Alzheimer ve Parkinson Hastalığı Olan Hastaların Plazmasındaki Mikotoksinlerin BiyoizlenmesiⅢ
Apr 12, 2023
3. Sonuçlar
La Rioja'da (İspanya) sağlıklı ve hasta (AD ve PD) gönüllülerden alınan plazma örneklerinde 19 mikotoksin ve metabolitin analizine ilişkin ilk HBM çalışmasından elde edilen sonuçları sunuyoruz. Çalışmanın sonuçları hem kontrol hem de hastalar arasında OTA ve STER seviyelerinde bazı farklılıklar olduğunu göstermektedir. Bu farkın nedeni bilinmiyor. Diyetlerdeki farklılıklar, hastalık nedeniyle değişen metabolizma veya cinsiyet ve yaşın plazmada saptanan mikotoksin düzeylerinde önemli bir rolü olabileceği gerçeği gibi çeşitli faktörler gözlemlenen sonucu etkiliyor olabilir.
Alzheimer hastalığı ve Parkinson hastalığı için cistanche tentürü için tıklayın
Tüm bu karıştırıcı faktörler, daha fazla birey içeren çalışmalarla dikkatle değerlendirilmelidir. Bu çalışmada, sağlıklı refakatçiler ve hastalar arasında OTA'da farklılıklar gözlenmiştir, ancak farklılıklar hastalığın kendisinden çok cinsiyete bağlı görünmektedir. Ayrıca OTA, özellikle PH grubunda yaşla birlikte azalma eğilimindeydi. Ana bulgulardan biri, STER'nin yalnızca -glukuronidaz/arilsülfataz tedavisinden sonra ortaya çıkmasıdır ve bu da STER-glukuronidlerin insan metabolizması sırasında oluştuğu hipotezini destekler. Ayrıca STER plazmatik seviyeleri hastalarda patolojiler arasında fark olmaksızın daha yüksek bulundu. Ayrıca, STER seviyeleri kadınlarda yaş ile pozitif korelasyon gösterdi.
Verileri yorumlarken, bu çalışmanın PH veya AD'nin patobiyolojisini açıklamak için değil, olası bir çevresel risk faktörünün varlığının gen- çevre etkileşimi. Kontrol grubundan alınan numuneler, İspanya'nın komşu bir bölgesindeki benzer bir popülasyonda elde edilen önceki verilerle eşleşir ve aynı LC/MS-MS analizini kullanır [35].
Bununla birlikte, her iki çalışma arasında sağlıklı bireyleri karşılaştırırken şunlara dikkat edilmelidir: (i) yaş aralığı farklıdır, çünkü bu çalışmadaki örneklerin çoğunluğu, özellikle AD ve PH gruplarında 60 yaşından büyük kişilerden elde edilmiştir. , yaşa bağlı hastalıklar için beklendiği gibi; ve (ii) bu çalışmada düşük olan kontrol numunesi sayısı. Ayrıca, bu çalışmadan elde edilen veriler yorumlanırken diğer sınırlamalar da dikkate alınmalıdır; verilerin birçoğu LOD'ye çok yakındı ve örnek sayısı sınırlıydı (özellikle AD erkeklerde). Genel olarak, sonuçlarımız kontrol grubu ile nörodejeneratif hastalık hastaları arasında istatistiksel olarak anlamlı bazı farklılıklar gösteriyor, ancak aynı zamanda metabolizmayı etkileyebilecek yaş ve cinsiyetle ilgili bazı tepkilere de işaret ediyor.
4. Malzemeler ve Yöntemler
4.1. reaktifler
LC-MS grade methanol (Honeywell Riedel-de-Haën, Seelze, Germany), LC grade acetonitrile (ACN) (Merck, Darmstadt, Germany), MS grade formic acid (purity > 98%), ammonium formate (both from Fluka Sigma-Aldrich, Mannheim, Germany), and deionized water (>Ultramatic Tip I sisteminde (Wasserlab, Navarra, İspanya) saflaştırılmış 18 MΩ cm-1 özdirenç) numune hazırlama ve LC-MS/MS analizi için kullanıldı. Captiva EMR-lipid (3 mL) kartuşları, Agilent Technologies'den (Santa Clara, CA, ABD) temin edildi.
Tüm mikotoksinler (referans materyal, saflık Yüzde 98'den büyük veya buna eşit), Sigma-Aldrich'ten (St. Louis, MO, ABD) aşağıdaki AFM1, AFG2 ve AFB2 konsantrasyonlarında ACN çözeltileri halinde satın alınmıştır: 0. 5 µg/mL; AFG1 ve AFB1: 2 µg/mL; OTA-d5 ve OTB: 10 µg/mL; STER ve DOM-1: 50 µg/mL; NIV, DON, 3-ADON, 15-ADON, NEO, DAS, FUS-X, ZEA ve T-2 ve HT-2 toksinler: 100 µg/mL. Referans malzemeler -20 ◦C'de saklandı. ACN'de standart stok çözeltiler hazırlandı ve -20 ◦C'de saklandı. Tüm mikotoksinleri içeren çalışma solüsyonu, karşılık gelen bireysel stok solüsyonları ACN içinde seyreltilerek hazırlandı. Bu saklama koşullarında standart ve çalışma stoku çözümlerinin stabilitesi daha önce değerlendirilmişti [36].
4.2. konuvb
Çalışmaya dahil edilmeden önce tüm katılımcılardan bilgilendirilmiş yazılı onay alındı. Hafif PH'si olan 44 hasta, PH ile ilişkili olmayan demansı olan 25 hasta ve 25 sağlıklı kontrol dahil olmak üzere toplam 94 denek La Rioja'daki (İspanya) San Pedro Hastanesindeki nörolojik servisten etik onayla alındı ("Çalışma Parkinson hastalığı olan hastalardan alınan serum/plazma numunelerindeki lipidik profillerin, teşhis amacıyla farklı bir klinik model elde edilmesi için" Ref: CEICLAR PI- 212, onaylanma tarihi 4 Nisan 2016), yerel insan deneyleri etik kurulundan (CEImLar) , Comité Ética de La Rioja ilaç araştırmaları). Hastalar deneyimli nörologlar tarafından teşhis edildi. PH hastaları modifiye HY ölçeği (Tablo S3) ile değerlendirilirken, PH ile ilişkili olmayan demansı olan hastalar hastalık evrelerini belirlemek için GDS (Tablo S4) ile değerlendirildi. Sağlıklı kontroller, belirgin veya bilinen nörolojik hastalığı veya komorbiditesi olmayan hastaların eşlerini veya akraba olmayan refakatçilerini içermiştir.
4.3. Plasanne
Toplama Kan örnekleri tıbbi bir ziyarette alındı. Kan, 4 mL EDTA kaplı tüplere (Vacutainer, ref # 368171) toplandı ve plazma, oda sıcaklığında 15 dakika 2200x g'de santrifüjleme ile 2 saat içinde ayrıldı. Plazma hemen çıkarıldı ve tekrarlanan dondurma/çözülme döngülerinden kaçınmak için 0,2 mL'lik parçalar halinde kodlanmış şişelere aktarıldı ve sonra -80 ◦C'de saklandı. Plazma numunelerinin santrifüjlemeden elde edilen peletin hücreleri veya bileşenleri ile kontaminasyonunu önlemek için uygun özen gösterildi.
4.4. Numune Hazırlamation
Enzimatik hidrolizden önceki ve sonraki plazma işlemi, ArceLópez ve diğ. (2020) [35,36]. Kısaca, plazma numuneleri (400 uL), 1200 uL asitleştirilmiş ACN (yüzde 1 formik asit) içeren bir Captiva EMR-lipit kartuşuna eklenmiştir. Vakum uygulandı ve 5 dakika sonra atık sudan iki adet 400 uL'lik alikot (araştırılacak mikotoksin gruplarının her biri için bir tane) ayrıldı ve ardından kuruyana kadar (60°C) buharlaştırıldı.
Bu metodoloji, iki gruba ayrılan (kromatografik ayırma için gereken farklı elüsyon programlarına göre) 19 bileşiğin (mikotoksinler ve metabolitler) saptanması için kullanıldı: DOM-1, AFG2, AFM1, AFG1, AFB2, AFB1 , OTB, ZEA, STER, OTA, T-2, HT-2 (I. grup) ve NIV, DON, FUS-X, NEO, 3-ADON, 15-ADON ve DAS (grup II). Tortu, analiz edilmesi amaçlanan mikotoksin grubuna karşılık gelen oranda (grup I için yüzde 40 B ve grup II için yüzde 5 B) 200 uL mobil faz ile sulandırıldı.
Kromatografik analizden önce solüsyon vortekslendi (5 dakika) ve süzüldü (PVDF, 0.45 um, Merck Millipore, İrlanda). Enzimatik hidroliz prosedürü şuydu: 400 µL plazma, 50 µL glukuronidaz/sülfataz enzim karışımı (250 U/mL, PBS içinde 0,2 U/mL; Helix Pomatia'dan (Sigma Aldrich, Sigma Aldrich, Mannheim, Almanya).Çalkalamadan sonra, numuneler gece boyunca (37 ◦C) bir su banyosunda inkübe edildi.Daha sonra, Captiva-EMR kartuşları kullanılarak yukarıda açıklanana benzer şekilde plazma numunesi temizliği yapıldı.
4.5. LC/MS-MS Analizi
LC-MS/MS analizi, her ikisi de Agilent Technologies'den (Mannheim, Almanya) ESI( plus ) modunda 6410 Üçlü Dört Kutuplu (QqQ) ile birleştirilmiş bir LC sistemi 1200 serisinde gerçekleştirildi. Ayırma, 5 mM amonyum format ve yüzde 0.1 formik asitten oluşan bir mobil faza sahip bir Ascentis Express C18, 2.7 µm partikül boyutu 150 x 2.1 mm kolon (Supelco Analytical, St. Louis, MO, ABD) üzerinde 45 °C'de gerçekleştirildi. su (A) ve gradyan koşullarında 95:5 metanol/su (B) içinde 5 mM amonyum format ve yüzde 0.1 formik asit içinde.
Enjeksiyon hacmi 20 µL idi ve gradyan elüsyon, 0.4 mL/dk akış hızında gerçekleştirildi. Veri toplama parametreleri Arce-López ve ark. (2020) [36]. Numuneler analiz edildi ve analitik dizilerde gruplandı. Her dizi, örneklerle birlikte sekiz matris uyumlu kalibratör içermiştir.
Bu kalibratörler, aynı sırayla analiz edilen numunelerdeki mikotoksin miktarının belirlenmesine hizmet eden kalibrasyon eğrilerinin hazırlanmasında kullanıldı. Kalibrasyon eğrileri için kabul kriterleri şunlardı: minimum altı nokta, belirleme katsayısı (R2 ) > 0,99 ve her kalibratör için nominal değerden şu kadar farklı olmayan (RE olarak ifade edilen) geri hesaplanmış konsantrasyon: yüzde 15'ten fazla (LOQ seviyesi için yüzde 20) [32]. Ayrıca, alıkonma süreleri numuneler ve kalibratörler arasında yüzde 2,5'ten fazla farklılık göstermemelidir [33]. Mevcut plazma hacmine bağlı olarak, enzimatik işlemden sonra tüm numuneler analiz edilememiştir.
4.6. Analitik Yöntem Validasyonu
Arce-Lopez et al. (202{{10}}) [35,36]. LOD değerleri şunlardı: DOM-1 için 1,35 ng/mL; AFG2 için 0,35 ng/mL, AFM1 için 0,18 ng/mL; 0.0AFG1 ve AFB2 için 7 ng/mL; 0.0AFB1 için 4 ng/mL; HT için 2,70 ng/mL-2; OTA ve OTB için 0,40 ng/mL; T-2 ve STER için 0,20 ng/mL; ZEA için 1,80 ng/mL; NIV için 9,10 ng/mL; DON için 1,94 ng/mL; FUS-X için 1,95 ng/mL; NEO için 0,18 ng/mL; 3-ADON için 0,70 ng/mL; 15-ADON için 1,20 ng/mL ve DAS için 0,15 ng/mL.
Enzimatik işlemden önceki geri kazanım değerleri (ara kesinlik koşullarında), STER için yüzde 68,8'den DAS için yüzde 97,6'ya (RDS tüm mikotoksinler için yüzde 15'ten az veya buna eşit) olmuştur ve enzimatik işlemden sonra hiçbir fark bulunmamıştır. Matriks etkileri enzimatik işlemden önce ve sonra da değerlendirildi ve mikotoksinlerin çoğunda fark yoktu, hepsi için RDS değerleri yüzde 15'e eşit veya daha az elde edildi. İki donma-çözülme döngüsünden sonraki stabilite, iki konsantrasyon seviyesinde (6 ve 30xLOQ) (seviye başına üç tekrar) değerlendirildi. Tüm mikotoksinler stabildi (RSD < yüzde 15) (Tablo S7).
4.7. İstatistiksel Analiz ve Veri İşleme
Analitik verileri istatistiklerle ele alırken, veri setini karakterize eden dağılım türünü aydınlatmak önemlidir. Normal dağılan veya normal dağılmayan verilerimiz varsa, kullanılacak tanımlayıcılar ve paket testleri farklıdır. İncelenen mikotoksin konsantrasyon düzeylerinin normal dağılımını doğrulamak için Shapiro-Wilk testi kullanıldı.
Normallik hipotezi reddedildiğinden, istatistiksel işlem için parametrik olmayan (herhangi bir dağılım varsayımı anlamına gelmez) bir dizi test kullanıldı. Gruplarda ve alt gruplarda OTA ve STER konsantrasyon seviyeleri arasındaki olası farklılıkları değerlendirmek için Wilcoxon sıra toplamı testi (Mann-Whitney iki örnek istatistiği) kullanıldı [49]. İstatistikte, Wilcoxon sıra toplamı testi, iki örneğin aynı popülasyondan türeyip gelmeyeceğini test etmek için kullanılan parametrik olmayan bir testtir ve iki popülasyondan rastgele seçilen iki X ve Y değeri için X olasılığının daha yüksek olduğunu doğrular. Y, Y'nin X'ten büyük olma olasılığına eşittir.
Aynı amaçla, değişkenlerin harmanlanmasının birden fazla dağılımı [50] ima ettiği bir Kruskal-Wallis testi kullanıldı. Mikotoksin seviyeleri ile yaş (niceliksel değişken) arasındaki ilişkiyi değerlendirmek için Spearman's rank korelasyon katsayısı (veya Spearman's rho) kullanıldı. Tüm testler, yüzde 5'lik bir önem düzeyi ile gerçekleştirilmiştir. Çıktılar, istatistiksel anlamlılık düzeyi ve p-değeri ile birlikte rapor edilir. Tüm analizler STATA14 yazılımı (Stata/IC 14.0, Telif Hakkı 1985–2015 StataCorp LP) kullanılarak yapılmıştır. Veri setinin ayarlanması için veri işleme ile ilgili olarak, nicel ve nitel değişkenler şu şekilde ele alınmıştır: OTA ve STER seviyesi. Nicel değişken, negatif olmayan değişken, ng/mL cinsinden değerler olarak ifade edilir.
Değerler şu şekilde atanmıştır: Değer=0 ng/mL; analizden elde edilen analitik sonuç bulunduğunda
PD hastalarının tanısını ölçeklendirmek için nicel bir değişken kullanıldı (Tablo S3). Ek olarak, bir ikili değişken (HY_d=0 ve HY_d=1) tanımlandı: PD için HY_d=0 HY ölçeğini 1-2 aralığında puanlayan hastalar (bozulmuş postüral refleksler); HY_d=1 HY ölçeğini 2,5–3 aralığında (bozulmuş postüral refleksler) puanlayan Parkinson hastaları için. GDS ölçeği. AD'li hastaların tanısını ölçeklendirmek için nicel bir değişken kullanıldı (Tablo S4).
Cistanche'nin mekanizması Alzheimer hastalığını ve Parkinson hastalığını tedavi eder
Cistanche, uzun yıllardır potansiyel sağlık yararları için kullanılan geleneksel bir Çin bitkisidir. Son araştırmalarda, Cistanche'nin nöroprotektif etkilere sahip olabileceği ve Alzheimer hastalığı (AD) ve Parkinson hastalığının (PH) tedavisinde etkili olabileceği bulunmuştur.
Cistanche'nin AD ve PD'yi etkili bir şekilde tedavi etme mekanizması, ekinakozit, akteozid ve sistanosidler gibi aktif bileşenlerine atfedilir. Bu bileşiklerin, nörodejeneratif hastalıkların gelişimi ve ilerlemesi ile ilişkili beyindeki oksidatif stresi ve iltihabı azaltabilen antioksidan ve antienflamatuar özelliklere sahip olduğuna inanılmaktadır.
Cistanche ayrıca sinir hücrelerinin büyümesini teşvik edebilir ve nöronların büyümesinde ve korunmasında çok önemli bir rol oynayan bir protein olan beyin kaynaklı nörotrofik faktör (BDNF) seviyelerini artırarak bilişsel işlevi geliştirebilir. Ek olarak, Cistanche'nin Alzheimer hastalığının ayırt edici özellikleri olan -amiloid plaklarını azalttığı ve beyinde Parkinson hastalığı ile ilişkili olan -sinüklein birikimini azalttığı gösterilmiştir.
Genel olarak, Cistanche'nin AD ve PD tedavisindeki potansiyel terapötik faydaları umut vericidir, ancak kesin etki mekanizmalarını aydınlatmak ve klinik ortamlarda etkinliğini ve güvenliğini doğrulamak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
Referanslar
1Serrano-Pozo, A.; Frosch, milletvekili; Masliah, E.; Hyman, BT Alzheimer hastalığında nöropatolojik değişiklikler. Soğuk Kaynak Harb. Perspektif. Med. 2011, 1, a006189. [ÇaprazRef]
2. Fearnley, JM; Lees, AJ Yaşlanma ve Parkinson hastalığı: Substantia nigra bölgesel seçicilik. Beyin 1991, 114, 2283–2301. [ÇaprazRef]
3. Barber, RC Alzheimer hastalığının genetiği. Scientifica (Kahire) 2012, 2012, 1–14. [ÇaprazRef]
4. İzco, M.; Carlos, E.; Alvarez-Erviti, L. Parkinson hastalığında Eksozomların iki yüzü: Patolojiden tedaviye. Sinirbilimci 2021, 107385842199000. [CrossRef] [PubMed]
5. Hou, Y.; Dan, X.; Babbar, M.; Wei, Y.; Hasselbalch, SG; Croteau, DL; Bohr, VA Nörodejeneratif hastalık için bir risk faktörü olarak yaşlanma. Nat. Rahip Neurol. 2019, 15, 565–581. [CrossRef] [PubMed]
6. Johnson, ME; Stecher, B.; Labrie, V.; Brundin, L.; Brundin, P. Tetikleyiciler, Kolaylaştırıcılar ve Ağırlaştırıcılar: Parkinson Hastalığı Patogenezini Yeniden Tanımlamak. Trendler Nörobilim. 2019, 42, 4–13. [ÇaprazRef]
7. Wainaina, MN; Chen, Z.; Zhong, C. Geç başlangıçlı Alzheimer hastalığının gelişimi ve ilerlemesinde çevresel faktörler. Nörobilim. Boğa. 2014, 30, 253–270. [ÇaprazRef]
8. Rahman MA; Rahman MS; Uddin, MJ; Mamum-Or-Rashid, ANM; Pang, M.-G.; Rhim, H. Ortaya çıkan çevresel faktörler riski: Alzheimer hastalıklarının içgörü mekanizmaları. çevre. bilim kirlilik. Res. 2020, 27, 44659–44672. [CrossRef] [PubMed]
9. Bush, AI Alzheimer Hastalığının Metal Teorisi. J. Alzheimer Dis. 2012, 33, S277–S281. [CrossRef] 10. Moulton, PV; Yang, W. Hava kirliliği, oksidatif stres ve Alzheimer hastalığı. J. Çevre. Halk Sağlığı 2012, 2012, 472751. [CrossRef]
11. Li, Y.; Fang, R.; Liu, Z.; Jiang, L.; Zhang, J.; Li, H.; Liu, C.; Li, F. Çevresel toksik pestisit maruziyeti ile Alzheimer hastalığı arasındaki ilişki: Scientometric ve görselleştirme analizi. Chemosphere 2021, 263, 128238. [CrossRef]
12. Fulop, T.; Witkowski, JM; Burgade, K.; Halil, A.; Zerif, E.; Larbi, A.; Hirokawa, K.; Pawelec, G.; Bocti, C.; Lacombe, G.; et al. Bir enfeksiyon hipotezi, Alzheimer hastalığının beta-amiloid hipotezini açıklayabilir mi? Ön. Yaşlanma Nörobilim. 2018, 10, 224. [CrossRef]
13. Vasefi, M.; Ghaboolian-Zare, E.; Abedelwahab, H.; Osu, A. Çevresel toksinler ve Alzheimer hastalığının ilerlemesi. nörokimya Int. 2020, 141, 104852. [CrossRef]
14. Goldman, SM Çevresel toksinler ve Parkinson hastalığı. Annu. Rev. Pharmacol. Toksikol. 2014, 54, 141–164. [CrossRef] [PubMed]
15. Marras, C.; Konserve, CG; Goldman, SM Çevre, yaşam tarzı ve Parkinson hastalığı: Önümüzdeki on yılda önleme için çıkarımlar. Mov. Uyuşmazlık 2019, 34, 801–811. [CrossRef] [PubMed]
16. Van der Mark, M.; Brouwer, M.; Kromhout, H.; Nijssen, P.; Hüs, A.; Vermeulen, R. Pestisit kullanımı Parkinson hastalığı ile ilişkili midir? Çalışma sonuçlarındaki heterojenliğe dair bazı ipuçları. çevre. Sağlık Perspektifi. 2012, 120, 340–347. [CrossRef] [PubMed]
17. Gorell, JM; Johnson, CC; Rybicki, BA; Peterson, EL; Richardson, RJ Pestisitlere maruz kalma, çiftçilik, kuyu suyu ve kırsal yaşam ile Parkinson hastalığı riski. Nöroloji 1998, 50, 1346–1350. [ÇaprazRef]
18. Priyadarshi, A.; Khuder, SA; Schaub, EA; Priyadarshi, SS Çevresel risk faktörleri ve Parkinson hastalığı: Bir meta-analiz. çevre. Res. 2001, 86, 122–127. [ÇaprazRef]
19. Mitchell, NJ; Bowers, E.; Hurburgh, C.; Wu, F. ABD mısır endüstrisinde aflatoksin kontaminasyonundan kaynaklanan potansiyel ekonomik kayıplar. Gıda Katkısı. Kontaminasyon Bölüm A 2016, 33, 540–550. [CrossRef] [PubMed]
20. Marin, S.; Ramos, AJ; Cano-Sanço, G.; Sanchis, V. Mikotoksinler: Oluşum, toksikoloji ve maruz kalma değerlendirmesi. Gıda Kimyası Toksikol. 2013, 60, 218–237. [ÇaprazRef]
21. Janik, E.; Niemcewicz, M.; Ceremuga, M.; Stela, M.; Saluk-Bijak, J.; Siadkowski, A.; Bijak, M. Mikotoksinlerin moleküler yönleri — İnsan sağlığı için ciddi bir sorun. Int. J. Mol. bilim 2020, 21, 8187. [CrossRef]
22. Logrieco, A.; Miller, J.; Eskola, M.; Kriska, R.; Ayalev, A.; Bandyopadhyay, R.; Battilani, P.; Bhatnagar, D.; Chulze, S.; De Saeger, S.; et al. Mikotoksin tüzüğü: Dünya çapında mikotoksin maruziyetini en aza indirmek için artan farkındalık ve ortak eylem. Toksinler (Basel) 2018, 10, 149. [CrossRef] 23. Avrupa Komisyonu. 19 Aralık 2006 tarih ve (EC) 1881/2006 sayılı Komisyon Yönetmeliği, gıda maddelerindeki belirli kontaminantlar için maksimum seviyeleri belirlemektedir. Kapalı. J.Eur. Birlik 2006, 364, 5–24.
24. Avrupa Parlamentosu. Avrupa Parlamentosu ve AB Konseyi Hayvan yemlerinde istenmeyen maddelere ilişkin 7 Mayıs 2002 tarihli Avrupa Parlamentosu ve Konseyi Direktifi 2002/32. Kapalı. J.Eur. Topluluklar 2002, L140, 10–22.
25. Avrupa Komisyonu. Hayvan besleme amaçlı ürünlerde deoksinivalenol, zearalenon, okratoksin A, T-2 ve HT-2 ve fumonisinlerin varlığına ilişkin 17 Ağustos 2006 tarihli Komisyon Tavsiyesi. Kapalı. J.Eur. Birlik 2006, L299, 7–9.
26. Eskola, M.; Kos, G.; Elliott, CT; Hajšlová, J.; Mayar, S.; Krska, R. Gıda mahsullerinin mikotoksinlerle dünya çapında kirlenmesi: Yaygın olarak alıntılanan yüzde 25'lik 'FAO tahmini'nin geçerliliği. kritik Rev. Gıda Bilimi Nutr. 2020, 60, 2773–2789. [CrossRef] [PubMed]
27. Escrivá, L.; Font, G.; Manyes, L.; Berrada, H. Biyolojik numunelerde mikotoksinlerin varlığına ilişkin çalışmalar: Genel bir bakış. Toksinler (Basel) 2017, 9, 251. [CrossRef]
28. Gurusankar, R.; Yenugadhati, N.; Krishnan, K.; Hays, S.; Haines, D.; Zidek, A.; Kuçta, S.; Kinniburgh, D.; Gabos, S.; Mattison, D.; et al. Sağlık riski değerlendirmesinde insan biyolojik izlemesinin rolü. Int. J. Risk Değerlendirmesi. Yönetim 2017, 20, 136–197. [ÇaprazRef]
29. Bredesen, DE İnhalasyonel Alzheimer hastalığı: Tanınmayan—Ve tedavi edilebilir—Salgın. Yaşlanma (Albany NY) 2016, 8, 304–313. [ÇaprazRef]
30. Martins, I. Aşırı beslenme, nörodejeneratif hastalıklarda mikotoksin kaynaklı nörotoksisitenin LPS düzenlemesini belirler. Int. J. Mol. bilim 2015, 16, 29554–29573. [CrossRef] [PubMed]
31. İzco, M.; Vettorazzi, A.; Forcen, R.; Blesa, J.; de Toro, M.; Alvarez-Herrera, N.; Cooper, JM; Gonzalez-Peñas, E.; Lopez de Cerain, A.; Alvarez-Erviti, L. Mikotoksin okratoksin A'ya oral subkronik maruz kalma, tedavinin bitiminden altı ay sonra farelerde Parkinson hastalığının temel patolojik özelliklerini indükler. Gıda Kimyası Toksikol. 2021, 152, 112164. [CrossRef]
32. İlaç Değerlendirme ve Araştırma Merkezi (FDA). Endüstri için Biyoanalitik Yöntem Doğrulama Kılavuzu. 2018. Çevrimiçi olarak erişilebilir: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf (erişim tarihi 20 Kasım 2019).
33. Avrupa Komisyonu. Analitik yöntemlerin performansı ve sonuçların yorumlanmasına ilişkin Konsey Direktifi 96/23/EC'yi (2002/657/EC) uygulayan 12 Ağustos 2002 tarihli Komisyon Kararı. Kapalı. J.Eur. Topluluklar 2002, 221, 8–36.
34. EFSA. Kimyasal maddelerin diyet maruziyet değerlendirmesinde sol sansürlü verilerin yönetimi. EFSA J.2010, 8, 1–96.
35. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. Kuzey İspanya'nın bir bölgesinde insan plazmasında 19 mikotoksin varlığı. Toksinler (Basel) 2020, 12, 750. [CrossRef]
36. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Flores-Flores, M.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. İnsan plazmasındaki mikotoksinlerin eş zamanlı belirlenmesi için Captiva EMR-lipid temizleme ve LC-MS/MS analizine dayalı bir metodolojinin geliştirilmesi ve doğrulanması. Talanta 2020, 206, 120193. [CrossRef]
37. Remiro, R.; González-Peñas, E.; Lizarraga, E.; López de Cerain, A. Navarra kırmızı şaraplarında okratoksin A ve beş analoğun miktarının belirlenmesi. Gıda Kontrolü 2012, 27, 139–145. [ÇaprazRef]
38. Yang, S.; Zhang, H.; De Saeger, S.; De Boevre, M.; Güneş, F.; Zhang, S.; Cao, X.; Wang, Z. Okratoksin A'nın in vitro ve in vivo metabolizması: Ultra performanslı sıvı kromatografi-dört kutuplu/uçuş süresi hibrit kütle spektrometresi kullanan karşılaştırmalı bir çalışma. Anal. Biyoanal. kimya 2015, 407, 3579–3589. [CrossRef] [PubMed]
39. Munoz, K.; Cramer, B.; Dopstadt, J.; Humpf, HU; Degen, GH Bebeklerden ve yetişkinlerden alınan idrar örneklerinde okratoksin A konjugatlarının kanıtı. Mikotoksin Res. 2017, 33, 39–47. [CrossRef] [PubMed]
40. Vidal, A.; Mengeller, M.; Yang, S.; De Saeger, S.; De Boevre, M. Mikotoksin Maruziyet Biyobelirteçleri: Kapsamlı Bir İnceleme. kompr. Rev. Gıda Bilimi Gıda Saf. 2018, 17, 1127–1155. [ÇaprazRef]
41. EFSA CONTAM Paneli (Besin Zincirindeki Kirleticilere İlişkin EFSA Paneli); Şrenk, D.; Bodin, L.; Chipman, JK; del Mazo, J.; Grasl-Kraupp, B.; Hogstrand, C.; Hoogenboom, L.; Leblanc, J.; Nebbia, CS; et al. Gıdalarda okratoksin A'nın risk değerlendirmesi. EFSA J.2020, 18, 06113.
42. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Vettorazzi, A.; González-Peñas, E. Son yıllarda kan, plazma ve serumdaki mikotoksinlerin insan biyoizlenmesi: Bir gözden geçirme. Toksinler (Basel) 2020, 12, 147. [CrossRef]
Beatriz Arce-López 1 , Lydia Alvarez-Erviti 2 , Barbara De Santis 3 , María Izco 2 , Silvia López-Calvo 4 , Maria Eugenia Marzo-Sola 4 , Francesca Debegnach 3 , Elena Lizarraga 1 , Adela López de Cerain 5,6 , Elena González-Peñas 1,† ve Ariane Vettorazzi 5,6,* ,†
1 Farmasötik Teknoloji ve Kimya Bölümü, Araştırma Grubu MITOX, Eczacılık ve Beslenme Okulu, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, İspanya; barce@alumni.unav.es (BA-L.); elizarraga@unav.es (EL); mgpenas@unav.es (Örneğin-S.)
2 Moleküler Nörobiyoloji Laboratuvarı, La Rioja Biyomedikal Araştırma Merkezi (CIBIR), Piqueras 98, 3. Kat, 26006 Logroño, İspanya; laerviti@riojasalud.es (LA-E.); mizco@riojasalud.es (MI)
3 Mikotoksinler ve Bitki Toksinleri için Ulusal Referans Laboratuvarı, Istituto Superiore di Sanità, 00161 Roma, İtalya; barbara.desantis@iss.it (BDS); francesca.debegnach@iss.it (ÇD)
4 Servicio de Neurología, Hospital San Pedro, Piqueras 98, 26006 Logroño, İspanya; slcalvo@riojasalud.es (SL-C.); memarzo@riojasalud.es (MEM-S.)
5 Department of Pharmacology and Toxicology, Research Group MITOX, School of Pharmacy and Nutrition, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Spain; acerain@unav.es 6 IdiSNA, Navarra Institute for Health Research, 31008 Pamplona, Spain
