Soyut

Arka plan: Rosa rugosa Thunb'un fitokimyasal bileşenleri ve biyolojik aktiviteleri. var. plena Regal çiçek hücresi özü (RFCS) araştırıldı.

İlgili araştırmalara göre,cistanche"ömrü uzatan mucize bitki" olarak bilinen yaygın bir bitkidir. Ana bileşenikistanositgibi çeşitli etkilere sahiptir.antioksidan, antienflamatuvar, Vebağışıklık fonksiyonu teşviki. Cistanche ile cilt beyazlatma arasındaki mekanizma, cistanche'ın antioksidan etkisinde yatmaktadır.glikozitler. İnsan derisindeki melanin, tirozinin oksidasyonu ile üretilir.tirozinazve oksidasyon reaksiyonu oksijenin katılımını gerektirir, bu nedenle vücuttaki oksijensiz radikaller önemli bir faktör haline gelir.melanin üretimini etkileyen. Cistanche, bir antioksidan olan ve vücuttaki serbest radikallerin oluşumunu azaltabilen cistanoside içerir, böylecemelanin üretiminin engellenmesi.

Cistanche Tablet Faydaları İçin Tıklayınız

Daha fazla bilgi için:

david.deng@wecistanche.com WhatsApp:86 13632399501

Yöntemler:Linalool, feniletil alkol, sitronellol ve -bisabolol gibi uçucu bileşenler GCMS ile tanımlandı. Hiperosid, kaempferol-3-O-rutinosid, rutin ve luteolin içeriklerinin yanı sıra RFCS'deki toplam flavonoid içeriği, HPLC ve HPLC-MS ile belirlendi. Toplam polifenol içeriği, Folin-Ciocalteu kolorimetrik yöntemiyle değerlendirildi. RFCS'nin ve standartların antioksidan aktiviteleri, DPPH ve ABTS radikal yakalama deneyleri ile değerlendirildi. Gül örneklerinin ve standart maddenin tirozinaz inhibitör aktiviteleri spektrofotometrik bir yöntemle belirlendi. RFC'lerin antimikrobiyal etkileri, minimum inhibitör konsantrasyonlar (MIC'ler) ve minimum bakterisit konsantrasyonlar (MBC'ler) veya minimum Fungisit konsantrasyonlar (MFC'ler) açısından değerlendirildi.

Sonuçlar:Gül fraksiyonu, yüksek oranda biyolojik olarak aktif bileşenler içeriği sergilemiştir. RFCS'deki toplam uçucu bileşik içeriği yaklaşık 48,21 ± 2,76 ng/mL idi. Toplam fenolik asit içeriği ve toplam flavonoid içeriği sırasıyla 0,31 ± 0,01 mg/mL ve 0,43 ± 0,01 mg/mL olmuştur. DPPH testindeki IC50 değeri 1120 ± 42 ug/mL idi ve ABTS radikal süpürme aktivitesi için IC50 değeri 1430 ± 42 ug/mL idi. RFCS, 570 ± 21 ug/mL IC50 değeriyle L-tirozin oksidasyonunu güçlü bir şekilde inhibe etti . RFCS'de tanımlanan her bileşik, geniş spektrumlu antimikrobiyal aktivite sergiledi. F. nucleatum, 64 ug/mL MIC ve 250 ug/mL MBC ile RFCS'ye en duyarlıydı.

Sonuçlar:Gül benzeri aroması nedeniyle feniletil alkol, ilaç endüstrisinde doğal bir cilt beyazlatma maddesi ve cilt bakım katkı maddesi olarak kullanılmak üzere linalool ile birleştirilebilir.

anahtar kelimeler:RFCS, Fitokimyasal bileşenler, Antioksidan, Antimikrobiyal, Tirozinaz inhibitör aktiviteleri

Arka plan

Rosa rugosa Thunb'un çiçeği. var. plena Regal sadece parfüm üretiminde değil, Asya ülkelerinde binlerce yıldır sağlıklı gıda ve ilaç olarak da kullanılmaktadır. Ek olarak, güller antimikrobiyal, antienflamatuar, hipoglisemik ve antioksidan aktiviteleri ile bilinen uçucu yağlar, polifenoller, flavonoidler ve antosiyanin gibi aktif maddeler içerir. Gül, gül çayı, gül kurabiyesi, gül yağı gibi birçok şekilde tüketilebilir. Gül çiçeklerinin (Rosa rugosa ev. Plena) düşük sıcaklıkta kurutulması yoluyla gül çayı veya kurutulmuş çiçek yapraklarının üretimi, "gül çiçeği hücresi özü" (RFCS) adı verilen bir yoğuşma sağlar. RFCS'nin atılması, yüksek polifenol içeriği ve çok yüksek biyolojik aktiviteye sahip gül esansiyel yağı nedeniyle büyük bir kaynak israfını temsil eder. Ek olarak, ayrışması zor olduğu için RFCS'nin uygun olmayan şekilde atılması çevre kirliliğine neden olabilir. Ek olarak, uçucu yağlar ve polifenoller ilaç, kozmetik ve gıda endüstrilerinde aktif bileşenlerdir. 1 kg ham gül yaprağı veya çiçek tomurcuğu malzemesinin kurutulması, yaklaşık olarak 0,2 L kondens üretebilir. Yalnızca Pingyin'de endüstriyel mikrodalga kurutma döngüsü başına yaklaşık 40,000 kg gül çiçeği tomurcuğu ve 20,{10}} kg yaprak kullanılır. Bugüne kadar hiçbir çalışma, RFCS'nin ve burada bulunan biyoaktif bileşiklerin bertaraf edilmesi için uygun bir yöntem bildirmemiştir.

Gül yağı damıtma atık suyu (RODW), gül yağı üretmek için kurutulmuş gül çiçeklerinin buharla damıtılmasının bir başka yan ürünüdür. Önceki çalışmalarda, RODW, uçucu olmayan fenolik bileşikler içeren polifenol açısından zenginleştirilmiş bir kalıntı oluşturmak için konsantre edilmiştir [5]. Ayrıca, RODW'nin polifenol fraksiyonu mantar tirozinazını güçlü bir şekilde inhibe edebilir (IC50 değeri 0,41 ug/mL) [6]. Bu nedenle, RODW'deki polifenoller, hiperpigmentasyonu gidermek için biyoaktif bir madde olarak kullanılabilir.

Gıda ile ilgili patojenik bakteriler, yalnızca ABD'de her yıl milyonlarca insanda gıda kaynaklı hastalıklara ve hatta yüzlerce ölüme neden olmaktadır ve bununla ilgili toplam maliyet yaklaşık 2,4 milyar $'dır [7]. Bu nedenle, sağlıklı, toksik olmayan ve etkili antimikrobiyal maddelere yönelik artan talep, çok işlevli, doğal olarak üretilen gıda katkı maddeleri araştırmalarına ilham vermiştir. Gül yağı öncelikle anti-mikrobiyal aktiviteleri ile bilinen esansiyel yağları içermesine rağmen [8], RFC'lerin antimikrobiyal etkileri araştırılmamıştır.

Çiçeklerde bulunan fenolik bileşikler ve uçucu maddeler, antioksidan ve tirozinaz inhibitör etkileri gibi güçlü biyolojik aktivitelere sahiptir [9]. Tirozinazın beyazlatma etkisi ve esmerleşmeyi kontrol etme yeteneği nedeniyle, tirozinaz aktivitesini inhibe etmek için ek yöntemlerin geliştirilmesi, fonksiyonel kozmetik ve gıda endüstrilerinde aktif bir araştırma alanıdır [10, 11]. Antioksidanlar, reaktif oksijen türlerinin (ROS) seviyesini azaltarak kanser, yaşlanma ve ateroskleroz gibi sağlık sorunlarının risklerini azaltabilir [12]. Askorbik asit gibi bazı antioksidanların da beyazlatıcı etkileri olduğu bildirilmiştir [11].

Ön testimizde, Rosa rugosa Thunb'dan RODW'nin antimikrobiyal, antioksidan ve tirozinaz inhibitör aktiviteleri. var. Plena Regal değerlendirildi [13]. Ancak, literatürde Rosa rugosa ev. Plena. Bu çalışmada, (1) toplam fenolikler, flavonoidler, tamamen katı ve uçucu içeriklerin içerikleri araştırılmış; (2) her bir aktif bileşik ve RFCS'nin antibakteriyel (altı tür) ve mantar önleyici (bir tür) aktivitesi, antioksidan ve tirozinaz önleyici etkinlikleri incelenmiştir. Sonuçlarımız, tıbbi ve kozmetik ürünler alanlarında güllerin değerini artırmaya yardımcı olacaktır [13-16].

Yöntemler

Kimyasallar

Feniletil alkol, -bisabolol, -terpineol, sitronellol, mikonazol nitrat, hidroklorid tetrasiklin, mentol ve kafur, J&K Scientific Ltd.'den (Pekin) satın alınmıştır. Kojik asit, hiperosit, kersetin, gallik asit, kaempferol-3-O-asetilglukozilrhamnosid ve kaempferol-3-O-glukozit Sigma'dan (Şanghay, Çin) satın alınmıştır. Anaerobik kan agarı baz ortamı (CDC), aktinomiset suyu ortamı (GAM suyu), beyin kalp infüzyonu (BHI) suyu ve besin agarı, Suolaibao Biotech Co., Ltd.'den (Pekin, Çin) temin edildi. Geri kalan kimyasallar analitik veya kromatografik saflıktaydı.

örnek hazırlama 

Rosa rugosa Thunb'un RFCS'si. var. plena Regal, Pingyin'deki Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD'den temin edildi. Numuneler, analizlerden önce bir 0.42 μm mikro filtreleme zarından filtre edildi. RFCS'nin toplam katı içeriği, dondurarak kurutma ile değerlendirildi. Rosa rugosa Thunb'un kimliği. var. plena Regal, kıdemli agronomist Guo tarafından tanımlandı ve Pingyin Gül Bilimleri Enstitüsü, Herbarium'da saklanan belge örneğinde (Ser. No. 0712) doğrulandı.

HPLC analizleri

Ekstredeki polifenol bileşenlerinin konsantrasyonu, HPLC ve UV analizleri ile belirlendi. HPLC aparatı bir LC-20A HPLC sistemiydi (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japonya) ve bir Ultrasphere 5 C18 kolonu (4,6 mm × 250 mm, Ultrasphere Co., Ltd., Berkshire, BK) ile donatılmıştı ). Mobil faz, su (A) ve asetonitrilin (B) kademeli bir elüsyonuydu ve şu şekilde programlandı: 10 dakika boyunca yüzde 10 B, 15 ila 20 dakika arasında yüzde 10-25 B, 20 dakika arasında yüzde 25-30 B ile başlayarak. ve 25 dakika, 25 ile 50 dakika arasında yüzde 30-60 B, 50 ile 51 dakika arasında yüzde 60-10 B ve 51 ile 55 dakika arasında yüzde 10 B. Mobil fazın akış hızı 1 mL/dk'da tutuldu, detektör dalga boyu 350 nm'ye ayarlandı, kolon fırını 25 dereceye ayarlandı ve numune enjeksiyon hacmi 10 uL idi.

HPLC-ESI-MS koşulları

Elektrosprey iyonizasyon (ESI) kütle spektrometrisi (MS) verileri, bir Agilent-LC-1100 aletine (Agilent, ABD) kaydedildi. HPLC-ESI-MS analizi için HPLC koşulları yukarıda tarif edildiği gibiydi. ESI parametreleri aşağıdaki gibidir: çarpışma gazı (N2) akış hızı 10 mL/dk'da tutuldu, kolon fırını 25 dereceydi, veriler negatif iyon modunda [MH]- elde edildi, taramalar m/z 50 üzerinde yapıldı –2000, sprey voltajı 4.5 kV, kılcal voltajı 10 V ve kılcal sıcaklığı 250 derece idi. Numunedeki bileşenler, kütle spektral verilerine ve alıkonma sürelerine göre tanımlandı.

GC/MS analizi

RFCS'deki uçucu bileşenler, bir Rtx-5MS (30 m × 0,25 mm, film kalınlığı 0,25 μm) kılcal kolon. Fırın programı şu şekildeydi: 60 dereceden başlayarak, 120 dereceye kadar ısıtma 1,7 derece C/dk, 200 dereceye kadar ısıtma 2,5 derece/dk, 260 dereceye kadar ısıtma 8 derece/dk ve sonunda 2 dakika boyunca 260 derecede tutuyor. Taşıyıcı gaz olarak helyum kullanıldı ve akış hızı 1.0 mL/dak idi. Enjektör ve detektör sıcaklıkları sırasıyla 250 derecede ve 280 derecede tutuldu. Bölünmüş modda bir bölünmüş enjeksiyon gerçekleştirildi. İyon kaynağı sıcaklığı 250 derece ve iyonlaşma enerjisi 70 eV idi. Kütle aralığı 35–500 Da idi. Numunedeki bileşenler, kütle spektral verilerine ve alıkonma sürelerine göre tanımlandı.

Standart eğrilerin hazırlanması

Feniletil alkol (2.23 mg), -bisabolol (2.1 mg), -terpineol (5.23 mg), sitronellol (1.52 mg), mentol (1.32 mg) ve kafur çözeltileri 1 mL asetonitril içinde ayrı ayrı hazırlandı. Daha sonra, stok çözeltiler etil asetat ile on bin ila bir milyar kat arasında seyreltildi ve her numuneden 1 uL GS/MS ile analiz edildi. Kojik asit (1,12 mg), hiperosit (1,07 mg), kersetin (1,07 mg), gallik asit (1,29 mg) ve kaempferol-3-O-asetilglukosilhamnosid (1,15 mg) çözeltileri 1 mL metil içinde ayrı ayrı hazırlandı alkol. Stok çözeltiler, 2 faktörü ile metil alkol ile seyreltildi ve her çözeltiden 10 uL, HPLC ile analiz edildi. Çalışma solüsyonunun her konsantrasyonu üç kez analiz edildi. Kalibrasyon eğrileri, her standardın konsantrasyonuna karşı pik alanları olarak çizildi. Her numunedeki referans maddenin içeriği, kalibrasyon eğrileri kullanılarak hesaplandı.

Toplam fenolikler, flavonoidler ve toplam katı içeriğin belirlenmesi

RFCS'nin toplam fenolik içeriği, Folin-Ciocalteu kolorimetrik yöntemi [17] ile değerlendirildi. Fenolik maddenin toplam içeriği, standart bir gallik asit eğrisi ile karşılaştırılarak belirlendi. RFCS numunelerinin toplam flavonoid içerikleri, test edilen tüm flavonoid bileşiklerinin toplam miktarını sağlayan HPLC ile değerlendirildi. 10- mL'lik bir RFCS örneği, toplam katı içeriği belirlemek için dondurularak kurutuldu. Her belirleme üç kopya halinde gerçekleştirildi.

antioksidan özellikler

DPPH radikal süpürme aktivitesi

RFCS'nin ve standartların antioksidan aktivitesi, daha önce bildirilen bir yöntemin biraz değiştirilmiş bir versiyonu kullanılarak DPPH radikal süpürme aktivitesi ile değerlendirildi [18]. Kısaca, gül örneklerinden 10 μL alikot (1000 ug/mL ila 62,5 ug/mL), 0,4 mM DPPH içeren 190 μL yüzde 50 etanol ile karıştırıldı ve karanlıkta inkübe edildi. 30 dk. Süpernatanların alikotları (100 uL) kuyucuklu bir mikroplakaya aktarıldı ve her birinin absorbansı, bir Spectramax Plus384 UV-Vis spektrofotometre (Molecular Devices, Sunnyvale, California, ABD) kullanılarak 517 nm'de kaydedildi. Pozitif kontrol olarak askorbik asit (1000 ug/mL ila 0.05 ug/mL) ve negatif kontrol olarak numunesiz DPPH solüsyonu kullanıldı. DPPH radikalinin yüzde 50'sinin inhibe edildiği gül numunelerinin ve standart maddenin konsantrasyonlarını temsil eden IC50 değerleri belirlendi. Testler üç kopya halinde gerçekleştirildi ve DPPH temizleme yüzdesi aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplandı.

ABTS radikal yakalamanın belirlenmesi

RFCS'nin ABTS testi, daha önce bildirilmiş bir yöntemin [19] değiştirilmiş bir versiyonuna göre gerçekleştirilmiştir. Kısaca, eşit miktarlarda 7.4 mM ABTS● artı çözelti ve 2.6 mM potasyum persülfat çözeltisinin karıştırılmasıyla stok çözeltiler üretildi ve karışım oda sıcaklığında 12 saat karanlıkta inkübe edildi. Daha sonra solüsyon, pozitif kontrol olarak görev yapan yüzde 5{11}} etanol içeren 1 mL ABTS● artı solüsyonla dengelendi. 734 nm'de çözeltinin absorbansı 1.17 ± 0.02 birimdi. Gül numunelerinin alikotları (10 uL) (1000 ug/mL ila 62.5 ug/mL), 1.0 mL seyreltilmiş ABTS• plus solüsyonu ile karıştırıldı. Karışım kuvvetlice karıştırıldı ve 30 derecede 30 dakika inkübe edildi. Absorbans daha sonra spektrofotometre kullanılarak 734 nm'lik bir uyarma dalga boyu ile 520 nm'de ölçülmüştür. Pozitif standart Trolox'tur (2000 ug/mL ila 0,05 ug/mL).

İnhibisyon(yüzde)={(Kör Absorbans - Örnek Absorbans)/Kör Absorbans} × 100

Tirozinaz inhibitör aktivitesinin belirlenmesi

Gül örneklerinin ve standart maddenin tirozinaz inhibitör aktiviteleri spektrofotometrik bir yöntemle belirlendi [17]. İlk olarak, her numuneden farklı konsantrasyonlarda (1000 ug/mL ila 62,5 ug/mL) 300 μL alikot, 700 μL 0,175 ile seyreltildi M sodyum fosfat tamponu (pH 6.8), ardından 1.0 mL 10 mM DOPA solüsyonu ve 1.0 mL mantar tirozinazı (220 birim/mL) eklendi. Boş referans ve pozitif standart olarak sırasıyla etanol (300 uL, yüzde 50) ve kojik asit (2000 ug/mL ila 0.1 ug/mL) kullanıldı. Reaksiyon karışımı vortekslendi ve 37 derecede 15 dakika tutuldu ve ardından bir mikroplaka okuyucu (Molecular Devices, Sunnyvale, California, ABD) kullanılarak dopakromun maksimum absorpsiyonu (479 nm'de ayarlanmış) ölçüldü. Testler üç kopya halinde gerçekleştirildi ve tirozinaz inhibisyon aktivitesinin değeri yukarıda tarif edildiği gibi hesaplandı.

Antimikrobiyal özellikler

Antibakteriyel ve antifungal testler

Antimikrobiyal aktivite, Xue [20] tarafından açıklanan yöntemle ölçüldü. Tüm standart suşlar, Guangdong Mikrobiyoloji Kültür Merkezi'nden (Guangzhou, Çin) elde edildi. Listeria ivanovii (ATCC 19119), BHI'de kültürlendi, Salmonella enteritidis (ATCC 14028) Staphylococcus aureus (ATCC 25923) ve Escherichia coli (ATCC 25922), 24 saat ve 37 derecede besleyici agarda (NA) kültürlendi. Candida albicans (ATCC 10231), PHB'de 37 derecede 24 saat kültürlendi. Propionibacterium acnes (ATCC 6919) ve Fusobacterium nükleer um (ATCC 10953), bir YQX-II anaerobik inkübatörde (Şangay, Çin) 37 derecede 48 saat boyunca CDC agarda kültürlendi. 1 mL et suyu içindeki nihai hücre sayısı yaklaşık 106 koloni oluşturan birim (CFU/mL) idi. Su içinde 10 mg/mL'lik bir mikonazol nitrat ve hidroklorür tetrasiklin çözeltisi, sırasıyla mantarlara ve bakterilere karşı pozitif kontrol olarak kullanıldı.

Minimum inhibitör konsantrasyonun (MIC) ve minimum bakterisidal konsantrasyonun (MBC) veya minimum fungisidal konsantrasyonun (MFC) belirlenmesi

MIC ve MBC veya MFC değerleri, daha önce Xue tarafından açıklandığı gibi belirlendi. Kısaca, Besin suyu içinde Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Fusobacterium nucleatum ve Candida albicans'ın 100 μL'lik dilüsyonları (yaklaşık 100,000 CFU/mL) ve GMA sıvısında Listeria ivanovii ve Propionibacterium acnes mikrotitreye aşılandı tabaklar. Daha sonra, besin sıvısı (2 mg/mL'den 3 ug/mL'ye) ile iki kat seri seyreltmeden sonra test bileşiğinin solüsyonlarından 100 uL'lik parçalar eklendi. Kontrol olarak yüzde 5 (v/v) DMSO içeren et suları kullanıldı. Petri kapları, 37 derecede 48 saat inkübe edilen Propionibacterium acnes ve Fusobacterium nucleatum dışında 37 derecede 24 saat inkübe edildi. MIC, saptanabilir bir büyüme göstermeyen numunenin en düşük konsantrasyonu olarak kaydedildi. Bakteri veya mantar üremesinin olmadığı MBC veya MFC değerlerini belirlemek için, test bileşiklerinin 10 uL alt inhibitör konsantrasyonları, 24 veya 48 saat boyunca CDC veya GMA agar plakalarında inkübe edildi. Her belirleme üç kopya halinde gerçekleştirildi.

Veri analizi

Veriler, üç kopyanın ortalaması ± standart sapma olarak sunulur. Bir bilgisayar (Lenovo, Yangtian B) kullanılarak sırasıyla SPSS 13.0 ve Sigma Plot 10.0 ile sonuçları analiz etmek için Duncan'ın çoklu aralık testi ile tek yönlü ANOVA kullanıldı 41) Win 7 işletim sistemi ile donatılmıştır. < 0.05'lik bir p değerinin istatistiksel olarak anlamlı olduğu belirlendi.

Sonuçlar ve tartışma

Uçucu madde içeriği

RFCS örneklerinin belirli bir gül kokusu olduğundan, etil asetat ekstraktının uçucu bileşenlerini analiz ettik ve karşılaştırdık. RFCS'nin etil asetat ekstraktının uçucu bileşenlerinin içerikleri, GC/MS ile belirlendi ve dört standart eğriyle karşılaştırılarak analiz edildi ve sonuçlar ng/mL olarak ifade edildi.

Altı ana bileşen, standart tutma sürelerine ve MS iyon fragmanlarına göre aynı anda tanımlandı. RFC'lerdeki referans maddenin GC kromatogramları Şekil 1'de gösterilmektedir. Her numunedeki her bir elementin içeriği Tablo 1'de sunulmaktadır. Şekil 1'de gösterildiği gibi, gradyan sıcaklık programı altında altı bileşik başarıyla ayrıldı. RFCS'deki uçucu bileşiklerin toplam içeriği yaklaşık 48,21 ± 2,76 ng/mL ve feniletil alkol (40,48 ± 2,24 ng/mL), sitronellol (7,83 ± {{ 16}},77 ng/mL), -bisabolol (0.08 ± 0,01 ng/mL) ve feniletil asetat (11,20 ± 0,89 ng/mL) tanımlandı (iki pik belirlenmedi) tanımlanmıştır ve linalool içeriği nadirdir). RODW, GC-MS, daha spesifik olarak HS-SPME/GC/MS'deki uçucu bileşikler üzerine yapılan önceki çalışmalarda teknikler yaygın olarak kullanılmıştır [13, 21–24]. Bu önceki çalışmaların aksine, çalışmamız bileşenlerin mutlak içeriğini bildirmektedir. Geniş bir uçucu bileşik yelpazesi olmasına rağmen, baskın bileşenlerde hiçbir fark yoktu. RFCS'deki başlıca uçucu bileşikler monoterpen alkollerdi (sitronellol, linalool ve küçük güllere özgü feniletil alkol). RFC'lerdeki baskın bileşen türleri, RODW'dekilere benzer, ancak bileşenlerin içeriklerinde önemli bir fark vardır [13]. Bu farklılıkların olası bir nedeni, gül çayı kurutma işleminde uçucu bileşenlerin çoğunun kaybolmuş olmasıdır.

Toplam fenolik, flavonoid ve katı içerikler

HPLC kullanılarak belirlenen flavonoidler, bunların alıkonma süreleri ve standart bileşiklerin RFCS'deki kalibrasyon eğrileri Şekil 2'de gösterilmektedir. Şekil 2'de gösterildiği gibi dört bileşik gradyan sıcaklık programı altında başarıyla ayrıldı. flavonoidlerin kalibrasyon eğrileri ve regresyon katsayıları Tablo 2'de gösterilmiştir. Referans bileşiklerin iyi doğrusallık gösterdiği bulunmuştur (R2 Büyük veya eşittir 0.997). RFCS'nin hiperosit (0.18 ± 0.01 mg/mL), kaempferol{{10}}O olmak üzere üç ana bileşen içerdiği bulundu. -rutinoted (0.12 ± 0.{{20}}1 mg/mL) ve rutin (0.23 ± 0). 01 mg/mL). Toplam fenolik içerik ve toplam flavonoid içeriği sırasıyla 0.31 ± 0.01 mg/mL ve 0.43 ± 0.01 mg/mL idi. RFCS'deki toplam katı içeriği 1,45 ± 0,04 mg/mL idi.

Önceki araştırmalar, gül rugosa çayındaki baskın fenolik ve flavonoid bileşiklerin gallik asit, kateşin, epikateşin ve kuersetin olduğunu ve Rosa rugosa çayı polifenol özündeki toplam polifenol içeriği ve flavonoid içeriğinin 875.2 mg/g ve 610.3 mg/g olduğunu bildirmiştir. , sırasıyla [1]. Ayrıca RODW'nin reçine fraksiyonlarında rutin, mulflorin B, hiperosid, kaempferol ve ellagik asit de bulunmuştur [6]. Ayrıca, önceki çalışmalardan farklı olarak, çalışmamız RODW'deki fenol ve flavonoid bileşiklerini belirlemek için HPLC-MS kullanmasına rağmen, bu çalışmada ve önceki çalışmalarda baskın bileşiklerden sadece biri olan kaempferol-3-O-rutinosid bulundu [6 , 13]. Fenol bileşiklerinin hiçbiri RFCS'de HPLC ile tespit edilmemiştir, çünkü RFCS'deki fenollerin ve flavonoidlerin konsantrasyonları çok düşüktür ve bu nedenle HPLC tarafından tespit edilemezler. RFCS'deki bu katılar, küçük moleküllerin bir karışımıydı.

antioksidan kapasitesi 

Tablo 3, RFCS'nin ve standart bileşiklerin DPPH IC50 değerlerini sunar. IC50 değerleri < 1 ug/mL olan flavonoidler, hiperosid (IC50 değeri 0,695 ± 0.021 ug/mL dahil) ), kaempferol-3-O-rutinosid (IC50 değeri 0,808 ± 0.024 ug/mL) , rutin (IC50 değeri 0.715 ± {{60}}.017 ug/mL) ve luteolin (IC50 değeri 0.507 ± 0.015) ug/mL), RFCS'den (IC50 değeri 1120 ± 42 ug/mL) daha güçlü DPPH radikal yakalama aktiviteleri gösterdi. Linalool, feniletil alkol, sitronellol ve -bisabolol gibi tek uçucu bileşikler > 10,000 ug/mL IC50 değerleri ile zayıf radikal süpürme aktivitesi gösterdi. Önceki raporlarda, gülden elde edilenler de dahil olmak üzere çeşitli doğal ürünlerin antioksidan aktiviteleri, fenolik bileşiklerin içeriğine atfedilmiştir [25, 26]. ABTS radikal testi, birçok doğal üründe hidrojen veren ve zincir kıran antioksidanların radikal yakalama aktivitesini değerlendirmek için de kullanılır [27, 28]. Tabloda gösterildiği gibi. Şekil 3'te, tekli bileşiklerin ve RFCS'nin ABTS radikal yakalama aktiviteleri ug/mL olarak ifade edilir. Önceki çalışmalarla uyumlu olarak, flavonoidler, uçucu bileşiklerden önemli ölçüde daha yüksek anti-radikal aktiviteler ve antioksidan kapasiteler sergiledi [8, 13]. Bu çalışmada, ABTS temizlemenin sonuçları DPPH'ninkine benzerdi; hiperozit (IC50 değeri 0,526 ± 0,014 ug/mL), kaempferol-3-O-rutinosid (IC50 değeri 0,719 ± 0,016 ug/mL), rutin (IC50 değeri) dahil olmak üzere IC50 değerleri < 1 ug/mL olan flavonoid bileşikler 0,621 ± 0,024 ug/mL) ve luteolin (IC50 değeri 0,436 ± 0,026 ug/mL), RFCS'den (IC50 değeri 1430 ± 49 ug/mL) daha güçlü ABTS radikal yakalama aktiviteleri gösterdi. Linalool, feniletil alkol, sitronellol ve -bisabolol gibi tek uçucu bileşikler, zayıf antiradikal aktiviteler sergilediler (IC50 değerleri > 10,000 ug/mL).

Tirozinaz inhibe edici aktiviteler

Tirozinaz, mantarlarda, memelilerde ve bitkilerde bulunan çok işlevli bakır içeren bir enzimdir [29]. Tirosinazın iki farklı enzim aktivitesi vardır, yani monofenolaz aktivitesi ve difenolaz aktivitesi [30]. Mantar tirozinazının tirozinaz inhibitör aktivitelerine ilişkin bir ilk çalışma yürüttük. Bu tahlile göre RFCS, 570 ± 21 ug/ mL'lik bir IC50 değeriyle güçlü tirozinaz inhibe edici aktiviteler gösterdi (Tablo 3). Linalool, feniletil alkol, sitronellol ve -bisabolol dahil olmak üzere uçucu bileşikler ayrıca 730 ± 44 ug/mL, 315 ± 13 ug/mL, 825 ± 31 ug/mL IC50 değerleri ile doza bağlı tirozinaz inhibe edici etkiler gösterdi ve sırasıyla 635 ± 22 ug/mL. Hiperosit, kaempferol-3-O-rutinosid ve hatta rutin gibi tüm flavonoid bileşikleri, kojik asitten (80 ± 17 ug/mL) daha güçlüydü ve hepsinin IC50 değerleri 1 ug/mL'nin altındaydı. Solimine'in raporuna benzer şekilde, flavonoid bileşikleri içeren polifenolle zenginleştirilmiş RODW fraksiyonu, 0.41 ± 0.01 ug/mL'lik bir IC50 değeriyle bariz tirozinaz inhibe edici aktivite sergiler [6]. Bu arada, RFCS'nin tirozinaz inhibitör etkileri Pingyin'den [13] RODW'den daha güçlüdür. Flavonoid içeriği, RODW'nin genel tirozinaz inhibitör etkisine katkıda bulunur.

Antimikrobiyal faaliyetler

Farklı gül fraksiyonları, RFCS ve standart antibiyotiklerin (tetrasiklin ve hidroklorür) antimikrobiyal aktivite çalışmalarının sonuçları Tablo 4'te sunulmaktadır. 250 ug/mL. Hem P. acnes hem de S. aureus'a karşı RFCS için MİK değerleri 125 ug/mL idi. Diğer bakterilere karşı MİK değerleri 250 ug/mL idi. RFCS'nin dokuz bileşeninin MIC ve MBC veya MFC değerleri, RFCS'nin anti-mikrobiyal etkilerinden sorumlu bileşenleri belirlemek için belirlendi. -bisabolol'e en duyarlı L. ivanovii ve F. nucleatum türleri olup, bu türlere karşı MİK değerleri 8 ug/mL ve MBC değerleri 32 ug/mL olarak göstermişlerdir (Çizelge 4). -bisabololden sonra feniletil alkol, RFCS'nin tüm bileşenleri arasında en düşük MIC ve MBC veya MFC değerlerini göstermiştir. Genel olarak, uçucu bileşenler, RFCS'nin antimikrobiyal aktivitesinde flavonoid bileşiklerden daha önemli bir rol oynadı.

Gülün çeşitli fraksiyonlarının antimikrobiyal etkilerine ilişkin önceki araştırmalar benzer sonuçlar bildirmiştir [8, 28, 31]. Sulu ekstrakt, etanol ekstraktı, kloroform ekstraktı, etil asetat fraksiyonu ve bütanol fraksiyonu dahil olmak üzere uçucu yağ ve çeşitli gül özleri, geniş spektrumlu antimikrobiyal aktiviteler sergiler. Etil asetat fraksiyonu dışında, gül esansiyel yağı, test edilen bakterilere karşı nispeten daha aktiftir [28]. Gülün mutlak ve uçucu yağları, olağanüstü antimikrobiyal özelliklerle sonuçlanan yüksek düzeyde polifenoller ve feniletil alkol içerir [8]. RODW'deki uçucu yağ içeriği RFCS'den daha yüksek olduğundan, RODW'nin antimikrobiyal etkisi RFCS'den daha iyidir [13]. Ru gosa çayından elde edilen polifenolik açıdan zenginleştirilmiş fraksiyon, Escherichia coli ve Pseudomonas aeruginosa quorum algılamayı ve biyofilm oluşumunu inhibe edebilir [1]. Gül yağının linalool, citronellol ve geraniol gibi bazı aktif bileşenlerinin antimikrobiyal etkileri doğrulanmıştır [32, 33]. Bugüne kadar, R. Fenghua'nın RFCS'sinin antimikrobiyal aktivitesi değerlendirilmemiştir. Bu sonuç, yüksek oranda feniletil alkol ve diğer uçucu bileşenlerin RFCS'nin antimikrobiyal aktivitelerine katkıda bulunduğu gerçeğini açıkça desteklemektedir [34].

Sonuçlar

Çalışmamız, RFCS'nin güçlü antioksidan, anti-mikrobiyal ve tirozinaz inhibitör aktivitelerini göstermiştir. Tirosinaz inhibitör aktiviteleri ve S. enteritidis alt türü enteritidis, C. albicans ve P.acnes'e karşı antimikrobiyal etki ile birlikte feniletil alkolün gül benzeri aroması nedeniyle RFCS, doğal bir cilt beyazlatıcı ve cilt bakım katkı maddesi olarak kullanılabilir. kozmetik endüstrisinde. Ayrıca, antioksidan aktiviteleri ve L. ivanovii, S. alt türleri, E. coli ve S. aureus'a karşı antimikrobiyal etkileri nedeniyle RFCS, gıda ve ilaç endüstrilerinde doğal bir koruyucu ve antimikrobiyal ajan olarak kullanılabilir.

teşekkürler

RFCS'yi sağladığı için Pingyin'deki Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD'ye teşekkür ederiz.

Finansman

Bu çalışma, Ginseng Planting Resource Collection and Innovation (No. 20151FDA31290) tarafından desteklenmiştir.

Veri ve materyallerin mevcudiyeti

Mevcut çalışma sırasında kullanılan ve/veya analiz edilen veri kümeleri, makul talep üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.

Yazar katkıları

Çalışmayı GR, GZ ve PX tasarladı. Veri toplama ve veri girişinden GR ve GZ sorumluydu. PX ve XS verileri analiz etti ve taslağı yazdı. Tüm yazarlar son taslağı okudu ve onayladı.

Etik onay ve katılım onayı

Bu bölüm, yazarlardan herhangi biri tarafından insan katılımcılar veya hayvanlarla gerçekleştirilen herhangi bir çalışma içermemektedir ve bilgilendirilmiş onam söz konusu değildir.

yayın izni

Uygulanamaz.

Rekabet eden çıkarlar

Yazarlar, rekabet eden çıkarları olmadığını beyan eder.

Yayıncının Notu

Springer Nature, yayınlanan haritalardaki ve kurumsal bağlantılardaki yetki iddiaları konusunda tarafsız kalır.

Referanslar

1. Zhang JM, Rui X, Wang L, Guan Y, Sun XM, Dong MS. Rosa rugosa çayından elde edilen polifenolik özü, bakteriyel çekirdek algılamasını ve biyofilm oluşumunu engeller. Gıda Kontrolü. 2014;42:125–31.

2. Tursun X, Zhao YX, Talat Z, Xin XL, Tursun A, Abdulla R, Akber AH. Lipopolisakkarit ile uyarılan RAW264.7 makrofajlarında Rosa rugosa çiçeği ekstraktının anti-enflamatuar etkisi. Biyomol Ter. 2016;24:184–90.

3. Thao NP, Luyen BTT, Tai BH, Yang SY, Jo SH, Cuong NX, Nam NH, Kwon YI, Minh CV, Kim YH. Rosa rugosa Thunb köklerinden bileşenlerin sıçan bağırsak sükraz inhibisyonu. Bioorg Med Chem Lett. 2014;24:1192–6.

4. Lee HJ, Ahn JW, Lee BJ, Moon SG, Seo Y. Rosa rugosa'nın antioksidan aktivitesi. Ksbb J. 2004;19:67–71.

5. Kovacheva N, Rusanov K, Atanassov I. 21. yüzyılda Bulgaristan'da yağ içeren gülün endüstriyel ekimi ve gül yağı üretimi, yönler ve zorluklar. Biotechnol Biotec Eq. 2010;24:1793–8.

6. Solimine J, Garo E, Wedler J, Rusanov K, Fertig O, Hamburger M, Atanassov I, Butterweck V. Gül yağı damıtma atık suyunun polifenolle zenginleştirilmiş fraksiyonundan tirosinaz önleyici bileşenler. Fitoterapi. 2016;108:13–9.

7. Callaway TR, Edrington TS, Anderson RC, Byrd JA, Nisbet DJ. Gastrointestinal mikrobiyal ekoloji ve salmonella ile ilgili gıda arzımızın güvenliği. J Animasyon Bilimi 2008;86:163–72.

8. Shohayeb M, Abdel-Hameed ESS, Bazaid SA, Maghrabi I. Rosa damascena MILL'in antibakteriyel ve antifungal aktivitesi. Uçucu yağ, farklı gül yaprakları özleri. Küresel J Eczacılık. 2014;8:01–7.

9. Kim S, Lee S, Gwak K, Lee J, Choi I. Cryptomeria japonica'dan elde edilen uçucu yağların beyazlatma etkisi ve antioksidan aktivitesi. Bitki Med. 2011;77:1301.

10. Baek SH, Nam IJ, Kwak HS, Kim KC, Lee SH. Bir Euryale ferox tohum özü etil asetat fraksiyonunun lizozomal bozunma makinesi yoluyla hücresel anti-melanojenik etkileri. Int J Mol Sci. 2015;16:9217–35.

11. Roh JS, Han JY, Kim JH, Hwang JK. Aspir (Carthamus tinctorius L.) tohumlarından izole edilen aktif bileşiklerin melanojenezi inhibe edici etkileri. Biol Eczacı Bull. 2004;27:1976–8.

12. Takaki A, Yamamoto K. Hepatoselüler karsinomda oksidatif stresin kontrolü: faydalı mı zararlı mı? Dünya J Hepatol. 2015;7:968–79.

13. Xue P, Sun XY, Zhang WY, Wang QC, Ren GX. RODW'nin fitokimyasal bileşenleri, antioksidan, antimikrobiyal, Tirosinaz inhibitör aktiviteleri. Modern Gıda Bilimi Teknolojisi. 2017;33:105–10.

14. Briehl MM. Yaşamdan ölüme insan sağlığında oksijen - mezun ve tıp öğrencilerine redoks biyolojisi ve sinyalizasyon öğretimi için bir yaklaşım. Redoks Biyo. 2015;5:124–39.

15. Ellinsworth DC. Arsenik, reaktif oksijen ve endotel disfonksiyonu. J Pharmacol Uzm. 2015;353:458–64.

16. Balaguer A, Chisvert A, Salvador A. Cilt beyazlatıcı kozmetiklerde askorbik asit ve türevlerinin eş zamanlı tayini için çevre dostu LC. J Eylül Sci. 2008;31:229–36.

17. Fawole OA, Makunga NP, Opara UL. Nar meyve kabuğu metanolik ekstraktının antibakteriyel, antioksidan ve tirozinaz inhibisyon aktiviteleri. BMC Tamamlayıcı Altern Med. 2012;12:1–11.

18. Park KM, Kwon KM, Lee SH. Miselyum Kültürü ekstraktlarından antioksidan aktivitelerin ve tirozinaz inhibitör özelliklerinin değerlendirilmesi. Kanıta Dayalı Zorunlu Alternatif Med. 2015;2015:616298–304.

19. Thaipong K, Boonprakob U, Crosby K. Guava meyve özlerinden antioksidan aktiviteyi tahmin etmek için ABTS, DPPH, FRAP ve ORAC deneylerinin karşılaştırılması. J Gıda Bileşimleri Anal. 2006;19:669–75.

20. Xue P, Yao Y, Yang XS, Feng J, Ren GX. Isı dönüşümü ile ginseng ekstraktının geliştirilmiş antimikrobiyal etkisi. J Gins Res. 2016;41:180–7.

21. Rusanov KE, Kovaçeva NM, Atanassov II. Yağ taşıyan gülün gül çiçeği ve damıtılmış yağ uçucularının karşılaştırmalı gc/ms analizi. Biotechnol Biotec Eq. 2014;25:2210–6.

22. Köksal N, Sarıbaş R, Kafkas E, Aslancan H, Sadighazadi S. İlk gül yağı ve ilk gül suyunun hs-spme/GC/ms teknikleri ile uçucu bileşiklerinin belirlenmesi. Afr J Geleneksel Tamamlayıcı Alt Med. 2015;1212:145–50.

23. Mahboubifar M, Shahabipour S, Javidnia K. İran gül suyundaki değerli oksijenli bileşenlerin değerlendirilmesi. Stajyer Uluslararası J Chemtech Res. 2014;6:4782–8.

24. Lei G, Wang L, Liu X, Zhang A. Gül suyundaki feniletil alkolün hızlı ölçümü ve Güneydoğu Çin'den ve Güneydoğu Çin'den gelen gül suyu ve yağının kimyasal profilleri. J Liq Chromatogr Rela Tech. 2015;38:823–32.

25. Wong PY, Kitts DD. Maydanoz (Petroselinum crispum) ve kişniş (Coriandrum sativum) ekstraktlarının ikili antioksidan ve antibakteriyel özellikleri üzerine araştırmalar. Gıda Kimyası 2006;97:505–15.

26. Li L, Ham H, Sung J, Kim Y, Lee H. Dört farklı gül çeşidinden metanolik ekstraktların antioksidan aktiviteleri. J Gıda Besin Arş. 2014;2:69–73.

27. Netzel M, Strass G, Bitsch I, Konitz R, Christmann M, Bitsch R. Üzüm işlemenin kırmızı şarapta seçilmiş antioksidan fenolikler üzerindeki etkisi. J Gıda Müh. 2003; 56:223–8.

28. Joo SS, Kim YB, Lee DI. Beyaz gül çiçeğinden ikincil metabolitlerin antimikrobiyal ve antioksidan özellikleri. Plant Pathol J. 2010;26:57–62.

29. Saanchez-Ferrer A, Rodríguez-López JN, García-Cánova F, García-Carmona F. Tirosinaz: mekanizmasının kapsamlı bir incelemesi. Bioch Et Biyophy Açta. 1995;1247:1–11.

30. Kim YJ, Uyama H. ​​Doğal ve sentetik kaynaklardan tirosinaz inhibitörleri: yapı, inhibisyon mekanizması ve gelecek için bakış açısı. Hücre Mol Life Sci. 2005;62:1707–23.

31. Said BOS, Haddadi-Guemghar H, Boulekbache-Makhlouf L, Rigou P, Remini H, Adjaoud A. Okaliptüs globulus meyvelerinin hidrodistilasyon ekstraktının uçucu yağ bileşimi, antibakteriyel ve antioksidan aktiviteleri. End. Mahsul Üretimi 2016;89:167–75.

32. Arıdoğan BC, Baydar H, Kaya S, Demirci M, Mumcum E. Bazı uçucu yağların antimikrobiyal aktivitesi ve kimyasal bileşimi. Arch Pharm Res. 2002;25:860–4.

33. Gochev V, Wlcek K, Buchbauer G, Stoyanova A, Dobreva A, Schmidt E, Jirovetz L. Başta Bulgar gül yağı olmak üzere çeşitli coğrafi kökenlerden gül yağlarının antimikrobiyal etkinliğinin ve bileşiminin karşılaştırmalı değerlendirmesi. Nat Ürün Komün. 2008;3:1063–8.

34. Etschmann MMW, Bluemke W, Sell D, Schrader J. 2-feniletanolün biyoteknolojik üretimi. Appl Microbiol Biot. 2002;59:1–8.