Bölüm Ⅱ Qi Sui Zhu Shui Alçısı AQP1'i Engeller ve MAPK Sinyali Sirotik Assitlerin Neden Olduğu Karaciğer Hasarını Azaltır

Sonuçlar

1. Sirotik Assit Lezyonları.

Şekil 1(a)'da gösterildiği gibi, çekirdek belirgin bir mavi renkte hematoksilin ile boyanır. Sitoplazma ve hücre dışı matristeki bileşenler, farklı kırmızı tonlarında eozin ile boyandı. Model grubundaki hepatositlerin tümü steatoz gösterdi, dördüncü hafta numunelerinde psödolobüler yapılar barizdi ve altıncı hafta numuneleri, düzensiz hepatosit düzenlemesi, hepatosit dejenerasyonu ve nekroz, fibröz bağ dokusunun bariz proliferasyonu ile sklerotik nekrotik özellikler gösterdi. ve psödolobüler yapıların kapsamlı oluşumu. On hafta artı üç gün karbon tetraklorid-zeytinyağı enjeksiyonundan sonra, model grubundaki sıçanlar vücut ağırlıklarını yavaş yavaş artırdılar ve birinci haftadan sonra kontrol grubu ile model grubu arasında vücut ağırlıklarında önemli bir fark oluşmaya başladı ( P < 0.001) ve karın çevresi katsayısı (karın çevresi/vücut ağırlığı) hesaplandı ve kontrol grubundaki sıçanların karın çevrelerini ve vücut ağırlıklarını normal olarak arttırdıkları bulundu. Aksine, model farelerin karın çevresi zamanla artmaya devam etti. Model grubunda karın çevresindeki artış, 3. haftada kontrol grubundakinden önemli ölçüde daha fazlaydı (Şekil 1(b)). Bu nedenle sirotik asit, sıçanlarda karın çevresinde anormal bir artışa ve karaciğerde ciddi hasara yol açabilir.

2. QSZSP, Sirotik Assitlerin Neden Olduğu Visseral Hasarı Hafifletir.

Şekil 2'de görüldüğü gibi siroz model grubunda karaciğer yapısı bozuldu ve yaygın vakuol benzeri dejenerasyon görülebiliyor ve böbrek dokusu hasarı, glomerüler hipertrofi, tilakoid bölgenin stromasında artış, enflamatuar hücre infiltrasyonu, glomerüler epitelyal hücre ayrılması ve böbrek tübülleri genişledi; peritoneal mezotel hücreleri artmış, submezotelyal stroma kalınlaşmış ve peritoneal doku kalınlaşmıştır. Yüksek doz QSZSP ile dört haftalık tedaviden sonra karaciğer doku yapısı, ortalanmış çekirdekler ve kırmızı lekeli sitoplazma ile sağlamdı; glomerüllerin çoğu normal yapıya ve normal tübüllere sahipti; model grubuna kıyasla peritoneal mezotel hücreleri döküldü ve peritoneal doku kalınlığı azaldı

3. QSZSP, Sirotik Asitli Sıçanlarda Karaciğer Fonksiyonuyla İlgili Faktörleri Düzenler.

Şekil 3'te gösterildiği gibi, model grubundaki TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na ve Ca konsantrasyonları önemli ölçüde daha yüksekti (P ​​< 0.0{{5} }1) kontrol grubundakilere göre ve yüksek dozlarda QSZSP ile tedaviden sonra önemli ölçüde azaldı. Model grubundaki ALB konsantrasyonları, kontrol grubundakinden önemli ölçüde daha düşüktü (P < 0.001) ve yüksek dozda QSZSP ile tedaviden sonra konsantrasyonları önemli ölçüde arttı (P < 0.001). Yukarıdaki iki sonucu birleştirerek, QSZSP'nin sirotik asidin neden olduğu karaciğer, böbrek ve peritoneal hasarı hafifletmek için karaciğer fonksiyonuyla ilgili faktörleri modüle edebildiği bulunabilir.

4. QSZSP, Karaciğer, Böbrek ve Peritondaki AQP1 Protein Ekspresyonunu Düzenler.

Şekil 4'te gösterildiği gibi sirotik asit, sıçanların karaciğerinde, böbreğinde ve peritonunda anormal derecede yüksek AQP1 proteini ekspresyonuna yol açar (P < 0.001). Model grubuyla karşılaştırıldığında, düşük doz QSZSP ile tedaviden sonra AQP1 protein ekspresyonu azaldı ve yüksek doz QSZSP ile tedaviden sonra önemli ölçüde azaldı (P < 0.001), ancak karaciğer, böbrek ve peritonda AQP1 protein ekspresyonu hala aynıydı. şu anda kontrol grubundakinden daha yüksek. QSZSP, sirotik asidin neden olduğu AQP1 proteini yüksek ekspresyonunu inhibe edebildi.

5. QSZSP, MAPK Sinyal Yolunu Engeller.

Şekil 5'te gösterildiği gibi, model grubundaki p-ERK, p-JNK ve p-p38'in aktivasyonu karaciğer, böbrek ve peritonda eş zamanlı olarak tespit edildi. p-ERK, p-JNK ve p-p38'in protein ekspresyonu, QSZSP işleminden sonra azaldı ve p-ERK, p-JNK ve p-p38 protein ekspresyon seviyeleri önemli ölçüde düşüktü (P < 0. 001) model grubundakilere göre yüksek doz QSZSP tedavisinden sonra.

6. QSZSP, Sirotik Asitli Sıçanlarda Karın Çevresini İndükler.

Şekil 6'da gösterildiği gibi, dört haftalık tedaviden sonra, model grubun sıçan vücut ağırlığı her zaman diğer üç gruptan daha düşüktür ve yüksek dozda QSZSP ile tedaviden sonra, sirotik asitli sıçanların vücut ağırlığında önemli bir artış görülmüştür ve QSZSP düşük doz tedavi grubundaki sıçanların vücut ağırlığı da model grubundan daha yüksekti (Şekil 6(a)). İlginç bir şekilde, QSZSP yüksek doz grubundaki fareler, vücut ağırlığındaki artışla birlikte karın çevresinde azalma eğilimi gösterdi ve dört haftalık tedaviden sonra, QSZSP yüksek doz grubundaki fareler, model grubundan önemli ölçüde daha düşüktü. HE boyama sonuçlarıyla birleştirildiğinde, QSZSP'nin sirotik asidin neden olduğu organ hasarını hafiflettiğini ve karın çevresindeki anormal büyümeyi azalttığını gösterebilir.

Tartışma

Siroz asidi, sirozun dekompanse fazı sırasında faktörlerin bir kombinasyonunun neden olduğu karın boşluğunda sıvı birikmesinin patolojik bir olgusudur ve sirozun dekompanse fazında en sık görülen ilk olaydır. Karaciğer hastalığı olan hastalara dayanılmaz ağrılar getirip yaşam kalitesini önemli ölçüde düşürmesinin yanı sıra su-elektrolit bozukluklarına ve vücudun iç ortamının bozulmasına neden olarak karaciğer ensefalopatisi, üst gastrointestinal kanamalar ve mide-bağırsak kanamaları gibi ciddi komplikasyonlara yol açabilmektedir. hepatorenal sendrom ve karaciğer hastalığı olan hastalarda ölüme yol açan ana faktörlerden biridir [31, 32]. Araştırmalar, siroz asidi olan hastaların 3-yıllık morbidite ve mortalite oranının yüzde 50 ve 5-yıllık sağkalım oranının yalnızca yüzde 5-10 olduğunu göstermiştir [33]. Bu çalışma, sirotik asitin yalnızca ciddi karaciğer, periton ve böbrek hasarına yol açtığını değil, aynı zamanda sirotik asitli sıçanların kilo alımını yavaşlattığını ve karın çevresinde aşırı büyümeyi de buldu (Şekil 1). 4 haftalık tedaviden sonra sıçanlar kilo almaya başladı ve karın çevreleri küçüldü (Şekil 6).

Almak için buraya tıklayınCistanche'nin faydaları

Kravat ve ark. [29], prostat kanseri hücrelerinde hipoksi kaynaklı AQP1 protein yukarı regülasyonunu ap38-bağımlı bir şekilde, AQP1'in hipoksi tarafından transkripsiyon seviyesinde indüklendiğini ve PC-3M'deki AQP1 düzenlemesinin bağımlı olduğunu buldular. kalsiyum, PKC ve p38MAPK ile oksijen gerilimi üzerinde. AQP1, lenfatik damarlarda, kılcal damarlarda ve küçük damarların endotel hücrelerinde yaygın olarak eksprese edilir ve karaciğer, periton, böbrek, plevra, solunum yolu, özofagustan kolona kadar sindirim sistemi, kalp kası, düz kas ve beyinde dağılır. 24]. Huebert ve ark. [34], karaciğer fibrozunun erken evrelerinde, karaciğer dokusu hücre zarları üzerindeki AQP1 ekspresyonunun, karaciğer fibrozunun derecesi ilerledikçe buna uygun olarak arttığını bulmuşlardır. Liu ve ark. [30, 35], peptidoglikanın, p38 MAPK transdüksiyon yolağının bir inhibitörü olduğunu ve lipopolisakaritin, nihayetinde insan plevral mezotelyal hücrelerinde AQP1 ekspresyonunun aşağı regülasyonuna neden olan AQP1 geni üzerinde etkili olan p38/JNK/ERK yolunun bir inhibitörü olduğunu bulmuşlardır. AQP1 ifadesinde doza bağımlı ve zamana bağımlıdır. Bu çalışmada QSZSP, sirotik asitli sıçanların "karaciğer periton-böbrek" ekseninde sirotik asidin neden olduğu AQP1 proteini yüksek ekspresyonunu inhibe edebildi. QSZSP, sirotik asidin neden olduğu AQP1 proteini yüksek ekspresyonunu inhibe edebildi ve "karaciğer periton-böbrek" eksenindeki MAPK sinyal yolu da bu sırada inhibe edildi. Bu, MAPK sinyal yolunun aktivasyonunun, sirotik asitli sıçanların "karaciğer-periton-böbrek" eksenindeki organ hasarına karıştığını ve AQP1 ile ilişkili olduğunu gösterdi. Son olarak, tedavi edilen sıçanların serumda daha düşük Cr ve TBiL'ye ve önemli ölçüde daha yüksek ALB'ye sahip olduğu bulundu; bu, tedaviden sonra vücut ağırlığındaki artışla birleştiğinde, QSZSP'nin yaşam kalitesini iyileştirme üzerinde bir miktar etkisi olduğunu gösterdi.

Cistanche özü

Ancak sirotik asitli hastaların tedavisi için ilaç su alımını artıracaktır ki bu hastalıkta su kısıtlaması ilkesine aykırıdır; özellikle çok sayıda asidi olan hastalarda ilaç uygulaması hastanın karın şişkinliği semptomlarını daha da artıracaktır ve uyumları zayıftır. Geleneksel Çin tıbbı ile sirotik asit tedavisi arasındaki çelişkiyi su kısıtlaması ile çözebilen ve doğrudan hastalıklı bölgeye etki edebilen Çin tıbbı, geleneksel Çin tıbbında önemli bir harici tedavi yöntemidir. QSZSP'nin jel formunun formülasyon sürecinin, kalite standardının ve güvenliğinin geliştirilmesi önceki aşamada tamamlanmıştır [36–39].

Sirozda asit oluşumunun mekanizması ile ilgili önceki çalışmalar, siroz tarafından portal hemodinamiğin değiştirilmesi, böbreğin su ve sodyum tutma etkisi veya her ikisinin tetiklediği hormonal değişiklikler gibi karaciğer ve böbreğin patolojik rolüne odaklanmıştır. , sirozda asit oluşumunda peritonun rolünü ve organik bir bütün olarak karaciğer-periton-böbreğin rolünü ihmal etmek.

Cistanche tozu

Önceki çalışmaya dayanarak, bu çalışma sirotik asitte su metabolizması bozukluğunun patolojik doğasını başlangıç ​​noktası olarak aldı ve "karaciğer-periton-böbrek" ekseninin su metabolizmasının işlevsel bir ekseni olduğu hipotezini ilk öneren oldu. ortak malzeme temeli olarak aquaporins proteini ile peritoneal sıvının "üretim-absorpsiyon-tükenme"sinde yer alır ve sirotik asit oluşumunda anahtar rol oynar. QSZSP'nin sirozlu asitli sıçanlarda MAPK sinyal yolunun aktivasyonunu engelleyebildiği ve karaciğer fonksiyonunu koruyabildiği kanıtlanmıştır ve "karaciğer-peritoneal-böbrek" ekseninin AQP1'inin sirozda asit sürecini kolaylaştırıcı bir rol oynadığı bulunmuştur. asit. Çalışma ayrıca, QSZSP'nin "karaciğer-peritoneal-böbrek" ekseninde AQP1 ekspresyonunu düzenlediğini ve böylece asidi bloke etme terapötik etkisine ulaştığını gösterdi. QSZSP, karaciğer, periton ve böbrekte AQP1 ekspresyonunu inhibe ederek karın çevresini azaltır. Bu süreç, QSZSP tarafından MAPK yolu aktivasyonunun inhibisyonu ile ilgilidir.

Birçok çalışma, MAPK sinyal yolunun sirozda asidin düzenlenmesinde rol oynadığını bulmuştur. Bu çalışmada, QSZSP tedavisinden sonra MAPK sinyal yolunun aktivasyonunun inhibe edildiğini bulduk, ancak bu çalışmada QSZSP'nin sirotik asit tedavisi için MAPK sinyal yolunu hedefleyip hedeflemediği bilinmiyor. Bu çalışmanın bir sınırlaması olarak, belki de sirotik asidin tedavisi için QSZSP'deki MAPK sinyal yolunun hedefleme ilişkisi karaciğerin gelecekteki çalışmalarında in vitro olarak doğrulanacaktır.

Çözüm

QSZSP, sirozda asit yaralanmasını hafifletmek için "karaciğer-peritoneal-böbrek" ekseninde MAPK aktivasyonunu ve AQP1 protein ekspresyonunu inhibe eder.

Cistanche'ın etkileri

Cistanche tubulosa'nın sirotik asidin neden olduğu karaciğer hasarı üzerindeki etkisi

Siroz, karın boşluğunda sıvı birikmesi anlamına gelen asit de dahil olmak üzere çeşitli komplikasyonlara yol açabilen kronik bir karaciğer hastalığıdır. Sirotik asit sıklıkla karaciğer hasarına neden olarak yüksek morbidite ve mortalite oranlarına yol açar. Cistanche tubulosa (CT), uzun yıllardır karaciğer ve böbrek hastalıklarını tedavi etmek için kullanılan geleneksel bir Çin bitkisel ilacıdır. Son araştırmalar, CT ekstraktının anti-inflamatuar, antioksidan ve immünomodülatör etkiler gibi çeşitli terapötik özelliklere sahip olabileceğini öne sürdü. Ayrıca CT ekstraktının karaciğer ve kalp gibi birçok organ üzerinde koruyucu etkileri olduğu bulunmuştur. Bu nedenle araştırmacılar, CT ekstraktının sirotik asit kaynaklı karaciğer hasarında terapötik bir potansiyele sahip olup olmadığını araştırdılar. Hayvan modellerinde yapılan ön çalışmalar, CT ekstraktı ile yapılan tedavinin karaciğer hasarı belirteçlerinde önemli azalmalara ve karaciğer fonksiyon göstergelerinde iyileşmeye yol açtığını göstermiştir. CT ekstresi, doku rejenerasyonunu teşvik etmenin yanı sıra iltihaplanmayı ve oksidatif stresi azaltma kabiliyeti sayesinde bu yararlı etkileri gösterebilir. Bununla birlikte, insan denemelerinde CT ekstraktının güvenliğini ve etkinliğini belirlemek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.

Referanslar

[28] E. McCoy ve H. Sontheimer, "MAPK, yaralanmayı takiben astrositlerde AQP1 ifadesini indükler", Glia, vol. 58, hayır. 2, s. 209–217, 2010.

[29] L. Tie, N. Lu, XY Pan, ve diğ., "Prostat kanseri hücrelerinde hipoksi kaynaklı aquaporin-1 proteininin a38-bağımlı bir şekilde yukarı regülasyonu", Hücresel Fizyoloji ve Biyokimya: Uluslararası Deneysel Hücre Fizyolojisi, Biyokimya ve Farmakoloji Dergisi, cilt. 29, hayır. 1-2, s. 269–280, 2012.

[30] L. Liu ve C. Xie, "Aquaporin1'in MeT-5A hücrelerinde MAPK yolları aracılığıyla peptidoglikan ve lipopolisakarit tarafından aşağı regülasyonunun etkileri", Lung, vol. 189, hayır. 4, s. 331–340, 2011.

[31] J. Uriz, A. C´ardenas ve V. Arroyo, "Sirozda asidin patofizyolojisi, teşhisi ve tedavisi," Best Practice & Research Clinical Gastroenterology, cilt. 14, hayır. 6, s. 927–943, 2000.

[32] W. Hou ve AJ Sanyal, "Assit: teşhis ve tedavi", Kuzey Amerika Tıbbi Klinikleri, cilt. 93, hayır. 4, s. 801–817, 2009.

[33] BS Sandhu ve AJ Sanyal, "Sirozda asit yönetimi", Karaciğer Hastalığı Klinikleri, cilt. 9, hayır. 4, s. 715–732, 2005.

[34] RC Huebert, MM Vasdev, U. Shergill, ve diğerleri, "Aquaporin-1, siroza eşlik eden patolojik neovaskülatürde anjiyojenik istilayı kolaylaştırır" Hepatology, cilt. 52, hayır. 1, s. 238–248, 2010.

[35] L. Liu, L. Du, Y. Chen ve diğerleri, "Aquaporin1'in (AQP1) birincil sıçan plevral mezotel hücrelerinde p38 MAPK yolları yoluyla peptidoglikan tarafından aşağı regülasyonu", Deneysel Akciğer Araştırması, cilt. 40, hayır. 4, s. 145–153, 2014.

[36] QH Yuehong, "Qisui Zhushui jel kremi için etanol ekstraksiyon işlemi üzerine çalışma", Hunan Geleneksel Çin Tıbbı Dergisi, cilt. 30, hayır. 10, s. 150–152, 2014.

[37] MD Qiu Hua, X. Liu ve Y. Guo, "Qisui Zhushui jel merheminin su çıkarma teknolojisi üzerine çalışma", Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy, cilt. 21, hayır. 2, s. 60–63, 2015.

[38] WN Qiu Hua, X. Liu, D. Mao, X. Xing ve Y. Guo, "Qishui Zhushui jel merhemlerinin kalite standardı üzerine çalışmalar," Geleneksel Çin Tıbbı Liaoning Üniversitesi Dergisi, cilt. 18, hayır. 3, s. 540–544, 2016.

[39] MD Qiu Hua, X. Liu ve Y. Guo, "Ortogonal test yoluyla optimize edilmiş Qishui Zhushui jel merhemlerinin matris formülasyonu," Guangxi Geleneksel Çin Tıbbı Dergisi, cilt. 37, hayır. 5, s. 4, 2014.

Rong Zhen Zhang 1 Yin Liu 1 Min Li 2 Yong Lin Huang 3 ve Zhen Heng Song 3

1 Hepatoloji Bölümü, Çin Tıbbı Guangxi Üniversitesi'ne Bağlı İlk Hastane, Nanning, Çin

2 Guangxi Çin Tıbbı Üniversitesi'ne Bağlı İlk Hastane, Tıbbi Laboratuvar Bölümü, Nanning, Çin

3 Hepatoloji Bölümü, Guangxi Çin Tıbbı Üniversitesi, Nanning, Çin