Cistanche Deserticola Gouqi Jujuepian'ın Kalite Standardı Üzerine Çalışma

PU Hongli,ZHOU Bo,WEI Shuchang (Eczacılık Okulu,Gansu Çin Tıbbı Üniversitesi,Lanzhou,Gansu,730000,Çin)

Soyut:Amaç Ｒoucongrong Gouqi Jujuepian'ın kalite kontrol yöntemlerini oluşturmak.Yöntemler Ｒoucongrong ( Cistanches Herba) ve Gouqizi( Lycii Fructus)'u tanımlamak için TLC kullanıldı. ．Echinacoside ve verbascoside içeriğini belirlemek için HPLC kullanıldı.HPLC analizi 25 derecede bir Hypersil BDS C18( 250．0 mm×4．6 mm,5 μm) kolonu ．Metanol ve 0．1 yüzde formik asit ile izokratik elüsyon kullanıldı 1 mL/dk akış hızında. 20 μL örnek solüsyondan oluşan bir alikot kolona enjekte edildi ve algılama dalga boyu 330 nm idi. Ｒoucongrong ( Cistanches Herba) ve Gouqizi( Lycii Fruc tus)'un sonuçları TLC lekelerinin özellikleri, güçlü bir özgüllükle açıktı.Echinacoside ve verbascoside'ın lineer aralıkları 41．8 ila 418．0 ug / mL ( r=0}． { {17}}) ve 40 ila 400 ug/mL ( r=0． 999 9) ． Ortalama örnek geri kazanımları 99 idi. Yüzde 58 (ＲSS=0．85 yüzde) ve yüzde 99．31 (ＲSD= 1．yüzde 13 ) ．Sonuç Bu makalede bildirilen yöntemler, Ｒoucongrong Gouqi kalitesini değerlendirmek için bilimsel ve etkili bir şekilde kullanılabilir. Jujuepian.

anahtar kelimeler: Cistanche Deserticola Gouqi Jujuepian; HPLC; TLC; ekinakozit; verbascoside; kalite standardı

Cistanche Deserticola ve Goji Berry

Cistancheçöl şerbetive goji çiğneme tabletleri, yorgunluğu geciktirme ve yorgunluğun atılmasını hızlandırma gibi sağlık işlevleri olan Cistanche ve goji meyvelerinden oluşur.. Vücut fonksiyonlarını düzenlemeye, bağışıklığı güçlendirmeye ve alt sağlık koşullarını ortadan kaldırmaya yardımcı olurlar.Şu anda, uzun çalışma saatleri ve yüksek iş baskısı nedeniyle, Çin'de bazı sektörlerde yorgun ve sağlık durumu düşük birçok insan var [1-3]. Bu endüstri grupları, bu sağlıklı gıda için ana uygun popülasyondur. Su olmadığında bile zamanında uygulanabilen çiğneme tableti olarak geliştirdik. Tablet çiğnendikten sonra yutulması kolaydır ve ilacın çözünmesini hızlandırarak terapötik etkiyi artırabilir [4]. Bu makale, çiğneme tabletlerinin kalite standartlarını incelemektedir ve elde edilen kalitatif ve kantitatif analiz yöntemleri, çiğneme tabletlerinin iç kalitesini nesnel olarak yansıtabilir ve formülasyon için kalite kontrol standartları olarak hizmet edebilir.

Cistanche Deserticola gibi Çin tıbbi malzemeleri

1. Alet ve test ilacı

1.1 Aletler

Agilent1260 yüksek performanslı sıvı kromatografı (Agilent, ABD), UV Bluestar B ultraviyole görünür spektrofotometre (Beijing Laibetai Technology Co., Ltd.), WFH-203 (ZF-1) üç yollu ultraviyole analiz cihazı ( Shanghai Jingke Industry Co., Ltd.), BT125D 1/100000 elektronik terazi (Sartorius Scientific Instrument Co., Ltd.), DZF-6090 vakumlu kurutma fırını (Shanghai New Scientific Instrument Co., Ltd.), SY{ {10}}T ultrasonik temizleme makinesi (Shanghai Shengyuan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.), poliamid film (Zhejiang Taizhou Luqiao Sijia Biyokimyasal Plastik Fabrikası).

1.2 İlaçlar ve reaktifler:

ekinesetinreferans madde (parti numarası 111670-201505), havuz kenarı referans maddesi (parti numarası 111530-201411), Cistanche Deserticola referans maddesi (parti numarası 121101-200402) ve Lycium barbarum referans maddesi (parti numarası {{3}) }}) tamamı Çin Gıda ve İlaç Kontrolü Enstitüsünden satın alınmıştır. Cistanche Deserticola ma ve Lycium barbarum çiğnenebilir tabletler, Gansu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Eczacılık Okulu Çin Tıbbı Laboratuvarı tarafından kendi kendine yapılmıştır ve metanol kromatografik olarak saftır, Diğer tüm reaktifler analitik saftır.

Cistanche Deserticola'nın ana kimyasal bileşeni olan Echinoside

2 Yöntem ve Sonuçlar

2.1 İnce tabaka kromatografisi (TLC) tanımlaması

2.1.1 Cistanche Deserticola'nın TLC tanımlaması

Uygun miktarda Cistanche Deserticola ve goji berry çiğneme tableti alın ve toz haline getirin. 1,5 g ince toz alın ve bir konik şişeye koyun. 20 mL metanol ekleyin ve 15 dakika boyunca ultrasonla (güç 250 W, frekans 40 kHz) işleyin. Soğutun ve süzün. Süzüntüyü neredeyse kuruyana kadar konsantre edin ve kalıntıyı test solüsyonu olarak 5 mL metanol içinde çözün. 1 g referans şifalı bitki Cistanche Deserticola alın ve aynı yöntemi kullanarak referans şifalı bitkiden bir çözelti hazırlayın. Cistanche Deserticola içermeyen 0,5 g negatif numune alın ve test solüsyonuyla aynı yöntemi kullanarak bir negatif kontrol solüsyonu hazırlayın. Test solüsyonu, negatif kontrol solüsyonu ve referans tıbbi solüsyon μ L'den her birinden 0,5 alın. Numuneleri aynı poliamid film üzerine yerleştirin, geliştirme maddesi olarak metanol buzlu asetik asit suyu (2:1:7) ile geliştirin, çıkarın, havayla kurutun ve ultraviyole ışık (365 nm) altında incelendi. Test örneğinin kromatogramında, referans tıbbi malzeme kromatogramının karşılık gelen konumlarında aynı renge sahip 4 nokta vardır ve negatif kontrolün herhangi bir müdahalesi yoktur. Ayrıntılar için lütfen Şekil 1'e bakın.

Cistanche Deserticola'nın Ana Kimyasal Bileşenleri

Cistanche ürünlerini incelemek için tıklayınız

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1.2 Goji meyvelerinin TLC tanımlaması

Uygun miktarda Cistanche Deserticola ve goji berry çiğneme tableti alın, toz haline getirin, 2,5 g ince tozu bir santrifüj tüpüne tartın, 35 mL suda eritin, santrifüjleyin ve süpernatantı 15 mL etil asetatla ekstrakte edin. Bir etil asetat tabakası alın ve test solüsyonu olarak 1 mL'ye konsantre edin. Referans malzeme olarak 0,5 g kurt üzümü alın, küçük parçalar halinde kesin, 35 mL su ekleyin, ısıtın ve 15 dakika kaynatın, soğumaya bırakın, santrifüjleyin ve süpernatantı 15 mL ile ekstrakte edin etil asetat. Bir etil asetat tabakası alın ve bunu referans malzeme solüsyonu olarak 1 mL'ye konsantre edin. Kurt üzümü içermeyen 2 g negatif numune alın ve test solüsyonunun hazırlama yöntemiyle bir negatif kontrol solüsyonu hazırlayın. Test solüsyonundan 2 numune, negatif kontrol solüsyonundan 2 numune ve referans tıbbi solüsyon μ L'den 2 numune alın. Aynı poliamid film üzerinde spot numuneler alın, etil asetat kloroform formik asit (3:2:1) ile şu şekilde geliştirin: geliştirme maddesi, çıkarın, havayla kurutun ve ultraviyole ışık (365 nm) altında incelendi. Test örneğinin kromatogramında, referans tıbbi malzeme ile ilgili pozisyonda aynı renge sahip bir nokta vardır ve negatif kontrolün herhangi bir etkileşimi yoktur. Ayrıntılar için lütfen Şekil 2'ye bakın.

1. Referans tıbbi malzemeler; 2, 3, test örneği; 4. Negatif kontrol.

Şekil 1 Cistanche Deserticola'nın TLC diyagramı

1. Referans tıbbi malzemeler; 2. Negatif kontrol; 3. Numuneyi test edin.

Şekil 2 Goji meyvelerinin TLC diyagramı

2.2 Fructus Moringa ve Echinacetin'den Glikozitlerin Kantitatif Analizi

2.2.1 Referans solüsyonunun hazırlanması Uygun miktarlarda ekinezyayı kesin olarak tartın ve referans maddeleri sağlayın, bunları kahverengi bir balon jojeye koyun ve 0.836 içeren karışık bir referans solüsyonu hazırlamak için yüzde 50 metanol ekleyin. mililitrede mg ekinezya ve 0,799 mg havuz başı elde edilir [5].

2.2.2 Test solüsyonunun hazırlanması

Uygun miktarda Cistanche Deserticola muşmula çiğneme tableti alın, toz haline getirin (6{10}} gözenekli elekten geçirin), 1,4 g hassas olarak tartın, 50 mL'lik kahverengi bir balon jojeye koyun, teraziye yüzde 50 metanol ekleyin , sallayın, tartın, 30 dakika ıslatın, 40 dakika ultrasonla (güç 250 W, frekans 40 kHz) işleyin, soğutun, tartın, kaybı azaltmak için yüzde 50 metanol kullanın, çalkalayın yukarı kaldırın, hareketsiz durun, süpernatantı alın, mikro gözenekli bir membran ile 0,45 μ Filtre kullanın ve [6] elde etmek için sürekli süzüntü alın.

Cistanche Deserticola'nın Ana Kimyasal Bileşenleri

2.2.3 Negatif kontrol solüsyonunun hazırlanması

Cistanche Deserticola'sız uygun miktarda negatif numune alın, toz haline getirin (60 gözenekli bir elekten elenmiş), 1,4 g hassas bir şekilde tartın ve "2.2.2"deki yönteme göre bir negatif kontrol solüsyonu hazırlayın.

2.2.4 Kromatografik koşullar

Kromatografik kolon Hypersil BDS C18'dir (250.0 mm × 4．6 mm,5 μm) Saptama dalga boyu 330 nm'dir, mobil faz A olarak metanol ve yüzde 0,1 formik asit vardır mobil faz B olarak. Gradyan elüsyon Tablo l'e göre gerçekleştirilir; Akış hızı 1 mL/dk; Sütun sıcaklığı 25 derecedir. Yukarıdaki kromatografik koşullar altında, sırasıyla referans solüsyonun yüzde 20'sini, test solüsyonunun yüzde 20'sini ve negatif kontrol solüsyonunun yüzde 20'sini ekstrakte edin μ L örneğini enjekte edin ve Şekil 3'te gösterildiği gibi kromatogramı kaydedin. Sonuçlar diğer bileşenlerin havuzbaşı ve ekinezya tayinine engel olmadığını, havuzbaşı ve ekinezya ayrımının iyi olduğunu göstermiştir.

Tablo 1 Metanol (A) -0,1 yüzde formik asit (B) mobil fazı için gradyan elüsyon koşulları

2.2.5 Doğrusal ilişki denetimi

{{0}}.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 ve 5.{'yi doğru bir şekilde ölçün {31}} mL ekinezya ve havuz kenarı karışık referans çözeltisi, bunları sırasıyla 10 mL'lik kahverengi ölçülü şişelere koyun, ölçeğe göre yüzde 50 metanolle seyreltin ve "2.2.4" altındaki kromatografik koşullara göre pik alanını belirleyin . Doruk alan integral değeri ordinat (Y) olarak ve enjeksiyon hacmi apsis (X) olarak kullanılarak doğrusal regresyon gerçekleştirildi. Ekinakozit ve havuz kenarı için regresyon denklemleri Y=1493.8X-8.0748 (r=0.999 9) ve Y=1895.8X{{ 25}}.486 (r=0.999 9), sırasıyla. Sonuçlar, Ekinezya ve Moringa antosiyaninlerinin sırasıyla 41.8-418.0 ve 40-400 arasında olduğunu gösterdi μ g/mL aralığında iyi bir doğrusal ilişki vardır.

2.2.6 Kesinlik testi

Ekinezya glikozit ve havuz başı 20 μ L'lik karışık referans solüsyonunu kesin olarak ölçün. Ardışık 5 numune enjekte edin ve pik alanını kaydedin. Sonuçlar, epifiz ve havuz kenarının RSD'lerinin sırasıyla yüzde 0,62 ve yüzde 0,51 olduğunu gösterdi, bu da aletin iyi hassasiyetini gösteriyor.

2.2.7 Stabilite testi

Test solüsyonunun aynı partisini alın ve sırasıyla 0, 4, 8, 16 ve 32 saatte enjekte edin ve pik alanını kaydedin. Sonuçlar, pineal ve havuz başındaki RSD'nin sırasıyla yüzde 1,30 ve yüzde 1,35 olduğunu gösterdi; bu da test solüsyonunun 32 saat içinde kararlı olduğunu gösteriyor.

1. Karışık referans madde; 2. Test numunesi; 3. Negatif kontrol;

A. Ekinesetin; B. Maorui çiçeği glikozidi.

Şekil 3 Ekinesetin ve Fructus Moringae Glikositin HPLC Diyagramı

2.2.8 Tekrarlanabilirlik testi

Aynı partiden 5 numune alın ve bunları test solüsyonunun hazırlama yöntemine göre sırayla hazırlayın ve ölçün. Sonuçlar, epifiz ve havuz kenarının RSD'sinin sırasıyla yüzde 0,82 ve yüzde 0,75 olduğunu gösterdi ve bu, bu yöntemin tekrarlanabilirliğinin iyi olduğunu gösteriyor.

2.2.9 Örnek kurtarma testi

Antosiyanin ve antosiyanin içeriği bilinen 5 numune alın, antosiyanin ve antosiyanin kontrol numunelerine ekleyin, test solüsyonunu "2.2.2"deki yönteme göre hazırlayın ve "2.2"deki kromatografik koşullara göre geri kazanım oranını belirleyin. .4". Sonuçlar, ekinezya glikozit ve havuz başındaki ortalama geri kazanımların sırasıyla yüzde 99,58 ve yüzde 99,31 olduğunu ve RSD'nin yüzde 0,85 ve yüzde 1,13 olduğunu gösterdi. Ayrıntılar için lütfen Tablo 2 ve 3'e bakın.

2.2.10 Numune İçeriği Belirleme

Üç grup numunede ekinakozit ve havuz kenarı içeriğini belirlemek için yukarıdaki belirleme yöntemini kullanın. Sonuçlar Tablo 4'te gösterilmiştir.

Tablo 2 Ekinezya glikozit ilavesi için geri kazanım oranı testinin sonuçları

Tablo 3 Maorui çiçek glikozitlerinin eklenmesi için geri kazanım oranı testinin sonuçları

Tablo 4 Üç parti numunenin içerik belirleme sonuçları

3 Tartışma

Cistanche Deserticola, Cistanche Deserticola ve Lycium barbarum çiğneme tabletlerinin reçetelerinde baskın ilaç olduğundan, formülasyonun büyük bir bölümünü oluşturur. Bu nedenle, kalitatif ve kantitatif analizler Cistanche Deserticola üzerinde, kalitatif analizler ise Lycium barbarum tohumları üzerinde yapılmıştır. Kullanılan yöntem basit, duyarlı ve iyi bir kalite kontrol rolü oynayabilecek şekilde güçlü bir özgüllüğe sahiptir.

Yakınımdaki Cistanche takviyesi

Kantitatif analizde, ekinakozit ve havuzbaşının daha iyi çözünmesini sağlamak için numune tozu önce yüzde 50 metanolde 30 dakika bekletildi ve ardından ultrasonik işleme tabi tutuldu. Çiğnenebilir tabletlerdeki ekinakozit ve havuz kenarı içeriğini doğru bir şekilde belirlemek için ultrasonik ekstraksiyon süresi araştırıldı. 30, 40 ve 50 dakika ekstrakte edilen örneklerle karşılaştırıldığında, ekinacoside ve havuzbaşının 40 dakika sonra tamamen ekstrakte edilebildiği görülmüştür.. Bu makalede oluşturulan yöntem, çiğneme tabletlerinin kalitesini etkili bir şekilde kontrol edebilir.

referans:

[1] Gao Mingyou. Yulin Şehrinin Kentsel Alanlarında Ziraat Bankası Çalışanlarının Alt Sağlık ve Spor Faaliyetleri Üzerine Araştırma [J]. Yulin Üniversitesi Dergisi, 2015 (4): 60-64

[2] Li Huishang, Chen Minghai, Dong Xiaoxia ve ark. Taksi şoförlerinin sağlık durumunun ve etkileyen faktörlerin analizi [J]. Çin Gıda ve Beslenme Dergisi, 2009 (11): 62-64

[3] Ruan Huili, Ruan Ying, Li Yonghong. Acil servis hemşirelerinin yorgunluk durumlarının incelenmesi ve analizi [J]. Çağdaş Hemşireler Dergisi, 2015 (4): 98-100

[4] Shi Xinlei, Huang Shengwu. Çiğnenebilir tabletlerle ilgili araştırma ilerlemesi [J]. China Pharmaceutical, 2008, 17 (14): 17-19

[5] Ulusal Farmakope Komisyonu. Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi (Bölüm 1) [M]. Pekin: China Medical Science and Technology Press, 2015:135

[6] Zhang Siju, Liu Li, Zhang Shuyun ve ark. Cistanche Deserticola tıbbi malzemelerinin kalite standartları üzerine çalışma [J]. Çin Geleneksel Çin Tıbbı Dergisi, 2000, 25 (6): 359