Enzim fermantasyonu sırasında antioksidan aktivitedeki değişiklikler

Bölüm 4 Enzim fermantasyonu sırasında antioksidan aktivitedeki değişiklikler

Meyveler besin açısından zengindir ve birçok çeşitte gelir. Fermantasyon sırasında maddelerin üretimi karmaşık ve çeşitlidir veantioksidan aktivite. İnsanlar her zaman keşfediyor ve keşfediyorlar, faydalı olan yiyecekleri arıyorinsanlık, böylece enzimler son yıllarda sıcak bir konu haline geldi. Geleneksel enzim üretim süreci, meyve ve sebzelerin doğal fermantasyonu ile enzimler elde etmektir. Önceki araştırmalara dayanarak, bu makale 4 faydalı fermantasyon bakterisi eklemektedir. Bu bakterilerin kendisi de enzimde mevcuttur. Bakterilerin ilave ilavesinden sonra, fermantasyon işleminde mikroorganizmaların sayısı ve tipi değiştirilir. Bu değişikliğin antioksidan aktivitesi üzerinde nasıl bir etkisi olacak? Önceki bölümde, ayrıntılı bir açıklama için bir örnek olarak elmaları aldık. Deney grubunun ve farklı enzim konsantrasyonlarındaki kontrol grubunun antioksidan aktivitesinin karşılaştırılması, deney grubundaki enzimin antioksidan aktivitesinin kontrol grubundan daha büyük olduğunu göstermiştir. Antioksidan aktivitenin yoğunluğu, enzimin güvenilirliğini belirli bir şekilde yansıtır.

Güçlü antioksidan güce sahip yeni bitkiler cistanche

 

Çin'deki en büyük cistanche ihracatçısı Wecistanche'nin destekleyici hizmeti:
E -posta: wallence.suen@wecistanche.com
WhatsApp/Tel: +86 15292862950

 

Bu bölüm, orijinal deneye ortak meyveler armut ve narenciye ekler ve onlarındaki değişiklikleri izler ve algılar.antioksidan aktivitefermantasyon sırasında. Maliyetleri azaltma temelinde, deneyler yoluyla, bakteriler ekledikten sonra enzimlerin biyolojik aktivitesini daha kapsamlı bir şekilde yansıtmayı ve mikrobiyal enzimlerin üretimi için belirli bir teorik temel ve veri desteği sağlamayı umuyoruz.s suşların yapay aşılaması.

 

 

 

4.1 Malzeme ve Yöntemler

4.1.1 Malzemeler

(1) Deneysel malzemeler

Taze elma, armut ve narenciye, steril koşullar altında steril su ile yıkayın, doğal olarak steril bir ameliyat masasında kurutun, soyun ve daha sonra kullanım için dilimleyin. 1: 1 kütle oranında sterilize edilmiş bir cam kavanoza beyaz şeker ve meyveler ekleyin. Deney için gereken bakterileri aktive edin ve optimal şemaya göre (bu çalışma adımı kontrol grubu için atlanır), kapatın ve serin ve kuru bir yere yerleştirin. Meyve hamurunu içeren tüm enzim sıvısını elde etmek ve filtrelemek için oda sıcaklığında farklı zaman dilimlerinde fermantasyonda numune alın. Süpernatant deney numunesi olarak alın ve 10, 000 rpm'yi 15 dakika boyunca yüksek hızlı bir santrifüjde santrifüj ettikten sonra ilgili verileri ölçmek için kullanın. Enzim yapma sürecinde, gereksiz kontaminasyondan kaçınmak için tüm operasyonlarımızın steril koşullar altında gerçekleştirildiğini belirtmek gerekir.

(2) Ana aletler

Deney için gereken aletler 3.1.1 (2) ile aynıdır.

 

4.1.2 Yöntemler

(1) fermantasyon sırasında toplam fenol içeriğindeki değişiklikler

46ml hacmi yapmak için damıtılmış su ile 450μl numune çözeltisi ilave edildi ve daha sonra 1ml folin-fenol reaktifi ilave edildi. İyice karıştırın ve 3 dakika tepki verin. Daha sonra% 20 NACO3 eklendi. Karışım, 2 saat boyunca 25 derecede sabit sıcaklıkta su banyosunda çalkalandı. Boş kontrol olarak damıtılmış su kullanıldı. Absorbans A, spektrofotometre ile 760Nm'de ölçüldü. Her tedavi için üç kopya yapıldı. Toplam fenol içeriği standart eğri denklemine göre hesaplandı.

(2) fermantasyon sırasında gücü azaltmada değişiklikler

0. 2mol/L ve pH değeri 6.6 konsantrasyonu ile 2.5ml fosfat tamponuna 45 0 μl numune ekleyin, daha sonra 2.5 ml potasyum ferrisyanid (w/h) ekleyin,%1 {23}},%1 {23}} ekleyin. (w/h) Kütle%10'luk bir kütle konsantrasyonu ile, 10 dakika boyunca 3000rpm'de santrifüj, çıkarın ve hemen bir hacimsel şişeye 2.5 ml süpernatant çekin, 2.5ml damıtılmış su ve 0.5ml ferrik klorür (w/h) ekleyin. Damıtılmış suyu boş bir kontrol olarak kullanın ve A absorbansını bir spektrofotometre ile 700Nm'lik bir dalga boyunda ölçün. Her tedavi için 3 kopya gerçekleştirin. Gücü azaltma gücü, absorbans değerine göre belirlenir.

 

(3) Fermantasyon sırasında süperoksit anyon radikal temizleme yeteneğinde değişiklikler
4.5 ml 0. {{1 0}} 5 mol/L pH 8.2 Tris-HCl tamponunu sabit sıcaklıkta bir su banyosuna yerleştirin ve sıcaklığı 25 dereceye kadar ayarlayın. 20 dakika sonra, 25 mmol/L molar konsantrasyonu ile 1 mL enzim numune çözeltisi ve 0.4 mL pirogallol çözeltisi ekleyin. İyice karıştırın ve 25 derecelik bir su banyosuna 5 dakika yerleştirin. Reaksiyonu sonlandırmak için 1.0 mL 8 mol/L HC1 ekleyin. Referans olarak Tris-HCL tamponu kullanın ve temizleme oranını hesaplamak için 299 nm'de absorbans A'yı ölçmek için bir spektrofotometre kullanın. Boş kontrol grubu numune yerine 1 ml çözücü kullanır. Süperoksit anyon radikal temizleme hızı, formül 4.1: süperoksit anyon radikal temizleme hızı (%)=a2)/a1 × 100 (4.1) 'e göre hesaplanır; A2, deney grubunun enzim numune çözeltisinin absorbansıdır.

 

(4) Fermantasyon sırasında hidroksil radikal temizleme kabiliyetindeki değişiklikler

 

2 ml'ye 45 0 μl numune çözeltisine su ekleyin, daha sonra 6mmol/L molar kütle konsantrasyonu ile 1.4ml hidrojen peroksite ekleyin, daha sonra bir molar kütle konsantrasyonu için 20mmol/L ve 2ml, 3 ferroz sülfat ile molar kütle konsantrasyonu ile 0.6ml sodyum salisilat ekleyin ve 3 ferroz sülfat, 3 ferroz sülfat ile 3 ferroz sülfat ile 3 ferroz sülfat, 3 ferroz sülfat ile 3 ferroz sülfat, 3 ferroz sülfat ile 3 ferroz sülfat ile 35 molar sülfat ekleyin. 1H. Damıtılmış su ile sıfır ve A absorbansını bir spektrofotometre ile 562Nm'lik bir dalga boyunda ölçün. Her tedavi için üç kopya yapıldı. Hidroksil radikal temizleme hızı, formül 4.2'ye göre hesaplandı: hidroksil radikal temizleme oranı (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (4.2) burada: A1 boşluğun ortalama absorbanıdır; A2, numune çözeltisinin ortalama absorbansıdır.

 

(5) Fermantasyon sırasında DPPH serbest radikal temizleme yeteneğinde değişiklikler
2 mL enzim numune çözeltisini 1 0 ml hacimsel şişeye doğru bir şekilde aktarın, daha sonra 2 x {5}} mol/L molar kütle konsantrasyonu ile 2 mL% 80 DPPH etanol sulu çözeltisi ekleyin. İyice karıştırın ve oda sıcaklığında 30 dakika bekletin. Referans olarak% 80 etanol çözeltisi alın ve numunenin absorbansını A1 olarak kaydedilen 517 nm dalga boyunda ölçün. 2 mL DPPH çözeltisi ve 2 mL% 80 etanol çözeltisini karıştırın ve absorbanslarını A0 olarak kaydedilen aynı dalga boyunda ölçün. 2 mL enzim çözeltisi ve 2 mL% 80 etanol çözeltisini karıştırın ve absorbanslarını A2 olarak kaydedilen aynı dalga boyunda ölçün. Her tedavi için üç kopya yapıldı. Formula 4.3'e göre DPPH serbest radikal temizleme oranını hesaplayın:
DPPH serbest radikal temizleme oranı (%) {{0}}}}}}}}}}}}}}}}/a {1- a2)/a {1- a2) 100 (4.3) burada: A1, A1'in ortalama 2 ml dppH 80 dph 80 dpph 80 80 etanol quous çözeltisi ve 2 ml. A2, 2 mL enzim çözeltisinin ve 2 mL% 80 etanol karışık çözeltisinin absorbansıdır; A0, 2 mL DPPH çözeltisinin ve 2 mL% 80 etanol karışık çözeltisinin absorbansıdır.

(6) Fermantasyon sırasında ABTS serbest radikal temizleme yeteneğinde değişiklikler
8 uL numune çözeltisi, fosfat tamponu (5 mmol/L pH 7.4) ile 10 uL'ye takviye edildi ve daha sonra 10 mL potasyum sülfat ve ABTS ile eşit olarak karıştırıldı ve 30 derecelik bir reaksiyon sıcaklığı ve 5 dakika reaksiyon süresinde reaksiyona girdi. Çözelti damıtılmış su ile sıfır ve bir spektrofotometre kullanarak 734 nm dalga boyunda A absorbans A'yı ölçün. Her tedavi için üç kopya yapıldı. ABTS serbest radikal temizleme oranı Formula 4.4'e göre hesaplandı:
ABTS serbest radikal temizleme oranı (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (4.4) burada: A1 boş kontrol grubunun absorbansıdır; A2, örnek deney grubunun absorbansıdır.