Maydanoz Polifenollerinin ve Antioksidan Kapasitelerinin Depresyon ve Anksiyete Tedavisine Yardımcı Olma Potansiyeli: Bir İn Vivo Subakut Çalışması

Daha fazla bilgi için. İletişimtina.xiang@wecistanche.com

Soyut: Depresyon ve anksiyete, dünyanın her yerinde önemli zihinsel sağlık sorunlarıdır. Bu hastalıklar, oksidatif stres de dahil olmak üzere bir dizi risk faktörü ile ilişkilidir. Kimyasal nitelikteki psikotrop ilaçlar, bu hastalıkların etkisini artıran çeşitli yan etkiler göstermiştir. Bu durum karşısında doğal ürünler gelecek vadeden bir alternatif olarak görünmektedir. Bu çalışmanın amacı, Petroselinum sativum'un anksiyolitik ve antidepresan etkilerini değerlendirmektir.polifenollerin vivo ve bununla ilişkiliantioksidan in vitro özellikler.anksiyolitikekstrenin aktivitesi (50 ve 100 mg/kg) açık alan ve aydınlık-karanlık oda testleri kullanılarak değerlendirilirken, antidepresan aktivite zorunlu yüzme testi kullanılarak değerlendirildi. Ekstraktın antioksidan aktivitesi, 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil(DPPH) serbest radikal testi ve FRAP (demir azaltma kapasitesi) testi ile değerlendirildi. Fenolik ekstrakt, özellikle 100 mg/kg dozunda çok güçlü anksiyolitik ve antidepresan benzeri etkiler göstererek farelerde depresif davranışı (hareketsizlik süresini azalttı) ve ayrıca anksiyolitik davranışı (merkezde ve aydınlatılmış alanlarda keşfetme eğilimi) azalttı. )paroksetin ve bromazepamdan (klasik ilaçlar) bile daha iyi, bu sonuçlarla birlikte ekstrakt da önemli bir antioksidan kapasite gösterdi. Bu ön sonuçlar, Petroselinum satioum'un depresyon ve anksiyeteyi tedavi etmek için tamamlayıcı veya bağımsız bir bitkisel ilaç olarak kullanım için anksiyolitik ve antidepresan potansiyeli sergilediğini göstermektedir.

anahtar kelimeler: Petroselinum sativum; polifenol; anksiyolitik; antidepresan benzeri; antioksidan; farmakoloji; bitkisel ilaç; doğal ürünler

1. Giriş

Depresyon ve anksiyete bozuklukları uzun zamandır akıl sağlığı sorunları olarak kabul edilmekte ve stresin her yerde mevcut olduğu herhangi bir toplum için ağır bir yük oluşturmaktadır. Dünya Sağlık Örgütü (WHO), 2030 yılına kadar potansiyel olarak ölümcül bir hastalık olarak depresyonun dünya çapında engelliliğin ikinci önde gelen nedeni olacağını tahmin ediyor [1]. En son DSÖ tahminlerine göre, dünya çapında 300 milyondan fazla insan depresyondan muzdariptir ve bunların 260 milyondan fazlası da anksiyete bozukluğuna sahiptir [2].

Ruhsal Bozuklukların Tanısal ve İstatistiksel El Kitabı (DSM-V), majör depresif bozukluğu yalnızca ara sıra bir üzüntü ya da depresyon nöbeti olarak değil, en az iki hafta boyunca üst üste gelen depresif bir ruh hali ya da ilgi ya da zevk kaybı olarak tanımlamıştır. sıklıkla tekrarlayan [3]. Dünya Sağlık Örgütü, depresyonu "genel bir üzüntü hissi, zevk ve ilgi kaybı, suçluluk duygusu, uyku bozukluğu (uykusuzluk veya uyuşukluk) ve iştah, yorgunluk hissi (psikomotor gerilik) gibi çeşitli psikolojik ve biyolojik belirtiler olarak tanımlamaktadır. ) ve konsantrasyon eksikliği". En ciddi vakalarda depresyon intihara bile yol açabilir [4].

Anksiyete, WHO tarafından tanımlandığı gibi, "halsizlik, ajitasyon, çaresizlik ve hatta yok olma halinin eşlik ettiği belirsiz bir yakın tehlike hissi" dir. Gerçek tehlike karşısında ortaya çıkan korkunun aksine, nedeninin mutlaka bilinçli olmamasına rağmen, potansiyel ve belirsiz tehlikenin neden olduğu bir beklenti korku durumu olarak da tanımlanabilir. Ancak bu iki duygu benzer fizyolojik (artmış kan basıncı, terleme, taşikardi vb.) ve davranışsal (artan uyanıklık ve kaçınma) tepkilerle karakterize edilir [5].

Depresyon ve anksiyete genellikle antidepresanlar ve antidepresanlar dahil olmak üzere psikotrop ilaçlarla tedavi edilir.anksiyolitikler(sakinleştiriciler), genellikle doğada kimyasal, örneğin paroksetin ve benzodiazepinler. Ancak bu ilaçların kullanımı belirli sınırlar gösterir ve istenmeyen yan etkilere neden olabilir. Anksiyete tedavisi için bromazepam reçete edilir. Bununla birlikte, tüketimi, uyuşukluk, sedasyon ve hafıza kaybı gibi bir dizi olumsuz yan etki ile birlikte gelir [6]. Uyku güçlüğü, iştahsızlık, uyuşukluk ve cinsel işlev bozukluğu da majör depresif bozuklukları yönetmek için kullanılan serotonin geri alım inhibitörü (SSRI) ailesinden bir antidepresan olan paroksetinin tipik yan etkileridir [7]. Bu sınırlı etkinliğin bir sonucu olarak, yeni, daha etkili ve toksik olmayan terapötik yöntemlerin keşfi çok takdir edilmektedir.

Şifalı bitkiler, özellikle birçoğunun daha az yan etki gösterdiği bilindiği için, yeni, güvenli ve etkili terapötikler için yeterli bir kaynak olabilir [8]. Yukarıdaki bozukluklarda birden fazla tıbbi bitki test edilmiştir ve bunlar, ek bitkilerin antidepresan benzeri ve anksiyolitik özelliklerini keşfetmek için daha ileri çalışmaları teşvik eden çok hoş sonuçlar vermiştir [9].

Yaygın olarak "maydanoz" (Arapça "maadnous") olarak bilinen Petroselinum satioum Hoffm., Apiaceae ailesinin bir üyesidir. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm ve Petroselinum crispum (Değirmen) Fuss. aynı zamanda Petroselinum sativum Hoffm'un eşanlamlılarıdır.[10. Akdeniz bölgesinden gelen bir mutfak bitkisi olan maydanoz, modern zamanlarda dünya çapında yaygın bir bitki haline gelmiştir [11]. P. sativum, aşağıdakiler de dahil olmak üzere bir dizi faydalı özelliğe sahiptir:antioksidan, analjezik, spazmolitik, antidiyabetik, immüno-modüle edici ve gastrointestinal etkiler [12]. Bu çeşitli faydalar, bitkinin polifenoller (apigenin, kersetin, luteolin ve kaempferol), vitaminler, karotenoidler, kumarin ve tanenler gibi temel bileşenlerine atfedilebilir [13]. Apiaceae familyası, Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] gibi antidepresan ve anksiyolitik aktiviteleri ile bilinen birçok bitkiyi kapsar. 50 ila 200 mg/kg arasında değişen bir konsantrasyon için.

Bu çalışmada maydanozun potansiyel antidepresan benzeri ve anksiyolitik aktiviteleri incelenmiştir.polifenollerile birlikte ilk kez değerlendirildi.antioksidan aktivite, bir korelasyon olup olmadığını belirlemek için.

2. Sonuçlar

2.1. Antioksidan Aktivitesinin Değerlendirilmesi

2.1.1.DPPH Testi

Şekil 1, farklı PSPE ve BHT seviyelerinin bir fonksiyonu olarak antioksidan aktivite yüzdesini göstermektedir. Elde edilen sonuçlar, ekstraktımızın ve BHT'nin konsantrasyona bağlı antiradikal aktivite gösterdiğini ortaya koymaktadır. Yani, DPPH radikalinin inhibisyon yüzdesi, P. sativum ve BHT'nin fenolik ekstraktının konsantrasyonu ile artar. BHIT, ekstremize kıyasla en yüksek aktiviteyi gösterdi. 0.5 ug/mL için BHT, 1 ug/mL'lik bir konsantrasyon için sabit kalan yüzde 90'lık bir maksimum inhibisyon yüzdesine ulaştı. Aynı konsantrasyonda, fenolik özüt maksimum yüzde 58'lik bir inhibisyon üretti.

Sentetik antioksidan BHT, P sativum'un fenolik özü için kaydedilenden (yaklaşık 0.184 ug/mL) daha yüksek, yaklaşık 0.024 ug/mL'lik bir IC50 ile çok güçlü bir antiradikal aktivite gösterdi. .

2.1.2.FRAP Testi

Şekil 2, PSPE ve BHT'nin (pozitif kontrol) farklı konsantrasyonlarının bir fonksiyonu olarak optik yoğunluktaki (OD) değişimi göstermektedir. İndirgeme yüzdelerinin, hem özütün hem de BHT'nin konsantrasyonuyla orantılı olduğu görülebilir. İkincisi, özüt ile karşılaştırıldığında daha yüksek bir azalma yüzdesi gösterdi.

P. sativoum(PSPE)'nin polifenolik fraksiyonunun etkinliğini BHT'ninki ile karşılaştırmak için, FRAP'ın (IC50) yüzde 50'sini azaltan konsantrasyonu belirledik.

BHT (Sentetik antioksidan BHT), P. sativum'un fenolik özü için kaydedilenden daha yüksek, yaklaşık 0.09ug/mL IC50 ile oldukça güçlü antioksidan aktivite gösterdi （yaklaşık 0.38 ug/mL ）.

2.2. Antidepresan Aktivite Zorunlu Yüzme Testinin Değerlendirilmesi

Deneyin üç haftası boyunca zorunlu yüzme testindeki kesinti süresindeki değişiklik Şekil 3'te gösterilmektedir. Test sırasında hareketsizlik süresi, PSPE ile tedavi edilen farelerde (PSPE 50 mg/kg (34 s±3.286), önemli ölçüde daha kısaydı), PSPE 100 mg/kg (33.8s±2.653))kontrollerle karşılaştırıldığında (Paroksetin(100,8s±6,837), Araç(176s±6.550).

Bu sonuçlar, P. sativum'un fenolik ekstraktının antidepresan etkisinin paroksetinden daha fazla olduğunu göstermektedir.

2.3. Anksiyolitik Aktivitenin Değerlendirilmesi

2.3.1. Açık Alanda Kaygılı Davranış

Şekil 4, üç haftalık ekstrakt tedavileri sırasında açık alan testinin merkezinde harcanan süredeki değişimi göstermektedir. PSPE (50 ve 100 mg/kg) ile tedavi edilen farelerin, kontrol gruplarına kıyasla merkezi alanda daha fazla zaman geçirdiği görülebilir. Bu önemli artış, sadece tedavi süresi ile değil, aynı zamanda ekstraktın konsantrasyonu ile de orantılıdır. Optimal değer, 100 mg/kg'lık bir konsantrasyonla elde edildi (37.4 s± 1.778, 33.4s±1.208 doza göre 50 mg/kg doza kıyasla). Bu, biranksiyolitikBu bitkinin etkisi.

Üç haftalık deney sırasında geçilen karo sayısındaki değişiklik Şekil 5'te gösterilmektedir. Analiz, PSPE ile tedavi edilen farelerin geçtiği karo sayısında dikkate değer bir artış gösterdi (50 mg/kg (161.2±5.490), 100 mg/kg). kg (173±10.104)) bromazepam 1 mg/kg(115.8±1.393) ve araç(147,4±1.568) ile tedavi edilen gruplara kıyasla. Bu sonuçlar, FPPS'nin 1 mg/kg'da bromazepamdan bile daha büyük bir anksiyolitik etkisi olduğunu göstermektedir.

2.3.2. Aydınlık-Karanlık Odada Kaygılı Davranış

Şekil 6, çalışma süresi boyunca ışıklı odada harcanan zamandaki değişimin sonuçlarını göstermektedir. Sonuçlar, PSPE ile tedavi edilen fareler için zaman içinde ışıklı bölmede harcanan sürede aşamalı bir artış olduğunu göstermektedir. Bu artış, özellikle 21. günde fark edilir. Bu testte, bromazepam ile tedavi edilen ve PSPE ile tedavi edilen fareler, ışıklı bölmede önemli ölçüde daha fazla zaman geçirdi (bromazepam 1 mg/kg(146.8 s ± 1.068), PSPE 50mg/kg (199.6s±) 6.838), PSPE 100 mg/kg (213.6s±9.331)kontrol fareleri ile karşılaştırıldığında (araç(75.8s±4.352)). Bu, P. sativum polifenolik ekstraktının anksiyolitik etkisinin kanıtı olarak yorumlandı.

Şekil 7, bu test sırasında aydınlık ve karanlık odalar arasındaki geçiş sayısındaki değişimi göstermektedir. 21 gün boyunca PSPE ile tedavi edilen fareler (50 mg/kg (16±{{10}}.548)), 100 mg/kg arasında dikkate değer bir fark bulundu. kg (12.4±0.510)) ve kontrol fareleri (araç(10±0.837),bromazepam 1 mg/kg (12±0.949) Bu sonuçlar, ışıklı odada geçirilen sürenin sonuçlarıyla tutarlıdır, çünkü bu iki parametre aşağıdaki gibidir: farelerin sergilediği kaygı düzeyiyle ters orantılıdır.

3. Tartışma

Bu çalışmada, P. satioum'un fenolik ekstraktının in vitro antioksidan aktivite ve in vivo anksiyolitik ve antidepresan aktivite gösterdiğini gösterdik.

Bazı çalışmalarda ferulik asit ve sinnamik asidin antidepresan etkileri olduğu bulunmuştur [17,18], kuersetin ve hidroksitirosol ise onaylanmış bir anksiyolitik etki göstermiştir [19,20]. Bu bileşikler, gözlemlenen etkinin arkasında olabilir.

Bir antioksidanın etkinliği, serbest radikallerin temizlenmesi, serbest radikallerin parçalanması ve ayrıca metal iyonlarının şelasyonu gibi farklı şekillerde uygulanabilir [17]. Bu aktivite, FRAP ve DPPH tahlilleri ile değerlendirilebilir, ikincisi, hızı nedeniyle, bitki özlerinde bulunan molekülleri taramak için sıklıkla kullanılır [18]. Sonuçlarımız maydanozun fenolik özünde antioksidan aktivite gösterdi. Hinneburg ve arkadaşlarının[21] önceki çalışması, maydanozun sulu ekstraktının, DPPH radikali üzerinde 12 civarında bir IC50 ile zayıf inhibitör aktivite uyguladığını gösterdi.0±{{8} }.10 mg/mL (çalışmamızdaki polifenolik ekstrakt ile karşılaştırıldığında, 0.184 ug/mL). Tersine, bu ekstraktın şelatlama etkisi, aynı çalışmada kullanılan diğer ekstraktlara kıyasla daha etkiliydi.

Son araştırmalar ayrıca duygudurum bozuklukları ile oksidatif stres [22,23] ve psikolojik stres [24,25] arasında bir bağlantı bulmuştur, böylece antioksidanların potansiyel uygulamasına ilişkin kaygı ve depresyonu önleyen ve/veya yöneten yeni yollar açmıştır. Desrumaux ve ark. [26] farelerin beyinlerindeki E vitamini eksikliğinin, oksidatif stres ve kaygı uyandıran davranışların temel belirtilerini artırdığını fark ettiler. Benzer şekilde, C vitamini verilen fareler, son zamanlarda kuyruk süspansiyonu test sonuçlarına dayanarak bu bileşiğin antidepresan bir role sahip olduğunu ortaya koymuştur [27]. Flavonoidler ve fenolik asitler dahil olmak üzere polifenoller, güçlü antioksidan etkileriyle iyi bilinmektedir [28,29]. Bu ikincil fitokimyasal metabolitlerin anksiyete ve depresyondan kaçınmanın ve bunları yönetmenin bir yolu olarak kullanılması umut verici bir strateji olabilir [9]. Akıncı ve ark. [30], maydanozun, ortalama doku glutatyon seviyelerinde (53.31 ± 9.50) bir artışa yansıyan hücrelerin antioksidan savunma sistemini destekleyerek ağızdan alındığında stres kaynaklı mide hasarını en aza indirmede başarılı olduğunu göstermiştir. 15.18±1.05) ve katalaz (16.68 ±2.29).

Açık alan deneyi, bir hayvanın duygusal durumunu değerlendirmek için kullanılır. Kafeslerinden ayrılan ve farklı bir ortama konan hayvanlar, ambulatuvar aktivitede azalma, keşif ve hareketsizlik gibi parametrelerin tamamında veya bazılarında değişiklikler, ancak tımarlanmada artış gibi sıklıkla sıkıntı ve endişe gösterirler. davranış [31]. 100 mg/kg'lık bir dozda P.sativum özütü, alanın merkezinde geçirilen süredeki önemli artış ve toplam ayaktan aktivite ile gösterildiği gibi, çok önemli bir anksiyolitik etki üretti. Bu artış, 1 mg/kg'da bromazepam ile tedavi edilen farelerde görülenden daha büyüktü.

Aydınlık-karanlık oda deneyi, ilaçların anksiyolitik etkisini tahmin etmede de yararlıdır. Bu test sırasında farelerde kaygı derecesini ölçmek için iki parametre not edilir: (1) Hayvanın karanlık odada geçirdiği zamanın düşük yüzdesi, kaygı düzeyiyle ilişkilidir. Yani ışıklı bölmede geçirilen zamanın yüzdesi minimum olduğunda kaygı yüksek kabul edilir ve(2)geçiş sayısı yani iki bölme arasındaki geçiş sayısı kaygı düzeyi ile ters orantılıdır. (düşük geçiş sayısı, yüksek kaygı düzeyi anlamına gelir)[32]. Bu çalışmanın bulguları, 100 mg/kg'da P. sativum polifenolik özütünün, hayvanın ışıklı bölmede geçirdiği artan süreye ve çalışma süresi boyunca kontrollerle karşılaştırıldığında geçişlerin sayısına bağlı olarak optimal bir anksiyolitik etki gösterdiğini ortaya koydu.

Zorunlu yüzme deneyi 1970'lerde geliştirildi. Porsolt testi olarak da mucidinin adıyla bilinmektedir [33]. Bulgumuz, tedavi edilen farelerin hareketsizlik süresinin kontrol farelerininkinden daha kısa olduğunu gösterir, bu da P. sativum'un fenolik ekstraktının bir antidepresan etkisini gösterir. Ancak hareketsizlik süresindeki bu azalma, yüzme süresinin artması veya tırmanma süresinin artması lehine olmuş olabilir. Bu fark, nörofarmakolojik bir bakış açısından çok önemlidir, çünkü teorik olarak, zorunlu yüzme sırasında, ağırlıklı olarak noradrenerjik veya dopaminerjik bir artış üreten antidepresanlar, yükselme süresini artırarak hareketsizliği azaltır [34], 5HT'yi aktive edenler ise yüzme süresini artırarak hareketsizliği azaltır [34]. [35]. CNS işlevi açısından, polifenollerin çoğu doğrudan nörotransmitter sistemleriyle etkileşime girer [36]. Maydanoz üzerinde yapılan araştırmalar flavonoidlerin baskın olduğunu göstermektedir 37]. Geleneksel geleneksel tıbbi özlerde bulunan çok çeşitli flavonoidlerin, GABA A reseptörlerine doğrudan bağlanarak yatıştırıcı/anksiyolitik etkilere sahip olduğu bildirilmektedir [38].

Priprem ve ark. [39], polifenol kersetin'in, 300 mg/kg dozunda bir hafta tekrarlı uygulamadan sonra anksiyolitik aktivite gösterdiğini, bunun etkisini uygulamadan bir saat sonra daha düşük dozlarda sergileyen diazepam kadar etkili olmadığını gösterir. Pereira et al. [40], rosmarinik asidin çok düşük dozlarda (2 ila 4 mg/kg) bir anksiyolitik etki gösterdiğini gösterdi. Diğer bir örnek, neredeyse hiç yan etkisi olmayan bir anksiyolitik aktivite üreten benzodiazepin reseptörleri için seçici ve düşük bir afinite sergileyen apigenindir[41. Flavonoidler ayrıca monoamin oksidazın inhibisyonu ve bunun sonucunda beynin belirli bölgelerinde 5-HT, DA ve norepinefrin düzeylerinde artış yoluyla depresyonda rol oynar [42].

Aspartat, glutamat, homosistein ve sistein gibi uyarıcı amino asitler sinaptik sonrası hücreleri uyarır, alanin, glisin, GABA ve taurin gibi inhibitör amino asitler sinaptik sonrası hücre gelişimini baskılar 43]. Aromatik L-amino asit dekarboksilaz adı verilen ve aynı zamanda DOPA dekarboksilaz, triptofan dekarboksilaz, 5-hidroksitriptofan dekarboksilaz veya AAAD olarak da adlandırılan, L-dopa ve 5-hidroksitriptofanın dopamine ve 5-hidroksitriptofanın ilgili dekarboksilasyonunu katalize eden bir enzim. 7}}hidroksitriptamin de bir rol oynayabilir. Maydanoz, bu enzimin aşırı ekspresyonuna neden olarak antidepresan etkisine katkıda bulunur. Aynı Apiaceae familyasına ait bir bitki olan Centella Asiatica üzerinde yapılan bir araştırma, toplam triterpenlerin antidepresan etkisinin, hipotalamik-hipofiz-adrenokortikal eksenin fonksiyonunun iyileştirilmesi ve monoamin nörotransmitterlerinin içeriğindeki artıştan kaynaklandığını göstermiştir. [44]. Bu çalışmalar, P. sativum'un fenolik ekstraktının anksiyolitik ve antidepresan aktivitesinin varlığını ortaya koymaktadır.

4. Malzemeler ve Yöntemler

4.1. Bitki Malzemesi

Petroselinum sativum Hoffm. Kuzey Fas'taki Tanounate bölgesinden (34 derece 32'9"K 4 derece 38'24"B) çiçeklenme öncesi evrede (2018 baharı) toprak üstü kısımlar toplanmıştır. Bu bitkinin sınıflandırılması, tanımlanması ve botanik adı, kalifiye bir botanikçi Pr. Bari Amina. Bitkinin numunesi Fen Fakültesi Dhar El Mahrez Fez herbaryumunda saklanır (kupon numunesi: 18TA5001).

4.2. çıkarma

Ekstraksiyon, Slighoua ve diğerleri tarafından tarif edildiği gibi gerçekleştirildi. [11]. Kısaca, P. sativum ince tozunun 10 g hava üstü kısımları metanol (100 mL) ile karıştırıldı ve 3 saat 50°C sıcaklıkta yumuşatıldı. Daha sonra, süzüntü, solventin tamamen buharlaşmasını sağlamak için kuruyana kadar bir döner buharlaştırıcı kullanılarak konsantre edildi. Elde edilen ekstrakt, damıtılmış suda (200 mL) yeniden çözündürüldü ve pigmentlerden ve diğer safsızlıklardan kurtulmak için üç heksan ve kloroform (üç kez 200 mL) ile yıkandı. Nihai sulu fazın özü, etil asetat (200 mL üç kez) ile çıkarıldı. Organik faz (etil asetat), polifenol özü elde etmek için konsantre edildi. Ekstraksiyonun verimi yüzde 10,52'dir.

HPLC-DAD analizini kullanarak aşağıdaki polifenollerden oluştuğunu gösterdiğimiz aynı özüt üzerinde daha önce yayınlamıştık: (1) Ferulik asit, (2) Sinnamik asit, (3) Gallik asit, (4) Kuersetin, (5) Myricetin,(6)Naringenin, (7)Hidrox-tirosol [11].

4.3. Çalışma Hayvanları

Bu çalışmada, fareler (İsviçre albino) bilimler fakültesi Dhar el Mahraz Fez Hayvan Evi tarafından sağlanmıştır. Deneylere dahil edilmeden önce, geleneksel kafeslerde altılı gruplar halinde tutularak, 22±2 derece kontrollü sıcaklık ve aydınlık/karanlık döngüsü altında yem ve suya serbest erişim ile iki haftalık adaptasyon süresine izin verildi. 12 sa/12 sa.

Deneyler, Deney Hayvanlarının Tedavisi ve Kullanımına ilişkin uluslararası standartlara [16] ve Dahili Hayvan Etik Kuruluna (#09-12/2019/LBEAS) uygun olarak yapıldı.

4.4. Antioksidan Aktivitesinin Değerlendirilmesi

4.4.1.2,2-Difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) Testi

DPPH, fenolik bileşiklerin antioksidan aktivitesini değerlendirmek için kullanılan en yaygın kimyasal bileşiklerden biridir |45. DPPH, köprü oluşturan bir nitrojen atomu üzerinde eşlenmemiş bir elektrona sahiptir. Bu testin prensibi, özütün koyu mor DPPH serbest radikalini spektrofotometri ile ölçülebilen sarımsı renkli bir redüksiyona indirgeme kapasitesinde özetlenir [28]. Metanol içinde bir dizi ekstrakt konsantrasyonu hazırlandı, 10her biri 0 μL, 750 μL metanolik DPPH çözeltisine (yüzde 0,004) ilave edildi. 25 derecede 30 dakikalık bir inkübasyon periyodundan sonra, absorbans 517 nm'de ölçülmüştür. Negatif kontrol için numune metanol ile değiştirildi. DPPH yüzdesi aşağıdaki denklemle belirlendi:

(1)Ben=[(Boş-Örnek)/Boş]×100

Antiradikal aktivite yüzdesinde, Numune numunenin absorbansıdır ve Blank, negatif kontrolün absorbansıdır.

4.4.2. Demir Azaltma Gücü (FRAP) Testi

İncelenen ekstrakttaki demirin indirgeme gücü (Fe3 plus), Mechchate ve ark. 【28】. Kısaca, farklı konsantrasyonlarda 100 μL ekstrakt 500μL fosfat tamponlu çözelti ile karıştırıldı （PBS,0.2 M, pH6.6 ）ve 500 μL'lik yüzde 1 potasyum ferrisiyanür K, Fe（CN） çözeltisi. Bunlar 50 derecede 20 dakika su banyosunda inkübe edildi. Daha sonra, reaksiyon karışımına 500 µL yüzde 10 sulu trikloroasetik asit （TCA） çözeltisi, 100 µL yüzde 0.1 ferrik klorür FeCl3 çözeltisi ve 0,5 mL damıtılmış su ilave edildi. Bu karışımın absorbans okuması, bitki özü dışında ortamın tüm reaktiflerini içeren bir köre karşı 700 nm'de alındı. Sonuçlar, 0,5'lik bir absorbans elde etmek için gerekli antioksidanların konsantrasyonunu temsil eden yüzde 50 etkili konsantrasyon (EC50) olarak ifade edilir. Absorbanstaki bir artış, test edilen özütün indirgeme gücündeki bir artışa karşılık gelir.

4.5. Antidepresan Aktivite Zorunlu Yüzme Testi (FST)

Porsolt modeli veya zorunlu yüzme testi, antidepresan tipi aktivitenin öngörücü bir testidir. Fareler, su ile 12 cm yüksekliğe kadar doldurulmuş silindirik bir kapta ayrı ayrı yüzmeye zorlanır. Test 6 dakika sürer, ancak testin yalnızca son 4 dakikası analiz edilir. Hayvan dik pozisyonda yüzdüğünde ve sudaki dengesini korumak için sadece birkaç hareket yaptığında hareketsiz kabul edilir (hareketsizlik süresi).

Bu test için her biri beş fareden oluşan toplam dört grup kullanıldı. Tüm bitki özleri 21 gün boyunca gavaj yoluyla uygulandı ve test, özütlerin uygulanmasından 21 gün sonra 1 saat sonra yapıldı. Grup A, negatif kontrol, araç olarak fizyolojik bir solüsyon aldı. Grup B, pozitif kontrol grubu, 11 mg/kg paroksetin aldı. Grup C ve D, sırasıyla 50 ve 100 mg/kg'da PSPE aldı.

Bitki özü uygulamasından bir saat sonra, 6 dakika boyunca hareketsizlik süresi sayıldı. İlk iki dakika farenin strese uyum sağlamasına izin verdi ve ardından fare zamanla yoruldu ve hareketsiz kaldı. Hareketsizlik süresi saniye cinsinden sayıldı ve daha sonra referans için pozitif kontrol grubundaki (paroksetin) farelerin hareketsizlik süresi ile karşılaştırıldı [33].

4.6. an.ksiyolitik Aktivite

4.6.1.Açık Alan

Açık alan(OF) testi, hayvanlar çevreye göre merkezi bir alandan yüksek derecede kaçınma gösterdiğinden, anksiyolitik aktiviteyi tahmin etmek için kullanılır. Keşif ve hareket testi olarak da kullanılır. Alan, siyah çizgilerle işaretlenmiş eşit büyüklükte 25 karoya bölünmüş, 50x50 cm'lik bir alanda düzenlenmiş 40 cm yüksekliğinde dört ahşap duvardan oluşuyordu.

Bu test için her biri beş fareden oluşan toplam dört grup kullanıldı. Tüm bitki özleri 21 gün boyunca gavaj yoluyla uygulandı. Daha sonra, 1,7,14. günlerde bitki özü uygulamasından 1 saat sonra test gerçekleştirildi ve Grup A, negatif kontrol, araç olarak fizyolojik bir solüsyon aldı Grup B, pozitif kontrol, 1 mg/kg'da bromazepam aldı . Grup C ve D, sırasıyla 50 ve 100 mg/kg'da PSPE aldı.

60 dakika sonra test, farelerin toplam ambulatuvar aktivitesini (fareler tarafından geçilen toplam karo sayısı, yani periferik karo sayısı ve dört ayağı olan farelerin çaprazladığı merkezi karolar) ve açık alanın merkezinde geçirilen süre [3146].

4.6.2. Açık-Karanlık Oda Testi

Aydınlık-karanlık oda testi, hayvanın farklı renk ve aydınlatmadaki iki bölme arasındaki hareketlerini analiz ederek kaygıyla ilgili hayvan davranışlarının kolay değerlendirilmesine olanak tanıdığından, anksiyolitik aktiviteyi tahmin etmek için de kullanılır. Daha endişeli hayvanlar, aydınlatılmış odada daha az zaman geçirme eğilimindedir. 44 × 21 × 21 cm boyutlarındaki ahşap açık-koyu kutu, bir geçişle birbirine bağlanan iki siyah ve beyaz bölmeden oluşuyordu (merkezde 7 × 7 cm'lik bir delik, iki bölmeyi ayıran ve birine veya diğerine erişime izin veren bir delik. bölmeler). Aydınlatılmış bölme bir lamba ile aydınlatıldı.

Bu test için her biri beş fareden oluşan toplam dört grup kullanıldı. Tüm bitki özleri 21 gün boyunca gavaj yoluyla uygulandı. Test, 1,7,14 ve 21. günlerde bitki özü uygulamasından 1 saat sonra gerçekleştirildi. Negatif kontrol olan Grup A, araç olarak fizyolojik bir solüsyon aldı. Grup B, pozitif kontrol, 1 mg/kg'da bromazepam aldı. Grup C ve D, sırasıyla 50 ve 100 mg/kg'da PSPE aldı.

60 dakika sonra, her fare karanlık bölmeyi birleştiren açıklığa bakacak şekilde yerleştirilerek beş dakikalık test yapıldı [47]. Her testten sonra kutu alkolle temizlendi. Ölçülen parametreler, ışıklı odada geçirilen süre ve oda geçişlerinin sayısıydı [48].

5. Sonuçlar

Dünya çapında günlük olarak kullanılan bir mutfak bitkisi olan maydanoz, sağlık açısından muazzam faydalar sunar ve bu çalışma sayesinde, özellikle 100 mg/kg dozunda klasik ilaçlardan bile daha iyi, kayda değer bir antidepresan benzeri ve anksiyolitik aktiviteye sahip olduğu gösterilmiştir. Daha az veya neredeyse hiç yan etkisi olmayan etkili bir ilaç arayışında, bu bitki iyi bir alternatif olabilir. Bu çalışma, günlük tüketiminin yanı sıra yerleşik bir fito-tıbbın gelişimini teşvik eder.

Etkinliğini doğrulamak için aynı öze sahip diğer davranış testlerinin performansı da dahil olmak üzere, bu çalışmayı tamamlamak için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır. Bu nedenle, gözlemlenen anksiyolitik ve antidepresan benzeri aktivitelerden sorumlu anahtar bileşeni tanımlamak ve bunların kesin etki mekanizmalarını belirlemek için P. satioum'un fenolik ekstraktının biyo-güdümlü bir fraksiyonlanması planlanmıştır.

Referanslar
1. Friedrich, MJ Depresyon, Dünya Çapında Engelliliğin Önde Gelen Nedenidir. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Zhang, MW; Ho, RC 1994-2014 Arasında 30 Ülkeden Toplulukta Depresyon Prevalansı. Sci. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. Amerikan Psikiyatri Birliği. Ruhsal Bozuklukların Tanısal ve İstatistiksel El Kitabı (DSM-5®); Amerikan Psikiyatri Birliği: Washington, DC, ABD, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Penninx, BW; Schmaal, L. Çok Çeşitli Klinik, Psikolojik ve Biyolojik Verilerden Depresyonun Doğal Seyrinin Tahmin Edilmesi: Bir Makine Öğrenimi Yaklaşımı. Tercüme Psikiyatri 2018, 8, 1–11. [Çapraz Referans]
5. Daviu, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Stres ve Kaygı Arasındaki Nörobiyolojik Bağlantılar. Nörobiyol. Stres 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.A.; Maldonado, M. Benzodiazepinler: Temel İlaçlar veya Toksik Maddeler Olarak Kullanımları. Toxics 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Sheth, CS; Ombach, HJ; Olson, Halkla İlişkiler; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Ancı, KE; Renshaw, PF Sıçanlarda Hipobarik Hipoksi Maruziyeti, Seçici Serotonin Geri Alım İnhibitörleri Fluoksetin, Paroksetin, Essitalopram ve Sertralinin Antidepresan Etkinliğini Farklı Şekilde Değiştirir. farmakol. Biyokimya. Davran. 2018, 170, 25–35. [Çapraz Referans]
8. Es-Safifi, İ.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andriy, A.; Andriy, D. Fas'ın Fez-Meknes Bölgesinde Akut Sindirim Sistemi Sorunlarını Tedavi Etmek İçin Kullanılan Tıbbi Bitkiler: Bir Etnofarmakolojik Araştırma. Etnobotanik. Araş. Uygulama 2020, 20. [ÇaprazRef]
9. Amaghnouje, A.; Mechchate, H.; Es-Safifi, İ.; Bukhira, S.; Aliqahtani, AS; Noman, OM; Nasr, FA; Conte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. İsviçre Albino Farelerinde Origanum Majorana L. Polifenollerinin Toksisite ve Antidepresan Benzeri Etkilerinin Subakut Değerlendirmesi. Moleküller 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Ağyare, C.; Appiah, T.; Bokye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: Bir İnceleme. Med. Baharat Sebze. Afr. 2017, 527-547. [Çapraz Referans]
11. Slighoua, M.; Mehdi, İ.; Di Cristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Maydanozun (Petroselinum sativum Hoffm.) Hidro-Etanolik Ekstraktının ve Polifenolik Fraksiyonunun İn Vivo Östrojenik ve Anti-inflamatuar Aktivitelerinin Değerlendirilmesi. J. Etnofarmakol. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, MRS; Rahimi, R.; Farzaei, F. Maydanoz: Etnofarmakoloji, Fitokimya ve Biyolojik Aktivitelerin İncelenmesi. J. Gelenek. Çene. Med. 2013, 33, 815-826. [Çapraz Referans]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafim, M.; de Almeida, AP; Zingali, RB; Costa, SS Petroselinum Crispum Ekstraktının Fenolik Kimyasal Bileşimi ve Hemostaz Üzerine Etkisi. Nat. Ürün Komün. 2011, 6, 1934578X1100600709. [Çapraz Referans]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Coriandru m Sativum'un Anti-Anksiyete Aktivitesi Farklı Deneysel Anksiyete Modelleri Kullanılarak Değerlendirildi. Hint J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Şahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Pimpinella Anisum Meyvesinin Sulu ve Etanolik Ekstraktlarının Farelerde Antidepresan Benzeri Etkilerinin Değerlendirilmesi. İbni Sina J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, İ.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; İmtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Carum carvi L.'nin Anksiyolitik ve Antidepresan Benzeri Özelliklerine Bir Bakış ve Antioksidan Aktivitesi ile İlişkisi. Yaşam 2021, 11, 207. [CrossRef]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. Ferulik Asit, Anti-İnflamatuvar Aktivite ve HPA Ekseni ile Doğum Öncesi Stresli Yavru Sıçanlarda Depresif benzeri Davranışı İyileştirir. Int. J. Mol. bilim 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP Sinnamik Asitlerin Antidepresan Potansiyeli: İlaç Geliştirmede Eylem Mekanizmaları ve Perspektifler. Moleküller 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Şim, İ.; Lee, H.; Hahm, D.-H. Quercetin'in Sıçanlarda Lipopolisakkarit Tarafından İndüklenen Anksiyete Benzeri Semptomlar ve Nöroinflamasyon Üzerindeki Koruyucu Etkileri. Kötü. Temelli Tamamlayıcı. Alternatif. Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovi'c Markoviç, A.; Tori's, J.; Barbar, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hydroxytyrosol, Tyrosol ve Türevleri ve Bunların İnsan Sağlığı Üzerindeki Potansiyel Etkileri. Moleküller 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburg, İ.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Seçilmiş Mutfak Bitkileri ve Baharatlardan Ekstraktların Antioksidan Aktiviteleri. Gıda Kimyası 2006, 97, 122-129. [Çapraz Referans]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, H O; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. Duygudurum Bozukluklarında Düşük Yaşam Kalitesi Artan Nöro-Oksidatif Stres ve Bazal Tiroid Uyarıcı Hormon Düzeyleri ve Antikonvülsan Duygudurum Stabilizatörlerinin Kullanımı ile İlişkilidir. J. Eval. Klinik. Pratik yapın. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, H O; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Duygudurum Bozukluklarında Artan Kan Basıncının Ana Belirleyicisi Olarak Artan Nitro-Oksidatif Stres Toksisitesi. J. Etki. Bozukluk. 2021, 278, 226–238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eick, SM; Barrett, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Kuğu, SH; Ferguson, KK Gebelikte Prenatal Psikolojik Stres ve Oksidatif Stres Arasındaki İlişki. Pediatr. Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318-326. [Çapraz Referans]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, HS; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Egzersiz Sırasındaki Psikolojik Stresin Genç Sağlıklı, Eğitimli Erkeklerde Oksidatif Stres Belirteçleri Üzerindeki Etkileri. Fizyol. Davran. 2019, 198, 90–95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schröder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athias, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. Fosfolipid Transfer Proteini (PLTP) Eksikliği Farelerde Beyin E Vitamini İçeriğini Azaltır ve Kaygıyı Artırır. FASEB J. 2005, 19, 1-16. [Çapraz Referans]