanılarak cilt fotoğraflandı ve cilt kırışıklıklarının görsel analizi yapıldı.

2.12. Enzim bağlı immünosorbent deneyi

2.13. Cildin histolojik gözlemi

Her deney grubundan ekstrakte edilen deri dokuları, 48 saat boyunca yüzde 10'luk formalin solüsyonunda sabitlendi ve ardından epidermal kalınlığı belirlemek için Cardiff [18] yöntemiyle hematoksilen ve eozin ile boyandı. Kollajen görselleştirme için, Masson'un trichome boyaması yerleşik protokollere göre yapıldı [19].

2.14. RNA ekstraksiyonu ve gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu

Üreticinin talimatlarına göre TRIzol kullanılarak KRG ile tedavi edildikten ve a-MSH ile uyarıldıktan sonra B16/F10 hücrelerinden ve UVB-ira-genişletilmiş fare derisinden toplam RNA özümlendi. RNA (2 mg), oligodT (Bioneer Co., Daejeon) ile 70°C'de 10 dakika süreyle tavlandı ve 5 dakika süreyle buz üzerinde soğutuldu, 20 mL reaksiyon karışımı içinde ters transkriptaz ön karışımı (Bioneer Co., Daejeon) kullanılarak ters kopyalandı ve bir termal döngüleyicide 42,5 derecede 90 dakika çalıştırın. Ters transkriptazı inaktive etmek için reaksiyon 95 derecede 5 dakika süreyle sonlandırıldı. Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), bir PCR ön karışımında (Bioneer Co, Daejeon) Ters Transkriptaz (RT) reaksiyonundan elde edilen cDNA alikotları üzerinde gerçekleştirildi. PCR ürünleri daha sonra yüzde 1 agaroz jel üzerinde elektroforeze tabi tutuldu, etidyum bromür ile boyandı ve ImageQuant LAS 500 (GE Healthcare Life Sciences, Seoul, Güney Kore) kullanılarak görselleştirildi. Bant yoğunluklarının yoğunluğu, Gliseraldehit 3- fosfat dehidrojenazın (GAPDH) yoğunluğuna normalleştirildi ve primer dizileri Ek Tabloda sağlandı. 1. MMP-2, MMP-9 ve interlökin (IL){21}}b'nin ifadesi, bir Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR sistemi kullanılarak gerçek zamanlı kantitatif PCR kullanılarak analiz edildi ( Applied Biosystems, ABD).

2.15. Western blot analizi

2.16. istatistiksel analiz

Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501