Cistanche Oligosaccharide'in Farelerde D-Galaktoza Bağlı Subakut Yaşlanma Üzerinde Yaşlanma Karşıtı Etkisi

Soyut:Arjantinoligosakkarit(COS), doğalpolisakkaritiyi ileantioksidanVe anti-inflamatuar özellikler, çeşitli biyolojik özelliklere sahip cistanche'nin depolimerize ürünüdür.faaliyetler. Bu çalışma, araştırmak için tasarlanmıştır.COS'un olası yaşlanma karşıtı etkisiAçıktarafından indüklenen yaşlanma modeli fareD-galaktoz (D-gal) ve altta yatan mekanizmayı keşfedin.Deneyde, 48 erkek Kunming faresi (KM faresi) rastgele normal farelere ayrıldı.grup, model grup, pozitif grup ve düşük-orta-yüksek doz polisakkarit grupları (300, 600,1200 mg/kg/gün).

Yaşlanma Karşıtı Cistanche Extract Almak İçin Buraya Tıklayın

Sonuçlar, subkutan enjeksiyondan sonra intragastrik sonda ile COS'unile ilgiliD-gal'i (250 mg/kg/gün) farelerin boynuna sekiz hafta boyunca peş peşe taktı, kademeli olarak iyileştifarelerin vücut ağırlığı, günlük yaşam aktivitesi ve organ indekslerinin yanı sıra etkili bir şekilde iyileştirildihistolojik bozulmakaraciğer ve böbrektarafından tetiklenen farelerdeD-gal. Spesifik olmak,COS, antioksidan enzimlerin aktivitelerini açıkça geliştirdiiçindeKM farelerinin karaciğeri ve böbreği, katalaz (CAT), glutatyon peroksidaz (GSH-Px) dahil vesüperoksit dismutaz(SOD), olarakAyrıcaazaltılmış malondialdehit(MDA) seviyeleri, model grubu farelerdekilerle karşılaştırıldığında.Ayrıca, COS yalnızcaazaltılmış seviyeleriserum immünoglobuliniG (IgG) ve tarafından indüklenen IgMD-galama aynı zamandaönemli ölçüde engellediD-gal kaynaklı serum alanin upregülasyonuaminotransferaz(ALT), aspartat transaminaz (AST), alkalin fosfataz (ALP), ürik asit (UA)ve kreatinin (CREA) seviyeleri, model grubundaki farelerinkiyle karşılaştırıldı. Bu sonuçlarCOS'un sahip olduğunu göstermekbariz yaşlanma karşıtı aktiviteD-gal kaynaklı subakut yaşlanan fareler,mekanizması, bir dereceye kadar,antioksidan savunmayı güçlendirmek,azaltmaoksidatif stres, Vebağışıklık fonksiyonunu iyileştirmekyaşlanan model fareler.

anahtar kelimeler:Arjantinoligosakkarit; D-galaktoz; subakut yaşlanma;yaşlanma karşıtı; antioksidan; bağışıklık fonksiyonu

1. Giriş

Yaşlılık olarak da bilinen yaşlanma, ortaya çıkan karmaşık ve geri dönüşü olmayan bir dejenerasyondur.sadece vücut dokularında değil, zayıf bağışıklık gibi vücut organlarının fizyolojik fonksiyonlarında datepkiler, hafıza kaybı vb. Çok sayıda çalışma, yaşlanmanın yakından ilişkili olduğunu keşfetmiştir.ileçeşitli kronik hastalıklar, örneğinhipertansiyon, diyabet,ateroskleroz, Alzheimer hastalığı, Parkinson hastalığı, Veçoklu kanserler [1–3]. 21. yüzyıla girdikten sonra, küresel trend ileyaşlanma ve tüm dünyada yaşam standartlarının iyileşmesi, yaşlanmanın neden olduğu sağlık sorunlarıve yaşlanma ile ilişkili hastalıklar giderek daha belirgin hale geldi. Bu nedenle, nasıl sürdürüleceğiyaşlıların sağlığı ve yaşlanmanın geciktirilmesi ve yaşlanmaya bağlı hastalıkların ortaya çıkması zatenbugün insanlar arasında, özellikle gençler arasında ortak bir konu ve aynı zamanda bir araştırma noktasıBilim insanları [2,3]. Yaşlanmanın teorik hipotezlerinde, başlangıçta önerilen serbest radikal yaşlanma teorisi1950'lerde Denham Harman tarafından, geniş çapta endişelendi [4]. Kabul edilir ki enYaşlanmanın önemli belirleyicisi, reaktif oksijenin aşırı üretiminin neden olduğu oksidatif hasardır.türler (ROS). Aşırı ROS oluşumu doğrudan oksidatif stres ve proinflamatuar ile sonuçlanır.tepkiler, daha sonra redoks dengesizliğine neden olur ve sonuçta protein oksidasyonuna, lipide yol açar.normal hücre fonksiyonlarını tam olarak engelleyebilen peroksidasyon ve mitokondri ve DNA hasarı,ve hatta apoptoza neden olur [5,6].

Bu arada, ROS'un yaşlanmada ek bir rol oynaması bekleniyor.süperoksit dismutazlar da dahil olmak üzere endojen antioksidan sisteme doğrudan veya dolaylı olarak zarar verir.(SOD), katalaz (CAT) ve glutatyon peroksidaz (GSH-Px) [7]. Ayrıca, giderek daha fazla kanıtyaşlanmanın, vücudun gerilemesinden kaynaklanan kaçınılmaz bir biyolojik fenomen olduğunu göstermiştir.Bağışıklık fonksiyonu ve araştırmalar ayrıca yaşlanma ve bağışıklık arasında pozitif bir ilişki olduğunu göstermiştir.vücudun dış patojenlere direnme yeteneğinde bir azalmaya yol açan bağışıklık disfonksiyonu,böylece yaşlanmaya bağlı hastalıkların olasılığını artırır [8–10]. Bu analizlere dayanarakyaşlanma mekanizmaları, antioksidan ve/veya immünomodülatör fonksiyonları olan ajanlar olabiliryaşlanma ile ilişkili hastalıklarda önleyici veya potansiyel terapötik değer.

Kecentlv. çok sayıda doğal bileşik keşfedilmiş ve yeni yaşlanma karşıtı tedavilerin geliştirilmesi için potansiyel adaylar olarak büyük ilgi çekmiştir. biyolojik aktiviteler, bu nedenle, bu subakut yaşlanmayı önlemek ve/veya tedavi etmek için antioksidan, immünomodülatör ve anti-inflamatuar özelliklere sahip doğal içerik maddeleri aramak yeni bir sıcak nokta haline geldi. } B-14-bağlı D-glukozamin birimleri, cistanche'nin depolimerize ürünüdür (Şekil 1'de gösterildiği gibi) [11]. Çalışmalar, COS'un biyouyumlu, toksik olmayan ve emilebilir olduğunu ve ayrıca anti-bakteriyel, nöroprotektif, anti-diyabetik, anti-tümör ve anti-hipoglisemik özellikler dahil olmak üzere çeşitli biyolojik etkilere sahip olduğunu göstermiştir. farmasötik uygulamalarda (11-13Ayrıca, COS'un antioksidan aktiviteyi artırabildiğini, uygun bir redoks dengesini koruyabildiğini ve ilgili sinyal yollarını ayarlayarak anti-enflamatuar kapasiteye sahip olabileceğini gösteren kanıtlar da vardır (14.151. Son çalışmamız, Tüysüz fare derisinde ultraviyole ışınlamanın neden olduğu fotoyaşlanma, COS ile topikal tedavi ile önemli ölçüde iyileştirilmiştir (16Ayrıca, COS'un farelerde oksidatif stresin neden olduğu retina hasarını azaltabildiği, fareleri LPS tehdidinden koruyabildiği, retinal I/R yaralanmasını önleyebildiği bildirilmiştir. esas olarak antioksidan enzimlerin aktivitelerini koruyarak ve NF-KB'nin aktivasyonunu inhibe ederek (17-20. Ayrıca, düşük moleküler ağırlık ve düşük viskozite ile COS'un büyük bir etkiye sahip olduğu yaygın olarak kabul edilmektedir) insan bağırsak yolunun emilimini etkiler ve hızla kan dolaşımına girebilir; bu arada organizmada sistemik bir biyolojik etkinin üretilmesine de katkıda bulunur ve vücuttaki farmakolojik etkileri artırır (17181.

Şekil 1.Kimyasal yapıCOS'un.

COS'un biyolojik aktiviteleri ile ilgili önceki çalışmalara dayanarak, bu oligosakkaridin yaşlanma karşıtı alanda kullanılmak üzere önemli bir potansiyele sahip olabileceğine inanmak mantıklıdır, ancak bu doğal polisakaritin koruyucu etkileri hakkında sınırlı bilgi vardır. in vivo olarak D-galaktoz (D-gal) kaynaklı subakut yaşlanmaya karşı moleküler ağırlık. Bu nedenle, bu çalışma, esas olarak oksidatif stres parametrelerini ölçerek ve ayrıca farelerin makroskopik ve histopatolojik durumlarını değerlendirerek ve/veya bunların COS'un yaşlanma karşıtı etkisi için öncü bir farmakolojik temel sağlayan ana organlar

2. Sonuçlar

2.1. Günlük Davranış Gözlemi

Deneyimizin sekiz haftalık süresi boyunca, farelerin günlük görünümleri ve davranışsal aktiviteleri gözlemlendi ve haftalık olarak kaydedildi, bu da her grupta meydana gelen kusma ve beslenmeme gibi patolojik değişikliklerin olmadığını gösterdi. Normal gruptaki fareler sadece akli dengesi yerinde değil, aynı zamanda canlı, hareketli, çevik ve sağlıklı besleniyorlardı. Şekil 2'de gösterildiği gibi, normal grup dışında, diğer gruplardaki fareler, D-gal enjeksiyonundan sonraki ilk aşamada kilo kaybı gösterdi ve ardından yavaş yavaş kilo aldı. D-gal enjeksiyonunun beşinci haftasından sonra, model grubundaki fareler, yavaş hareket, kademeli olarak azalan gıda alımı, yanıtta gecikme, halsizlik ve ayrıca solmuş ve cansız kürk dahil olmak üzere belirgin yaşlanma belirtileri gösterdi; deri altı D-gal enjeksiyonu ile tetiklenen başarıyla kuruldu. Model grubuyla karşılaştırıldığında, E vitamini (VE) ve ilaç verilen gruplardaki farelerin yukarıdaki yaşlanma özellikleri, farklı derecelerde geri çekildi. Özellikle COS-H tedavi grubunda, yukarıdaki farelerin yaşlanma özellikleri, model grubu farelere kıyasla önemli ölçüde hafifletildi. Düşük ve orta doz COS gruplarında fareler için biraz cansız kürk ve yavaş bir reaksiyon olmasına rağmen, model grubuyla karşılaştırıldığında yaşlanma olgusu açıkça ılımlıydı.

2.2. COS'un Bağışıklık Fonksiyonu Üzerindeki Etkisi

Dalak ve timus belirgin bağışıklık organları olduğundan, bunların indeksleri, bağışıklık durumunun gücünü veya bağışıklık işlevindeki gelişmeyi yansıtabilir (101. Tablo 1'de gösterildiği gibi, sekiz haftalık D-gal tedavisinden sonra, dalak ve timus model grup farelerin indeksleri, normal gruptakilerden belirgin şekilde daha düşüktü, bu, fare bağışıklık sisteminin, arka arkaya 56 gün boyunca D-gal uygulanmasıyla inhibe edildiğini gösterir.Ayrıca, D- tarafından indüklenen farelerin dalak ve timus indekslerinde azalma gal tedavisi, COS uygulamasından sonra kademeli olarak belirli bir dereceye kadar yukarı regüle edildi.Ayrıca, sonuçlarımız (Tablo 1'de ortaya çıktığı gibi), ayrıca immünoglobulin G (gG) ve IgM'nin serum seviyelerinin, model grup farelerde gözle görülür şekilde azaldığını ortaya koydu.

2.3. COS'un Karaciğer ve Böbrek Fonksiyonuna Etkisi

COS'un karaciğer fonksiyonu üzerindeki etkisiD-gal ile tedavi edilen fareler, serum ölçülerek değerlendirildialanin aminotransferaz (ALT), aspartat transaminaz (AST) ve alkalin fosfataz seviyeleri(ALP). Tabloda görüldüğü gibi2ile tedavi edildikten sonraD-gal, sekiz hafta boyunca, sergilenen model grubundaki farelerNormal farelerle karşılaştırıldığında ALT, AST ve ALP'nin serum seviyelerinde belirgin artışlar(Tümüp < 0.05). However, these D- farelerde alışılmadık derecede yüksek ALT, AST ve ALP seviyeleri gal ile tetiklendikarşılaştırıldığında VE ve COS ile tedavi edilen gruplarda serum belirli bir dereceye kadar kademeli olarak azaldı.model grubu fareleri, özellikle COS-H grubu için ve bu seviyeler,model grubunda (tümp < 0.05). Bu arada, COS'un böbrek fonksiyonu üzerindeki etkisiD-gal enjekte edilen fareler tarafından değerlendirildiserumlarındaki kreatinin (CREA) ve ürik asit (UA) seviyelerinin ölçülmesi ve sonuçlarayrıca tabloda sergilenen2, bu da model grubu için CREA ve UA'nın serum seviyelerininfareler, normal grup farelerinden önemli ölçüde daha yüksektir (tümüp < 0.05). Nevertheless, for the VE and COS uygulanan gruplarda, serum CREA ve UA düzeylerindeki bu olumsuz artışlar kademeli olarakmodel grubuna göre (özellikle COS-H grubunda) daha düşük oranda restore edilmiştir.

2.4. COS'un etkisiD-Karaciğer ve Böbrekte Gal Kaynaklı Histokimyasal Hasarlar

Şekilde gösterildiği gibi3, karaciğer dokusunun normal histolojik yapısı normalde açıkça görülebilirher yerde bulunan poligonal hepatositler, merkezi bir merkez etrafında radyal olarak sıralanmış hepatik kordon dahil olmak üzere fare grubuven ve hepatositlerde hafif binükleasyon. Sekiz haftalık süreklilikten sonraD-gal enjeksiyonları, karaciğerdoku, artan sayıda hepatosit binükleasyonunu, dağınık bir şekilde düzenlenmiş hepatik kordonu,yaygın hepatoselüler balonlaşma ve bir dizi enflamatuar hücre infiltrasyonu. Yine de,COS-H ile tedavi edilen grup için düzgün düzenlenmiş hepatik kord, daha az inflamatuar infiltrasyon vefare karaciğer dokularında hepatositlerin binükleasyonu gözlenirken, balonlaşan hepatositlerdoza bağımlı bir şekilde azaldı, bu da COS'un iyileşebileceğini gösteriyorD- gal kaynaklı karaciğer hasarıbir dereceye kadar

Şekil 3. Karaciğerin histopatolojik görünümü (hematoksilen-eozin (HE) boyama 400x). Hepatositin çift çekirdekli oluşumu (siyah ok), dağınık şekilde düzenlenmiş karaciğer kordonu (sarı ok) ve balonlaşan hepatosit (kırmızı ok).

Ek olarak, D-gal ile tedavi edilen farelerin böbrek dokusunun histopatolojik analizleri, balonla genişleyen kavite ve renal proksimal kıvrık tübüllerdeki epitel hücrelerinin damlasının yanı sıra yaygın renal ödem gözlenirken, glomerülün bariz bir atrofi gösterdiğini ve hatta ortadan kaybolduğunu ortaya çıkardı. normal grupla karşılaştırıldığında ortaya çıkabilir (Şekil 4'te gösterildiği gibi). Özellikle, COS ve VE tedavisi böbrek dokusunda D-gal'in neden olduğu bu sağlıksız patolojik değişiklikleri önemli ölçüde hafifleterek böbrek koruyucu aktivite gösterirken, böbrek ödemi ve balonla genişlemiş kavite COS-H grubu için büyük ölçüde kontrol edildi. Bu sonuçlar, COS'un Kunming farelerinin (KM fareleri) karaciğer ve böbrek dokularında gal kaynaklı bu patolojik hasarları başarıyla hafiflettiğini gösterdi.

Şekil 4. Böbreğin histopatolojik görünümü (HE boyama 400 x). Atrofi (sarı ok), renal proksimal kıvrımlı tübüllerde (siyah ok) bir damla epitel hücresi ve balonla genişlemiş kavite (kırmızı ok).

2.5. COS'un Karaciğer ve Böbrek Anti-Oksidasyon İndekslerine Etkisi

Önceki çalışmalar, antioksidan enzimlerin, ROS'u temizleyerek karaciğeri ve böbreği D-gal kaynaklı subakut yaşlanmadan koruyabildiğini göstermiştir. Bu nedenle, malondialdehit (MDA) içeriğinin yanı sıra SOD, CAT ve GSH-Px aktiviteleri bu çalışmamızda incelenmiştir (5-7) Şekil 5'te gösterildiği gibi, D-gal'in deri altı enjeksiyonundan sonra sekiz hafta, bu üç temel antioksidan enzimin aktiviteleri, normal grup farelerin karaciğer ve böbrek dokularındakilere kıyasla keskin bir şekilde azalırken MDA seviyesi için bunun tersi geçerliydi (tümü p < 0.{{1111). }}5). Bununla birlikte, farelere COS verildiğinde, bu enzimlerin azalan aktiviteleri, bD-gal'in kademeli olarak model grup farelerinkinden daha fazla yükselmesine neden oldu ve MDA seviyesi, COS tarafından doza bağımlı bir şekilde zayıflatıldı. özellikle COS-H grubunda, model grubuna karşı p < 0,05). Bu sonuçlar, COS tedavisinin D-gal ile tedavi edilen farelerin SOD, CAT ve GSH-Px aktivitelerini önemli ölçüde iyileştirebileceğini ve karaciğer ve böbrekteki MDA seviyesini azaltabileceğini gösterdi.

Şekil 5. COS'un SOD, GSH-Px ve CAT aktivitelerinin yanı sıra D-gal'in neden olduğu fare karaciğeri (A) ve böbrek (B) MDA seviyeleri üzerindeki etkisi. Veri temsili, 土 SD (n=8) anlamına gelir. # p < 0.05 normal grupla karşılaştırıldığında;* model grubuyla karşılaştırıldığında p < 0.05. Normal: normal kontrol grubu; ModelD-gal ile tedavi edilen grup; VE: D-gal artı VE tedavi grubu; COS-L: D-gal artı COS (300 mg/kg/gün tedavi grubu; COS-M: D-gal artı COS (600 mg/kg) tedavi grubu; COS-H: D-gal artı COS1200 mg/kg) Tedavi grubu.