Soyut

Bu çalışmada floroglusinol kullanılarak yüz beyazlatıcı kremlerdeki hidrokinonu analiz etmek için mikroakışkan kağıt tabanlı bir analitik cihaz (µPAD) geliştirilmiştir. µPAD, saptama için hidrofobik bir bariyere sahiptir ve Whatman kromatografi kağıdına sahip bir mumlu yazıcı kullanılarak üretilmiştir. Saptama, turuncu bir hidrokinon-floroglusinol kompleksinin oluşumuna dayanan kolorimetri ile gerçekleştirildi. µPAD algılama bölgesinde oluşan renkli reaksiyon ürünü tarandı ve elde edilen görüntüler Image-J yazılımı ile işlenerek renk yoğunlukları (RGB değeri) belirlendi. Hassas ölçümler elde etmek için proses koşullarının optimizasyonu yapılmıştır. Maksimum hassasiyet sağlayan optimum koşullar, floroglusinol → NaOH → numune (hidrokinon), 1 µL yüzde 0,5 floroglusinol, 1 M NaOH ve bir 10-dakikalık reaksiyondan oluşan bir reaktif ekleme dizisini içermiştir. Optimum koşullar altında, µPAD hidrokinon için 10–100 mg/L (R2=0,9979) ve 250–1000 mg/L (R2 = 0,9991) konsantrasyonlarında iki doğrusal kalibrasyon eğrisi üretti. Yöntem, tatmin edici bir geçerlilik ve yüzde 100'e yakın ortalama geri kazanımla, propilen glikol ve resorsinol varlığında hedef analit için çok iyi seçicilik gösterdi. Önerilen µPAD, hidrokinon analizi için çok basit ve ucuz bir tekniktir ve tatmin edici sonuçlarla kozmetik numunelere uygulanabilir.

İlgili araştırmalara göre cistanche, "ömrü uzatan mucizevi bitki" olarak bilinen yaygın bir bitkidir. Ana bileşeni, antioksidan, antienflamatuar ve bağışıklık fonksiyonunun teşviki gibi çeşitli etkilere sahip olan kistanosiddir. Cistanche ve cilt beyazlatma arasındaki mekanizma, cistanche glikozitlerinin antioksidan etkisinde yatmaktadır. İnsan derisindeki melanin, tirozinaz tarafından katalize edilen tirozinin oksidasyonu ile üretilir ve oksidasyon reaksiyonu oksijenin katılımını gerektirir, bu nedenle vücuttaki oksijensiz radikaller melanin üretimini etkileyen önemli bir faktör haline gelir. Cistanche, bir antioksidan olan ve vücuttaki serbest radikallerin oluşumunu azaltabilen ve böylece melanin üretimini engelleyen cistanoside içerir.

Cistanche'ı Nereden Satın Alabilirim Tıklayın

Daha fazla bilgi için:

david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501

giriiş

Kozmetikte hidrokinon tayini, redoks titrasyonu, ince tabaka kromatografisi [1], spektrofotometri [4, 5], akış enjeksiyon spektrofotometrisi [6-8] ve yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) dahil olmak üzere çeşitli yöntemlerle elde edilebilir. ) [9,10]. Bu yöntemler, özellikle ikincisi, doğru ölçümler ve yüksek hassasiyet ve etkinlik sunduğu iyi bilinmektedir. Ancak bu yöntemler aynı zamanda yetenekli bir operatör gerektirir ve taşınabilir değildir; bu nedenle yerinde ölçümler için kullanılamazlar.

Malzemeler ve yöntemler

Materyaller ve ekipman.Bu çalışmada kullanılan ekipman, µPAD için Whatman No. 1 kromatografi kağıdına (CHR, Whatman, GE Healthcare Life Sciences, UK) hidrofobik bariyeri yazdırmak için bir mum yazıcı (Xerox ColorCube 8580 DN-2 tipi T2B047382) içeriyordu. . Balmumu mürekkebi bariyerini ısıtmak ve reaksiyon bölgesi için kusursuz bir bariyer oluşturmak üzere kağıdın içinden geçmesine izin vermek için bir ocak gözü kullanıldı. Yakalanan görüntülerin renk yoğunluğunu kırmızı, yeşil ve mavi (RGB) değerlerine yorumlamak için bir Canon PIXMA MP237 tarayıcı ve Image-J yazılımı kullanıldı ve bunlar daha sonra değiştirilmiş Lambert-Beer Yasası kullanılarak bir soğurma değerine dönüştürüldü.

Yöntem Optimizasyonu.Önerilen µPAD yönteminin işlem koşulları, hassas ölçümler sağlamak için optimize edilmiştir.

Hidrokinon Tayini.Bölüm 2.3'te belirlenen optimum koşullar altında hidrokinon tespiti, Şekil 2'ye göre gerçekleştirildi. Bu şemada, 1 uL yüzde 0,5 floroglusinol, µPAD tespit bölgesine damlatıldı. Cihaz 5 dakika bekletildi ve ardından tespit bölgesine 1 µL 1 M NaOH solüsyonu eklendi. Cihaz kuruması için 10 dakika daha bekletildi ve ardından kullanıma hazır kabul edildi. Hidrokinon tespiti, basitçe 1 µL numuneyi µPAD cihazının reaksiyon bölgesine bırakarak, kağıdı 10 dakika bekleterek ve ardından turuncu reaksiyon ürününü bir Canon PIXMA MP273 tarayıcı ile tarayarak elde edilebilir. Elde edilen görüntülerin renk yoğunlukları Image-J yazılımı kullanılarak RGB değerlerine işlendi ve daha sonra absorbans değerlerine dönüştürüldü. Hidrokinon konsantrasyonu, elde edilen absorbans standart bir kalibrasyon eğrisiyle eşleştirilerek belirlendi.

Yöntem Seçiciliği.µPAD yönteminin yüz beyazlatıcı kremlerde hidrokinona yönelik seçiciliği, karışan bileşikler olarak resorsinol ve propilen glikol ile ve bunlar olmaksızın hidrokinon ölçümleri elde edilerek belirlendi. Çeşitli konsantrasyonlarda rezorsinol (0, 25, 50, 125 ve 250 mg/L), 25 mg/L hidrokinon içeren beş adet 10 mL'lik hacimsel şişeye ilave edildi ve işarete kadar seyreltildi. Bu çözeltilerin renk yoğunluğu, hidrokinon tayini için aynı prosedür kullanılarak ölçüldü (Şekil 2), karşılık gelen RGB değerleri absorbansa dönüştürüldü ve hidrokinon geri kazanımı hesaplandı. Aynı prosedür, resorsinol ile aynı çeşitli konsantrasyonlara sahip propilen glikol için tekrarlandı. Müdahale eden bileşikler içeren ve içermeyen çözeltiler arasında elde edilen hidrokinon konsantrasyonundaki fark yüzde hatasını hesaplamak için kullanıldı.

Yöntem geçerliliği.Standart ekleme tekniği ile iki kozmetik numunede hidrokinonun belirlenmesi için µPAD kullanılarak yöntem doğrulaması sağlandı. Tam olarak 0,10 g beyazlatıcı kremler A ve B tartıldı ve 50 mL'lik bir beher camında damıtılmış su ile kademeli olarak çözüldü. Çözelti, ince filtre kağıdından geçirildi ve süzüntü, bir şırınga filtresi kullanılarak bir kez daha süzüldü. Süzülmüş çözelti 100 mL'lik ölçülü bir balona aktarıldı ve işarete kadar saf su ilave edildi. Daha sonra numune, kalibrasyon eğrisi aralığında olan bir konsantrasyon elde etmek için seyreltildi.

Sonuçlar ve tartışma

Optimum Koşulların Belirlenmesi

Reaktif Ekleme Dizisinin Optimizasyonu.Reaktiflerin µPAD üzerine damlatılma sırası, floroglusinol-hidrokinon kompleksinin oluşumunu ve hidrokinon ölçümünün hassasiyetini etkileyebilir. Şekil 5, A2 dizisinin uPAD tespit bölgesinde A1 dizisine göre daha yoğun bir renk verdiğini göstermektedir. Bu bulgu, floroglusinolün, A2 dizisi tarafından teşvik edilen, istenen kompleksin oluşumunu kolaylaştıran nükleofilik gruplar olarak hareket eden floroglusinol iyonlarına kapsamlı dönüşümü ile açıklanabilir. Şekil 5'te gösterildiği gibi, mavi okumaların yoğunluğu kırmızı ve yeşil okumalarla karşılaştırıldığında çok daha yüksekti. Ayrıca mavi okumalar, renk yoğunluğu (veya absorbans) ve hidrokinon konsantrasyonu ile doğrusal olarak ilişkilidir. Bu bulgu, tamamlayıcı renk okumaları kullanılarak yoğunluk ve konsantrasyon arasında doğrusal bir ilişkinin elde edilebileceğini bulan Kohl [30]'un sonuçlarıyla uyumludur. Bu nedenle, sonraki deneylerde uPAD görüntülerinin renk yoğunluğunu ölçmek için mavi okumalar seçildi.

Floroglusinol Hacminin Optimizasyonu.Optimum floroglusinol hacmi, tam olarak tespit bölgesi alanında floroglusinol-hidrokinon kompleksinin en yüksek renk yoğunluğunu üretebilir. Floroglusinol hacmi ne kadar büyük olursa, Şekil 6'da gösterildiği gibi, kompleksin renk yoğunluğu (absorbans) o kadar yüksek olur. Mavi okumalar kullanılarak belirlenen absorbans, 1 µL'ye kadar artan floroglusinol hacmi ile arttı; ancak 1,2 µL'yi aşan floroglusinol hacimleri, kompleksin hidrofobik bariyeri geçmesine neden olarak hatalı sonuçlara yol açabilir. Bu nedenle, daha fazla optimizasyon için 1 uL'lik bir floroglusinol hacmi kullanıldı.

Floroglusinol Konsantrasyonunun Optimizasyonu.Turuncu floroglusinol-hidrokinon kompleksinin absorbansı, başlangıçta floroglusinol konsantrasyonuyla yüzde {{0}},5'e kadar arttı ve ardından tüm hidrokinon tamamen bir floroglusinol-hidrokinon kompleksi oluşturduğu için dengelendi (Şekil 7) . Bu nedenle, yüzde 0,5 optimal floroglusinol konsantrasyonu olarak kabul edildi.

NaOH Konsantrasyonunun Optimizasyonu.Optimum NaOH konsantrasyonu, negatif yüklü floroglusinol iyonlarının oluşumu için uygun bir alkalin atmosfer sağlar. NaOH'nin hidroksil (OH-) grubu, floroglusinolün OH- grubundaki hidrojene saldırarak bir floroglusinol iyonu oluşturabilir, bu da hidrokinona saldırarak heterokompleks bir floroglusinol-hidrokinon kompleksi oluşturabilir. Şekil 8, daha yüksek NaOH konsantrasyonlarının µPAD görüntülerinin renk yoğunluğunu arttırdığını ortaya koymaktadır. En yüksek absorbans 1 M NaOH konsantrasyonunda elde edilmiştir. Bu nedenle sonraki deneylerde 1 M NaOH kullanılmıştır.

Reaksiyon Süresinin Optimizasyonu.Reaksiyon süresi, en kısa tarama süresini belirlemek ve karmaşık bileşiklerin renk bozulmasını önlemek için optimize edildi. Kısa bir reaksiyon süresi, floroglusinol-hidrokinon kompleksinin tamamlanmamış oluşumuna neden olabilir. Bununla birlikte, uzun reaksiyon süreleri, ışığa ve uygun olmayan sıcaklık ve pH'a maruz kalma yoluyla karmaşık rengi bozabilir. 10 dakikalık bir reaksiyon süresi, maksimum absorbans ile optimum sonuçlar verdi (Şekil 9). Bu reaksiyon süresi sonraki deneyler için kullanıldı.

Standart Eğri ve Doğrusallık Ölçümleri.Yukarıda elde edilen optimum koşullar altında (yani, A2 reaktif immobilizasyon dizisi, 1 µL yüzde 0,5 floroglusinol, 1 M NaOH ve 10-dakikalık reaksiyon), 1 µL hidrokinon konsantrasyonu 10 mgL-1 ila 1000 mg/L arasında değiştiği için numune renk yoğunluğunda net farklılıklar göstermiştir (Şekil 10). Elde edilen görüntülerin renk yoğunluğunun RGB değerleri absorbans değerlerine dönüştürüldüğünde ve absorbans değerleri hidrokinon konsantrasyonunun bir fonksiyonu olarak çizildiğinde, 10– konsantrasyon aralıklarında çok iyi korelasyonlar (yani 1'e yakın R2) elde edildi. 100 mg/L (Şekil 11-a) ve 250–1000 mg/L hidrokinon (Şekil 11-b). µPAD görüntüleri, renkleri yüksek hidrokinon konsantrasyonları altında daha yoğun ve düşük hidrokinon konsantrasyonları altında daha düşük yoğunlukta sundu. Başka bir deyişle, hidrokinon konsantrasyonu ne kadar yüksekse, turuncu floroglusinol-hidrokinon kompleksinin renk yoğunluğu da o kadar fazladır.

Şekil 11'e göre hidrokinon konsantrasyonu, uPAD görüntüsünün renk yoğunluğu ile orantılıdır; spesifik olarak, hidrokinon konsantrasyonu ne kadar yüksek olursa, mavi okumaların yoğunluğundan elde edilen absorbans değeri o kadar yüksek olur. 10 mgL-1 ila 100 mgL-1 arasındaki konsantrasyonlarda hidrokinon için standart eğri, y =  0.0004x artı 0.0563 (R{{9) şeklinde doğrusal bir regresyon denklemi sağladı }}.9979). Benzer şekilde, hidrokinon konsantrasyonu ile absorbans arasındaki ilişki, 250–1000 mgL-1 hidrokinon konsantrasyonlarında y=0.0001x artı 0.0923 (R2=0.9991) doğrusal regresyon denklemini verdi. Bu çalışmada, 1'e yakın R2 değerleri, konsantrasyon ve absorbans arasında çok iyi doğrusal korelasyonları gösterir.

Yöntem Seçiciliği.µPAD yönteminin seçiciliği, beyazlatıcı kozmetiklerde yaygın olarak bulunan iki madde olan resorsinol ve propilen glikolün standart bir hidrokinon çözeltisine ayrı ayrı eklenmesiyle araştırıldı. Tablo 1'de gösterildiği gibi, 25, 50 ve 125 mg/L konsantrasyonlarda resorsinol eklenmesi, µPAD yöntemi kullanılarak elde edilen hidrokinon ölçümlerini önemli ölçüde etkilemedi. Bu bulgu, üretilen küçük hata yüzdesi ile desteklenmektedir (<10%). Hydroquinone measurements obtained following the addition of 250 mg/L resorcinol  (1:10) showed a slight increase, with a % error of  10.82%. The results of a t-test at the 95% confidence level showed that count (3.65) is greater than the table (2.92). Thus, the addition of resorcinol to a sample at amounts 10 times greater than the hydroquinone concentration can increase the measured concentration of the latter. The addition of propylene glycol at concentrations of 25, 50, 125, and 250   mg/L did not interfere with the measurement of hydroquinone concentration, as indicated by the low % error determined from the experiments.

Yöntem geçerliliği.µPAD yönteminin geçerliliği, iki tür beyazlatıcı krem ​​kozmetikte hidrokinon saptanarak değerlendirildi. Validasyon testinin sonuçları Tablo 2'de sunulmaktadır. µPAD yöntemi, yüzde 95 - yüzde 105 aralığındaki geri kazanım değerleri ve yüksek kesinlik (yüzde RSD < yüzde 10) ile desteklenen çok iyi doğruluk ve geçerlilik göstermiştir.

Özetle, bu çalışmada önerilen µPAD yöntemi tatmin edici doğruluk ve kesinlik sağlar. Bu nedenle, fabrikasyon cihaz, beyazlatıcı krem ​​kozmetiklerde hidrokinonun saptanması için alternatif bir yöntem olarak kullanılabilir.

Çözüm

Beyazlatıcı kremlerdeki hidrokinon, turuncu bir hidrokinon-floroglusinol kompleksi oluşturmak için alkalin koşullar altında hidrokinonun floroglusinol ile basit reaksiyonuna dayanan önerilen μPAD kullanılarak belirlenebilir. Bu yöntem, 10–100 ve 250–1000 mg/L aralığındaki hidrokinon konsantrasyonlarını belirlemek için kullanılabilir. Bu çalışmada geliştirilen µPAD, diğer gelişmiş yöntemlerle karşılaştırıldığında daha az duyarlı olmasına rağmen, basit bir işlem içerir ve ucuzdur. Önerilen μPAD cihazı, yüz beyazlatıcı kremlerdeki hidrokinonun oldukça yüksek doğruluk ve hassasiyetle izlenmesi için bir test kiti olarak kullanılabilir.

teşekkürler

Yazarlar, bu araştırmayı kolaylaştırdığı için Brawijaya Üniversitesi Kimya Bölümüne ve 2020 Doktora Bursu, DIPA-023.17.2.677512/2020, Sözleşme No. 32/UN10.F09/PN/2020.

Referanslar

[1] Ortonne, JP., Bissett, DL 2008. Cilt Hiperpigmentasyonuna Dair Son Görüşler. J. Araştırmak. Dermatol. Semptom Proc. 13: 10–14,

[2] Westerhof, W., Kooyers, T. 2005. Dermatolojide hidrokinon ve analogları-A potansiyel sağlık riski. J. Kozmetik. Dermatol. 4(2): 55–9

[3] Couteau, C., Coiffard, L. 2016. Cilt Beyazlatıcı Maddelere Genel Bakış: İlaçlar ve Kozmetik Ürünler Kozmetik. 3(27): 1–16,

[4] Elferjani, HS, Ahmida, NHS, Ahmida, A. 2017. Spektrofotometrik Yöntemle Bazı Farmasötik ve Kozmetik Preparatlarda Hidrokinon Tayini. IJSR. 6(7): 2219–2324,

[5] Sulistyarti, H., Sari, PM, Syamaidzar, Retnowati, R., Tolle, H., Wiryawan, A. 2020. Krom (VI)-Difenilkarbazid Azalmasına Dayalı Kozmetiklerde Hidrokinonun Belirlenmesi İçin Dolaylı Spektrofotometri Yöntemi Absorbans. GİB Konf. Sör. Anne. bilim Müh. 833(012047): 1–10,

[6] Fahmi, MI, Sulistyarti, H., Mulyasuryani, A., Wiryawan, A. 2019. Optimization of flow injection (FI) – Spectrophotometry for Hydroquinone Analysis. J. Saf Uygulama. kimya Res. 8(1): 53–61

[7] Trenggamayunelgi, FS, Sulistyarti, H., Retnowati, R. 2019. Mavi Nişasta-İyot Kompleksinin Oluşumuna Dayalı Hidrokinon Tayini için Akış Enjeksiyon-Spektrofotometri Yönteminin Geliştirilmesi. GİB Konf. Sör. Anne. bilim Müh. 546(032031): 1–10, https://doi.org/10.1088/1 757- 899X/546/3/032031.

[8] Albhibani, MMO, Sulistyarti, H., Sabarudin, A. 2019. Demir (II)-Fenantrolin Kompleksinin Oluşumuna Dayalı Hidrokinon Analizi için Akış Enjeksiyonu – Dolaylı Spektrofotometri. J. Saf Uygulama. kimya Res. 8(3): 208–216

[9] García, PL, Santoro, MIRM, Kedor-Hackman, ERM, Singh, AK 2005. Jel ve krem ​​preparasyonlarında hidrokinonun belirlenmesi için bir HPLC ve UV türevi spektrofotometrik yöntemlerin geliştirilmesi ve doğrulanması. J. Ecz. Biyomed. Anal. 39(3–4): 764–768.

[10] Gimeno, P., Maggio, AF, Bancilhon, M., Lassu, N., Gornes, H., Brenier, C., Lempereur, L. 2016. Hidrokinonun Tanımlanması ve Taranması için HPLC–UV Metodu, Yasadışı Kozmetik Ürünlerde Muhtemelen Cilt Beyazlatıcı Ajanlar Olarak Kullanılan Hidrokinon Eterleri ve Kortikosteroidler. J Kromatr. bilim 54(3): 343–352,

[11] Martinez, AW, Phillips, ST, Whitesides, GM, Carrilho, E. 2010. Gelişmekte Olan Dünya için Teşhis: Mikroakışkan Kağıt Tabanlı Analitik Cihazlar. Anal. kimya 82(1): 3–10

[12] Adkins, J., Boehle, K., Henry, C. 2015. Elektrokimyasal kağıt bazlı mikroakışkan cihazlar. Elektroforez, 36(16): 1811–1824,

[13] Oh, JM, Chow, KF 2015. Elektrokimyasal kağıt tabanlı analitik cihazlardaki son gelişmeler. Anal. Yöntemler. 7(19): 7951–7960

[14] Mettakoonpitak, J., Boehle, K., Nantaphol, S., Teengam, P., Adkins, JA, Srisa-Art, M., Henry, CS 2016. Kağıt tabanlı analitik cihazlarda elektrokimya: Bir inceleme. Elektroanaliz. 28(7): 1420–1436

[15] Yao, B., Zhang, J., Kou, TY, Song, Y., Liu, TY, Li, Y. 2017. Esnek enerji depolama cihazları için kağıt bazlı elektrotlar. Av. bilim 4(7): 1700107

[16] Sriram, G, Bhat, MP, Patil, P., Uthappa, UT, Jung, HY, Altalhi, T., Kumeria, T., Aminabhavi, TM, Pai, RK, Madhuprasad, Kurkuri, MD 2017. Bildiri toksik iyonların kolorimetrik tespiti için tabanlı mikroakışkan analitik cihazlar: Bir inceleme. Eğilimler Anal. kimya 93: 212–227

[17] Morbioli, GG, Mazzu-Nascimento, T., Stockton, AM, Carrilho, E. 2017. Mikroakışkan kağıt tabanlı analitik cihazlarla kolorimetrik saptamanın teknik yönleri ve zorlukları (µPADs–A incelemesi. Anal. Chim. Açta. 970: 1–22

[18] Yu, JH, Ge, SG, Yan, M. 2014. Kemilüminesans ve elektrikle üretilen kemilüminesans tespiti kullanan kağıt üzerinde laboratuvar tabanlı cihazlar. Anal. Biyoanal. kimya 406(23): 5613–5630

[19] Gross, EM, Durant, HE, Hipp, KN, Lai, RY 2017. Kağıt bazlı ve diğer ucuz mikroakışkan cihazlarda elektrokemilüminesans tespiti. kimya Elektro. kimya 4(7): 1594–1603

[20] Busa, LSA, Mohammadi, S., Maeki, M., Ishida, A., Tani, H., Tokeshi, M. 2016. Yiyecek ve su analizi için mikroakışkan kağıt tabanlı analitik cihazlarda gelişmeler. Mikro makineler. 7: 8

[21] Wisang, YF, Sulistyarti, H., Andayani, U., Sabarudin, A. 2019. Çıplak Göz ve Kolorimetrik Tespitler Kullanan Analiz Lideri için Mikroakışkan Kağıt Tabanlı Analitik Cihazlar (µPAD'ler). GİB Konf. Sör. Anne. bilim Müh. 546: 0320331–7

[22] Meredith, NA, Quinn, C., Cate, DM, Reilly, TH, Volckens, J., Henry, CS 2016. Çevre analizi için kağıt tabanlı analitik cihazlar. Analist. 141(6): 1874–1887

[23] Yetisen, AK, Akram, MS, Lowe, CR 2013. Kağıt tabanlı mikroakışkan hasta başı teşhis cihazları. Laboratuvar Yonga. 13(12): 2210–2251

[24]Jeong, S.-G., Kim, J., Nam, J.-O., Song YS, Lee C.- S. 2013. Kantitatif idrar tahlili için kağıt tabanlı analitik cihaz. Int. Nöroürol. J.17(4): 155–161

[25] Santhiago, M., Nery, EW, Santos, GP, Kubota, LT 2014. Biyoanalitik uygulamalar için mikroakışkan kağıt tabanlı cihazlar. Biyoanaliz. 6(1): 89–106

[26] Rozand, C. 2014. Hasta başı bulaşıcı hastalık testi için kağıt tabanlı analitik cihazlar. Avro. J. Clin. Mikrobiyol. bulaştırmak. Dis. 33(2): 147–156

[27] Xia, Y., Si, J., Li, Z. 2016. Mikroakışkan kağıt tabanlı analitik cihazlar için üretim teknikleri ve bunların biyolojik test uygulamaları: Bir inceleme. Biyosensler. Biyoelektron. 77: 774–789.

[28] Mahdiasanti, IW, Sabarudin, A., Sulistyarti, H. 2019. Mikroakışkan Kağıt Tabanlı Analitik Cihazlar Kullanılarak Kanda Böbrek Fonksiyonu Biyobelirteçleri Olarak BUN-Kreatinin Eş Zamanlı Belirlenmesi, GİB Konf. Sör. Anne. bilim Müh. 546(032019): 1–9

[29] Fauziyah, N., Andini, Anneke, Oktavia, I., Sari, MI, Sulistyarti, H., Sabarudin, A. 2019. GİB Konf. Sör. Anne. bilim Müh. 546(032007): 1–8

[30] Kohl, SK, Landmark, JD, Stickle, DF 2006. Dijital Renkli Görüntü Analizi ve Renkli Çözümler Kullanılarak Absorbansın Gösterimi. J. Chem. Eğitim 83(4): 644–646

Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501