Cistanche Feniletanol Glikozitlerinin Farelerde Siklofosfamid ile İndüklenen Spermatogenez Üzerindeki Terapötik Etkisi ve Mekanizması

İletişim: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-posta:audrey.hu@wecistanche.com

ZHAODong-hai1, ZHANGLei2, ZHANGYan3, QILing1, ZOU Xiang-ming4

[Özet]

Amaç:terapötik etkisini araştırmak içinCistanche feniletanoid glikozitlerSiklofosfamid ile indüklenen spermatogenez ile fareler üzerinde ve etki mekanizmasını önceden netleştirmek için.Yöntem:Ekstrakt için etanol ekstraksiyon yöntemiCistanche feniletanoid glikozitler. Kırk BALB/C faresi rastgele bir kontrol grubu, bir model grubu, düşük dozCistanche feniletanoid glikozitgrup (50 mg·kg-1) ve her grupta 10 fare bulunan yüksek dozlu bir grup (100 mg·kg-1). Kontrol grubu hariç, diğer gruplardaki farelere, spermatogenez bozukluklarının fare modellerini hazırlamak için ardışık 5 gün boyunca her gün siklofosfamid (80 mg·kg-1) enjekte edildi. Son uygulamadan sonra, düşük doz ve yüksek doz gruplarındaki farelerCistanche feniletanoid glikozitlerkarşılık gelen dozlar gavaj yoluyla verildi ve kontrol grubu ve model grubundaki farelere, 30 gün boyunca günde bir kez gavaj yoluyla aynı hacimde normal salin verildi. Son gavajdan yirmi dört saat sonra fare testis dokusu alındı. Fare testis dokusu homojenatındaki testosteron seviyesini belirlemek için enzime bağlı bir immünosorbent tahlili kullanıldı. Her grubun sperm yoğunluğu, sperm motilitesi ve sperm anormallik oranı karşılaştırıldı. HE boyama ile testis dokusunun morfolojik değişiklikleri gözlemlendi. Bulgular: Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubun sperm yoğunluğu ve sperm motilite oranı azaldı (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" increased=""><0.01), and="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" decreased=""><0.01). 0.01);="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" of="" mice="" in="" each="" dose="" group="" of="">Cistanche feniletanoid glikozitlerönemli ölçüde arttı (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.01), and="" the="" testicular="" tissue="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" homogenate="" increased=""><0.05 or=""><0.01). histological="" observations="" showed="" that="" the="" seminiferous="" tubules="" in="" the="" testis="" of="" the="" model="" group="" were="" atrophied="" and="" degenerated,="" the="" seminiferous="" epithelium="" was="" significantly="" thinner,="" the="" arrangement="" of="" spermatogenic="" cells="" was="" disordered,="" and="" the="" number="" of="" sperm="" in="" the="" cavity="" decreased;="" the="" number="" of="" the="" seminiferous="" epithelium="" in="" the="" testes="" of="" the="">Cistanche feniletanoid glikozitgrup önemli ölçüde artmıştır, Katmanlar belirgindir, spermatojenik hücreler düzgün, sıkı ve düzenli bir şekilde düzenlenmiştir ve lümende sperm görülebilir.Çözüm: Cistanche feniletanoid glikozitlerfarelerde siklofosfamidin neden olduğu spermatogenez bozukluğu üzerinde önemli bir terapötik etkiye sahiptir ve mekanizması, testis dokularındaki testosteron seviyelerinin iyileştirilmesi ile ilişkili olabilir.

[Anahtar kelimeler]Cistanche feniletanoid glikozitler; siklofosfamid; spermatogenez bozukluğu; fareler, BALB/C

Cistanche ürünleri için tıklayın

Sosyal ritmin hızlanması, kötü yaşam alışkanlıkları ve çevre kirliliği ve diğer faktörler nedeniyle, oligospermi ve astenospermi gibi anormal sperm kalitesi erkek kısırlığının ana nedeni haline gelmiştir [1]. Şu anda, oligospermi ve astenospermi tedavisi için daha az ilaç vardır ve terapötik etki açık değildir. Geleneksel Çin tıbbı reçeteleri veya aktif içerikleri, erkek üreme fonksiyonunu iyileştirmede iyi etkilere sahiptir [2-6]. Bununla birlikte, reçeteli ilaçların çok çeşitli olması nedeniyle, farmakolojik etkileri ile ilacın etkili bileşenleri arasındaki ilişki net değildir ve bu da spermatojenik ilaçların tanıtımını ve uygulamasını sınırlamaktadır. Çin tıbbının etkili bileşenlerinin araştırılması ve geliştirilmesi ve üreme yaralanmalarındaki terapötik etkilerinin incelenmesi, iyi bir uygulama değerine sahiptir.Cistanche feniletanoid glikozitleren önemli aktif maddelerden biridir.cistanche çöl çiçeği. Bunlar genellikle çekirdek olarak -glukoz ile ester bağları ve okso-glikosidik bağlar içeren doğal glikozitlerdir. Çift çenekli bitkilerde yaygın olarak bulunurlar [7]. Çalışmalar [8] göstermiştir kicistanchefeniletanoidglikozitlersıçan spermini in vitro oksidatif hasardan koruyabilir, ancak spermatogenezi hakkında herhangi bir rapor yoktur. Bu deney, Cistanche feniletanoid glikozitlerin, siklofosfamid ile indüklenen spermatogenez ile farelerin spermatojenik fonksiyonu üzerindeki terapötik etkisini inceler ve uygulanması için deneysel ve teorik bir temel sağlar.Cistanche feniletanoid glikozitlerspermatogenez bozukluklarının tedavisinde.

1. Malzemeler ve yöntemler

1.1. Laboratuvar hayvanları, ana reaktifler ve aletler

20-22g vücut kütlesine sahip, 6-8 haftalık 40 SPF sınıfı yetişkin BALB/C faresi, Jilin Üniversitesi Temel Tıp Fakültesi Hayvan Deney Merkezi'nden satın alındı ​​ve hayvan sertifika numarası : SCXK (Kırgızistan) 2008-005. Fareler deneyden 5 gün önce adaptif olarak yetiştirildi. Besleme koşulları: 22 derece ~ 25 derece, sirkadiyen ritim (12 saat/12 saat), serbest içme suyu ve yiyecek. Cistanche, Xinjiang Dakang Trading Company'nin bir ürünüdür. Enjeksiyon için siklofosfamid, Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd.'den satın alındı ​​(parti numarası 11061921). Testiküler doku homojenat testosteron enzimine bağlı immünoanaliz kiti Tianjin Jiuding Medical Bioengineering Co., Ltd.'den satın alındı ​​(parti numarası) 20120812), diğer reaktiflerin tümü yurt içinde üretilen analitik derecelerdir. PLUS384 mikroplaka okuyucu (Amerika Birleşik Devletleri'nde MDC), TE2000U ters mikroskop (Nikon, Japonya) ve J-26XP santrifüj (Nanodrop, Amerika Birleşik Devletleri).

1.2 Cistanche Feniletanol Glukozitin Hazırlanması

10 g cistanche tozu, fenetil alkol glikozit konsantresini elde etmek için her seferinde 2 saat olmak üzere yüzde 70 etanol ile geri akışa tabi tutularak özümlendi. Konsantre edilmiş çözelti, D101 makro gözenekli reçine kolonu üzerinde kromatografiye tabi tutuldu ve Cistanche fenekozit alkolü elde etmek için yüzde 70 etanol ile yıkandı. UV spektrofotometresi, özü 333 nm dalga boyunda tanımladı.

1.3 Hayvan modelinin hazırlanması ve ilaç uygulama yöntemi

40 erkek BALB/C faresi 5 gün boyunca adaptif olarak beslendikten sonra, fareler rastgele 4 gruba (her grupta 10 fare) ayrıldı: kontrol grubu, model grubu, CistancheCistanche feniletanoid glikozitlerdüşük doz grubu veCistanche feniletanoid glikozitleryüksek doz grubu. Kontrol grubu dışında, diğer üç fare grubuna, spermatogenez bozukluklarının hayvan modellerini hazırlamak için art arda 5 gün boyunca her fare için intraperitoneal siklofosfamid 80 mg·kg-1 enjeksiyonu yapıldı. Model hazırlandıktan sonra düşük ve yüksek doz gruplarındaki farelercistanchefeniletanoid sırasıyla 50 ve 100 mg·kg-1·d-1 verildi. Kontrol grubundaki ve model grubundaki farelere eşit hacimlerde normal salin verildi. 30 gün boyunca günde bir kez. Tüm fareler, son ilaç uygulamasından 24 saat sonra öldürüldü ve iki taraflı testler alındı. Sağ testis formaldehit ile tespit edildi. Epididim ve testis sol taraftan alındı. Testis homojenize edildi ve 3,000 dakikada 10 dakika santrifüj edildi. Süpernatant alındı ​​ve test için -20 derecede bir buz kutusunda saklandı. Sol epididim, sperm yoğunluğu, sperm motilitesi ve deformite oranı açısından test edildi.

1.4 Sperm yoğunluğunun, sperm motilitesinin ve deformite oranının belirlenmesi

10 mL sperm besin solüsyonu [9] içeren bir test tüpünü önceden 37 dereceye kadar ısıtmak için sabit sıcaklıktaki bir su banyosuna yerleştirin, bağ dokusunu ve yağı çıkarmak için tek taraflı bir epididim alın, dokuyu kesin ve bir test tüpüne koyun. 37 derecede 10 dakika Sperm tamamen serbest kaldıktan sonra kan hücresi sayım plakasına 1 damla alın ve hücre sayım yöntemine göre sperm yoğunluğunu hesaplayın. Sonuç, mililitredeki sperm sayısı olarak ifade edilir; ayrıca test tüpünden 5μL sperm süspansiyonu ve aynı miktarda eozin-Y alın İyice karıştırın, oda sıcaklığında 10 dakika bekletin, bir kapak camı ekleyin ve ışık mikroskobu ile gözlemleyin. Ölü sperm pembeye boyanır, canlı sperm boyanmaz ve sitoplazma şeffaftır. Her örnek 200 spermi sayar, sperm canlılığını hesaplar, sonuç yüzde olarak ifade edilir, sperm canlılığı=canlı sperm sayısı / toplam sperm sayısı × yüzde 100 . 5 uL'lik başka bir sperm süspansiyonu, 5 dakika süreyle metanol içinde sabitlendi, kurutuldu ve 1 saat boyunca yüzde 2'lik sulu eozin çözeltisi ile lekelendi, durulandı ve fön ile kurutuldu. Düşük güçlü bir lens altında daha az sperm örtüşen parçaları arayın ve sperm morfolojisini sırayla kontrol etmek için yüksek güçlü bir lens kullanın. Her fare 1,000 tam spermi inceledi. Kancasız, muz biçimli, amorf, şişman başlı ve çift başlı sperm başları deformite olarak değerlendirildi. Sperm deformite oranı hesaplandı ve sonuçlar yüzde olarak ifade edildi. Sperm deformasyon oranı=deforme olmuş sperm sayısı / toplam sperm sayısı × yüzde 100 .

1.5 Üreme hormonlarının tayini

Testis zardan soyuldu ve bir şişe tabağına ve önceden soğutulmuş homojenizasyon ortamına (0.01mol·L-1 sakaroz, 0.01mol) yerleştirildi. ·L-1 Tris- HCl, 0.1mmol·L-1 EDTA-Na2 solüsyonu, pH 7.4), testis dokusunu oftalmolojik makasla kesin, bir cam homojenizasyon tüpüne dökün ve 4°C'de santrifüjleyin, 000×g düşük sıcaklıkta 10 dakika ve süpernatantı alın, Testiküler doku homojenatındaki testosteron seviyesini ölçmek için enzime bağlı immünosorbent test kiti kullanın ve her numune için 3 paralel numuneyi test edin. Deney adımları ve yöntemler, kitin talimatlarına uygun olarak tamamlanmıştır.

1.6 Testisin morfolojik gözlemi

HE ile boyanmış fare testisinin parafin kesitlerini alın ve ışık mikroskobu altında testis dokusundaki spermatogonia ve spermatojenik hücrelerin dağılımını gözlemleyin.

1.7 İstatistiksel analiz

İstatistiksel analiz, SPSS17.0 istatistik yazılımı kullanılarak yapıldı. Her gruptaki farelerin sperm yoğunluğu, sperm hareketlilik oranı, sperm deformite oranı ve testis testosteron seviyesi x±s olarak ifade edildi ve gruplar arasındaki karşılaştırma tek faktörlü varyans analizi ile yapıldı.

2. sonuçlar

2.1. Her fare grubunun sperm yoğunluğu, sperm hareketliliği ve sperm deformite oranı

Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubun sperm yoğunluğu ve sperm canlılığı azaldı (P<0.01), and="" the="" sperm="" deformity="" rate="" increased=""><0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" rate="" of="" mice="" in="" each="" dose="" of="">Cistanche fenoksietanol glikozitarttı (P<0.05 or=""><0.01), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05 and=""><0). .01).="" compared="" with="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group,="" the="" high-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" had="" higher="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility=""><0.05), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05). see="" table="">

2.2 Her gruptaki farelerin testis dokularındaki testosteron seviyeleri

Kontrol grubu ve model grubunun testis dokusu homojenatlarındaki testosteron seviyeleri (10.26±0.57) ve (5.33±0.84) nmol·L-1, sırasıyla. Model grubunun testosteron seviyesi, kontrol grubundan önemli ölçüde düşüktü (P<0.01). the="" testosterone="" levels="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" were="" (7.55±1.21)="" and="" (10.35±0.94)="" nmol·l-1.="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" low="" and="" high-dose="" groups="" of="" cistanche="" cistanche="" ethanol="" glycosides="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05 or=""><0.01). the="" testosterone="" level="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="">cistanchecistanche fenetil glikozit yüksek doz grubu, düşük doz grubundan önemli ölçüde daha yüksekti (P<>

2.3 Her grupta fare testis morfolojisi

Işık mikroskobu ile bakıldığında normal grubun testislerindeki seminifer tübüllerin yoğun bir şekilde sıralandığı, germ hücrelerinin seviyesi ve sayısının fazla olduğu, seminifer epitelinin düzgün düzenlendiği ve seminifer tübüllerin tamamı sperm oluşumu ile birlikte görüldü. Model grubunda farelerin testislerindeki seminifer tübüller atrofik ve dejenere olmuş, seminifer epitel önemli ölçüde inceltilmiş, epitel tabakalarının sayısı azalmış, diziliş bozulmuş ve kavitedeki sperm sayısı azalmıştır. Model grubu ile karşılaştırıldığında, düşük dozCistanche fenetil alkol glikozit.

Grupta, seminifer tübüllerin seminifer epitel tabakalarının sayısı arttı, epitel düzeni daha düzenliydi ve seminifer tübüllerin hasarı açıkça iyileşti; yüksek dozda seminifer tübüllerin yapısıCistanche feniletanoid glikozitgrup daha belirgin bir şekilde iyileşti ve seminifer epitel tabakalarının sayısı ve sayısı önemli ölçüde arttı. Düzgün bir şekilde düzenlenmiş seminifer tübüllerde olgun spermler vardır ve yapı temelde normale dönmüştür. Şekil 1'e bakın (Ek 6).

3 Tartışma

Siklofosfamid, yaygın olarak kullanılan bir anti-tümör ilacı ve immünosupresan olup, esas olarak DNA'nın alkilasyonu yoluyla çeşitli hücre içi biyolojik fonksiyonlara müdahale eder. Üreme toksisitesi, kolayca sperm DNA hasarına ve anormal sperm gelişimine yol açabilen siklofosfamidin [3] ana yan etkilerinden biridir. Klinik çalışmalar [10-11], siklofosfamidin üreme toksisitesinin azospermi veya oligospermiye neden olabileceğini göstermektedir. , Kısırlığa veya yavrularda genetik kusurların veya malformasyonların oluşmasına yol açar.

Cistanche tübülozaLeiden ailesinde çok yıllık yüksek parazitik bir bitkidir. Böbreği ve yang'ı besleyen, kanı besleyen, bağırsakları besleyen iyi bilinen bir Çin tıbbıdır. Erkek üreme işlev bozukluğunun geleneksel tedavisi için yaygın olarak kullanılan reçeteli bir ilaçtır [12].feniletanoid glikozitleren önemli aktif bileşenlerinden biridir.cistanche[13] ve anti-oksidasyon, anti-aging ve anti-tümör [14] gibi çok çeşitli farmakolojik etkilere sahiptir.

Bu çalışmada, spermatogenez bozukluğunun bir fare modelini hazırlamak için siklofosfamid kullanılmış ve Cistanche feniletanoid glikozitlerin siklofosfamidin neden olduğu spermatogenez bozukluğu üzerindeki terapötik etkisi incelenmiştir. Sonuçlar, normal grupla karşılaştırıldığında, model grubun sperm yoğunluğunun azaldığını, hayatta kalma oranının azaldığını ve deformite oranının arttığını gösterdi. Model grubuyla karşılaştırıldığında, Cistanche fenoksietanol glikozitlerinin tüm doz grupları, sperm yoğunluğunu etkili bir şekilde artırabilir, sperm hareketliliğini artırabilir ve sperm deformite oranını azaltabilir. Yukarıdaki sonuçlar, cistanche fenoksietanol glikozitlerin spermatogenezi teşvik edebileceğini ve hasarlı testisi koruyabildiğini göstermektedir. Testis morfolojisinin sonuçları, tedaviden sonraCistanche feniletanoid glikozit, model farelerin testislerindeki seminifer epitel sayısının önemli ölçüde arttığını, katmanların farklı olduğunu, spermatojenik hücrelerin düzgün, sıkı ve düzenli olduğunu ve lümende spermin görülebildiğini düşündürür.Cistanche feniletanoidShanhe, üreme yaralanmasından sonra seminifer epitelinin yapısını ve morfolojisini geri yükler.

Testosteron, erkek germ hücrelerinin farklılaşmasını düzenler ve testisin normal gelişimi ve spermin normal oluşumu için gerekli bir koşuldur. Bazı çalışmalar [15], testisin Sertoli hücrelerinde androjen reseptörlerinin seçici olarak yok edilmesinin, sperm gelişim bozukluklarına ve erkek kısırlığına neden olduğunu bildirmiştir. Bu çalışmada, spermatojenik üretmek için siklofosfamid kullanıldı.

Engel yaralanma modelinden sonra, farelerin testis dokusundaki testosteron seviyesi, normal gruba göre önemli ölçüde düşüktü. Cistanche feniletanoid glikozitlerin etkisinden sonra, her doz grubundaki testosteron seviyeleri arttı ve yüksek doz grubundaki testosteron seviyesi, düşük doz grubundan önemli ölçüde daha yüksekti. Cistanche fenoksietanol glikozitlerin, spermatojenik disfonksiyonu tedavi etmek için testis dokusundaki testosteron seviyesini artırarak spermatogenezi teşvik edebileceği öne sürülmektedir, ancak testosteron üzerindeki etkisinin mekanizması daha fazla araştırma ve tartışmaya ihtiyaç duymaktadır.

Testosteron, erkek germ hücrelerinin farklılaşmasını düzenler ve testisin normal gelişimi ve spermin normal oluşumu için gerekli bir koşuldur. Bazı çalışmalar [15], testisin Sertoli hücrelerinde androjen reseptörlerinin seçici olarak yok edilmesinin, sperm gelişim bozukluklarına ve erkek kısırlığına neden olduğunu bildirmiştir. Bu çalışmada, spermatojenik üretmek için siklofosfamid kullanıldı.

Engel yaralanma modelinden sonra, farelerin testis dokusundaki testosteron seviyesi, normal gruba göre önemli ölçüde düşüktü. eyleminden sonraCistanche feniletanoid glikozitler, her doz grubundaki testosteron seviyeleri arttı ve yüksek doz grubundaki testosteron seviyesi, düşük doz grubundan önemli ölçüde yüksekti. Cistanche fenoksietanol glikozitlerin, spermatojenik disfonksiyonu tedavi etmek için testis dokusundaki testosteron seviyesini artırarak spermatogenezi teşvik edebileceği öne sürülmektedir, ancak testosteron üzerindeki etkisinin mekanizması daha fazla araştırma ve tartışmaya ihtiyaç duymaktadır.

[Referanslar]

[1] Wang Yixin, Zheng Jufen. Erkek kısırlığı araştırmasında yeni ilerleme [J]. Çin Androloji Dergisi, 2006, 12(9): 771-774.

[2] Xie Jianxing, Wang Jun, Chen Ming, et al. Guilingji Kapsülünün Oligospermili Model Sıçanlar Üzerindeki Etkisi. Sperm üretiminin rolü ve seks hormonları üzerindeki etkisi [J]. Guangzhou Üniversitesi Geleneksel Çin Tıbbı ve Eczacılığı Dergisi, 2011, 28(6): 621-623.

[3] Zhang Changcheng, Jia Liangliang, Li Shouchao, et al. Epimedium toplam flavonoidler, siklofosfamidin en aza indirilmesine neden olur Sıçan kaynaklı sperm bariyerinin [J] koruyucu etkisi üzerine araştırma. Çin patent tıbbı, 2010, 32 (12): 2052-2055.

[4] Xu Lei, Wang Rui, Zhang Weixing, et al. Siklofosfamidin neden olduğu Sperm Bozulması Üzerindeki Shengjing Granülleri Farelerin [J] terapötik etkisini engeller. Zhengzhou Üniversitesi Dergisi: Tıp Bilimi Baskısı, 2008, 43(2): 267-270.

[5] Wang Rui, Xu Lei, Zhang Weixing, et al. Çin Tıbbının Shengjing Granüllerinin Spermatogenez Bozulmuş Fareler Üzerindeki Etkisi Terapötik etkiler üzerine deneysel araştırma [J]. Çin Androloji Dergisi, 2008, 14 (11): 1046-1049.

[6] Guo Kaihua, Gao Fulu, Niu Siyun, et al. Heshouwu Kaynatmasının Yaşlanan Sıçanların Testis Dokusu Üzerindeki Etkisi Hücre Rb/p53 sinyal iletim yolunun [J] etkisi. Anatomi Dergisi, 2010, 41(3): 435-439.

[7] Wu Haihong, Xuan Guodong, Liu Chunquan. Etanol Faktör araştırması [J] ile Cistanche Feniletanol Glukozitin Geri Akış Ekstraksiyonunun Etkisi. Jiangsu Tarım Bilimleri, 2009 (1): 250-251.

[8] Li Gang, Zhu Wenbin, Niu Fei, et al. Cistanche Phenylethanol Glucoside'ın Sıçan Spermi Üzerindeki Etkileri Dış oksidatif hasarın koruyucu etkisi üzerine Araştırma [J]. Lishizhen Geleneksel Çin Tıbbı ve Materia Medica, 2010, 21(9): 2205-2207.

[9] Chen Deyu, Liu Limin, Xie Qingdong, vb. Sperm mitokondriyal fonksiyonu üzerindeki anti-semen antikorları [J]'nin etkisi. Shantou Üniversitesi Tıp Fakültesi Dergisi, 2008, 21(1): 4-6.

[10] KenneyLB, Laufer MR, Grant FD, et al. Yüksek bilgi riski, yüksek dozda siklophaphamiddeforsarcomathing çocukluk [J].Cancer, 2001, 91(3): 613-621.

[11] JahunkainenK, EhmckeJ, Houm, et al. Testis fonksiyonu ve mallekanserpartilerde doğurganlığın korunması [J]. BestPrect ResClinEndocrinol Metab, 2011, 25: 287-302.

[12] Gao Zhanyou, Zhou Haitao, Lin Qiang. Cistanche'nin sıçanlarda egzersiz yorgunluğuna direnme yeteneği ve beyindeki serbest radikallerin etkisi [J]. Anhui Tarım Bilimleri, 2011, 39(16): 9592-9595.

[13] Ren Lu, Gu Xiaohong, Tang Jian, et al. Ekili Cistanche cistanche Ekstraksiyon ve saflaştırma araştırmalarında feniletanol glikozitler [D]. Wuxi: Jiangnan Üniversitesi, 2006, 25(3): 33-36. [14] Jinghui, Zuo Jianfeng, Li Jiaoshe. Fenoksietanol glikozitlerin farmakolojik araştırmalarındaki gelişmeler Sergi [J]. Lishizhen Medicine ve Materia Medica, 2006, 17(3): 440-441.

[15] ChangC, ChenYT, YehSD, et al. Infomedia bahar TheandrogenreceptorinSertolicells [J]. ProcNatlAcadSci ABD, 2004, 101 (18): 6876-6881.