Laminaria Japonica Fucoidan ve Cistanche Tubulosa Ekstraktının Sinerjik Anti-inflamatuar Etkileri
Mar 03, 2022
İletişim: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-posta:audrey.hu@wecistanche.com
Soyut
buantienflamatuvarfucoidan'ın etkileri veCistanche tübüloza (CT) özütü, Vitro makrofaj kültür sisteminde ve in vivo karagenan kaynaklı hava kesesi iltihaplanma modelinde araştırıldı.Cistanche Tubulosaekstrakt, fucoidan aktif değilken, aktive edilmiş RAW 264.7 makrofaj hücrelerinden nitrik oksit üretimini inhibe etti. İn vivo hava kesesi inflamasyon modeli, karagenan kaynaklı vasküler eksüdasyon ve eksüdalardaki artan nitrik oksit ve prostaglandin E2 konsantrasyonları, fucoidan veyaCistanche TtubulosaAyıkla. Ayrıca, doku iltihabı, kombinasyon tedavisi ile büyük ölçüde hafifletildi. Ancak, karşı sinerjik bir etki yoktu.iltihaplıfucoidan ve CT olmasına rağmen hücre infiltrasyonu(Cistanche tübüloza)her birini ayıklayın, hücre sayılarını önemli ölçüde azaltın. Bu nedenle, fucoidan'ın infiltrasyonu bloke etmesi önerilmektedir.iltihaplıhücreler, iken CT(Cistanche tübüloza) özü, hücrelerin aktivasyonunu inhibe eder ve bunların kombinasyon tedavisi, çeşitli iltihaplanma türlerinin giderilmesi için umut verici bir aday olabilir.
Anahtar Kelimeler: Karagenan, inflamasyon, fucoidan, Cistanche tubulosa özü.
Yabancı antijenlere karşı bir bağışıklık tepkisi olarak makrofajlar, tümör nekroz faktörü- (TNF-), interlökin-1 (IL-1), IL-6 ve diğerleri gibi proinflamatuar sitokinler salgılar. [1,2]. Bu tür sitokinler, granülositlerin, monositlerin, lenfositlerin ve mast hücrelerinin hasarlı dokuya kemotaktik akışını indükler, bu da antijenin uzaklaştırılmasını ve doku iyileşmesini destekler [3,4]. Bununla birlikte, hücrelerin aşırı infiltrasyonu ve aktivasyonu, doku yaralanmalarını şiddetlendirerek, iyi bilinen inflamasyon fenomeni olan ödem (vasküler eksüdasyon) ve ağrıya yol açar.
TNF-, birkaç hücre hattında nitrik oksit sentaz (iNOS) gen ekspresyonunu indüklemek için önemli bir faktördür. iNOS aktivasyonu, nitrik oksit (NO) üretimine yol açar[5-7], bu sadece bakterisidal ve vazodilatasyon gibi çeşitli fizyolojik fonksiyonları modüle etmekle kalmaz aynı zamanda inflamasyona da neden olur [8,9]. Doku hasarından sonra, hücre zarı fosfolipidlerinin fosfolipazları tarafından bozunması araşidonik asit üretir. Araşidonik asit ayrıca siklooksijenaz (COX) tarafından prostaglandinlere (PG'ler) ayrıştırılır [10]. COX-II tarafından oluşturulan aşırı miktarda PGE2, iltihaplanma için birkaç sitokini indükler. Hem NO hem de PGE2, inflamasyon ve ağrı indüksiyonu için ana faktörler olarak hareket ettiğinden, TNF- ve COX-II-PGE2 yolakları, kortikosteroidler ve nonsteroidal ilaçlar tarafından inhibe edilen inflamatuar sürecin ana akımlarıdır.antienflamatuvarilaçlar (NSAID'ler), sırasıyla [10,11].
İnflamatuar hastalıkların tedavisi için çeşitli steroidler ve NSAID'ler olmasına rağmen, bu ilaçlar bağışıklık sistemi, gastrointestinal sistem, böbrekler, karaciğer, merkezi sinir sistemi, kan basıncı ve kardiyovasküler sistem üzerinde olumsuz etkilere neden olabilir [12-14 ]. Bu nedenle, kimyasal terapötiklerin olumsuz etkilerini, bunları değiştirerek veya doğal ürünlerle birlikte kullanarak en aza indirmek gerekir.
Fucoidan, birçok ülkede yaygın olarak bulunan Laminaria japonica ve Cladosiphonokamuranus gibi deniz yosunlarından elde edilen sülfat polisakkarit kompleksi, Doğu tıbbında uzun süredir tedavi edici olarak kullanılmaktadır. Önceki çalışmalarda fucoidan'ın anti-oksidatif, anti-pıhtılaştırıcı, anti-kanser veantienflamatuvarfaaliyetler [15,16]. Buna göre fucoidan'ın inflamatuar hastalıklar, iskemi, immün disfonksiyon ve tümörler üzerindeki faydalı etkileri araştırmacıların dikkatini çekmektedir [17,18]. Diğer taraftan,Cistanche tübüloza(CT) ayrıca Çin'de geleneksel ilaçlar için yaygın olarak kullanılmaktadır. CT ekstraktının, inflamatuar yolda NO üretimi için ana faktörler olan TNF-á ve IL-4 üretimini azalttığı bildirilmiştir [19].
Bu tür önceki bulgular, fucoidan ve CT'nin kombinasyonel etkinliğini araştırmamıza neden oldu.(Cistanche tübüloza)Enflamasyonun 2 ana yolundan ekstrakte edin. Etki mekanizmasını aydınlatmak için, karagenan kaynaklı hava kesesi iltihabından kaynaklanan eksüdalarda NO ve PGE2'yi analiz ettik [20].
Malzemeler ve yöntemler
Malzemeler
CT'nin yarı saf fucoidan ve su özütü(Cistanche tübüloza)Misuba RTech Co., Ltd.'den (Asan, Kore) elde edilmiştir. Fucoidan ve CT özütü 4oC'de saklandı, karıştırıldı (1:3) ve kullanımdan önce saf suda eritildi ve 5 mL/kg hacimde ağızdan verildi.
Hücre kültürü ve NO ölçümü
Murin makrofaj RAW 264.7 hücre çizgisi, American Type Culture Collection'dan (Manassas, ABD) satın alındı ve Dulbecco'nun modifiye edilmiş kartal ortamında (Sigma, St. Louis, ABD) yüzde 10 fetal sığır serumu ve antibiyotikler [100 U/mLpenisilin ( Sigma) ve 100 ug/mL streptomisin (Sigma)]. Hücreler, 37°C'de nemlendirilmiş yüzde 5 CO2 atmosferinde inkübe edildi.
Fucoidan ve BT'nin etkilerini değerlendirmek için(Cistanche tübüloza)NO salgılanması üzerine ekstrakt, RAW 264.7 hücreleri (1×106 hücre/mL), fucoidan veya CT özü (1–320 µg/mL) ile 5 dakika inkübe edildi, ardından interferon- (IFN-) , 10 U/mL) ve lipopolisakkarit (LPS, 10 µg/mL) 24 saat süreyle. Ön çalışmalarımızda, RAW 264.7 hücrelerinin aktivasyonu için IFN- artı LPS ile tedavinin hücrelerin 24 saate kadar canlılığını etkilemediği ve fucoidan ve CT ekstraktının 1 mg/mL'ye kadar sitotoksik olmadığı doğrulandı. NO'nun oksitlenmiş ürünü olan nitrit (NO2–) konsantrasyonu, NO'nun bir göstergesi olarak ölçülmüştür. Kültür ortamı eşit hacimde Griess reaktifi (yüzde 2,5 fosforik asit içinde yüzde 1 sülfanilamid, yüzde 0,1 naftiletilendiamid) [21] ile karıştırıldı ve oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edildi. Nitrit konsantrasyonu, standart bir eğri oluşturmak için NaNO2'nin kullanıldığı 540 nm'de analiz edildi.
Hayvanlar ve tedavi
Erkek ICR fareleri (7 haftalık) Daehan Biolink'ten (Eumseong, Kore) satın alındı ve sabit çevresel koşullara (22±2ºC; 40-70 yüzde bağıl nem; 12-saat ışığı) sahip bir odaya yerleştirildi. -karanlık döngü;150-300 lüks parlaklık). Pelet yem ve arıtılmış su, ad libitum olarak mevcuttu. Tüm hayvan deneyleri, Kore'deki Chungbuk Ulusal Üniversitesi'nin (CBNU) Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı ve CBNU Laboratuvar Hayvan Araştırma Merkezi'nin Standart Operasyon Prosedürlerine (SOP) göre yapıldı.
Fareler (n=8/grup) oral olarak fucoidan (18 veya 54 mg/kg), CT ile tedavi edildi.(Cistanche tübüloza)7 gün boyunca günde bir kez ekstrakt (54 veya 162 mg/kg) veya bunların karışımı (18 artı 54, 54 artı 162 veya 90 artı 270 mg/kg). Düşük dozlarda fucoidan (18 mg/kg) ve CT özütü (54 mg/kg), vücut ağırlığının yüzey alanı translasyonundan sonra (Km{{14) 100 mg/vücut (70 kg) ve 300 mg/vücut olan tahmini insan dozlarından alınmıştır. sırasıyla insan için }}/fare için Km=3). Yüksek dozlarda fucoidan ve CT özü, tek başına veya karışım içinde 3 kat olarak ayarlandı ve maksimum sinerjik etkileri değerlendirmek için en yüksek doz karışımı 5 kat olarak sabitlendi.
Fucoidan ve CT'nin 1. gününde(Cistanche tübüloza)ekstrakt tedavisi, farelere bir kese oluşturmak için arka tarafa 10 mL steril hava deri altından enjekte edildi [22,23]. 2 ve 5 gün sonra torbaya 5 mL hava yeniden enjekte edildi. Nihai tedaviden bir saat sonra, poşete 1 mL karagenan (tuzlu su içinde yüzde 1; Sigma) veya aracı (tuzlu su) enjekte edildi.
Eksüda analizleri
Hava kesesi, karagenan enjeksiyonundan 6 saat sonra 1 mL soğuk tuzlu su ile yıkandı ve lavaj sıvısının net hacmi kaydedildi. Enflamatuvar hücrelerin, nötrofillerin, monositlerin ve lenfositlerin toplam sayısı, bir colter sayacı kullanılarak belirlendi. NO ve PGE2 konsantrasyonları, sırasıyla bir korelasyon-EIA kiti (Assay Designs, Ann Arbor, AnnArboUSA) kullanılarak Griess reaktifi (Sigma) ve enzim immünolojik testi (EIA) ile belirlendi.
Histopatolojik inceleme
Kese astar dokusu çıkarıldı ve nötr formalin solüsyonunda sabitlendi. Parafine gömülü doku slaytları hematoksilen-eozin ile boyandı ve inflamatuar lezyonlar için ışık mikroskobu altında incelendi.
istatistiksel analiz
Sonuçlar ortalama±SE olarak sunulmuştur. Deney grubu karşılaştırmaları, tek yönlü varyans analizi ve ardından Tukey test düzeltmesi ile yapılmıştır. bir P-değeri<0.05 was="" considered="" statistically="">
Sonuçlar
In vitro RAW 264.7 hücre kültürü, IFN- ve LPS tedavisi NO üretimini büyük ölçüde arttırdı (Şekil 1). Fucoidan (1-320 µg/mL) ile ön tedavi, makrofaj hücre hattından NO salınımını etkilemedi(Şekil 1A). Karşılaştırıldığında, BT(Cistanche tübüloza)ekstrakt (32–320 µg/mL) NO üretimini önemli ölçüde bastırdı, bunun göstergesiantienflamatuvaraktivite (Şekil 1B).
Fare hava kesesine karagenan enjeksiyonu, kese içindeki eksüda hacmini belirgin şekilde arttırdı (Şekil 2). Bu tür artan eksüdasyon, fucoidan (18 mg/kg) ve CT ile tedavi edilerek hafifletildi.(Cistanche tübüloza)özü (54 ve 162mg/kg). Özellikle, fucoidan ve CT'nin kombine tedavisi(Cistanche tübüloza)Daha yüksek doz kombinasyonları (54 artı 162 mg/kg ve 90 artı 270 mg/kg) en düşük doz kombinasyonuna (18 artı 54 mg/kg) ek etkinlik göstermemesine rağmen, ekstrakt eksüda hacmini bireysel etkilere kıyasla daha da azalttı. (Şekil 2A). Kesedeki NO içeriği de carrageenan enjeksiyonunu takiben büyük ölçüde arttı (Şekil 2B). Fucoidan'ın hafif etkisi ile karşılaştırıldığında, CT(Cistanche tübüloza)özü NO konsantrasyonunu önemli ölçüde düşürdü. Fucoidan ve CT özütünün kombine tedavisi, NO seviyesini doza bağlı bir şekilde daha da azalttı. Benzer şekilde, artan PGE2 içeriği, fucoidan ve CT'nin kombinasyonel tedavisi ile sinerjik olarak bastırıldı.(Cistanche tübüloza)özü (Şekil 2C). Kesedeki enflamatuar aracılara paralel olarak, karagenan enjeksiyonu ile enflamatuar hücrelerin sayısı büyük ölçüde arttı: nötrofiller, monositler ve lenfositler için sırasıyla 37.8, 4.8 ve 24.1 kat kontrol seviyesi (Tablo 1) . Ancak fucoidan ve BT(Cistanche tübüloza)özütü, fucoidan'ın CT özünden biraz daha üstün olduğu inflamatuar hücre infiltrasyonunu önemli ölçüde azalttı. Beklenmedik bir şekilde, fucoidan ve CT'nin birlikte uygulanmasıyla inflamatuar hücre infiltrasyonunda sinerjistik bir etki elde edilmedi.(Cistanche tübüloza)Ayıkla.
Eksüdalardaki inflamatuar hücre infiltrasyonundan anlaşıldığı üzere, hava keselerini çevreleyen deri altı doku şiddetli inflamatuar lezyonlar sergilemiştir (Şekil 3). Kontrol hayvanlarında (Şekil 3A) normale yakın özelliklerle karşılaştırıldığında, karagenana maruz kalan kalınlaşmış deri altı dokusunda çok sayıda hücre gözlemlendi (Şekil 3B). Bu tür enflamatuar lezyonlar, fucoidan (Şekil 3C ve 3D) veya CT ile tedavi ile dikkat çekici şekilde hafifletildi.(Cistanche tübüloza)özü (Şekil 3E ve 3F). Özellikle, fucoidan ve CT ile kombinasyon tedavisi ile daha yüksek anti-inflamatuar etkiler elde edildi.(Cistanche tübüloza)ayıkla(Şekil 3G-3I)
Tartışma
Bir in vivo karagenan kaynaklı hava kesesi iltihaplanma modeli kullanılarak, kemirgenlerin sırtlarına hava enjeksiyonu, sinovyuma benzer bir yapı oluşturmak için boşluğun yüzeyinde katmanlaşan hücrelerin çoğalmasını indükler. Bu modelde, karagenan kaynaklı enflamatuar hücre infiltrasyonunun enjeksiyonu, vasküler sızıntının göstergesi olan eksüdayı arttırdı. Hava kesesi, lokal olarak biriken sıvıda kolayca ölçülebilen inflamatuar hücrelerin ve aracıların rezervuarı görevi görür.
Vasküler geçirgenliği indükleyebilen çeşitli inflamatuar mediatörler arasında NO ve PGE2'nin birçok inflamatuar hastalığın patogenezinde rol oynayan ana faktörler olduğu iyi bilinmektedir [24,25]. Ayrıca ağrı indüksiyonu ve algısının aracıları olarak da bilinirler[10,11]. Enflamasyon sırasında TNF- ve/veyaLPS ile stimülasyon yoluyla çeşitli hücre tiplerinde eksprese edilen ve aktive edilen iNOS, yüksek, kalıcı NO konsantrasyonları üretir [3,5-7]. NO, vasküler sızıntıya yol açan vazodilatasyon gibi çeşitli fizyolojik fonksiyonlarda önemli bir düzenleyici moleküldür [8,9]. Cox yoluyla araşidonik asitten üretilen PGE2, birçok inflamatuar hastalığın gelişimine katkıda bulunur [26,27] ve çeşitli inflamatuar uyarılara yanıt olarak PGE2'nin aşırı üretimi, COX-II seviyesinin yukarı regülasyonu ve inflamasyonun ilerlemesi ile ilişkilidir [28]. Bu nedenle, TNF- -NO ve COX-II-PGE2 yolakları, sırasıyla iNOS (kortikosteroidler) ve COX (NSAID'ler) inhibitörleri tarafından bloke edilen iki ana inflamatuar süreç akışı olarak kabul edilmiştir [22,29].
Bu çalışmada, fucoidan ve CT'nin birlikte uygulanması(Cistanche tübüloza)özü, kesedeki eksüda hacmini azalttı, bu da vasküler sızıntıya karşı baskılayıcı aktiviteye sahip olduklarını düşündürdü (Şekil 2A). Her fucoidan ve CT'nin bireysel etkileriyle karşılaştırıldığında(Cistanche tübüloza)ekstrakt, kombinasyonel işlem daha da arttı, bu da iki bileşiğin sinerjistik olarak hareket ettiğini ima etti. Fucoidan ve CT özü arasındaki bu tür sinerjik etkiler, eksüdalardaki NO ve PGE2 seviyeleri üzerindeki aktiviteleriyle desteklenmiştir (Şekil 3B ve 2C).
Ancak ilginç bir şekilde, fucoidan'ın makrofajların invitro tahlilinin aktivasyonunu doğrudan engellemediği doğrulandı (Şekil 1A). Benzer şekilde, fucoidan'ın biyoanalizde NO ve PGE2 birikimi üzerindeki inhibitör potansiyeli, CT'ninkinden nispeten daha düşüktü.(Cistanche tübüloza)özü (Şekil 2B ve 2C). Fucoidan'ın böyle bir etki mekanizması, hücrelerin CT özü ile doğrudan etkisizleştirilmesinden farklıdır (Şekil 1B). Karşılaştırıldığında, fucoidan, keselerde inflamatuar hücre infiltrasyonunun inhibisyonu üzerinde yüksek bir etkinlik gösterdi (Tablo 1). Fucoidan, nötrofillerin, monositlerin ve lenfositlerin karagenan kaynaklı doku yaralanma bölgelerine göçünü bloke etmede CT özünden üstündü. İlginç bir şekilde, fucoidan ve CT özü arasındaki farklı etki mekanizmalarının göstergesi olan sinerjistik bir anti-göç etkisi yoktu: yani, fucoidan enflamatuar hücrelerin infiltrasyonunu bloke ederken CT(Cistanche tübüloza)özü hücrelerin aktivasyonunu engeller.
Polimorfonükleer hücreler, özellikle nötrofiller, karagenan tarafından indüklenen akut inflamatuar bölgelere toplanan ana hücresel bileşenlerdir. Ek olarak, makrofajlar ve lenfositler gibi inflamatuar hücreler de sitokin salgılayarak inflamatuar süreçte merkezi rol oynarlar [22,30,31]. Fucoidan veya CT ile ön tedavi yapıldığında(Cistanche tübüloza)özü, carrageenan enjekte edilen hava keselerine göç eden beyaz kan hücrelerinin sayısı belirgin şekilde bastırıldı. Bu sonuç, deksametazon gibi kortikosteroidler tarafından elde edilecek bir etki ile tutarlıydı, ancak indometasin dahil NSAID'ler tarafından elde edilemedi [23,30]. Bu nedenle, fucoidan ve CT'nin(Cistanche tübüloza)özü kısmen steroidlerin bir özelliğine sahiptir.
İnflamatuar hücre kemotaksisi üzerindeki bloke edici etkiye ek olarak, BT(Cistanche tübüloza)ekstraktının makrofajların aktivasyonunu baskıladığı ortaya çıktı. Bu, makrofajlar tarafından üretilen ana inflamatuar aracı olan NO in vitro ve in vivo üzerindeki inhibe edici etkileriyle doğrulandı. Böylece BT'nin etkisi(Cistanche tübüloza)Makrofajlar üzerindeki ekstrakt, mRNA ekspresyonunun baskılanmasından ve/veya bu hücrelerde iNOS aktivitesinin doğrudan inhibisyonundan kaynaklanabilir.
PGE2 de başlıca inflamatuar mediatörlerden biridir. COX inhibitörleri olan NSAID'ler tarafından baskılanan doku ödemine paralel olarak artar [21,22]. Karagenan, kese eksüdasında COX-II mRNA ve COX-II proteinini indükleyerek PGE2 üretimini artırabilir [32]. Bu modelde, karagenan, PGE2 miktarını önemli ölçüde arttırdı ve CT tarafından büyük ölçüde bastırıldı.(Cistanche tübüloza)Ayıkla. Bu sonucun, bir NSAID indometasin [23] tarafından elde edilecek bir etki ile tutarlı olduğunu belirtmek ilginçtir. Bu nedenle, CT ekstraktının NSAID'lerin ek özelliğine sahip olduğu sonuçlardan çıkarılmıştır. Birlikte ele alındığında, CT'nin(Cistanche tübüloza)özü, karagenan kaynaklı iltihaplanma modelinde hem kortikosteroid hem de NSAID benzeri etkiler uyguladı ve bu fucoidan,antienflamatuvarinflamatuar hücre infiltrasyonunu bloke ederek CT ekstraktının etkileri.
Tam etki mekanizmasının tanımlanması daha fazla çalışma gerektirmesine rağmen, fucoidan ve CT karışımı(Cistanche tübüloza) karagenan kaynaklı hava kesesi iltihabında TNF- –NO ve COX-II-PGE2 yollarını bloke ederek belirgin şekilde zayıflatılmış inflamatuar belirtileri ayıklayın. Bu bulgular, fucoidan ve CT'nin kombine tedavisinin(Cistanche tübüloza)özü, kortikosteroidlere veya NSAID'lere yanıt veren çeşitli inflamasyon türlerinin giderilmesi için umut verici bir aday olabilir.
Referanslar
1. Gün R. Romatoid artritte TNF inhibitörlerine karşı advers reaksiyonlar. Lancet 2002; 359(9306): 540-541.
2. Feldmann M, Brennan FM, Maini RN. Romatoid artritte sitokinlerin rolü. Annu Rev Immunol 1996; 14: 397-400.
3. Eigler A, Sinha B, Hartmann G, Endres S. Taming TNF: bu proinflamatuar sitokini dizginleme stratejileri. Immunol Today 1997;18(10): 487-492.
4. Ershler WB, Keller ET. Yaşa bağlı artan interlökin-6gen ifadesi, ileri yaş hastalıkları ve kırılganlık. Annu Rev Med2000; 51: 245-270.
5. Adams V, Nehrhoff B, Späte U, Linke A, Schulze PC, Baur A, Gielen S, Hambrecht R, Schuler G. IL-1 ve NFκB aktivasyonu ile iskelet kasında iNOS ekspresyonunun indüksiyonu: bir in vitro andin canlı çalışma. Kardiyovasküler Res 2002; 54(1): 95-104.
6. Xie QW, Whisnant R, Nathan C. Kalsiyumdan bağımsız nitrik oksit sentazı kodlayan fare geninin promotörü, interferon ve bakteriyel lipopolisakkarit tarafından indüklenebilirlik sağlar. J ExpMed 1993; 177(6): 1779-1784.
7. Yui Y, Hattori R, Kosuga K, Aizawa H, Hiki K, Kawai C. Sıçan makrofajından nitrik oksit sentazın saflaştırılması. J BiolChem 1991; 266(19): 12544-12547.
8. Marletta MA, Yoon PS, Iyengar R, Leaf CD, Wishnok JS. L-argininin nitrit ve nitrata makrofaj oksidasyonu: nitrik oksit bir ara maddedir. Biyokimya 1998; 27(24): 8706-8711.
9. Moncada S, Palmer RM, Higgs EA. Nitrik oksit: fizyoloji, patofizyoloji ve farmakoloji. Pharmacol Rev 1991; 43(2):109-142.
10. Pang L, Hoult JR. Prostaglandinlerin aşırı üretiminin eşlik ettiği bir anti-silikoz alkaloidi olan tetrandrin makrofajlarına sitotoksisite. Biochem Pharmacol 1997; 53(6): 773-782.
11. Hunskaar S, Hole K. Farelerde formalin testi: inflamatuar ve inflamatuar olmayan ağrı arasındaki ayrışma. Ağrı 1987; 30:103-114.
12. Lester RS, Knowles SR, Shear NH. Sistemik kortikosteroid kullanımının riskleri. Dermatol Kliniği 1998; 16(2): 277-288.
13. Lichtenstein DR, Syngal S, Wolfe MM. nonsteroidalantienflamatuvarilaçlar ve gastrointestinal sistem. İki ucu keskin kılıç. Artrit Rheum 1995; 38(1): 5-18.
14. Mukherjee D, Nissen SE, Topol EJ. Seçici COX-2 inhibitörleriyle ilişkili kardiyovasküler olay riski. JAMA 2001; 286(8):954-959.
15. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Leathesiadifformis kaynaklı fucoidan fraksiyonlarının antiviral özellikleri. Bitkisel Tıp 1999; 6(5): 335-340.
16. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Laminaria japonica'dan ekstrakte edilen düşük moleküler ağırlıklı fucoidan fraksiyonlarının potansiyel antioksidan ve pıhtılaşma önleyici kapasitesi. Uluslararası J Biol Macromol2010; 46(1): 6-12.
17. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan, sıçanda renal iskemi/reperfüzyon hasarının erken evresinde renal kan akışını iyileştirir. JPhysiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
18. Li N, Zhang Q, Song J. Wistar sıçanlarında Laminaria japonica'dan ekstrakte edilen fucoidan'ın toksikolojik değerlendirmesi. Gıda ChemToxicol 2005; 43(3): 421-426.
19. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Cistanche tubulosa'dan izole edilen ateositin RBL-2H3 ve KU812 hücreleri tarafından kimyasal aracı salınımı ve inflamatuar sitokin üretimi üzerindeki inhibitör etkisi. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
20. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB.Antienflamatuvarcarrageenan-hava kese iltihabı modelinde angelica gigas etanol ekstraktının etkileri.Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
21. Hevel JM, Marletta MA. Nitrik oksit sentaz deneyleri. YöntemlerEnzymol 1994; 233: 250-258.
22. Romano M, Faggioni R, Sironi M, Sacco S, Echtenacher B, DiSanto E, Salmona M, Ghezzi P. Carrageenan fare hava kesesi sinovyal modelinde akut inflamasyona neden oldu. Tümör nekroz faktörünün rolü. Arabulucular Inflamm 1997; 6(1): 32-38.
23. Wallace JL, Chapman K, McKnight W. Limitedantienflamatuvarkaragenan-hava kesesi iltihabında siklo-oksijenaz-2 inhibisyonunun etkinliği. Br J Pharmacol 1999; 126(5): 1200-1204.
24. Guslandi M. Nitrik oksit ve iltihabi bağırsak hastalıkları. Eur J Clin Yatırım 1998; 28(11): 904-907.
25. Ritchlin CT, Haas-Smith SA, Li P, Hicks DG, Schwarz EM.Mechanisms of TNF- - ve RANKL aracılı osteoklastogenez ve psoriatik artritte kemik rezorpsiyonu. J Clin Invest 2003;111(6): 821-831.
26. Enflamatuar ve dejeneratif beyin hastalıklarında Minghetti L. Siklooksijenaz-2 (COX-2). J Neuropathol Exp Neurol 2004;63(9): 901-910.
27. St-Onge M, Flamand N, Biarc J, Picard S, Bouchard L, DussaultAA, Laflamme C, James MJ, Caughey GE, Cleland LG, BorgeatP, Pouliot M. Siklooksijenaz (COX) yoluyla prostaglandin E2 jenerasyonunun karakterizasyonu{ insan nötrofillerinde {3}} yol.Biochim Biophys Acta 2007; 1771(9): 1235-1245.
28. Choi YH, Park HY.AntienflamatuvarLipopolisakkarit ile uyarılan BV2 mikroglial hücrelerde spermidinin etkileri. J Biomed Sci2012; 19: 31.
29. Wallace JL, Chapman K, McKnight W. Limitedantienflamatuvarkaragenan-hava kesesi iltihabında siklo-oksijenaz-2 inhibisyonunun etkinliği. Br J Pharmacol 1999; 126(5): 1200-1204.
30. Oliveira de Melo J, Conceição Torrado Truiti M, Muscará MN, Bolonheis SM, Dantas JA, Caparroz-Assef SM, Cuman RK,Bersani-Amado CA.AntienflamatuvarNectandra falcifolia yapraklarının ham özüt ve fraksiyonlarının aktivitesi. Biol Eczacı Boğa2006; 29(11): 2241-2245.
31. Zanardo RC, Brancaleone V, Distrutti E, Fiorucci S, Cirino G, Wallace JL. Hidrojen sülfür, lökosit aracılı inflamasyonun endojen bir modülatörüdür. FASEB J 2006; 20(12): 2118-2120.
32. Masferrer JL, Zweifel BS, Manning PT, Hauser SD, Leahy KM, Smith WG, Isakson PC, Seibert K. in vivo olarak indüklenebilir siklooksijenaz 2'nin seçici inhibisyonuantienflamatuvarve ülser olmayan erojenik. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91(8): 3228-3232.
