BÖLÜM 1 Cistanche Tubulosa Feniletanoid Glikozitlerin Mikroemülsiyon Bazlı Transdermal İletiminin Hazırlanması ve Değerlendirilmesi

İletişim: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-posta:audrey.hu@wecistanche.com

JIANHUA YANG1*, HUANHUAN XU1-3*, & et al.

Soyut.

Bu çalışmanın birincil amacı, yeni bir mikroemülsiyon (ME) formülasyonu geliştirmektir.cistanche gelen feniletanoid glikozit(PG) cilt aydınlatıcılarda ve güneşten koruyucularda kullanım içindir. Yağ fazı, ilaç çözünürlüğü temelinde seçilirken, yüzey aktif madde ve yardımcı yüzey aktif madde, çözündürme kapasiteleri ve ME'leri oluşturdukları verimlilik temelinde tarandı ve seçildi. ME bölgelerini değerlendirmek için sözde üçlü faz diyagramları oluşturuldu ve araç olarak beş su içinde yağ ME'si formülasyonu seçildi. ME formülasyonunu optimize etmek ve tuzlu su çözeltisine kıyasla geçirgenliğini değerlendirmek için in vitro deri geçirgenliği deneyleri yapıldı. Optimize edilmiş ME'nin fizikokimyasal özellikleri ve PG'nin nüfuz etme yeteneği(cistanche'den feniletanoid glikozit) Bu ME tarafından teslim edilenler de araştırıldı. Optimize edilmiş ME formülasyonu, izopropil miristat (yüzde 7, w/w), Cremorphor EL (yüzde 21, w/w), propilen glikol (yüzde 7, w/w) ve sudan (yüzde 65, w/w) oluşuyordu. kümülatif PG miktarı(cistanche'den feniletanoid glikozit) ME tarafından taşındığında kesilen fare derisine nüfuz eden, PG'nin sadece tuzlu su çözeltisi ile taşındığı zamankinin ~ 1.68 katıydı. Mikroemülsiyondaki (4149.650±37.3 µg·cm-2 ) kümülatif PG miktarı, salin solüsyonundaki PG'den önemli ölçüde daha yüksekti (2288.63±20.9 µg· cm-2). Ayrıca, geçirgenlik katsayısı, optimize edilmiş mikroemülsiyonun, PG'nin transdermal iletimi için kontrol çözeltisinden daha etkili bir taşıyıcı olduğunu gösterdi (8.87±0.49 cm/hx10-3 ve 5.41±0.12 cm/hx10-3 ). Birlikte ele alındığında, ME ile taşınan PG'nin nüfuz etme kabiliyeti, tuzlu su çözeltisine kıyasla önemli ölçüde arttı.

cistanche

giriiş

Herba cistanche,Çöl bölgelerinde yaygın olarak dağıtılan bir tonik bitki, geleneksel Çin tıbbında sıklıkla kullanılmaktadır. Bugüne kadar, hafızanın iyileştirilmesi, cinsel güç, serbest radikal süpürücü ve yaşlanma karşıtı aktivite dahil olmak üzere biyofarmasötik özelliklerini araştırmak için çok sayıda çalışma yapılmıştır (1). H. cistanche'ın ana bileşenifeniletanoid glikozit (PG). Önceki çalışmalar, PG'nin insan vücudunda melanin sentezi için hız sınırlayıcı enzim olan tirozinazın aktivitesini inhibe ettiğini ortaya çıkarmıştı (2). Ayrıca, PG(cistanche'den feniletanoid glikozit) 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil radikallerinin temizlenmesinden (3) ve keratinositleri ultraviyole (UV) radyasyondan korumaktan sorumlu olduğu bildirilmiştir. Bu nedenle, bu bileşen cilt depigmentasyonunda potansiyele sahip olabilir. Topikal ilaç, kozmetik alanında yaygın olarak kullanılmaktadır ve ilaç doğrudan vücut yüzeyine verilmektedir (4). Mikroemülsiyonlar (ME), geleneksel olarak yağ, yüzey aktif madde, yardımcı yüzey aktif madde ve sulu fazlardan (5) oluşan yeni bir ilaç dağıtım sistemidir ve lipofilik ilaçların hızını ve emilimini iyileştirdiği bildirilmiştir (6). Ayrıca tatmin edici çözünürlüğü, düşük cilt tahrişi ve yüksek geçirgenliği nedeniyle topikal ilaç dağıtımında kullanılması beklenmektedir (7,8). Bildiğimiz kadarıyla, PG'nin mikroemülsiyon kullanılarak topikal ilaç yoluyla verildiği birkaç çalışma yapılmıştır. Bu çalışmada, transdermal uygulama için bir su içinde yağ (O/W) nanoemülsiyon dağıtım sistemi kurulmuş ve PG nanoemülsiyona dahil edilmiştir (9,10). Bu arada, PG bazlı nanoemülsiyonun hazırlanması ve karakterizasyonu, in vitro olarak transdermal salım araştırılarak gerçekleştirildi.

Malzemeler ve Yöntemler Reaktifler.

Cremorphor EL ve izopropil miristat (IPM), Sigma Aldrich'ten satın alındı; Merck Millipore (Darmstadt, Almanya). Etanol, oleik asit (OA) ve Tween-80, Guangcheng Chemical Reagent Co., Ltd.'den (Tianjin, Çin) satın alındı. Etil oleat, Shanghai Chemical Reagent Co., Ltd.'den (Shanghai, China) satın alındı. Kullanılan tüm kimyasallar ve solventler analitik reaktif derecesindeydi. Cistanche tubulosa feniletanoid glikozitler JIANHUA YANG1*, HUAN HUAN XU1-3*, SHANSHAN WU2, BOWIE JU2, DANDAN ZHU2, YAO YAN1, MEI WANG2 ve JUMPING HU'nun mikro emülsiyon bazlı transdermal iletiminin hazırlanması ve değerlendirilmesi{{9} } Eczacılık Bölümü, İlk Bağlı Hastane; 2 Doğal İlaçlar Bölümü, Eczacılık Fakültesi, Sincan Tıp Üniversitesi, Urumçi, Xinjiang 830011; 3 Eczacılık Departmanı, Kanghua Hastanesi, Dongguan, Guangdong 523003, Çin Halkla İlişkiler 2 Aralık 2015; Kabul tarihi 29 Kasım 2016, DOI: 10.3892/MMR.2017.6147 Yazışma adresi: Dr. Junping Hu, Department of Natural Medicines, College of Eczacılık, Xinjiang Medical University, 393 Xinyi Road, Urumqi, Xinjiang 830011, PR Çin E-posta: hujp0551 @yeah.net * Eşit katkıda bulundu Anahtar Kelimeler: feniletanoid glikozit, mikroemülsiyon, transdermal uygulama, cilt açıcı, güneş kremi yang ve diğerleri: KOZMETİK UYGULAMA İÇİN ME-BASED PG 1110 PhG'lerin Hazırlanması. PhG(cistanche'den feniletanoid glikozit) rutin olarak tarif edildiği gibi hazırlandı (11).

hava ile kurutulmuşC. tübülozagüç verildi ve yüzde 80 EtOH ile süzülerek ekstrakte edildi. Perkolat basınç altında buharlaştırıldı, ardından kalan sıvı süzüldü. Süzüntü konsantre edildi ve yıkama sıvısı olarak su içinde yüzde 0, 30, 50, 70 ve 90 EtOH kullanılarak bir SP-825 makro gözenekli reçine kolonu üzerinde kromatografiye tabi tutuldu. Yüzde 30-50 EtOH yıkama sıvıları konsantre edildi ve kurutularak PhG açısından zengin fraksiyon elde edildi. UV spektrofotometrisi PhG içeriğini gösterdi(cistanche'den feniletanoid glikozit) yüzde 87,6 oldu. ME için yağların, yüzey aktif maddelerin ve yardımcı yüzey aktif maddelerin taranması. Yüksek ilaç yükleme kapasitesine sahip bir ME formülasyonunun hazırlanması için uygun bileşenleri seçmek için çözünürlük testleri yapıldı. Bu işlemde, aşağıdaki reaktiflerin her birinin 4 ml'sine fazla miktarda PG eklenmiştir: IPM, sıvı parafin, OA, Cremophor EL, Tween‑80, mutlak etanol, propilen glikol, gliserin ve PEG400 , sırasıyla. Bunu takiben elde edilen karışım, 72 saat boyunca 37°C'de karşılıklı olarak çalkalandı, ardından 10 dakika boyunca 12.830 x g'de santrifüjlendi. Ardından pelet metanol içinde yeniden süspanse edildi ve PG, 333 nm'de UV spektrofotometrisi kullanılarak belirlendi. Metanol içinde yağların, yüzey aktif maddelerin ve yardımcı çözücülerin uygun seyreltilmiş çözeltileri, boş bir kontrol görevi gördü. Faz diyagramının oluşturulması. Mevcut mikroemülsiyon sınırı için bileşenlerin bir konsantrasyon aralığını elde etmek için, daha önce tarif edildiği gibi bir su titrasyonu yöntemi kullanılarak sahte üçlü faz diyagramları oluşturulmuştur (12). Üç fazlı diyagramlar, 1:3, 1:1 ve 3:1 sürfaktan-kosurfaktan ağırlık oranları ile hazırlanmıştır. Yağ fazı ve yüzey aktif madde karışımı daha sonra 1:9, 2:8, 3:7, 4:6, 5:5, 6:4, 7:3, 8:2 ve 9:1 ağırlık oranlarında karıştırıldı. . Yağ ve yüzey aktif madde karışımı homojen bir şekilde karıştırıldı ve şeffaf ME elde edilene kadar oda sıcaklığında manyetik karıştırma (300 rpm) altında saf su ile damla damla seyreltildi. Sözde üçlü faz diyagramını tamamlamak için bileşenlerin konsantrasyonu kaydedildi. Bu diyagramlara dayanarak, PG bazlı ME'nin hazırlanması için uygun malzeme konsantrasyonları seçildi. ME'nin hazırlanması ve PG'nin sulu çözeltisi. Toplam 5 ME (ME1-5) faz diyagramlarına göre bir yüzey aktif madde ile seçildi: Yardımcı yüzey aktif madde ağırlık oranı 3:1 (Tablo I). Mikroemülsiyon sistemleri, yağın yüzey aktif madde ve yardımcı yüzey aktif madde karışımı ile karıştırılmasıyla hazırlandı ve 37˚C'de manyetik karıştırma (300 devir/dakika) ile yağlı fazlara hassas bir şekilde su ilave edildi. Sistemler, 30 dakika boyunca hafif manyetik karıştırma kullanılarak dengelendi, ardından uygun miktarda PG ultrasonikasyon altında eritildi. Sulu çözelti, aynı PG içeriği saf su içinde çözülerek hazırlandı. Mikroemülsiyonun karakterizasyonu. ME'lerin ortalama damlacık boyutu ve polidispersite indeksi, foton korelasyon spektroskopisi (Malvern Instruments, Ltd., Malvern, UK) ile değerlendirildi. Tüm numuneler 1:5 oranında su ile seyreltildi ve 0.22 um'lik bir filtreden süzüldü. Test, üç kopya halinde 25°C'de termostatik bir odada gerçekleştirildi. PG mikroemülsiyonlarının morfolojisi, transmisyon elektron mikroskobu (JEM-100CXII; JEOL Ltd., Tokyo, Japonya) kullanılarak gözlemlendi. Kısaca, bir damla seyreltilmiş numune bir film kaplı bakır ızgara üzerine bırakılmış, ardından bir damla yüzde 2 fosfotungstik asit sulu çözeltisi ile lekelenmiştir.

Mikroemülsiyonların ortalama damlacık çapları, oda sıcaklığında foton korelasyon spektroskopi cihazı (BI{{0}}SM; Brookhaven Instruments Corporation, Holtsville, NY, ABD) ile belirlendi. ME araçlarının viskozitesi, NDJ-8S dijital viskozimetre (Shanghai Precision and Scientific Instrument Co., Ltd., Şanghay, Çin) kullanılarak 25°C'de ölçülmüştür. 1 rotor 60 rpm'ye ayarlı. pH tayini. ME'lerin pH değerleri, Phs‑3C dijital asit ölçer (Shanghai REX Instruments Factory, Şanghay, Çin) kullanılarak 25°C'de belirlendi. Kırılma indeksleri, termostatik bir Abbe refraktometresi (Optical Instrument Factory, Şanghay, Çin) ile ölçüldü. Cilt dokularının hazırlanması. 20 g ağırlığındaki erkek Kunming fareleri, Xinjiang Tıp Üniversitesi (Xinjiang, Çin) Deney Hayvanları Merkezinden satın alındı. 10 fare (6 haftalık), oda sıcaklığında (24±2˚C), yüzde 50±15 nem ile 12 saat aydınlık/12 saat karanlık döngüsünde 1 hafta boyunca adaptif beslenmeye tabi tutuldu. Tüm hayvanların standart bir diyete ve suya erişimi vardı. Saç, elektrikli bir kesme makinesi ile alındı. Kloral hidrat (yüzde 10) ile subkutan enjeksiyon ile terminal anesteziyi takiben karın bölgesinden deri dokuları eksize edildi ve deri altı yağ ve bağ dokusu çıkarıldı. Dokular gece boyunca 4˚C'de bir buzdolabına yerleştirildi. Çalışma protokolleri, Sincan Tıp Üniversitesi (Sincan, Çin) Etik Kurulu tarafından onaylandı. In vitro permeasyon çalışması. Geçirgenlik deneyleri daha önce anlatıldığı gibi yapılmıştır (12). Eksize edilen deri, 2,8 cm2 etkin difüzyon alanına sahip bir dikey difüzyon hücresinin verici ve alıcı odası arasında klemplendi. Reseptör odası taze, normal salin ile dolduruldu. Difüzyon hücresi, devridaim yapan bir su banyosu kullanılarak 37°C'de tutuldu ve reseptör odalarındaki çözelti, 200 rpm'de sürekli olarak karıştırıldı. Bunu takiben test formülasyonu (1.0 mi) donör odasına nazikçe yerleştirildi. Daha sonra, reseptör odasındaki çözeltinin 3 ml'si çıkarıldı ve önceden belirlenmiş aralıklarla (0, 2, 4, 6, 8, 10 ve 24 saat) eşit hacimde taze normal salin ile değiştirildi. Reseptör odasından elde edilen numune, PG'yi belirlemek için kullanıldı.(cistanche'den feniletanoid glikozit)333 nm dalga boyunda UV spektroskopisi kullanılarak seviyeler. Kesilmiş fare derisine nüfuz eden kümülatif PG miktarı, aşağıdaki formüle göre hesaplandı:

Qn, belirli bir t zamanında biriken miktar iken, Cn, her örnekleme zamanında alıcı çözeltinin ilaç konsantrasyonudur, Ci, örneğin ilaç konsantrasyonudur, S, etkin difüzyon alanıdır (S{{0) }}.8 cm2) ve V0 ve Vi sırasıyla alıcı çözeltinin ve numunenin hacimleridir. PG'nin kümülatif miktarı (Qn)(cistanche'den feniletanoid glikozit)permeated, her formülasyon için zamanın (t) bir fonksiyonu olarak çizildi. Sabit durumda (Jss, µg/cm-2 /h-1) PG'nin fare derisine nüfuz etme oranı, Qnversus zaman grafiğinin doğrusal bölümünün eğiminden hesaplandı. Geçirgenlik katsayısı (Kp, cm/h) aşağıdaki formüle göre hesaplanmıştır:

Kp'nin geçirgenlik katsayısı olduğu yerde, Jss kararlı durumda hesaplanan akıştır ve C0araçta sabit kalan ilaç konsantrasyonunu temsil eder. Cilt tutma çalışması. Aşağıdaki bölümler, optimize edilmiş ME formülasyonları (PG içeriği, yüzde 2, w/w) ve sulu çözelti arasındaki ex vivo geçirgenlik davranışı, kümülatif miktar, nüfuz etme oranı, geçirgenlik katsayısı ve cilt tutma özelliklerinin karşılaştırmasını detaylandırmaktadır. Geçirgenlik deneyinin sonunda derideki kalıntı ilaç seviyesi homojenizasyon yöntemi kullanılarak belirlendi. Normal tuzlu su ile yıkandıktan sonra deri küçük bölümlere ayrıldı ve bir buz banyosunda 3 ml metanol içeren bir cam tüpe yerleştirildi. Numune 12000 dev/dak'lık bir hızla homojenleştirildi. rpm'de 2 dakika, ardından 12.830 xg'de yatay olarak 30 dakika 25˚C'de santrifüjlendi. Süpernatan, mikro gözenekli bir filtreden (0.45 um) geçirildi ve PG(cistanche'den feniletanoid glikozit)süpernatandaki seviyeler, 333 nm dalga boyunda UV spektroskopisi ile belirlendi. Stabilite çalışması. PG yüklü ME'nin fiziksel stabilitesi, 2‑8˚C'de ve oda sıcaklığında 3 ay boyunca gözlemlenen netlik, partikül boyutu analizi ve faz ayrımı yoluyla araştırıldı. ME'nin fiziksel stabilitesini değerlendirmek için 25°C'de 30 dakika boyunca 12.830 x g'de santrifüjleme yapıldı. Optimum depolama sıcaklığını değerlendirmek için PG'nin faz ayrımı ve konsantrasyonu aylık olarak incelenmiştir. Kimyasal stabilite, 2‑8°C'de ve oda sıcaklığında saklanan ilaç yüklü formülasyonlar üzerinde değerlendirildi ve PG içeriği 333 nm'de UV spektrofotometrisi ile belirlendi. Cilt duyarlılık testi. Geliştirilen formülasyonun daha önce tarif edildiği gibi topikal uygulamasının tahriş edici potansiyelini değerlendirmek için tavşanlarda (2.02.5 kg ağırlığında) deri duyarlılık testleri yapıldı (13). Sincan Tıp Üniversitesi Deney Hayvanları Merkezinden dokuz Hollanda tavşanı (16 haftalık; 2.0-2.5 kg; 5 erkek ve 4 dişi) alındı. Hayvanlar, oda sıcaklığında (24±2˚C), yüzde 50±15 nem ile 12 saat aydınlık/12 saat karanlık döngüsünde 1 hafta süreyle adaptif beslenmeye tabi tutuldu. Tüm hayvanların standart bir diyete ve suya erişimi vardı. Kurban için hava embolisi kullanıldı. Bu çalışmada kullanılan protokoller, Xinjiang Tıp Üniversitesi (Sincan, Çin) Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır. Arkadaki tüyler, ME formülasyonlarının uygulanmasından ~24 saat önce alındı. Hayvanlar aşağıdaki gruplara ayrıldı: Yüzde 2 (a/a) PG içeren optimize ME'nin topikal uygulaması ile optimize edilmiş bir ME grubu (n=3); yüzde 2 (a/a) PG içeren salin solüsyonunun topikal uygulaması ile bir PG salin grubu (n=3); ve kontrol salin grubu (n=3), normal salinin topikal uygulamasına tabidir. Uygulama 5 gün boyunca günde iki kez gerçekleştirildi. Hayvanlar, eritem, papül, pul pulluk ve kuruluk dahil olmak üzere herhangi bir kaşıntı veya deri değişikliği belirtisi açısından gözlendi (14). İlacın kesilmesini takiben, tekli veya çoklu uygulamalar için gözlem 3 gün boyunca sürdürülmüştür. Test bölgesinin tahriş skorları, aşağıdaki kriterlere göre eritem ve ödemin kapsamı değerlendirilerek değerlendirildi: 1, görünür reaksiyon yok; 2, hafif bir reaksiyon; 3, orta derecede reaksiyon ve 4, şiddetli reaksiyon (15,16). Son olarak, her durum için toplam tahriş puanları aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplandı:

İstatistiksel analiz. Veriler ortalama ± standart sapma olarak sunulmuştur. Veri analizi, tek yönlü bir varyans analizi ve ardından en az anlamlı fark testi kullanılarak yapıldı. Veriler, SPSS yazılım versiyonu 19.0 (IBM SPSS, Armonk, NY, ABD) kullanılarak analiz edildi. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Sonuçlar ve tartışma

ME için yağların, yüzey aktif maddelerin ve yardımcı yüzey aktif maddelerin taranması. PG(cistanche'den feniletanoid glikozit)sıvı parafin ve oleik asitte hemen hemen çözünmezdi, ancak IPM'de orta derecede çözünürlük gözlendi (Tablo II). IPM derideki difüzyon katsayısını arttırır ve permeasyon katsayısının artmasına neden olur (17,18). Ek olarak, IPM, iyi bilinen geçirgenliği arttırıcı özellikleri ve biyouyumluluğu nedeniyle ME'lerin hazırlanması için yaygın olarak seçilir. Yüzey aktif madde seçimi, yağ-su arayüzünde bir film oluşturarak arayüzey geriliminin azaltılmasına katkıda bulunduğundan, ME'lerin başarılı formülasyonu için kritik öneme sahiptir (19). Bu çalışmada, PG, Cremophor-EL'de (40.193 mg/ml; Tablo II) Tween-80 (28.051 mg/ml; Tablo II) ile karşılaştırıldığında daha yüksek bir çözünürlük sergilemiştir. Bu nedenle, CremophorEL, çözünürlük profili ve iyonik olmayan bir yüzey aktif madde olarak düşük toksisite seviyesi nedeniyle daha sonraki çalışmalarda kullanılmak üzere seçilmiştir. Ayrıca, sulu çözeltisi, PG'nin iyi çözünürlüğünü gösterdi. Yardımcı yüzey aktif maddeler arasında PG'nin en yüksek çözünürlüğü propilen glikolde gözlendi (48.714 mg/ml; Tablo II). Ayrıca propilen glikol, IPM ve CremophorEL ile ME oluşturma yeteneğine sahiptir. Birlikte ele alındığında, PG yüklü ME'lerin formülasyonu için sırasıyla yağ fazı, yüzey aktif madde ve yardımcı yüzey aktif madde olarak IPM, CremophorEL ve propilen glikol kullanıldı. Sözde üçlü faz diyagramlarının oluşturulması. Bu çalışmada, mikroemülsiyonlar için bileşenlerin konsantrasyon aralığını seçmek için faz diyagramları oluşturulmuştur ve işaretli alanlar net O/WME bölgesini göstermektedir (Şekil 1). Stratum corneum'un hidrasyon etkisi ile dermal permeasyon arasında yakın bir ilişki daha önce bildirilmişti (20) ve ME'lerdeki ilaçların termodinamik aktivitesi, ilaçların deriye salınması ve penetrasyonunun arkasında önemli bir itici güçtü (20,21). ). Düşük yüzey aktif madde karışım içeriğine sahip ME'deki ilaçların termodinamik aktivitesinin, ilacın deriye salınması ve penetrasyonu için önemli bir itici güç olduğu gösterilmiştir (22,23).

The decreased concentration of surfactant in dispersed systems may also increase the rate of drug release and its permeation in the skin (24,25). Thus, the water content ranged between 50 and 70%, while that of the surfactant and cosurfactant ranged between 20 and 45%. The microemulsion domain was determined by visual inspection for clarity and fluidity. The rest of the region in the phase diagrams represents turbid and conventional emulsions based on visual observation (Fig. 1). No liquid crystalline structure was observed using the cross polarizer. The area of the O/W ME region was expanded following the increase of the Km value (Fig. 1). These findings were consistent with previous studies, which demonstrated that a higher level of surfactant reduces interfacial tension of the colloidal solution more effectively, thereby improving the fluidity of the interface and increasing the entropy of the system (21,24). Thus, it is reasonable to speculate that the effect of CremophorEL on ME regions depends on the other ME components, especially the cosurfactant. The combination of short to medium carbon chain length alcohols, including propylene glycol, with single-chain surfactants, may lower interfacial tension due to increased fluidity at the interface. Additionally, medium carbon chain length alcohols may induce elevation of miscibility of the aqueous and oily phases due to the partitioning behavior between the two phases. Finally, in the presence of a Km ratio of 3:1, the ratio of the surfactant mixture to oil was 1:9 or 2:8. MEs prepared with a ratio of surfactant mixture to oil >2:8 bulanık ve kararsızdı (Şek. 2).

ME1‑5'in son bileşimleri Tablo I'de listelenmiştir. ME hazırlama ve karakterizasyonu. ME1-5'nin fiziksel özellikleri Tablo III'te listelenmiştir. Dağılım sistemleri, herhangi bir çökelti olmaksızın makroskopik olarak özdeş, homojen ve şeffaftı. Bu ME'lerin ortalama damlacık boyutları 30.56 ile 79.21 nm arasında değişmektedir (Şekil 3; Tablo III), polidispersite indeks değerleri 0.187 ile 0.321 arasında değişmektedir. (Tablo III). Bu, dar bir boyut dağılımına sahip tek tip bir ME gösterdi. Ayrıca damlacık boyutu, yağ içeriği ile orantılı olarak artarken, yüzey aktif madde karışımı içeriği ile azaldı. Bu fenomen, ME yağ çekirdeğinin genişlemesine ve damlacık boyutunu azaltmak için yağ-su ara yüzey gerilimini kuvvetli bir şekilde azaltan yüksek yüzey aktif madde konsantrasyonuna bağlanabilir. Ayrıca, artan yüzey aktif madde seviyesi ve azalan su sonucu ME viskozitesi yükselmiştir. Tüm ME'lerin pH değerleri uygun 5.0-7.5 (Tablo III) aralığına düştü ve bu nedenle cilt dokularınınkiyle uyumluydu. Fiziksel stabilite ile ilgili olarak, test edilen ME'lerin hiçbirinde hiçbir faz ayrımı, kırılma veya ilaç çökelmesi gözlemlenmedi, bu da ME'lerin santrifüjlemeye karşı tatmin edici termodinamik stabiliteye sahip olduğunu gösterir. Boya çözünürlüğü testi, suda çözünür bir boyanın (metil turuncu) ME sistemi boyunca eşit olarak dağıldığını ortaya çıkardı, bu da oluşturulan ME'nin O/W tipi olduğunu ima etti (veriler gösterilmemiştir). Mikrograflar, küresel bir çerçeveye sahip ayrı tek ME5 damlacıklarını ortaya çıkardı (Şekil 4). Exvivo cilt geçirgenliği çalışması. Test edilen tüm araçların geçirgenlik profilleri sıfır dereceli salım kinetiğini (26,27) izledi ve ME5 en yüksek transdermal PG akışını sağladı (86.795±0.23 µg/cm{{28) }} /h-1; Şekil 5; Tablo III). Bu çalışmada, yağ içeriği ve yüzey aktif madde karışımının PG'nin deri geçirgenliği üzerindeki etkileri belirlenmiştir. Sonuçlar, sürfaktanların membran akışkanlığını, ilaç çözünürlüğünü ve stratum corneumdan lipidin ekstraksiyonunu artırarak deri geçirgenliğini arttırdığını göstermiştir. ME5'in geçirgenlik oranı (86.795±0.23µg/cm-2 /h-1 ) ME1'in geçirgenlik oranlarına (69.57±{) kıyasla önemli ölçüde arttı {48}}.78, P=0.0094), ME2 (44.326±0.84, P{{50}}) .0052), ME3 (79.859±0.12, P=0.039) ve ME4 (58.332±0.39 µg/cm-2 /sa-1 , P=0.0063, Şekil 5; Tablo III) Bu, ME ilaç yükünün termodinamik aktivitesinin yüzey aktif madde seviyelerinin artmasıyla azalabileceği önceki bir çalışmanın sonuçlarıyla tutarlıydı (12,28). ). ME5'in viskozitesi (30.43±0.12 mPa.s) diğer ME1 (80.51±0.87 mPa.s, P=0.0076), ME2 (47.52±0.54 mPa.s, P{{88) ile karşılaştırıldığında daha düşüktü. }}.0089), ME3 (60.49±1.34 mPa.s, P=0.0094) ve ME4 (43.27±0.21 mPa.s, P=0.0059).