Şap Hastalığı Aşısının Geliştirilmesi ve Uzun Süreli Bağışıklık Sağlamadaki Zorluklar: Eğilimler ve Mevcut Perspektifler

Soyut:

Şap hastalığı (FMD), hem bireysel çiftçiler hem de ulusal ekonomi üzerinde ciddi bir ekonomik etkiye neden olan ayak ve fare hastalığı virüs cinsi Aphthovirus'ün neden olduğu çiftlik hayvanlarında son derece bulaşıcı bir viral hastalıktır. Şap hastalığı için bir aşı geliştirmeye yönelik birçok girişim, steril bağışıklığı tetiklemede başarısız oldu. Aşı üretiminin klasik yöntemleri, antijenik ve bağlanma bölgeleri çevresinde mutasyonların seçici birikiminden kaynaklanıyordu. Ajanın pozitif seçim ve yarı tür sürüsü ile tersine çevrilmesi, bu yöntemin kullanımı, endemik olmayan alanlarda kullanım için geçerli değildir. İkili etilenimin (BEI) kullanılarak kimyasal zayıflatma, kapsid bütünlüğünü korudu ve meydan okuma suşuna karşı belirgin bir bağışıklık üretti.

Şap hastalığı, bir hayvanın bağışıklık sistemini etkileyen viral bir hastalıktır. Şap hastalığı virüsü, hayvan hücrelerini istila edebilir, hücre zarlarını ve iç organları tahrip edebilir, hayvanın bağışıklık fonksiyonunu bozabilir ve onu diğer patojenlerin neden olduğu enfeksiyona duyarlı hale getirebilir.

Aynı zamanda, şap hastalığı aşısının aşılanması, hayvanların bağışıklığını geliştirebilir ve onları virüse karşı bağışık hale getirebilir. Aşılama başarılı olduktan sonra, hayvan antikor üretecek ve şap hastalığı virüsüne tekrar maruz kaldığında, hızlı bir şekilde bir bağışıklık tepkisi üreterek virüsün daha fazla enfeksiyon kapmasını ve hastalığa neden olmasını etkili bir şekilde önleyebilecektir. ceryan etmek.

Bu nedenle, özellikle şap hastalığına karşı aşılama yoluyla hayvanların bağışıklığının iyileştirilmesi, şap hastalığını önlemenin önemli bir yoludur. Aynı zamanda, bilimsel besleme yönetimi ve sanitasyon ve salgın önleme önlemleri de virüsün yayılmasını ve şap hastalığının oluşumunu azaltmaya yardımcı olabilir. Bu açıdan bakıldığında, insan vücudunun bağışıklığı geliştirmeye dikkat etmesi gerekip gerekmediğini düşünmemiz gerekiyor. Cistanche, insan bağışıklığını önemli ölçüde artırabilir. Cistanche ayrıca, bağışıklık sisteminin savaşma yeteneğini güçlendirebilen ve vücudun bağışıklığını geliştirebilen anti-virüs ve anti-kanser etkilerine sahiptir.

Tıklayın cistanche tubulosa faydaları

Virüslerde, plazmitlerde veya bitkilerde kimyasal olarak sentezlenen veya ifade edilen viral antijenler, hayvanların aşılanmasında denendi. Yapısal veya yapısal olmayan protein antijenlerini ifade eden DNA aşıları, hayvanları aşılamaya çalışılmıştır. İnterlökinlerin DNA aşıları için genetik adjuvan olarak kullanılması umut verici bir etkiye sahiptir. Steril bağışıklığı indüklemenin zorlukları, dendritik hücrelerin apoptozundan sorumlu olan ve geçici bağışıklığın baskılanmasına yol açan lenfoproliferatif tepkiler üzerinde olumsuz etkileri olan FMDV'nin yapısal olmayan (NS) proteinlerinde yatmaktadır. Ayrıca, yapısal olmayan proteinler tarafından konakçı protein kaçakçılığının yok edilmesi, CD8 artı T-hücre proliferasyonunu bastırdı. Bu inceleme, aşı geliştirme denemeleri için çoklu yaklaşımları ve steril bağışıklık üretmenin darboğazlarını ele almaya çalıştı.

anahtar kelimeler:

Şap aşısı, uzun süreli bağışıklık, steril bağışıklık.

Arka plan

Şap hastalığı (FMD), Ayak ve Fare hastalığı virüsünün neden olduğu, çiftlik hayvanlarında son derece bulaşıcı bir viral enfeksiyondur, cins: Aphthovirus ve Picornaviridae ailesi; bu da ciddi ekonomik kayıplara neden olur.1,2 Evcil ve yabani toynaklılar Şap Hastalığından oldukça etkilenir.3–5 5S protomerleri, bireysel olgun proteinler tarafından kendiliğinden üretilir; VP1, VP3 ve VP0, bunlardan beşi bir 12S pentamer halinde toplanır. 75S viral kapsid, 12 pentamerin bir araya gelmesiyle oluşturulurken,6,7 tam şap hastalığı virüsü (FMDV) 146S antijeninin, viral kapsid ile çok benzer antijen özgüllüğüne sahip olduğu bildirilmiştir.8,9 Şap ve -ağız hastalığı virüsü geniş bir konukçu yelpazesine, yüksek oranda genetik varyasyona ve büyük antijenik farklılıklara sahiptir ve yedi serotipi (A, O, C, Asia1, SAT1, SAT2 ve SAT3) ve 100'den fazla serosubtipi vardır.10 Yarı tür sürüsü nedeniyle, her yıl birçok yeni varyant da ortaya çıkıyor. Yedi serotip tarafından indüklenen çapraz bağışıklık yoktur. Aynı serotipin çeşitli alt tipleri arasında sadece kısmi bir çapraz bağışıklık vardır.11 FMDV'nin değişkenliği ve polimorfizmi, FMD'nin önlenmesini ve kontrolünü çok zorlaştırmıştır.10 Farklı serotiplerin P12A ve 3C proteinlerini eksprese eden adenovirüs rekombinant FMDV, koruyucu bir etki gösterdi.12–14

Klasik inaktive aşıların, termal istikrarsızlık, kısa ömürlü bağışıklık, yüksek maliyet, vahşi suşlarla rekombinasyon riski ve patojenitenin tersine çevrilmesi gibi birçok eksikliği vardır.11,15,16

90 yıllık araştırmalara rağmen Şap hastalığına karşı steril ve sağlam bağışıklık sağlayan etkili bir aşı yoktur, ancak hastalık dünyanın geniş bölgelerinde enzootik olmaya devam etmektedir. Şap hastalığına karşı bir aşı geliştirmeye yönelik birçok girişim, çok az çapraz serotip koruması ve yetersiz bağışıklık süresi ile steril bağışıklığı indüklemede başarısız olmuştur. hayvanlar ve doğal konağı virüsü zayıflatmayı başardı. Bunun nedeni, antijenik ve bağlanma bölgelerinin etrafındaki mutasyonların seçici birikimidir.19–21 Bununla birlikte, ajanın pozitif seçim ve yarı tür sürü yöntemiyle tersine çevrilmesinin kullanımı, endemik olmayan alanlarda kullanım için geçerli değildir.22 DNA ve protein teknolojileri, integrin reseptörlerini modifiye ederek,23 hayvanda açık bir bağışıklık tepkisini indükleyebilen sentetik peptitleri kullanarak araştırmayı geliştirmiştir.24 G–H halka bölgesine özgü T-yardımcı hücre epitopları, güçlü B-hücresi epitoplarıdır. hümoral bağışıklığı indükler.25 Rekombinant interferon (IFN ) ve sığır interlökin 18'in (IL-18) adjuvan olarak kullanılması, laboratuvar hayvanlarında uzun vadeli bağışıklığı arttırmıştır.26,27

Son zamanlarda, rekombinant canlı vektör DNA aşıları güçlü sitotoksik T lenfosit (CTL) indükleyicileridir.28,29 FMD'de bu etkiyi belirtmek için uygun bir adjuvan gereklidir.30 Bu etkinin üstesinden gelmek için konakçı Ig süper ailesi ve FMD epitopunun rekombinasyonu hümoral etkiyi geliştirmiştir. ve hayvanın hücresel bağışıklık tepkisi.

Steril ve uzun süreli bağışıklığın indüklenmesindeki darboğaz sorunu, özellikle 3A olmak üzere yapısal olmayan (NS) proteinler tarafından konakçı protein kaçakçılığının yok edilmesiyle engellenir, bu nedenle bir küme farklılaşması 8 pozitif (CD8 artı ) T hücresi tepkisine neden olmaz. zayıf CTL ve virüs hayvanda varlığını sürdürür.31 Kemik iliği kaynaklı dendritik hücre (DC) apoptozuna aracılık eden integrin reseptörleri, konağın doğuştan gelen bağışıklığını engelledi.32 Guzman ve arkadaşları33 ve Joshi ve arkadaşları34, çoğalma gibi CTL öldürme için vekil tepkileri analiz ettiler. veya CD8 eksprese eden hücreler tarafından IFN üretimi, ancak CTL olmayan birçok CD8 artı eksprese eden lenfosit, doğal öldürücü (NK) hücreler ve gama delta (δ) T-hücrelerinin alt kümeleri dahil olmak üzere IFN üretir. 35–37

Oh ve ark.38'e göre, IFN- yanıtı, yükleme gününde dolaşımda yüksek düzeyde virüs nötralize edici antikor titresi sergileyen aşılanmış sığırlarda yeniden uyarılabilir; bu, IFN ile aşının neden olduğu korumayla doğrudan ilişkilidir - ve nötrleştirici antikor. Ayrıca, CD4 artı T hücreleri, gelişen ana fenotip ve IFN üreten hücrelerdir. Bununla birlikte, doğal enfeksiyonda, in vivo plazmosit DC (pDC) sayıları ve in vitro pDC IFN- salgılanması, enfeksiyondan sonraki 2 gün içinde kısa bir süre için azalırken, viremi zirvesi ve serum IFN- yanıtı ile örtüşen lenfopeni vardı.39 monosit kaynaklı DC'ler (MoDC'ler) ve deri kaynaklı DC'ler (deri DC'ler), domuz enfeksiyonunun akut fazında inhibe edilir.40 Ayrıca, FMDV tarafından olgunlaşmamış dendritik hücrelerde apoptoz indüklenmiştir.32 Virüsün immün patogenezinin üstesinden gelmek için antikor üretimini ve T-hücre proliferasyonunu artırarak, CD8 T-hücrelerinde daha yüksek seviyelerde CTL aktivitesi ve IFN-ifadesi, mukozal aşı adjuvanları olarak sentetik oligonükleotidler tarafından elde edildi.41 Bu makalenin temel amacı, Şap Hastalığı aşısı geliştirme ve steril ve uzun vadeli bağışıklığı indüklemede zorluklar.

Zayıflatılmış ve İnaktive Aşı

İzin vermeyen hayvanlarda seri geçiş veya hücre kültürü gibi geleneksel yöntemlerle canlı zayıflatılmış Şap aşılarını iyileştirmeye yönelik birçok girişimde bulunuldu. Atenüasyon, fareler, tavşanlar ve embriyonlu yumurtalar gibi duyarlı olmayan türlerde, sığırlarda virülansı kaybedene kadar pasajlanarak sağlandı. Hücre kültüründe yüksek enfeksiyon çeşitliliğinde FMDV C-S8c1'in seri geçişleri, fareler için FMDV C-S8c1 ile ölümcül mücadeleye karşı tamamen koruyucu ve tek bir dozla aşılamadan sonra domuzlar için güvenli olan kusurlu bir genomla (C-S8p260) sonuçlandı. C-S8p260.42'nin aynı zamanda, domuzda yüksek titrelerde nötralize edici antikorları ve aktive edilmiş T-hücrelerini indüklemiştir.42

Yüksek oranda patojenik, domuza adapte edilmiş O Taiwan 97 izolatının domuzda seri temas iletimi, 14. domuz geçişinden sonra virülansı önemli ölçüde azaltır ve 16. geçişten sonra bunu ortadan kaldırır.43 İn vivo geçişler sırasındaki amino asit değişiklikleri oldukça sessiz ikame ve VP1'deki değişikliklerdir. (1D) geçiciydi. İzin vermeyen konakçılarda bir FMD aşısı geliştirmek, ajanın Arg-GlyAsp (RGD) dışındaki diğer hücresel reseptörleri kullanmasına neden olabilir, BHK 21 testindeki bir plak testi, virüs sağlamken negatif gösterebilir.43 Amino asidin değiştirilmesi Başka bir amino asit tarafından kapsid alt birimlerinin yakınında bulunan yan zincirler, alt birim arayüzleri arasında yeni disülfür bağları veya elektrostatik etkileşimler oluşturabilir ve Şap aşılarının mevcut prosedürler kullanılarak44 aşı suşlarının ısı toleransını artırarak enfeksiyon için harcanabilir olması öngörülür veya başlatılır. ideal bir soğuk zincire daha az bağımlıdır. FMDV C-S8p260 suşları, iki güvenlik bariyeri ile aşıların zayıflatılmasının temelini sağlayabilen replikasyon yetkinliğinin yanı sıra segmentlere ayrılmıştır.45

Çoğu araştırma, 2C'de bir amino asit ikamesi kullanan hayvan modeli FMDV inaktivasyonunun C-S8c1'de tespit edilemediğini ancak kobay adapte edilmiş FMDV'nin düşük bir oranında mevcut olduğunu göstermektedir.46 Bu amino asit ikamesi, sonrasında viral popülasyonda hızla baskın hale geldi. kobay adapte edilmiş virüsün domuzlara yeniden verilmesi. Bu bulgular, yapay bir konakçıya azınlık varyantı virüslerin dahil edilmesinin, orijinal konakçı tür yeniden enfekte edildiğinde nasıl baskın hale gelebileceğini göstermektedir.47 Bu pozitif seçilime ve yarı-tür sürüsüne ek olarak, aşı türü patojenik bir türe dönüşebilir. 22

Virüsün formalin ve endonükleaz kullanılarak etkisizleştirilmesi, sırasıyla virüsü etkisiz hale getirmede ve antijenik bölgeleri parçalamada başarısız olur.48 Binary etilenimin (BEI), kapsidin bütünlüğünü korurken virüsün zayıflatılması için de kullanılmıştır.15,49 BEI- etkisizleştirilmiş FMD hücresel reseptörleri, integrinler, kültürlenmiş hücrelere bağlanma ve içselleştirme için kullanılır, etkileşime, VP1 kapsid proteininin GH döngüsü içinde yer alan bir amino asit kalıntısı aracılık eder.49 FMDV'ye özgü monoklonal antikorlar veya sentetik bir peptit, BEI- inaktive edilmiş FMD, integrin bağlama motifi RGD'nin aracılık ettiği BHK-21'a işaret proteini ile ortak lokalizasyonları yoluyla içselleştirildi.50 Ayrıca, BEI inaktivasyonu, GH döngüsünün antijenisitesini etkilemez.20,51 BEI inaktivasyonu, korunmuş virion mimarisi ve virüsün kültürlenmiş hücrelere ve ayrıca in vivo içselleştirilmesini destekleyen reseptörlere integrin tanıma aracılık eder,47,52,53 bununla birlikte, tüm virüs kantifikasyonu, formalin ile karşılaştırıldığında minimum bir sonuç gösterir. inaktivasyon (yüzde 65-71,6), BEI inaktivasyonu ise yüzde 44,2 .49

Domuz ve kobaylardan C tipi FMDV'nin sıralı pasajı ve domuz ve emziren farelerde muhafaza edilmesi, amino asit replasmanlarıyla sonuçlanır (2C'de I2483T, 3A'da Q443R ve VP1'de L1473P). İntegrin bağlayıcı RGD motifinin yanındaki değiştirilen amino asit (L1473P), virüsün farklı hücre hatlarında büyümesini ortadan kaldırdı ve antijenisitesini değiştirdi.47 Burman ve ark.20 tarafından yürütülen başka bir çalışma, RGD'de tek bir amino asidin değiştiğini ortaya koydu. artı 1 ve RGD artı 4 bölgesi, virüs bağlanmasını ve v 6 veya v 8 tarafından kolaylaştırılan enfeksiyonu engeller, ancak virüs, hücre bağlanması için v 3'ü kullanır. Bağlanma bölgesinde metiyonin veya arginin ile değiştirmeler, v 6 için etkili inhibitörlerdir. RGD artı 1 ve RGD artı 4 noktalarındaki iki lösin kalıntısı, RGD'ye hemen C terminaline bağlı olarak bağlanmayı stabilize etti.20,54 EDTA'ya dirençli bağlanma v 6 bir ayırt edici özelliktir ve hücresel reseptörü ile kararlı kompleksin önemli ölçüde FMDV yüksek bulaşıcılığı üretmesi bekleniyordu.21

RGD artı 1 ve RGD artı 4 bölgelerindeki birinci ve dördüncü konumlarda alaninin lösinlerle yer değiştirmesi, virüs bağlanmasının ve v 6 veya v 8'e virüs bağlanmasının inhibisyonu ile sonuçlanır. Ancak virüs, hücre girişi için v 3'ü kullanır.20 Halbuki hücre kültürüne uyarlanmış suşlar, alternatif bir reseptör olarak heparan sülfat proteoglikanları (HSPG) kullanır. Ektoalanlarının ve integrinlerin ligand bağlama durumunun doğrulanması, virüsler için tropizm için önemli bir faktördür.54

Heparan sülfat bağlayıcı virüsler, DC'yi etkili bir şekilde içselleştirdi ancak antijeni lenfositlere sunmadı ve FMDV'ye özgü bir IgG tepkisini indükledi.55 Bu sonuçlar, FMDV'nin DC içselleştirilmesinin, HS bağlama kapasitesine sahip aşı virüsleri için en verimli olduğunu, ancak HS bağlanmasının bir özel gereksinim.

Konak hümoral immün yanıtı tarafından uygulanan seçici basınç, hücre tropizminde değişiklikle sonuçlanan antijenik FMDV varyantlarının hem seçiminde hem de stabilize edilmesinde önemli bir role sahiptir. İn vitro testler, alt nötrleştirici homolog serumların varlığında FMDV'nin paralel geçişinin mutantların korunmasına yol açtığını ortaya koydu.56 Bununla birlikte, hücre reseptörü bağlama sahasında bir SGD sekansı içeren FMD tip A24'ün çoğalması sığırlarda aşılandı , virüs BHK-21 hücrelerinde zayıf bir şekilde büyüdü ve sekans, sığır V6 integrinini (BHK3 V6) eksprese eden BHK-21 hücrelerinde ve ayrıca deneysel olarak aşılanmış ve temas halindeki sığırlarda yayılma sırasında kararlı bir şekilde korundu .56

Sığırlarda iki bağımsız iletim zincirinden, FMDV'nin BHK-21-hücre adapte edilmiş (heparan sülfat bağlayıcı) suşunda sıralı geçiş nedeniyle genomik değişiklikler vardır. VP1 356'de bir amino asit mutasyonuna sahip vahşi tip bir varyant, in vivo viral replikasyon için hızla seçildi.57

Silme genleri, in vitro virüs replikasyonu için çok önemli olmayan NS proteinini kodlar, canlı zayıflatılmış aşılar üretmek için alternatif bir tekniktir. Bununla birlikte, bir aşı olarak yararlı olabilmesi için, bu delesyon virüsünün duyarlı hayvanlarda yine de çoğalabilmesi gerekir. Genellikle sınırlı sayıda bölgede mutasyonlara neden olan klasik zayıflatma yöntemiyle karşılaştırıldığında bu yaklaşımın avantajı, virülansa dönüş riskinin önemli ölçüde azalması58 ve NS proteinlerinin güçlü T-hücresi epitopları olmasıdır.59

Etki, hayvanı bir tehditten tamamen koruduğu kanıtlanmış ancak in vitro replikasyon yeteneğine sahip vahşi virüse benzer büyüme özelliklerine sahip, antijenik bölgelerde bazı amino asit ikamesi olan genetiği değiştirilmiş FMDV aşı suşlarında gösterilmiştir.60

Acil durum çift yağlı adjuvanlanmış FMD aşısı, viremi ve virüs gölgelemesinde bir azalma gösterdi ve hiçbir klinik belirti göstermedi. Aşılanmış hayvanlarda tutarlı bir IL-6, IL-8 ve IL{2}} tespiti vardı.61 Diğer sitokinler ise IL-1, IL-2, TNF , TGF ve interferonlar saptanmadı; bu, aşının, FMD'ye karşı kısa süreli koruma ile ilgili olan, sistemik bir inflamatuar yanıtın yanı sıra T lenfosit aktivitesinde sistemik yükselmeyi indüklemediğini gösterir.61

Rekombinant insan IL-2, fare modeli FMD aşısında güçlü bir hümoral bağışıklık indükleyicidir.62 Aşılanmış hayvanlar 7-8 ay boyunca serokonvert pozitif kalır ve sitokinlerin (IL-6, IL{{5) sistemik seviyeleri }} ve IL-12) aşılamadan sonra arttı.63

Boş Viral Kapsitler

Virüs benzeri parçacıklar (VLP) olarak da bilinen boş viral kapsitler, bozulmamış virüslerde bulunan tüm immünojenik bölge repertuarını içerir, ancak bulaşıcı nükleik asitlerden yoksundur ve viral kapsidlerin sentezi, işlenmesi ve montajı için gerekli olan viral genomun klonlanmasını içerir. boş viral kapsidlere yapısal proteinler (P1-2A ve 3Cpro kodlayan genler; Şekil 1).64 Boş kapsitler doğal olarak hücre kültüründe in vitro üretilir, antijenik olarak benzerdir ve immünojeniktir.65

Boş kapsid aşısının kullanımı, virüsün aşı üretiminde kullanılmasını engellediği ve epitopların konformasyonunu koruduğu için umut verici bir adaydır.45 Ayrıca, virüsün geri dönüşme ve vahşi suşlarla rekombinasyon riski yoktur. Serumsuz süspansiyonda büyüyen memeli hücreleri, FMDV rekombinant boş kapsidlerin geçici gen ekspresyonu (TGE) için kullanılmıştır.66 Enfekte veya nekahat dönemindeki hayvanlardan aşılanmışların tanımlanması, şu anda mevcut olan teknoloji kullanılarak kolaydır.67-69

Alt birim Aşısı

Alt birim aşı, bir kültür ortamında minimum miktarda viral olmayan antijenin kimyasal ekstraksiyonu veya biyo-ekspresyonu ile toplanan viral antijenleri içerir.70 Araştırmacılar, VP1'in 1970'lerde önemli bir yüzey maruziyetine sahip olan FMDV kapsid proteinlerinden biri olduğunu ortaya çıkardılar. ve yapısal virolojideki son gelişmeler.71

Genetik mühendisliği, zayıflatılmış aşılar yaratmaya yönelik son girişimlerde genomun parçalarını mutasyona uğratmak veya VP1'in protein kodlayan bir bölgesini ortadan kaldırmak için kullanılmıştır. Rekombinant DNA kullanılarak, VP1'de RGD reseptörü bağlama bölgesi çıkarılmış FMDV'ye sahip bir virüs inşa edildi.72 7- ila 10-günlük farelerde veya domuzlarda, bu virüs hücrelere yapışamadı ve tutunamadı enfeksiyona neden olur.73

FMDV'nin VP1 kapsid proteini ve VP1'in karboksi-terminal bölgesi, B hücresi epitoplarına karşılık gelen, oldukça immünojenik olan bir G-H döngüsüne sahiptir. FMDV serotip O'dan bir virüs kaplama proteininin (VP1) bölgelerinden (141 ila 158 kalıntıları) oluşan kimyasal olarak sentezlenmiş bir peptit, yüksek seviyelerde nötralize edici antikoru tetiklemiş ve sığırları enfeksiyöz virüsün intradermolingual aşılamasına karşı korumuştur24, bu da G'nin önemini ortaya koymaktadır. –H döngüsü hümoral bir bağışıklık tepkisini indükler. VP1 ayrıca hiperdeğişken bölgeyi ve immünojenik bölgeyi içerir; siteden yararlanmak, geniş immünojenisite için temel olacaktır.74

IFN'nin genetik bir adjuvan olarak dahil edilmesi, klinik belirtilerin başlamasında ve viremi başlangıcında gecikmeye neden oldu.75 FMDV Asya 1'in P1-2A ve 3C proteazını kodlayan bir rekombinant ipekböceği bakulovirüsü, spesifik antikorlar üretebildi. aşılanmış ve öldürücü homolog bir virüsle mücadeleden sonra korunan hayvanlarda ve klinik belirtiler hafifledi ve gecikti.64

A serotipi FMDV'nin (Ad5A24) P1 ve 3C kodlama bölgesini içeren kusurlu adenovirüs 5'in (Ad5) tek bir dozu indüklendi, antikorları nötralize etti ve domuzları homolog yüklemeye karşı korudu.76 Bununla birlikte, hücresel bağışıklık kolu üzerindeki etki araştırılmadı .

Boş A-serotip kapsidlerinin hem vaccinia virüsü hem de bakulovirüs kaynaklı ifadesi için; Rasyonel olarak tasarlanmış mutasyonlar içeren ökaryotik hücrelerde stabilite artırıldı.77 Aşı antijeni üretmeye yönelik bu yöntemin, üretim maliyetleri, enfeksiyon riski ve ısıya dayanıklı aşı açısından mevcut teknolojilere göre birkaç olası faydası vardır.45

Kapsid proteini (P1-2A ve mutasyona uğramış viral 3C proteaz) ifade eden insan adenovirüs tip 5 vektörü, BALB/c farelerinde ortaya çıkan önemli bir hümoral, hücresel ve mukozal bağışıklık sağlar. Gine domuzlarının aşılanması, önemli ölçüde nötralize edici antikorlar ve anti-FMDV immünoglobulin A (IgA) antikorları ortaya çıkardı ve kobayları tehdide karşı yüzde 100 korudu.78

Kapsid proteinlerini (P1/3C) (Şekil 1) eksprese eden bir rekombinant köpek adenovirüs tip 2 (CAV2), kobaylarda güçlü bir hümoral bağışıklık tepkisini tetikleyebilmiştir. Bununla birlikte, köpek adenovirüs tip 2 (CAV2) ifade eden VP1 proteini, kobaylarda veya farelerde kalıcı bir antikor tepkisi ortaya çıkarmadı.79

A24-2B (Ad{2}}CI- A24-2BC) kodlayan sitomegalovirüs arttırıcı ile Adenovirüs 5 ile aşılanmış domuz, 7–14 dpv'lik bir tepe nötrleştirici antikor tepkisi oluşturdu ve dpv'de daha yüksek IgM üretimi ortaya çıkardı. 7 dpi.14 Modifiye edilmiş bir sitomegalovirüs promotörü, vektörün etkinliğini arttırdı ve hücre kültüründe hücre enfeksiyonunu arttıracak şekilde ilerledi, aşıyı alan grup, mücadeleden sonra tamamen korundu.14

Farelerin rekombinantlarla intramüsküler inokülasyonu, bir promotör olarak sitomegalovirüs anında erken güçlendirici (CMV-IE) ile klonlanmış FMDV baculovirüsünün rekombinant kapsid proteini ve T-hücresi epitopları ile T-hücresi immünojen kodlama bölgesi, nötralize edici antikorlar ve gama interferonu etkili bir şekilde indükledi ( IFN- ).80 P1- 2A ve 3C kodlama bölgeleri ipekböceği pupasında (Bombyx mori) eksprese edilen FMD serotip A, spesifik antikorların yüksek titrelerini indükleyebilmiş ve öldürücü homolog virüs tehdidine karşı tamamen korunmuştur.81

Çoklu antijenik peptit sistemi, FMD aşı antijenlerinin tek lineer peptitine kıyasla oldukça immünojeniktir.82 Kovalent olarak bağlı ana FMDV antijenik B hücresi antijenik bölgesinin [VP1 (140–158)] iki kopyasını barındıran sentetik dendrimer peptitler yapısal olmayan protein 3A'dan [3A (21-35)] heterotipik bir T-hücresi antijenik bölgesine, domuzları viral tehdide karşı koruduğu gösterilmiştir.83 Dendrimer peptit, heterotipik ve yüksek düzeyde korunmuş FMDV 3A'yı (21-35) üretir. T-hücresi epitopu ayrıca nötralize edici antikor ve IFN-yanıtlarını iyileştirmiştir.84 B2T ile aşılanmış domuzların yüzde 70'inde, bağışıklamadan sonraki 25. günde virüs tehdidi üzerine tam koruma - hiçbir klinik hastalık belirtisi görülmedi - gözlendi.84

DNA Aşıları

Ensefalomyokardit virüsü (EMCV) dahili ribozom giriş bölgesi (IRES) silinmiş ve eIF46,85'in proteolizi ile hücre kapanmasında rol oynayan L geni çıkarılmış ve ekspresyon etkinliğini arttırdığı gösterilen EMCV IRES, P1 dizilerinin yukarı akışına yerleştirildi.86 P1-2A ve GM-CSF'yi, adjuvanla indüklenmiş sağlam bir FMDV'ye özgü ve nötralize edici antikor olarak kodlayan DNA aşısının yanı sıra IL sitokinlerini de destekliyor-8 ve domuzda IFN üretimi.87

VP1 (amino asit dizisi 133–156)-3A (amino asit dizisi 11–40) ve VP4'ün (20–34) üç ana B ve T hücresi FMDV epitopuna karşılık gelen viral mini genlere dayalı DNA aşıları meydan okuma sırasında spesifik antikorların yokluğunda fareleri koruyun.88

FMDV DNA aşısının burun içi uygulaması; bir dağıtım aracı olarak kitosan ve moleküler adjuvan olarak IL-15'nin kullanılması, daha yüksek seviyede T-hücre proliferasyonu, CTL tepkisi, ve hem CD4 plus hem de CD8 plus T-hücrelerinde IFN- ekspresyonu. 73

Genetik bir adjuvan olarak VP1 ve IL9 ifade eden plazmid ile aşılanmış ve anti-apoptoz mekanizması tetiklenmiş fareler, güçlü bir humoral tepki, yüksek düzeyde IFN- ve CD8 artı T-hücrelerinde performans geliştirdiler, ancak IL ile değil{{6} } bu T-hücrelerinde. IL-9, Beclin geninin ifadelerini yukarı doğru düzenledi ve T hücrelerinin apoptozunu önledi.89

Başka bir çalışma, moleküler adjuvanlar olarak kullanılan interlökin-6 ve IFN- ifade eden VP1 DNA aşısının, antijene özgü hücre aracılı yanıtları geliştirdiğini ortaya çıkardı. Ayrıca, yüksek bir IgG2a/IgG1, IFN-, IL-4 titresi ve dendritik hücre olgunlaşmasını indüklemiştir.90

IL-2'yi DNA aşı kodlamasında bir genetik adjuvan olarak kullanarak, birden fazla epitop içeren iki FMDV VP1 epitopu (amino asit kalıntıları 141–160 ve 200–213), domuzda hem T-hücre proliferasyonunu hem de FMD'ye karşı nötralize edici antikoru ortaya çıkarmalıdır. IL-2'yi genetik adjuvan olarak kullanmak.91,92

P1-2A3C3D'yi kodlayan anti-FMDV DNA aşısı plazmidi ve domuz 'TNF ailesine ait B hücresi aktive edici faktör' (BAFF) ifade eden bir plazmit ile aşılanan domuzlar, B hücresi olgunlaşma aktivasyonunu ve immünoglobulin sınıfı değişimini destekledi.93

Düzenli takviyeli replika bazlı bir DNA aşısı, FMDV'ye karşı etkili bir aşı stratejisi sunmuştur.94 Farklı antijenik hedeflerin DNA aşılarına dahil edilmesi, tek bir aşı formülasyonunda bir antijen kokteyli yapmak için mükemmel bir yoldur. Şap hastalığı virüsü (FMDV), yalancı kuduz virüsü (PRV) ve klasik domuz nezlesi virüsü (CSFV) antijenini kodlayan üç plazmit ile aşılanan fareler umut verici sonuçlar verdi.95

Gine domuzlarının aşılanan domuz IgG geninin bir sinyal dizisini içeren FMDV'yi eksprese eden DNA plazmitleri ile kas içi aşılaması, nötralize edici bir antikor tepkisi gösterdi ve takviyeden sonra dalak hücresi proliferasyonu arttı, ancak hayvanlar viral tehditten korunmadı.96

VP1'in 135-167 bölgelerinden ve 141-160 bölgelerini (G-H döngüsü) ve FMDV tip O'nun VP1'inin karboksil terminalini içeren 135-167 bölgelerinden T-hücresi epitopunu ve B-hücresi epitoplarını kodlayan DNA aşısı, güçlü hücresel bağışıklık tepkisi ortaya çıkardı T-hücre proliferasyon testi kullanılarak gözlemlendiği gibi.97

Kapsid proteini kodlayan FMDV DNA aşısının, bir araç olarak Katyonik PLGA'nın (poli(laktid-ko-glikolit)) ve genetik bir adjuvan olarak sığır IL-6'nin burun içinden verilmesi, aşılanmış hayvanlarda gelişmiş mukozal ve sistemik bağışıklık tepkileri göstermiştir.98

pGM-CSF ile hazırlanmış ve etkisizleştirilmiş FMDV antijeni ile takviye edilmiş kapsid proteini (P1-2A, 3C ve 3D) ifade eden DNA aşısı, aşılanmış domuzlarda önemli düzeyde çapraz serotip reaktivitesi gösterdi. Virüs nötralizasyonu ve ELISA testlerinde A, C ve Asia1'e karşı önemli düzeyde çapraz serotip reaktivitesi rapor edildi.99 Bununla birlikte, VP1 proteinini eksprese eden ve FMDV'nin 5ʹUTR'sini hedef alan antisens RNA üreten DNA aşısı, aşılananlarda spesifik bir immün tepkiye neden oldu. fareler.72

IL-15 (moleküler adjuvan) ile birlikte VP1'i ifade eden bir DNA aşısı, daha yüksek antijene özgü T hücresi proliferasyonu, sitotoksik T lenfosit ile kanıtlandığı gibi, mukozal salgılanan IgA ve serum IgG'yi ve hücre aracılı bağışıklığı (CMI) artırdı (CTL) yanıtı ve hem CD4 plus hem de CD8 plus T hücrelerinde dalak ve mukozal bölgeleri bilgilendiren daha yüksek IFN- ekspresyonu.73

Rekombinant aşılar, konakçı Ig üst ailesinin yeniden birleştirilmesiyle yapılır ve viral epitoplar, aşılanmış hayvanların hümoral ve hücresel bağışıklık tepkisini geliştirmiştir. RNA aşıları, güçlü IgG sınıfı anahtarlardır, buna ek olarak, aşılanmış farelerde de yüksek bir IgM titresi gözlemlenmiştir.100 FMDV epitoplarını içeren plazmit DNA, farelerde ideal doku dağılımına sahiptir.101

Uzun Süreli Bağışıklığın İndüklenmesindeki Zorluklar

FMDV'nin farklı serotipleri ile enfeksiyondan sonra T-lenfosit alt popülasyonlarında, fonksiyonel yeterlilikte ve bollukta önemli bir değişiklik vardır.102 Enfeksiyondan 48 saat sonrasına kadar boCD4 plus ve boCD8 plus T-hücrelerinde bir aşağı regülasyon vardır (pi). Bununla birlikte, FMDV serotip O ile 48 hp'ye kadar boWC1 artı T hücrelerinin aşağı regülasyonu gözlemlenmiştir. Aşılanmış hayvanlardan alınan lenfositler, FMDV'ye maruz kalmanın ardından boCD4 plus , boCD8 plus ve boWC1 plus T hücrelerinde önemli bir yukarı regülasyon göstermiştir. 102

Doğal enfeksiyondan sonra, hastalığın farklı seyrinde farklı olan lenfositlerde 3A-NS protein ekspresyonunda önemli bir artış olur, bu da CD4 plus ve CD8 plus T hücrelerinin geçici immün supresyonuna yol açar. 34

NS proteinleri, özellikle 3A tarafından kaçakçılığı yapılan konakçı proteinin yok edilmesi, tamamen kesintiye uğrar, bu nedenle bir CD8 artı T-hücre yanıtı ortaya çıkarmaz,31 Zayıf CTL nedeniyle virüs hayvanda varlığını sürdürdü. İntegrin reseptörleri, konağın doğuştan gelen bağışıklığını engelleyerek kemik iliği kaynaklı DC apoptoza aracılık eder.32 Konak bağışıklığına müdahale eden bir diğer önemli fenomen, tip aktivasyonunda anahtar sinyal moleküllerinin ubikitinasyonunu inhibe ederek önemli bir rol oynayan yüksek düzeyde korunmuş bir alan olan Lbpro'dur. I Retinoik asitle indüklenebilir gen I (RIG-I), TANK bağlayıcı kinaz 1 (TBK1), TNF reseptörü ile ilişkili faktör 6 (TRAF6) ve TRAF3.103 gibi IFN yanıtı Bu, IFN'nin ani ve erken başlama düzeyini azaltır mRNA ve IFN ile uyarılan gen ürünleri.102 Ayrıca 3Cpro, Golgi içi taşıma için gereken proteini parçalayarak Golgi içi taşımayı bloke eder.

Guzman ve arkadaşları33 ve Joshi ve arkadaşları34, bildirilen CD8 eksprese eden hücreler tarafından IFN'nin çoğalması veya üretimi gibi CTL öldürme için temsili tepkileri analiz ettiler, ancak birçok CD8 artı NK hücreleri ve δ T alt kümeleri dahil olmak üzere IFN üreten CTL olmayan CTL eksprese eden lenfositler -hücreler. 35–37,39,104

Ad5-FMDV-3C ile sınamadan 10 gün sonra değerlendirilen CTL etkinliği, yükseltme seviyelerine kıyasla sınamadan 10 gün sonra CTL etkinliğinde önemli bir artış gösterdi, ancak 17 gün sonra temel seviyelere geri döndü meydan okuma.17 Ancak, 4. günde CTL aktivitesini değerlendirme girişimi, yeterli hücre elde edemedi. Bunun nedeni, FMDV tarafından indüklenen lenfopeni ve immünopatolojiydi. FMD virüsünün uzun vadeli kalıcılığında bir düşüşün yanı sıra, IFN yanıtı ile aşı kaynaklı koruma arasında pozitif bir ilişki vardır.38

Oh ve arkadaşlarına göre,38 CD4 artı T-hücreleri, başlıca çoğalan fenotip ve IFN üreten hücrelerdir.

FMDV serotipinden bağımsız olarak, serum IFN-, enfeksiyondan 2-3 gün sonra pik yaptı, lenfopeni, pik viremi ve serum IFN- yanıtına karşılık geldi ve dolaşımdaki plazmosit dendritik hücre (pDC) sayıları ve in vitro pDC IFN- üretimi, 48 saat sonra geçici olarak düştü. Enjekte edilen FMDV serotipi veya etkilenen hayvanın yaşı ne olursa olsun, lenfosit veya pDC enfeksiyonu asla bulunmadı.39

Monosit kaynaklı DC'lerden (MoDC'ler) ve deri kaynaklı DC'lerden (cilt DC'leri) IFN- üretimi, domuz enfeksiyonunun akut fazı sırasında baskılanır. Bu etki, kandaki artan viral titrelerle birlikte gerçekleşir, ancak bu hücreler verimli bir şekilde enfekte olmaz. İlginç bir şekilde, bu DC'lerin partikülleri alma ve antijenleri işleme kapasitelerinin değişmemesi, antijenlerin partikülleri alma ve antijenleri işleme yeteneklerini etkilemediğini gösterir.35

Çözüm

Yukarıdaki literatür ve araştırma boşluğuna dayanarak, aşağıdaki önerileri ileri sürmektedir. Geleneksel aşıların hücresel içselleştirilmesi, glikosilasyon modeli, antijen sunumu ve pozitif seçim mekanizmaları (patojenik suş gelişimi) çalışılmalıdır. Aşı kaynaklı CD8 artı T CMI, uzun ömürlü bağışıklık tepkisini ve çapraz korumayı güçlendirir. δ T-hücresi reseptörlerinin immün patogenez, kalıcılık ve CTL üretiminde kapsamlı bir şekilde çalışılması gereken bir rolü vardır. Rekombinant protein, akış sitometresi ve ELISpot ELISA kullanımı altında aşı partikül içselleştirmesi, antijen sunumu ve antijen sunan hücreler çapraz konuşmasının değerlendirilmesi için ELISA.

Yan zincirlerin B veya T hücre epitopu üzerindeki etkilerini gösterecek yeni web tabanlı araçlar geliştirilmelidir. Hayvan modeli enfeksiyonu ve aşı geliştirme ve etkinlik testlerinin kullanımı açıkça araştırılmalıdır çünkü laboratuvar hayvanlarında ve domuz ve geviş getiren hayvanlarda dikkate değer bir integrin reseptörü farkı vardır. Epitop tahmin araçlarını çok sayıda viral sekansın hesaplanmasına entegre ederek genom çapında CTL epitoplarının hesaplamalı tahmini ve ardından in vivo değerlendirme, uzun süreli koruma ve çapraz koruma kabiliyetine sahip aşılar üretmek için büyük bir avantaja sahiptir.

Kısaltmalar

3A, Yapısal olmayan protein; Ad5, Adenovirüs 5 Vektörü; 3Cpro, 3C proteaz (yapısal olmayan protein); BEI, İkili Etilenaminler; BHK hücresi, Yavru hamster böbrek hücresi; CD4 artı, Küme farklılaşma faktörü dört pozitif; CD8 artı, Küme farklılaşma faktörü sekiz pozitif; cDNA, Tamamlayıcı DNA; CTL, Sitotoksik T-hücreleri; DC, Dendritik hücre; ELISA, Enzime bağlı İmmünosorbent deneyi; Şap, Şap hastalığı; FMDV, Şap hastalığı virüsü; GM-CSF, Granülositler ve Monositler Koloni uyarıcı faktör; IFN- , İnterferon alfa; IFN- , İnterferon gama; Ig, İmmünoglobulin; IL, İnterlökin; LTR, Uzun terminal tekrarı; NK hücreleri, Doğal öldürücü hücreler; NS proteini, yapısal olmayan protein; P1-2A, yapısal protein öncüsü geni; P1-2A3C3D, Viral yapısal protein öncüsü P1–2A ve yapısal olmayan proteinler 3C ve 3D; PBMC, Tek çekirdekli periferik kan; RT- PCR, Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu; SAT, Güney Afrika Tipi; TGE, Geçici gen ifadesi; TGF, Tümör büyüme faktörü; TNF, Tümör nekroz faktörü; Th hücreleri, T yardımcı hücreleri; VP1, Viral protein 1; δ T hücreleri, Gama delta T hücreleri.

Veri Paylaşım Beyanı

Bu derlemede kullanılan veriler ikincildir ve makalede yer almaktadır.

Teşekkür

Materyal ve mali destek sağladığı için Gondar Üniversitesi Araştırma ve Toplum Hizmetleri başkan yardımcılığına çok minnettarım. Ek tesis desteği için Gondar Üniversitesi Veterinerlik ve Hayvan Bilimleri Fakültesine de teşekkür ederim.

Finansman

Yazar, Gondar Üniversitesi, Araştırma ve Toplum Hizmeti başkan yardımcılığına teşekkür eder.

ifşa

Yazar bu çalışmada herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan eder.

Referanslar

1. Kitching P, Hammond J, Jeggo M, et al. Global Şap Kontrolü - Bu bir seçenek mi? Aşı. 2007;25(30):5660–5664. doi:10.1016/j. aşı.2006.10.052

2. Raza S, Siddique K, Rabbani M, et al. Aphthovirus serotiplerinin dört yapısal proteininin silico analizinde mikrobiyal patogenez, önemli B ve T hücresi epitoplarını ortaya çıkardı. Mikrob Patog. 2019;128 (Ağustos 2018):254–262. doi:10.1016/j.micpath.2019.01.007

3. Arzt J, Belsham GJ. Şap hastalığının kalıcı olarak enfekte taşıyıcı sığırlardan saf sığırlara orofaringeal sıvının transferi yoluyla bulaşması. Veteriner Dünyası. 2018;3:318. doi:10.1128/ mSphere.00365-318

4. Arzt J, Pacheco JM, Stenfeldt C. Sığırlarda öldürücü ve zayıflatılmış şap hastalığı virüsünün patogenezi. Veteriner Dünyası. 2017;14:89. doi:10.1186/s12985-017-0758-759

5. Sobhy NM, Bayoumi YH, Mor SK, El-Zahar HI, Goyal SM. Mısır'da şap hastalığı salgınları: moleküler epidemiyoloji, evrim ve kardiyak biyobelirteçler prognostik önemi. Int J Vet Sci Med. 2018;6(1):22–30. doi:10.1016/j. sadece.2018.02.001

6. Senthilkumaran C, Yang M, Bittner H, et al. Şap hastalığı virüsü ile enfekte domuzlardan alınan oral sıvılarda genom, antijen ve antikorların tespiti. Can J Veteriner Arş. 2017;81:82–90.

7. Palinski RM, Bertram MR. Güney Vietnam'dan şap hastalığı virüsü serotip O alt çizgisi Ind2001e'nin ilk genom dizisi. Mikrobiyoloji Kaynak Duyurusu 2019;8: e01424–18. doi:10.1128/mra.01424-1418

8. Pulido MR, Sobrino F, Borrego B ve ark. 3' kodlayıcı olmayan bölgede bir delesyon taşıyan zayıflatılmış şap hastalığı virüsü RNA'sı domuzlarda bağışıklığı ortaya çıkarabilir. J Virol. 2009;83(8):3475–85. doi:10.1128/JVI.01836-08

9. Saravanan P, Iqbal Z, Selvaraj DPR, Aparna M, Umapathi V. Şap hastalığı yağ adjuvanlı aşıda 146S içeriğinin belirlenmesi için kimyasal ekstraksiyon yöntemlerinin karşılaştırılması. J Appl Microbiol. 2019;1(Rueckert 1985):1–9. doi:10.1111/jam.14465

10. Jamal SM, Belsham GJ. Şap hastalığı: geçmiş, bugün ve gelecek. Veteriner Res. 2013;44(1):1–14. doi:10.1186/1297-9716- 44-116

11. Robinson L, Knight-Jones TJ, Charleston B ve diğerleri. Küresel şap hastalığı araştırması güncellemesi ve boşluk analizi: 7 - patogenez ve moleküler biyoloji. Transbound Emerg Dis. 2016;63(1):63–71. doi:10.1111/tbed.12520

12. Sreenivasa BP, Mohapatra JK, Pauszek SJ, et al. Şap hastalığı virüsünün Hint aşı suşlarının kapsid proteinlerini eksprese eden rekombinant insan adenovirüsü-5, sığırlarda etkili bir antikor yanıtı ortaya çıkarır. Veteriner Mikrobiyolu. 2017;203:196–201. doi:10.1016/ j.vetmic.2017.03.019

13. Neilan JG, Schutta C, Barrera J ve ark. Bir adenovirüs vektörlü şap hastalığı virüsü serotiplerinin etkinliği Doğrudan temaslı bulaşma modeli kullanan sığırlarda bir alt birim aşı. BMC Veteriner Arş. 2018;14(1):1–9. doi:10.1186/s12917-018- 1582-1

14. Pena L, Pires M, Koster M, et al. Şap hastalığı virüsü boş kapsid alt birim antijeninin yapısal olmayan protein 2B ile verilmesi domuzların korunmasını geliştirir. Aşı. 2008;26 (45):5689–5699. doi:10.1016/j.vaccine.2008.08.022

15. Barteling SJ, Cassim NI. Şap hastalığı virüsü ve enterovirüslerin ikili etilenimin ve formaldehit kombinasyonu ile çok hızlı (ve güvenli) inaktivasyonu. Dev Biol (Basel). 2004;119:449–455

16. Rweyemamu MM, Umehara O, Giorgi W, Medeiros R, Neto DL, Baltazar M. Formaldehit ve ikili etilenimin (BEI)'nin şap hastalığı virüsü kapsidinin bütünlüğü üzerindeki etkisi. Rev Sci Tech. 1989;8(3):747–764. doi:10.20506/rst.8.3.425

17. Yama JR, Kenney M, Pacheco JM, Grubman MJ, Golde WT. Şap hastalığı virüsü enfeksiyonu ve aşılamadan sonra sitotoksik T lenfosit fonksiyonunun karakterizasyonu. Viral İmmünol. 2013;26(4):239–249. doi:10.1089/vim.2013.0011

18. Rodriguez-Calvo T, Ojosnegros S, Sanz-Ramos M, Garcia-Arriaza J, Escarmis C, Domingo E, Sevilla N. Zayıflatılmış ve etkisizleştirilmiş aşıların özelliklerini birleştiren kusurlu genomlara dayanan yeni aşı tasarımı. PLoS Bir. 2010;5(4):1–11. doi:10.1371/ journal.pone.0010414

19. Núñez JI, Baranowski E, Molina N, et al. Yapısal olmayan protein 3A'daki asit ikamesi, ayak ve ağız hastalığı virüsünün Gine domuzuna adaptasyonuna aracılık edebilir. J Virol. 2001. doi:10.1128/JVI.75.8.3977-3983.2001

20. Burman A, Clark S, Abrescia NGA, et al. Şap hastalığı virüsünün VP1 GH döngüsünün v 6 integrinleri için özgüllüğü. J Virol. 2006;80(19):9798–9810. doi:10.1128/JVI.00577-06

21. Dicara D, Burman A, Clark S, et al. Şap hastalığı virüsü, ana reseptörü olan integrin v 6: bulaşıcılık için çıkarımlar ile oldukça kararlı, EDTA'ya dirençli bir kompleks oluşturur. J Virol. 2008;82(3):1537–1546. doi:10.1128/JVI.01480-07

22. Domingo E, Sheldon J, Perales C ve ark. Viral yarı tür evrimi. Microbiol Mol Biol Rev. 2012;76(2):159–216. doi:10.1128/MMBR.05023-11

23. Mckenna TS, Lubroth J, Rieder E ve ark. Reseptör bağlama yeri silinmiş şap hastalığı (FMD) virüsü, sığırları şap hastalığından korur. J Virol. 1995;69(9):5787–5790. doi:10.1128/ jvi.69.9.5787-5790.1995

24. Dimarchi R, Brooke G, Gale C, Cracknell V, Doel T, Mowat N. Sentetik Peptit Tarafından Sığırların Şap Hastalığına Karşı Korunması. Bilim. 1986; 232:639–641. doi:10.1126/science.3008333

25. Gómez N, Salinas J, Escribano JM, et al. Transgenik bitkilerde ifade edilen VP1 ile şap hastalığı virüsüne karşı koruyucu bağışıklık tepkisi Transgenik bitkilerde ifade edilen VP1 ile şap hastalığı virüsüne karşı koruyucu bağışıklık tepkisi. J Virol. 1998;72:2–5.

For more information:1950477648nn@gmail.com