Neem Yaprağı (Azadirachta Indica A. Juss) Sıçanların Karaciğer ve Böbrek Fonksiyonları Üzerindeki Etanolik Ekstrakt

edmund.chen@wecistanche.com

giriiş

Doğal ürünlerden ilaçların geliştirilmesi bugün dünyanın dikkatini çekiyor. doğal ürünler benzersiz bir kimyasal yapıya sahiptir, çeşitli biyolojik aktiviteler üretir ve ilaca benzer özelliklere sahiptir [1]. artı doğal ürünler kullanarak tıp uygulamaları, çeşitli hastalıkların önlenmesinde ve tedavisinde tarih öncesi çağlardan beri ortaya çıkmaktadır. Doğal ürünler, acil ilaç ihtiyacını etkin bir şekilde karşılamak için tekrar tekrar kullanılabilmeleri için molekül hedefinin etkinliği ve seçiciliği açısından birçok avantaj sunar [2]. Doğal ürünler implantasyonlu aktif bileşikler [8, 9], antihiperglisemik, antiülser, antifungal, antibakteriyel, antienflamatuar, immünomodülatör, antimutajenik, antikanser, antimalaryal, antiviral, antioksidan [10-12], antifertilite [13, 14] ve doğum kontrolü [9, 11]. Neem bitkisinin çeşitli kısımları başarıyla izole edilmiştir, 140'tan fazla kimyasal bileşik içerir [10] ve binlerce yıldır bitkisel ilaç olarak kullanılmaktadır [14]. Neem, yağ türevleri, karbonhidratlar ve proteinler dahil olmak üzere çeşitli birincil bileşikler ve flavonoidler, steroidler, saponinler, terpenoidler, alkaloidler, glikozitler ve tanenler gibi ikincil bileşikler içerir [7-15]. Neem bitkileri, yan etki göstermeden etkinlikleri nedeniyle dünya çapında ilgi görmektedir. artı neem bitkisinin geleneksel olarak kullanımı oldukça güvenlidir ve geleneksel tıbbın yüzde 75'inden fazlası neem yaprağı özü kullanır. artı mevcut raporlardan kullanım geçmişi, neem yapraklarından herhangi bir yan etki göstermez. Bununla birlikte, neem yaprağı formülasyonlarının kullanımının kapsamlı bir güvenlik değerlendirmesi hiç yapılmamıştır [11].

CISTANCH BÖBREK/BÖBREK FONKSİYONUNU İYİLEŞTİRECEK

Önceki çalışma, neem yaprağı ekstraktının karaciğer üzerinde toksik etkileri olduğunu bildiriyor veböbrek [4, 11]; Bununla birlikte, diğer raporlar neem yaprağı ekstraktının karaciğeri koruyabildiğini veböbrekhasardan [16-18]. Endonezya, Aceh Eyaleti, Aceh Besar Regency'de yerel halk, neem yapraklarını sebze olarak kullandı ve yan etkilerini bilmeden hamileliği önlemek için kullandı. artı neem yapraklarının bugüne kadarki güvenliği hala belirsizdir. Şimdiye kadar, bildiğimiz kadarıyla, neem yaprağı etanolik ekstraktının karaciğer ve karaciğer üzerindeki etkisini değerlendiren sınırlı sayıda çalışma bulunmaktadır.Böbrek fonksiyonu. Bu çalışmada amaç, neem yaprağı etanolik ekstraktının karaciğer ve karaciğer üzerindeki etkisini araştırmaktı.böbrek fonksiyonuAST, ALT, üre ve kreatinin konsantrasyonunu ve histopatolojik karaciğeri inceleyerek veböbrekerkek sıçanlarda.

Anahtar Kelimeler:Böbrek fonksiyonu; Böbrek Dokuları; böbrek yetmezliği; Böbrek hastalığı; böbrek

Malzemeler ve yöntemler

Neem Yaprağı Örnek Koleksiyonu.Neem yaprakları Endonezya, Aceh Eyaleti, Aceh Besar Regency, Kajhu Köyünden Eylül 2019'da toplandı. Neem yapraklarının tanımlanması Bogoriense Herbaryumu, Biyoloji Araştırma Merkezi, Endonezya Bilimler Enstitüsü (LIPI), Bogor, Endonezya'da (1454) yapıldı. /IPH.1.01/If.07/VII/2019) ve Azadirachta indica A. Juss olarak belirtilmiştir.Neem Yaprağının Etanol Ekstraktının Hazırlanması.Taze neem yaprakları toplandı, yıkandı, havada kurutuldu ve ezilerek ham bir toz elde edildi. Ayrıca, ham toz 7 gün boyunca yüzde 70 etanol ile yumuşatıldı. artı tr, süzüntü, viskoz özütler üretmek için 50 derecede döner bir buharlaştırıcı kullanılarak buharlaştırıldı.Hayvan Deneyi.Deney hayvanları, vücut ağırlığı 150–250 g olan 24 erkek Wistar sıçanıydı. Sıçanlar 7 gün boyunca iklime alıştırıldı ve her grupta 6 sıçan olacak şekilde rastgele dört gruba (T0, T1, T2 ve T3) ayrıldı. T0, tedavisiz kontrol grubu ve T1, T2 ve T3 uygulanan tedavi gruplarıdır.

sırasıyla 100, 200 ve 300 mg/kg vücut ağırlığı ile neem yaprağı etanolik ekstraktı uygulandı. ekstrakt, 48 gün boyunca bir mide tüpü kullanılarak oral yoldan uygulandı ve AST, ALT, üre ve kreatinin konsantrasyonlarını belirlemek için 49. günde kan örnekleri alındı ​​ve ardından karaciğer veböbrekHistopatolojiyi değerlendirmek için dokular toplandı. Çalışma sırasında sıçanlara standart yem ve su ad libitum olarak verildi.

Biyokimyasal Analiz.Steril bir şırınga kullanılarak kalpten kan örnekleri (2-3 ml) alındı. artı tr, kan Eppendorf tüpüne aktarıldı ve 10 dakika oda sıcaklığında (30 derece) bırakıldı. Kan 3000 rpm'de 10 dakika santrifüj edildi. plus e serumu ayrıldı ve buzdolabında (0 20 derece) saklandı. Ayrıca AST, ALT, üre ve kan kreatinin bir kimya analizörü (Rayto RT-1904C) kullanılarak incelendi. plus e AST, ALT, üre ve kreatinin konsantrasyonlarının belirleme prosedürü üreticinin protokolüne göre yapıldı.

Histopatoloji İncelemesi. The karaciğer veböbreksıçanların % 10'u nötr tamponlu formalin solüsyonunda 24 saat süreyle sabitlendi, bir alkol serisinde dehidre edildi ve ksilol solüsyonunda temizlendikten sonra parafin bloğuna gömüldü. Parafin blok içine gömülen dokular bir döner mikrotom kullanılarak 4 µm kalınlığında kesilmiş, cam slaytlara monte edilmiş, hematoksilen ve eozin ile boyanmış ve ışık mikroskobu altında 10x10 büyütmede incelenmiştir.İstatistiksel analiz.Veriler, varyans analizi (tek yönlü ANOVA) ve ardından SPSS 24 kullanılarak Duncan'ın posthoc testi kullanılarak analiz edilir. Bir p-değeri<0.05 was="" considered="" statistically="">

CISTANCH BÖBREK/BÖBREK AĞRILARINI İYİLEŞTİRECEK

Sonuçlar ve tartışma

6e AST ve ALT Konsantrasyon. artı T0, T1, T2 ve T3'ün e AST konsantrasyonu 290,9 ± 202,5 U/L, 277.2 ± 167.2 U/L, 421.3 ± 2{ {28}}sırasıyla 1,5 U/L ve 366.3 ± 276.9 U/L. artı e AST konsantrasyonu T2 ve T3 gruplarında T{{30}} (kontrol grubu) ile karşılaştırıldığında artma eğilimindeydi. Bununla birlikte, T1, T2 ve T3 gruplarındaki AST konsantrasyonları, T0 grubundan anlamlı bir farklılık göstermedi (p > 0.05). artı T0, T1, T2 ve T3'ün e ALT konsantrasyonu sırasıyla 108,6 ± 23,1 U/L, 116,3 ± 51,9 U/L, 105,9 ± 15,2 U/L ve 95,9 ± 36,2 U/L idi. artı e ALT konsantrasyonu T2 ve T3 gruplarında T0'a (kontrol grubu) kıyasla düşme eğilimindeydi.

Ancak, T1, T2 ve T3 gruplarındaki ALT konsantrasyonları, T0 grubundan anlamlı bir fark göstermedi (p > 0.05) (Tablo 1). AST enzimi, karaciğer hasarının varlığını değerlendirmek için kullanılan bir belirteçtir. artı, oksaloasetik asit üretmek için aspartik asit amino grubunun ketoglutarik aside dönüşümünü katalize etmek için glukoneogenez sürecinde rol oynayan enzimdir. AST enzimi karaciğer, iskelet kasları, kalp kaslarının sitozolik ve mitokondriyal izoenzimlerinde bulunur.böbrekler,beyin, pankreas, akciğerler, lökositler ve kırmızı kan hücreleri. Ancak, bu AST enzimi karaciğer hasarını değerlendirmede daha az duyarlı ve özgüldür [19]. Kontrol grubu (T0) ile karşılaştırıldığında tedavi gruplarında (T1, T2 ve T3) AST konsantrasyonlarında anlamlı farklılıklar olmamasına rağmen, AST konsantrasyonu T2 ve T3 gruplarında T2 ve T3 gruplarında artma eğilimindeydi. 0 (kontrol grubu). artı e artışı, flavonoidler, tanenler, saponinler, alkaloidler ve steroidler gibi neem yaprağı ekstraktlarının aktif bileşikleri nedeniyle muhtemelen geç olmuştur, ancak neem yaprağı etanol ekstraktının aktif bileşiklerinin AST'yi arttırdığı belirlenmemiştir. AST enzimindeki bir artışı mutlaka karaciğer hasarı takip etmez, çünkü bu enzim sadece karaciğerde değil aynı zamanda diğer vücut dokularında da spesifiktir.

Bu çalışma ayrıca ALT enziminin tedavi grubunda (T1, T2 ve T3) kontrol grubuna (T0) kıyasla azalma eğiliminde olduğunu ancak ALT enzimindeki düşüşün istatistiksel olarak anlamlı olmadığını bulmuştur. ALT enzimleri, karaciğer hasarının AST enzimlerinden daha iyi bir göstergesiydi çünkü bu sitozolik enzim karaciğerde en yüksek konsantrasyonlarda bulundu ve karaciğer fonksiyonunun hasarını değerlendirmede daha spesifikti [20]. artı, amino gruplarının alaninden ketoglutarik aside transferini katalize ederek pirüvik asit üretmek için glukoneogenezde rol oynayan enzimdir [19]. ALT, 496 amino asitten oluşuyordu ve sitozol hepatositlerinde bulundu. Karaciğerdeki ALT enzim aktivitesi, serum aktivitesinin yaklaşık 3000 katıydı, bu nedenle hepatoselüler hasar veya ölüm durumunda, hasarlı karaciğer hücrelerinden salınan ALT, serumdaki ALT enziminin ölçülen aktivitesini artıracaktır [21].

CISTANCHE BÖBREK/BÖBREK DİYALİZİNİ İYİLEŞTİRECEK

Muhammed et al. [22] neem yaprağının etanol ekstraktının sıçan AST ve ALT enzimlerinde azalmaya neden olduğunu bulmuşlardır. Neem yaprağının etanol ekstraktının karaciğer üzerinde hiçbir yan etkisi yoktur ve hatta karaciğer koruması görevi görür. Haque ve ark. [23] ayrıca neem yaprağı ekstraktının erkek sıçanlarda AST ve ALT enzimlerinin normal serum aktivitesinde değişikliklere neden olmadığını buldu. Bhangra et al. [24], normal AST ve ALT konsantrasyonları ve histopatolojik gözlemlerin gösterdiği gibi, parasetamol ile indüklenen sıçanlarda neem yaprağı ekstraktının 500 mg/kg vücut ağırlığının uygulanmasının karaciğer hasarını azalttığını bildirmiştir. Dkhil ve ark. [17], karaciğere 500 mg/kg vücut ağırlığı dozu ile neem yapraklarının metanolik ekstraktının sisplatin tarafından indüklenen sıçan üzerinde koruyucu bir etkisi olduğunu göstermiştir. Mallick et al. [25], neem yaprağının metanolik ekstraktının yüksek dozlarda bile sıçan karaciğeri üzerinde toksik etkisinin olmadığını bildirmiştir. Neem yaprağı ekstresinin antioksidan içeriği hepatoprotektif bir etki verdi. Hartono ve Prabowo [26] tarafından yürütülen çalışmada, sıçanlara on gün boyunca yüksek dozda parasetamol indüklenerek neem yaprağının etanol özütünün, deney hayvanlarında ALT enziminin aktivitesini de azaltabileceği bulunmuştur. ALT enzimindeki azalma, oksidatif karaciğer hasarını engelleyerek hepatoproteksiyon işlevi gören neem yaprağı ekstraktının aktif bileşiğinden kaynaklanıyordu. Antioksidanlar, membran fosfolipidleri üzerinde toksik etkileri olan ve geniş bir hücre hasarı spektrumuna neden olan reaktif oksijen türlerinin (ROS) oluşumunu azaltan doğrudan süpürme yoluyla serbest radikal oluşumunu azaltabilir. Antioksidanlar karaciğer hücrelerindeki oksidatif stresi azaltabilir ve kandaki ALT enziminin aktivitesi azalacaktır.

Üre ve Kreatinin Konsantrasyonu.T{{0}, T1, T2 ve T3'ün üre konsantrasyonu 51,1 ± 7,0 mg/dl, 55,6 ± 8,5 mg/dl, 44,5 ± 5,4 mg/dl ve Sırasıyla 48.4 ± 3.4 mg/dl. T1, T2 ve T3 gruplarındaki üre konsantrasyonları, T0 grubundan önemli farklılıklar gösterdi (p < 0.{{30}}5).="" t0,="" t1,="" t2="" ve="" t3'ün="" kreatinin="" konsantrasyonu="" 0.22="" ±="" 0="" idi.{{40}}4="" mg/dl,="" {{44="" }}.24="" ±="" 0.0sırasıyla="" 3="" mg/dl,="" 0.21="" ±="" 0.03="" mg/dl="" ve="" 0.25="" ±="" 0.03="" mg/dl.="" t1,="" t2="" ve="" t3="" gruplarındaki="" kreatinin="" konsantrasyonları,="" t0="" grubundan="" anlamlı="" bir="" fark="" göstermedi="" (p=""> 0.05) (Şekil 1). buböbreküre, kreatinin ve ürik asit gibi atık ürünlerin ve toksinlerin atılımında önemli bir role sahiptir; ayrıca hücre dışı sıvı hacminin, ozmolalitenin, elektrolit konsantrasyonlarının ve hormon üretiminin düzenlenmesinde de bir işlevi vardır. artı e fonksiyonel birimiböbrekglomerulus, proksimal tübüller, distal tübüller ve toplayıcı kanallardan oluşan nefrondur [27]. plus e sonuçları, kontrol grubuna (T0) kıyasla tedavi gruplarında (T1, T2 ve T3) üre konsantrasyonlarında önemli farklılıklar olduğunu ve karşılaştırıldığında T2 ve T3 gruplarında üre konsantrasyonunun azaldığını gösterdi. T0'ye (kontrol grubu). Üre, protein metabolizmasının ve üre döngüsünün son ürünü olarak karaciğerde oluşan azot içeren bir bileşiktir. Alanın yaklaşık yüzde 85'i vücuttan atılır.böbreklerve geri kalanı sindirim sistemi yoluyla atılır. Akut ve kronik durumlarda olduğu gibi böbrek temizleme koşullarında serum üre artarböbrek yetmezliği. Üre ayrıca üst gastrointestinal kanama, dehidrasyon, katabolik süreç ve yüksek proteinli diyet gibi diğer durumlarda da artabilir [27].Bu çalışmada, kontrol grubuna kıyasla tedavi grubunda üre konsantrasyonunda bir azalma olmuştur. neem yaprağının etanol ekstraktınınböbrek fonksiyonuerkek sıçan. Guyton ve Hall'a [28] göre, kandaki toplam üre, diyet proteini ve vücudun yeteneği ile belirlendi.böbreklerüre salgılamak için. Böbrekler hasar görürse, kanda üre birikir. Plazmada artan üre belirtildiböbrek yetmezliğifiltreleme işlevini yerine getirirken. artı e koşuluböbrek yetmezliğiÇok yüksek plazma üre seviyeleri ile karakterize edilen, üremi olarak bilinir.

Üre, protein ve amino asit katabolizmasından türetilen, karaciğer tarafından üretilen ve tüm hücre içi ve hücre dışı sıvılara dağıtılan nitrojenin son ürünüdür. İçindeböbreküre, glomerüller tarafından kandan süzülür ve kısmen su tarafından geri emilir. Artan üre, glomerüler filtrasyon hızının zayıf olduğunun bir göstergesidir. Artan üre konsantrasyonu ile ilişkilidirböbrek hastalığıveya başarısızlık, idrar yolu tıkanıklığıböbrektaşlar, konjestif kalp yetmezliği, dehidratasyon, ateş, şok ve sindirim sisteminde kanama.Çalışma ayrıca tedavi gruplarında (T1, T2 ve T3) kreatinin konsantrasyonlarında kontrol grubuna (T0) kıyasla anlamlı bir farklılık olmadığını da bulmuştur. neem yapraklarının etanol ekstraktının fareye zarar vermediği belirtilmiştir.böbrek.Kreatinin yaygın olarak bir ölçü olarak kullanılır.Böbrek fonksiyonu. Kreatinin konsantrasyonu sadece kas kütlesi ürününden etkilenmez, aynı zamanda kas fonksiyonu, kas bileşimi, aktivite, diyet ve sağlık durumundan da etkilenir. Artmış kreatinin konsantrasyonları ayrıca kas distrofisi, anemi, lösemi ve hipertiroidizmde bulunur [29]. değerlendirmek için en sık kullanılan belirteç kreatinindir.böbrek fonksiyonu.kreatinin konsantrasyonu, glomerulusun etkisinin bir göstergesini sağlar. Kreatinin, kaslardaki kreatin fosfatın bir yan ürünüdür ve vücut tarafından sabit bir hızda üretilir. Çoğunlukla, kreatinin tamamen kandan temizlenir.böbrekler. Artan kreatinin, temizlemenin azaldığını gösterir.böbrekler. Kreatinin serumu daha doğru bir değerlendirmedir.Böbrek fonksiyonuüreden daha fazladır [27].

Monim et al. [16], neem yaprağı ekstraktının sıçanlarda beş gün boyunca 500 mg/kg vücut ağırlığı dozunda verilmesinin sıçanlarda üre ve kreatinin konsantrasyonlarında değişikliğe neden olmadığını bulmuşlardır. Kepala et al. [30] ayrıca 14 gün boyunca 500 mg/kg vücut ağırlığı dozunda neem yaprağı ekstresi ile beslenen sıçanın,böbrek hasarı. Neem yaprağının etanol özü, bir nefroproteksiyon görevi gördü.böbrek hasarı.Somsak ve ark. [18], 1000 ve 2000 mg/kg vücut ağırlığı dozlarında neem yaprağı suyu ekstraktının sıçanlar üzerinde toksik etkilerinin olmadığını bulmuşlardır. Neem yaprağı ekstresi, doku hasarına karşı nefroproteksiyon için bir aday olarak kullanılabilir.böbrekler.

Karaciğer ve Böbrek Histopatolojisi.Kontrol grubunda (Resim 2(a) ve tedavi grubunda 100 mg/kg (Resim 2(b)), 200 mg/kg (Resim 2(c)) ve 300 mg/kg dozlarında karaciğer histopatolojik gözlemleri (Şekil 2(d)) karaciğerin, santral damarların ve hepatosit hücrelerinin normal göründüğünü gösterdi (Şekil 2).böbrekhistopatoloji gözlemleri kontrol grubunda (Şekil 3(a)) ve tedavi grubunda 100 mg/kg (Şekil 3(b)), 200 mg/kg (Şekil 3(c)) ve 300 mg/kg ( Şekil 3(d)) glomerulusun ve proksimal ve distal tübüllerin normal görünümünü gösterdi. artı hiçbir histolojik değişiklik olmadıböbrek(Figür 3).

karaciğer veböbreklerilaçların veya diğer maddelerin metabolizmasında ve atılımında önemli rolü olan organlardır. Çalışmada, neem yapraklarının etanol ekstraktının 100, 200 ve 300 mg/kg dozlarında uygulanmasının sıçan karaciğerinde anormalliklere ve hasara neden olmadığı gösterildi. artı tedavi edilen sıçanlarda karaciğer, karaciğerin normal genel yapısını ve merkezi damarların ve hepatosit hücrelerinin normal görünümünü gösterdi. plus e karaciğer histopatolojisi, kontrol ve tedavi grupları arasında anlamlı bir fark olmadığını gösteren AST ve ALT enzimlerinin analiz sonuçlarını takip ediyor. Kontrol grubuna göre 200 ve 300 mg/kg grubunda AST enziminde artış olmasına rağmen karaciğer histopatolojisi normal görünüyordu. AST enzimi karaciğer hasarına spesifik değildir. AST esas olarak kırmızı kan hücrelerinde, kalp ve iskelet kaslarında bulunur veböbrekler. AST, karaciğere ALT'den daha az duyarlıdır [19].

buböbrek100, 200 ve 300 mg/kg dozlarda neem yaprağı etanol ekstresinin uygulanmasından sonra histopatoloji gözlemleri, kontrol ile karşılaştırıldığında hiçbir fark göstermedi. buböbrektedavi edilen sıçanlarda normal genel gösterdiyapısıböbrekve glomerulus ve tübüllerin normal görünümü. Bu bulgu, kontrol ve tedavi grupları arasında önemli bir fark göstermeyen sıçan kanındaki üre ve kreatinin analizi ile desteklenmektedir. Üre ve kreatinin ana göstergeleri olan biyokimyasal parametrelerdir.Böbrek fonksiyonu. Bununla birlikte, kreatinin daha doğru bir değerlendirmedir.Böbrek fonksiyonuüreden daha fazladır [27]. Bu, neem yaprağı ekstraktının potansiyel hepatoprotektif ve nefroprotektif etkilere sahip olduğu önceki raporlardan bazıları ile uyumludur [31]. Kusuma et al. [32], neem yaprağı etanol ekstraktının sıçanda hepatosit çapını, karaciğer lobüllerinin çapını ve karaciğer ağırlığını etkilemediğini buldu. Buna karşılık, Katsayal ve ark. [33], neem yapraklarının metanol ekstraktının 500, 1000 ve 2000 mg/kg dozlarında uygulanmasının, kontrollere kıyasla tedavi edilen sıçanların karaciğer ve böbreklerinde anormalliklere neden olduğunu buldu. Sonuçlardaki bu fark, muhtemelen neem yapraklarının farklı ekstrakt dozajlarından kaynaklanıyordu. buBu çalışmanın sonuçları, Kajhu'dan neem yapraklarının etanol ekstraktının karaciğere zarar vermediğini ve karaciğere zarar vermediğini göstermektedir.böbreklererkek sıçanlar. Artı, bir antioksidan olan neem yapraklarının etanol ekstraktının aktif bileşiğinden kaynaklanmaktadır. Önceki çalışmalar, Kajhu'dan elde edilen neem yaprağı etanol özütünün flavonoidler, alkaloidler, tanenler, saponinler ve steroidler içerdiğini göstermektedir [34]. artı antioksidan görevi gören aktif bileşikler flavonoidlerdir. artı e neem yaprağı etanol özü güçlü antioksidan aktiviteye sahiptir [35]. artı biz, Kajhu'dan gelen neem yapraklarının etanol özü, erkek sıçanların karaciğeri ve böbrekleri için güvenlidir.

CISTANCH BÖBREK/BÖBREK YETMEZLİĞİNİ İYİLEŞTİRECEK

Sonuçlar

Neem yapraklarının etanolik özü karaciğere zarar vermedi veböbrekAST, ALT enzimleri, üre ve kreatinin konsantrasyonu ve histopatolojik karaciğer analizi ile belirtildiği gibi erkek sıçanın veböbrek. Bununla birlikte, neem yapraklarının ilaç güvenliğine ilişkin net bir resim elde etmek amacıyla çeşitli dozlarda neem yaprağı ekstraktının kapsamlı bir güvenlik değerlendirmesi için daha fazla araştırma yapılması gerekmektedir.