SLC37A2, Kalsifiye Aorttaki Düz Kas Hücrelerinde Artan Fosforla İlgili Bir Molekül Ⅱ

Sonuçlar

Aday molekülleri arayınfosfat kaynaklı kalsifiyeAoSMC. Kalsifiye AoSMC'de ekspresyonu artan molekülleri araştırmak için, kalsifiye AoSMC ve kalsifiye olmayan AoSMC mRNA kullanılarak yaklaşık 26,000 genin DNA mikrodizi analizi gerçekleştirildi. Şekil 1, 2,6 mM ile kültürlenmeyen AoSMC ile 12 gün boyunca 2,6 mM P ile kültürlenenler arasında ifade edilen farklı genlerin Isı Haritasını gösterir. Toplam 3.066 gen, kültürlenmiş ve kültürlenmemiş AoSMC'de iki kattan fazla arttı. Ekspresyonu artan genler, osteopontin, periostin osteoblast spesifik faktör (POSTN), Wnt3, interlökin-6 gibi osteoblast oluşumuyla ilişkili moleküllerdi. (IL-6) vefibroblast büyüme faktörü23 (FGF23) ve ayrıca SLC süper ailesindeki birkaç molekül (Tablo 1). Bu moleküller arasında, 2,6 mM P ile kültürlenmeyen AoSMC'ye kıyasla 12 gün boyunca 2,6 mM P ile kültürlenen AoSMC'de mRNA'nın yaklaşık 3,1 kat arttığı SLC37A2'ye odaklandık. SLC37A2'nin P düzenlemesi ile ilişkili olduğu bildirildi, ancak ayrıntılı işlevi bilinmiyor etkisi SLC37A2 ekspresyonundaki inflamasyon.Damar kalsifikasyonuEnflamasyon tarafından teşvik edildiği bildirildi, bu nedenle SLC37A2 mRNA'nın inflamatuar yanıttan etkilenip etkilenmediğini inceledik. LPS tedavisinden 24 saat sonra IL-6, LPS ile tedavi edilmeyen AoSMC'ye kıyasla önemli ölçüde arttı (Şekil 2A). Bu sonuçlar LPS tedavisinden 72 saat sonra da görüldü. SLC37A2mRNA ifadesinde gruplar arasında anlamlı bir fark yoktu (Şekil 2B).

BÖBREK İŞLEVLERİNE YÖNELİK %25 EKİNAKOSİT VE %9 AKTEOSİT İÇEREN DOĞAL ORGANİK SİSTANŞ EKSTRATINI ALMAK İÇİN BURAYA TIKLAYIN

Wecistanche Destek Hizmeti-Çin'deki en büyük cistanche ihracatçısı:

E-posta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Daha Fazla Özellik İçin Alışveriş Yapın Detaylar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Fosfat kaynaklı kalsifiye AoSMC'de SLC37A2'nin ekspresyonu. SLC37A2'nin kalsifikasyona dahil olup olmadığını belirlemek için, kalsifiye olmayan ve kalsifiye AoSMC'de SLC37A2 mRNA'nın ekspresyonunu inceledik (Şekil 3). 6 gün boyunca 2,6 mM P ile kültürlenen AoSMC'de kalsifikasyon gözlendi ve 12 gün boyunca 2,6 mM P ile kültürlenen AoSMC'de daha ileri düzeyde kalsifikasyon gözlendi (Şekil 3A). Runx2 mRNA, kalsifiye olmayan AoSMC'ye kıyasla kalsifiye AoSMC'de önemli ölçüde arttı (Şekil 3B). SLC37A2 mRNA, kalsifiye AoSMC'de 3. günde önemli ölçüde artmaya başladı ve 9. günde kalsifiye AoSMC, kalsifiye olmayan AoSMC'ye kıyasla yaklaşık iki kat önemli ölçüde arttı (Şekil 3B). .3C). SLC37A2 proteininin ekspresyonu, kalsifiye olmayan AoSMC ile karşılaştırıldığında kalsifiye AoSMC'de 6. günde yaklaşık iki kat arttı (Şekil 3D).

CKD model sıçanlarda SLC37A2'nin ifadesi.

SLC37A2'nin in vivo vasküler kalsifikasyona dahil olup olmadığını ortaya çıkarmak için adenin kaynaklı CKD sıçanlarının damarlarında SLC37A2 mRNA ekspresyonunu inceledik. Adenin kaynaklı CKD fareleri, Şekil 4A'da gösterilen protokole göre oluşturuldu. Tablo 2 kurban gününde vücut ağırlığını ve biyokimyasal verileri göstermektedir. Vücut ağırlığıadenin kaynaklı KBHsıçanlarda KBH olmayan sıçanlarla karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha düşüktü. KBH olmayan grupla karşılaştırıldığında, KBH grupları daha yüksek plazma P ve Cr düzeylerine, daha düşük plazma Kal seviyelerine ve 24-saatlik idrarda P, Ca ve Cr atılımına sahipti. Ayrıca önceki çalışmalarda görüldüğü gibi bu sonuçlar KBH-HP grubunda daha belirgindi.37,39) Böylece KBH grubunda, özellikle CKD-HP grubunda böbrek fonksiyonu azaldı. CKD sıçanlarının aort damarlarındaki mRNA ekspresyonunu inceledik (Şekil 4). Vasküler kalsifikasyon mekanizmasında erken hareket eden bir transkripsiyon faktörü olan Runx2 mRNA'nın ekspresyonunda anlamlı bir fark olmamasına rağmen, osteopontin mRNA'nın gruplar arasında (Şekil 4B) ekspresyonu, CKD-HP grubunda olmayanlara kıyasla önemli ölçüde arttı. CKD grubu veCKD-LP grubu(Şekil 4C). SLC37A2 mRNA ekspresyonu da CKD-HP grubunda, CKD olmayan grup ve CKD-LP grubuyla karşılaştırıldığında önemli ölçüde arttı (Şekil 4D). Bu sıçanlarda büyük bireysel farklılıklar olduğu için osteopontin ile SLC37A2 mRNA arasındaki korelasyonu inceledik ve bu moleküller arasında anlamlı bir korelasyon bulduk (Şekil 4E). Torakoabdominal aortun histolojik incelemesi, yalnızca CKD-HP grubunun aortunda medial kalsifikasyon olduğunu ortaya çıkardı (Şekil 5A). SLC37A2'nin aort üzerindeki ekspresyon bölgesini incelemek için CKD-HPratların aortunun immün boyamasını gerçekleştirdik. SLC37A2, bulunduğu bölgede güçlü bir şekilde ifade edildi.damar kalsifikasyonumeydana geldi (Şekil 5B).

Şekil 1. 2,6 mM P ile kültürlenmiş AoSMC ile 2,6 mM P ile kültürlenmiş AoSMC arasındaki farklı şekilde eksprese edilen genlerin Isı Haritası. Kırmızı, yüksek sinyal seviyesine sahip genleri temsil eder ve yeşil, düşük sinyal seviyesine sahip genleri temsil eder. AOSMC aortik düz kas hücreleri. Çevrimiçi versiyondaki şekle bakın.

Tartışma

Vasküler kalsifikasyonda yer alan aday P ile ilişkili molekülleri araştırdık. Sonuçlarımız SLC37A2'nin artan moleküllerden biri olduğunu gösterdi.damar kalsifikasyonuin vitro ve in vivo.

SLC37 ailesi, SLC süper ailesine aittir ve proteinleri içerir: SLC37A 1-440) SLC37 ailesi, endoplazmik retikulum membranında transmembran proteinleri içerir ve bakteriyel organofosfatfosfat antiporterine homolog bir diziye sahiptir.(41) SLC37A4, daha iyi bilinen adıylaglikoz6-fosfat taşıyıcı.(2-44 Bununla birlikte, SLC37A2 hakkında az sayıda rapor vardır ve işlevi hakkındaki ayrıntılar tam olarak anlaşılamamıştır. SPX2 olarak da bilinen SLC37A2, fare makrofajlarında, dalakta, timusta ve beyaz yağ dokusunda (WAT) bol miktarda eksprese edilir. ) genetik olarak obez fare modellerinden ve Raw264.7 hücrelerinden türetilmiş osteoklast benzeri hücrelerden elde edilmiştir.(45.6) SLC37A2 proteini hem glukoz-6-fosfat/fosfat hem de fosfat/fosfat değişimlerini taşır.(4) Son zamanlarda, raporlar aşağıdakilerin bir ilişkisini göstermiştir: Hayvan hastalığına sahip SLC37A2. (47-49) Bir SLC37A2 kusuru,kraniomandibular osteopati(CMO), terrier ırklarında kendini sınırlayan proliferatif bir kemik hastalığıdır. (47) Süt sığırlarında embriyonik ölümden SLC37A2 homozigot mutasyonu sorumludur. (8.9) Ayrıca. SLC37A2, D vitamini hedef genleri için bir hedef olarak kabul edilmiştir. (yani) Fosfor-Ser294 progesteron reseptörü hedef geninin meme kanserinin ilerlemesindeki potansiyeli de dikkate alınmıştır(1)İnflamasyonun vasküler kalsifikasyona hem neden olabileceği hem de şiddetlendirebileceği rapor edilmiştir. (2s26) Üstelik. SLC37A2, makrofaj infiltrasyonundan etkilenen makrofajlarda ve WAT'ta bol miktarda eksprese edilir. (s) Bu nedenle. SLC37A2'nin iltihaplanma sırasında ifade edilen bir molekül olabileceğini düşündük. Ancak bulgularımız, inflamatuar bir tepkiye maruz kalan AoSMC'de SLC37A2 ekspresyonunda bir artış olmadığını gösterdi; bu molekül, inflamatuar uyarıdan doğrudan etkileniyor gibi görünmüyor. SLC37A2, inflamasyondan başka bir mekanizma yoluyla vasküler kalsifikasyona karışabilir.

SLC37A2'nin P-bağlantılı olarak görev yaptığı rapor edilmiştir.kapıcı karşıtı. (41) Ek olarak, SLC37A2'nin D vitamini için hedef gen olduğu ve SLC37A2 geninin majör bir D vitamini reseptörü bağlanma bölgesi (ss2) içerdiği rapor edilmiştir. SLC37A2 genlerinin ekspresyonunda ve D vitamininin dolaşımdaki formlarında sistematik olarak ilişkili değişiklikler vardır. insan periferik kan mononükleer hücrelerinde görülmüştür. (50)D vitamini reseptörleri, D vitamininin bir metaboliti olan 1a 25-dihidroksi D vitaminine bağlanır ve gen ifadesini düzenler. lo, 25dihidroksivitamin D, bağırsakta Ca ve P'nin emilmesinde, kemikte Ca mobilizasyonunda ve böbreklerde Cain'in yeniden emilmesinde görev yapar. (3) Adenin kaynaklı KBH model sıçanlarda serum la, 25-dihidroksi D vitamininin, yüksek p'li diyetle beslenen ve ilerlemiş vasküler kalsifikasyona sahip farelerde, düşük p'li sıçanlara kıyasla önemli ölçüde daha yüksek olduğuna dair bir rapor vardır. -p diyet alımı.39) SLC37A2, D vitamini yoluyla P regülasyonu ile ilişkili olabilir. D vitamininin in vitro ve Vivo'da SLC37A2 ekspresyonunu etkilediğini açıklığa kavuşturmak için daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.

Vasküler kalsifikasyon mekanizmasının kemik oluşumuna benzer olduğu gösterilmiştir. CMO'nun neden olduğu SLC37A2 eksikliği, Caffey hastalığı olarak da bilinen insan infantil kortikal hiperostozu ile klinik olarak karşılaştırılabilir.7 Ayrıca SLC37A2'nin kemik iliğinde ve osteoklastlarda eksprese edildiğine dair raporlar vardır.o Hytone ve ark.(7, SLC37A2, osteoblastik ve osteoklastik kemik oluşumunun fonksiyonunda dengesizliğe neden olur ve bunun sonucunda hiperostoz meydana gelir.

Runx2 vasküler kalsifikasyon için önemli bir transkripsiyon faktörüdür. Ayrıca Runx2'nin gelişen meme epitel hücrelerinde eksprese edilen bir osteoblast farklılaşma transkripsiyon faktörü olduğu da bildirilmektedir. (s435) Runx2'nin meme kanseri ilerlemesiyle ilişkili fosfor-Ser294 progesteron hedef genlerinin düzenlenmesi için gerekli olduğu görülmektedir. SLC37A2, aday fosfor-Ser294 progesteron reseptörü hedef geni olarak kabul edilir. (s1)Bu nedenle Runx2'nin SLC37A2'yi düzenleyebileceği düşünülmektedir. Bu çalışmada, CkD sıçanlarının aortundaki SLC37A2 mRNA'nın ekspresyonu, Runx2 genini hedefleyen osteopontin mRNA ile korele bulunmuştur.