SOYUT

hedefler:Maclura pomifera (Rafin.) Schneider tüm dünyada yaygın olarak bulunan bir tür olup, süs amaçlı olarak da sıklıkla kültürü yapılmaktadır. Önceki çalışmalar, M. pomifera meyvelerinin prenile edilmiş izoflavonoidler açısından zengin olduğunu, kayda değer biyolojik aktiviteler sergilediğini ve özellikle topikal olarak uygulandığında olası faydaları olduğunu ortaya koydu. Yaşlanma karşıtı kozmetik ürünlerin geliştirilmesinde fenolik bileşiklerin temel kaynaklar olduğu düşünüldüğünde, bu çalışma M. pomifera yüzde 80 metanolik ekstraktın (MPM) yaşlanma karşıtı potansiyelini, antioksidan ve hücre dışı matrisi bozan enzimleri inhibe eden enzimleri değerlendirerek araştırdı.

Cistanche glikozidi ayrıca kalp ve karaciğer dokularındaki SOD aktivitesini artırabilir ve her dokudaki lipofuscin ve MDA içeriğini önemli ölçüde azaltabilir, çeşitli reaktif oksijen radikallerini (OH-, H₂O₂, vb.) etkili bir şekilde temizleyerek ve neden olduğu DNA hasarına karşı koruma sağlayabilir. OH radikalleri tarafından. Cistanche feniletanoid glikozitler, serbest radikalleri güçlü bir şekilde süpürme yeteneğine, C vitamininden daha yüksek bir indirgeme kabiliyetine sahiptir, sperm süspansiyonunda SOD aktivitesini geliştirir, MDA içeriğini azaltır ve sperm zarı işlevi üzerinde belirli bir koruyucu etkiye sahiptir. Cistanche polisakkaritleri, D-galaktozun neden olduğu deneysel olarak yaşlanmış farelerin eritrositlerinde ve akciğer dokularında SOD ve GSH-Px aktivitesini artırabilir, ayrıca akciğer ve plazmada MDA ve kollajen içeriğini azaltabilir ve elastin içeriğini artırabilir. DPPH üzerinde iyi bir temizleme etkisi, yaşlanmış farelerde hipoksi süresini uzatır, serumdaki SOD aktivitesini geliştirir ve deneysel olarak yaşlanmış farelerde akciğerin fizyolojik dejenerasyonunu geciktirir Hücresel morfolojik dejenerasyonla, deneyler Cistanche'nin iyi antioksidan yeteneğe sahip olduğunu göstermiştir. ve cilt yaşlanması hastalıklarını önleyen ve tedavi eden bir ilaç olma potansiyeline sahiptir. Aynı zamanda, Cistanche'deki ekinacoside, DPPH serbest radikallerini temizleme konusunda önemli bir yeteneğe sahiptir ve reaktif oksijen türlerini temizleme ve serbest radikal kaynaklı kollajen bozulmasını önleme yeteneğine sahiptir ve ayrıca timin serbest radikal anyon hasarı üzerinde iyi bir onarım etkisine sahiptir.

Cistanche Tubulosa Eki'ne tıklayın

【Daha fazla bilgi için:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Malzemeler ve yöntemler:Bu çalışma için, yüzde 80 MPM'nin yaşlanma süreciyle ilişkili farklı enzimlere karşı engelleme potansiyeli değerlendirildi. Oksidatif stresin yaşlanmadaki kesin rolü göz önüne alındığında, in vitro antioksidan testleri de kullanılmıştır. Ayrıca osajin, yüksek performanslı ince tabaka kromatografi analizi ile numunenin ana biyoaktif izoflavonoidi olarak belirlendi.

Sonuçlar:Mekanik olarak farklı antioksidan deneylerinin sonuçları, ekstraktın önemli antioksidan potansiyelini sergiledi. MPM'nin yaşlanma sürecinin hızlanması ile doğrudan bağlantılı olan hiyalüronidaz, kollajenaz ve elastaz enzimlerine karşı inhibisyon potansiyeli araştırılmış ve sonuçlar MPM'nin yukarıdaki enzimleri açıkça inhibe ettiğini ortaya koymuştur. MPM, benzersiz fenolik ve flavonoid içeriğine sahipti; Sırasıyla 113,92 ± 2,26 mg gallik asit eşdeğeri/g ve 66,41 ± 0,74 mg QE/g. Toplam antioksidan kapasite analizleri göz önüne alındığında, MPM'nin umut verici bir anti-aging ajan olduğunu söylemek mümkündür.

Çözüm:Sonuç olarak, bu çalışma M. pomifera meyvelerinin ekstraktlarının önemli bir anti-aging potansiyeline sahip olduğunu ve bu amaçla kullanılabileceğini ortaya koymaktadır.

anahtar kelimeler:Maclura pomifera, yaşlanma karşıtı, antioksidanlar, HPTLC, osajin

GİRİİŞ

Aynı şekilde, insan derisi de dahil olmak üzere tüm organlar ilerleyen yaşla birlikte çeşitli fizyolojik değişikliklere uğrar.1 Yaşlanmanın iki sınıfı vardır: içsel yaşlanma genetik tarafından kontrol edilir ve dışsal yaşlanma, ultraviyole (UV) gibi çevresel faktörlerin zararlı etkilerinden kaynaklanan fizyolojik değişikliklerin doğal sonucudur. ) radyasyon, kimyasal toksinler ve sigara.1,2 Vasküler ve glandüler yapı bozulması, fibröz doku kaybı ve azalan hücre rejenerasyonu, doku dejenerasyonunda artışa, kırışıklıklara ve hücre dışı matrisin (ECM) azalmasına yol açan yaşlanmanın3 temel faktörleridir. ).4

En büyük organ olan derinin korunma, vücut ısısının düzenlenmesi ve duyuların algılanması gibi çeşitli görevleri vardır.5 Deri, epidermis, dermis ve deri altı dokudan oluşur ve insan vücudu ile dış arasındaki ilk bariyerdir. çevre.6,7 ECM, dermisin en büyük birimidir ve yapısal bir iskele sunarak büyümeyi ve elastikiyeti destekler.8 Dermal fibroblastların oluşturduğu kollajen, elastin ve fibronektin, ECM'yi oluşturur ve proteoglikanlarla kaynaşır.5 Kollajen, vücuttaki tüm protein içeriğinin yaklaşık yüzde 25-35 kadarını oluşturan ve çeşitli hayvan bağ dokularının hücre dışı boşluğunda bulunan temel bir protein.3 Cilt yaşlanmasının ve kırışık oluşumunun ana nedenlerinden biri, kolajenin değişmesidir. yapı.1 Elastin, cilde benzersiz bir fizyolojik esneklik kazandıran ve çeşitli bağ dokularında bulunan bir proteindir.6 Cildin hidrasyonu ve cildin pürüzsüz, nemli ve kaygan kalması, cildin yaşlanmasını önleyen önemli faktörlerdir ve önemli bir glikozaminoglikan (GAG), hyaluronik asit bu aktivitelerde hayati bir rol oynar.8 Bu önemli bileşenler hiyalüronidaz, kollajenaz ve elastaz enzimleri tarafından parçalanarak cilt yaşlanmasının hızlanmasına yol açar. Ayrıca mikroorganizmalara, kirliliğe, iyonlaştırıcı radyasyona, kimyasallara ve toksinlere maruz kalmak reaktif oksijen türlerinin (ROS) oluşumuna yol açar ve cilt yaşlanmasını hızlandıran zararlı sonuçlardır.9 ROS karmaşık moleküler yolları başlatabilir ve bunun sonucunda kollajenaz, elastaz ve hiyalüronidaz aktivitesi artarak saptanabilir ECM bozulmasına ve cilt dokusu değişikliklerine yol açabilir.10 Bahsedilen nedenlerden dolayı, ROS oluşumunu azaltan ve ECM'yi bozan proteazları inhibe eden yeni doğal ajanlar cilt yaşlanma sürecini geciktirebilir.11

Maclura pomifera (Rafin.) Schneider, Moraceae veya dut familyasına aittir ve aynı zamanda neredeyse tüm dünyada yetiştirilen osage portakal ağacı olarak da bilinir.12 M. pomifera'nın antibakteriyel, antifungal, antiviral, sitotoksik, antitümör, östrojenik, ve meyvelerin ana metabolitleri olarak kabul edilen prenile edilmiş izoflavonları, yani osajin ve pomiferin nedeniyle antimalarial13.14 Yaşlanma karşıtı kozmetik üretiminde, fenolik bileşikler önemli doğal kaynaklardır. Bu nedenle, bu tür faaliyetler için M. pomifera gibi fenolik bileşik açısından zengin bitkilerin incelenmesine artan bir ilgi vardır. Önceki çalışmalar, Maclura'nın izoflavonlarının kollajen, elastin ve fibrilin ekspresyon seviyelerini, eşdeğer retinol konsantrasyonlarıyla karşılaştırılabilir veya onlardan daha yüksek arttırdığını bulmuştur. Bu nedenle, Maclura izoflavonlarının güçlü ECM protein uyarıcıları olduğu varsayılabilir.15 Bu veriler göz önüne alındığında, bu çalışma, M. pomifera yüzde 80 metanol özütünün (MPM) yaşlanma karşıtı potansiyelini, antioksidan biyoaktivite ve inhibe etme potansiyelini keşfederek araştırmayı amaçlamaktadır. ECM parçalayıcı enzimler. Ek olarak, ekstraktın ana biyoaktif bileşeni olan osajin'in kantitatif analizi, yüksek performanslı ince tabaka kromatografisi (HPTLC) ile ölçüldü ve fenolik profilin daha doğru bir şekilde anlaşılması için toplam fenolik içerik ve toplam flavonoid içerik analizleri yapıldı. Sonuçlar, M. pomifera'nın yaşlanma karşıtı ürünler için değerli bir kaynak olabileceğini göstermektedir.

MALZEMELER VE YÖNTEMLER

Kimyasallar

Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, ABD) testlerde kullanılan tüm enzimleri, kimyasalları ve referansları sağladı. Tüm kimyasalların kalitesi analitik derecedeydi.

Bitki materyali

M. pomifera'nın meyveleri Mayıs 2020'de Uşak, Türkiye'den toplandı. Bitki örneklerinin botanik tanımlama prosedürünü Dr. Hilal Bardakcı gerçekleştirdi. Bitkinin bir fiş örneği Acıbadem Üniversitesi Eczacılık Fakültesi Herbaryumunda (ACUPH 00002) saklandı.

Ekstraktların hazırlanması

Meyveler küçük parçalara ayrıldı ve bir blenderden geçirildi. Meyveler (6.45 kg) 3125 mL yüzde 80 metanol (MeOH) ile karanlık bir yerde oda sıcaklığında üç gün çalkalama cihazı kullanılarak yumuşatıldı. Maserat süzüldü ve bu prosedür iki kez tekrarlandı. Elde edilen süzüntüler bir araya toplandı ve daha sonra döner buharlaştırıcıda metanol buharlaştırıldı. Ham metanolik ekstrakt liyofilize edildi (verim 204.37 g, yüzde 3.16 idi) ve -20 derecede (MPM) saklandı.

Başlıca biyoaktif bileşiklerin HPTLC ile miktar tayini prosedürü

Kullanılan tüm kimyasallar ve reaktifler analitik saflıktaydı. Kloroform (CHCl3) ve etil asetat (EtOAc), Sigma-Aldrich'ten satın alındı. Ticari olarak temin edilebilen bir osajin standardı Sigma-Aldrich'ten (SMB {{10}}0092) satın alınmıştır. HPTLC analizleri, 20 cm x 10 cm cam HPTLC silika jel 60 F254 plakaları (Merck, Darmstadt, Almanya) üzerinde yapıldı. MPM'deki Osajin içeriği, bir CAMAG HPTLC analitik sistemi ile belirlendi. Mevcut çalışmada kullanılan mobil faz daha önce Bozkurt ve ark.16 tarafından M. pomifera'nın aktif maddelerinin izolasyonu sırasında tanımlanmıştır. Analiz test solüsyonu olarak 10 mg/mL MeOH ekstresi kullanıldı. 2 mL aseton kullanılarak standart bir stok solüsyonu (0.5 mg/ mL) osajin hazırlandı. 50 ug/mL konsantrasyonda standart bileşik içeren bir çalışma solüsyonu, stok solüsyondan aseton ile seyreltilerek hazırlandı. Her numune, 0.45 um'lik bir şırınga filtresinden süzüldü. 10 μL ekstrakt en az beş farklı konsantrasyonda standart çözelti (3.{18}},7 μL) ile birlikte 8 mm uzunluğunda bantlar halinde CAMAG Automatic ile silika jel cam HPTLC plakaları 60 F254 üzerine uygulandı. TLC Örnekleyici IV. Geliştirmeler, CAMAG Otomatik Geliştirme Odasında-2 (ADC- 2) gerçekleştirildi ve mobil faz, CHCl3: EtOAc [8:2 (v/v)] idi. Hazne, 10 dakika süreyle doyuruldu ve plaka, geliştirmeden önce 5 dakika süreyle ön şartlandırıldı. Nem, 10 dakika boyunca MgCl2 (%33 bağıl nem) kullanılarak ADC{30}} ile kontrol edildi. Dansitometrik değerlendirme, floresan modunda bir CAMAG TLC Tarayıcı IV kullanılarak gerçekleştirildi. Yarık boyutu 5 × 0.2 mm, mikro olarak tutuldu ve tarama hızı 20 mm/s olarak ayarlandı. Standart içerikler, alıcı çalışma karakteristik eğrilerinin (AUC'ler) altındaki alan ile standartların 280 nm'deki kalibrasyon eğrisi karşılaştırılarak elde edildi. Ekstrakttaki standartların mevcudiyeti, her bir ekstrakt ve standardın hem alıkonma faktörlerinin (Rf) hem de üst üste binen UV spektrumlarının karşılaştırılmasıyla sağlanmıştır. Osajin miktarı, ekstrakttan ve fraksiyonlardan dağınık şekilde yansıyan ışığın yoğunluğunun standart bileşik ile karşılaştırılmasıyla belirlendi.

Ham bitki ekstraktındaki osajin içeriği, HPTLC-densitometri kullanılarak ölçüldü. Osajin standardının Rf değeri 0.556 olarak bulunmuştur. Test numunelerinde osajin oluşumu, Rf değerlerinin karşılaştırılması ve UV spektrumlarının örtüşmesiyle doğrulandı (Şekil 1). Numunelerin AUC'leri, standart bileşik osajin kullanılarak elde edilen kalibrasyon eğrisi ile karşılaştırılarak kantifikasyon sağlandı. Kalibrasyon işlevi y=2.268*10-8x idi. Kalibrasyon fonksiyonunun korelasyon katsayısı (R) ve varyasyon katsayısı sırasıyla yüzde 0,998 ve yüzde 1,06 idi. HPTLC analizi, MPM'nin yüzde 0,22 (ağırlık/ağırlık) osajin içerdiğini gösterdi. HPTLC çalışmasının sonuçları Tablo 1'de verilmiştir.

Fenolik profil deneyi

Toplam fenolik içerik deneyi

Tahlil, daha önce Kurt-Celep ve diğerleri tarafından kullanılan Folin-Ciocalteu yöntemiyle numunelerin toplam fenolik içeriğini değerlendirmek için yapıldı. 17 20 μL taze seyreltilmiş numune çözeltileri, 75 μL Na2 CO3 (%20) ile karıştırıldı ) ve H20 (1:9) ile seyreltilmiş 100 uL FCR (Folin-Ciocalteu reaktifi). 45 derecede 30 dakika inkübasyondan sonra karışımların absorbansları 765 nm'de spektrofotometrik olarak okundu. Sonuçlar, özütün gramı başına mg gallik asit eşdeğerleri (GAE) olarak ifade edildi.

Toplam flavonoid içerik testi

Fraksiyonların toplam flavonoid içeriğinin ölçümü, daha önce Bardakçı ve arkadaşları tarafından bildirilen bir yöntemle yapıldı.18 Kısaca, taze hazırlanmış 1 M CH3COONa ve yüzde 10 AlCl3 örneklerle karıştırıldı. Daha sonra karışımların oda sıcaklığında ve karanlıkta 30 dakika inkübasyonu gerçekleştirildi. İnkübasyon işleminden sonra absorbans 415 nm'de hesaplandı. Sonuçlar, 1 g numunede mg quercetin eşdeğerleri (QE) olarak verildi.

İn vitro antioksidan aktivitenin belirlenmesi

2,2-Difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) radikal yakalama etkinliği testi

DPPH radikal yakalama aktivitesini belirlemek için yeni seyreltilmiş numune solüsyonları (1 mg/mL stok solüsyondan hazırlanan çeşitli konsantrasyonlar) ve metanolik DPPH solüsyonu (100 mM) kombinasyonu yapıldı. Oda sıcaklığında 45 dakika inkübasyon aralığından sonra 517 nm'de absorbans okundu. Bütillenmiş hidroksitoluen (BHT), bir kalibrasyon eğrisi elde etmek için referans bileşik olarak kullanıldı. Sonuçların IC50 değerleri µg/mL olarak belirtildi.19

Ferrik indirgeyici antioksidan güç (FRAP) testi

FRAP reaktifi elde etmek için, 25 mL 300 mM asetat tamponu (pH 3,6), 2,5 mL TPTZ [2,4,6-tris(2-piridil)-s-triazin] ve 2.5 mL FeCl3 .6H20 (20 mM) karıştırıldı. Daha sonra 260 mL FRAP reaktifine 10 mL örnek ilave edildi ve 96 oyuklu bir plakada distile su ile 300 mL'ye seyreltildi. 37 derecede 30 dakika inkübe edildikten sonra 593 nm'de absorbans ölçümü yapıldı. BHT referans bileşik olarak kullanıldı. Standart bir eğri elde etmek için demir klorür çözeltisi (0.252 mM) kullanıldı ve sonuçlar 1 g kuru ekstraktta mM FeSO4 olarak verildi.20

Bakır azaltan antioksidan kapasite (CUPRAC) testi

CUPRAC testi, daha önce Barak ve arkadaşları tarafından açıklanan yönteme göre tahmin edildi.21 Eşit hacimlerde 10 mM CuSO4, neokuprain ve amonyum asetat tamponu (85 mL), bir 96-kuyulu plaka içinde karıştırıldı. Daha sonra karışıma sırasıyla 51 mL distile su ve 43 mL örnek çözeltiler eklendi. 20 dakika inkübasyondan sonra 450 nm'de absorbans okundu. Sonuçlar 1 g kuru ekstrede mg askorbik asit eşdeğeri olarak verildi.

Toplam antioksidan kapasite (TOAC) testinin belirlenmesi

Toplam antioksidan kapasite testi daha önce Barak ve ark.22 tarafından açıklanan fosfomolibden yöntemine göre hesaplandı. İlk olarak TOAC solüsyonu elde etmek için; 28 mM monobazik sodyum fosfat, 4 mM amonyum molibdat ve 600 mM H2SO4 karıştırıldı. Daha sonra 300 uL TOAC solüsyonu 96 sağlıklı plakta 30 µL numune solüsyonları ile karıştırıldı. 95 derecede 90 dakika inkübasyon süresinden sonra 695 nm'de absorbans okundu. Standart bir eğri elde etmek için askorbik asit kullanıldı ve sonuçlar 1 g kuru ekstraktta mg Trolox eşdeğerleri olarak hesaplandı.

Cilt yaşlanmasına bağlı enzimler üzerinde inhibitör aktivite

Anti-kollajenaz aktivite

MPM'nin anti-kollajenaz aktivitesini ölçmek için 50 mM trisin tampon çözeltisi (pH: 7.5) hazırlandı (400 mM NaCl ve 10 mM CaCl2). Clostridium histolyticum (ChC - EC. 3.4.23.3), kolajenaz kaynağı olarak kullanıldı ve bu, 0.8 U/mL'lik bir başlangıç ​​konsantrasyonu elde etmek için 50 mM trisin tampon çözeltisi içinde çözüldü. Trisin tamponunda çözülmüş 2 mM N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) substrat olarak kullanıldı. Ekstreler, reaksiyonu başlatmak için substrat eklenmeden önce kollajenaz enzimi ile bir tampon solüsyonda 15 dakika inkübe edildi. Nihai reaksiyon karışımı, 150 uL'lik bir toplam hacim içermiştir; trisin tamponu, 0,8 mM FALGPA, 0,1 birim ChC ve 25 uL MPM. Boş sonuçlar için su kullanıldı. Substrat eklendikten hemen sonra absorbans ölçümü yapıldı. Pozitif kontroller epigallocatechin gallate (EGCG) gerçekleştirdi.23

Anti-elastaz aktivitesi

Anti-elastaz aktivitesi için MPM değerlendirmesi, 0.2 mM Tris-HCl tampon çözeltisi (pH: 8.0) kullanılarak yapıldı. Domuz pankreasından elde edilen bir elastaz stok solüsyonu (PE, EC 3.4.21.36), 3.33 mg/mL konsantrasyonda damıtılmış su ile hazırlandı. Substrat olarak kullanılacak N-Succinyl-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) bir tampon solüsyonda (1.6 mM) çözüldü. MPM ekstraktı, substrat eklenmeden önce 37 derecede 15 dakika boyunca 1 ug/mL PE ile inkübe edildi. 15 dakikalık ön inkübasyonun sonunda 1 mg/mL bitki ekstraktı içeren enzim karışımına 0.8 mM AAAPVN substratı eklendi ve tekrar 37 derecede 15 dk inkübasyon yapıldı. Pozitif kontrol olarak 0,25 mg/mL EGCG kullanılırken, bu test numunesi MPM yerine aynı hacimde EGCG içerir ve test kurulumu tekrarlanır. İnkübasyon sürelerinin ardından Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate Spektrofotometre ile 365 nm eksitasyon ve 410 nm emisyonda 4 farklı zaman noktasında 5 ila 30 dakika arasında ölçümler alındı.24, 25

Anti-hiyalüronidaz aktivitesi

Anti-hiyalüronidaz aktivitesi, Kolaylı ve ark.26 ve Lee ve ark.3 tarafından açıklanan yöntem değiştirilerek gerçekleştirildi. İlk olarak, ticari olarak satın alınan hiyalüronidaz (EC 3.2.1.35, Sigma-Aldrich), 0 içinde çözüldü. 02 M fosfat tamponu (pH: 3,5), NaCl ve sığır serum albümini içerir. Daha sonra enzimin uygun substratı olan hyaluronik asit asetat tamponunda (0,1 M, pH: 3,5) hazırlanarak kullanıma hazır hale getirildi. 1 mg/mL konsantrasyonunda 20 uL MPM, 10 uL hiyalüronidaz ve 60 uL 0.1 M asetat tampondan oluşan tahlil karışımı, 37 derecede 20 dakika önceden inkübe edildi. İnkübasyon süresinin ardından karışıma 10 µL hyaluronik asit eklendi ve tekrar 37 derecede 20 dk inkübe edildi. Toplam inkübasyon süresinin sonunda farklı zaman noktalarında Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate Spectrophotometer ile 600 nm'de ölçümler yapıldı. Deney düzeneğinde kör grup enzim içermezken, kontrol grubu ekstrakt içermiyordu. Anti-hiyalüronidaz aktivitesinin yüzdesi, aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplandı:

Yaşlanma karşıtı faaliyetler (yüzde )= [(Mutlak kontrol - Numunenin abs'si)/ Abs kontrol] × 100

istatistiksel analiz

Bu çalışmada yer alan anti-elastaz, anti-kollajenaz ve anti-hiyalüronidaz aktivite deneyleri bağımsız olarak üç kez tekrarlandı. İstatistiksel fark, GraphPad Prism 8 yazılımının t-testi kullanılarak analiz edildi (p 0.05'ten küçük veya eşittir).

SONUÇLAR VE TARTIŞMA

Yaşlanma karşıtı potansiyelin belirlenmesi

Elastin, kollajen ve hyaluronik asit, cildin genç görünümünde önemli rol oynayan ECM'nin bilinen içerikleridir. Elastin, cildin elastik özelliklerini korumak için hayati bir proteindir, sonuç olarak, ECM'deki elastinin azalması, yaşlanma sürecinin hızlanmasına yol açar.27 Önceki literatür, azalan elastin miktarları ile cildin kırışması ve yaşlanması arasındaki doğrudan bağlantıya işaret eder.28 Hiyalüronik asit, hiyalüronidaz yoluyla depolimerize olan hidrofobik bir GAG molekülüdür. Hyaluronik asit, cildin pürüzsüzlüğünü ve nemini sabit tutmak için çok önemlidir; bu nedenle, aşırı parçalanmanın cildin kurumasına ve kırışmasına yol açtığı gösterilmiştir.29 Zamanla yaşlanma süreci boyunca, azalan kolajen seviyeleri dermiste incelmeye neden olur ve bu da mikroskobik incelemede belirgin bir belirti olarak kabul edilir.3{23 }} Kollajenaz inhibitörleri aracılığıyla kollajenin parçalanmasını geciktirmenin sonuç olarak cilt yapısının kırışmasını ve yaşlanmasını geciktirdiği kesin olarak belirtilmiştir.5 Bu bilgiler dikkate alındığında elastaz, kollajenaz ve hiyalüronidazı inhibe eden maddelerin anti-aging ürünler için dikkate değer bir potansiyeli vardır. Önceki çalışmalar, çeşitli izoflavonoidlerin yukarıda belirtilen enzimlere karşı önemli inhibitör biyoaktivite sergilediğini göstermiştir. Addotey ve ark.31 dört farklı izoflavonoidin hiyalüronidazı yüzde 61,2'ye kadar inhibe ettiğini göstermiştir. Kim ve ark.32, Glycyrrhiza uralensis Fisch.'den izole edilmiş bir izoflavonoid olan likorisidin'in önemli ölçüde elastaz inhibe edici aktiviteye sahip olduğunu göstermiştir. Referans bileşik olarak meyan kökünün IC50 değeri 61.2 ± 4.2 uM, oleanolik asit ise 131.4 ± 11.4 olarak hesaplanmıştır. Sonuçlar, izoflavonoidlerin elastaz enzimlerini inhibe edebileceğini gösterdi. Bahsi geçen çalışma ile uyumlu olarak Kim ve ark.33, Flemingia philippinensis Merr'in köklerinden izole edilen, osajin ile fazlasıyla ilişkili yapılar olan dokuz farklı prenile izoflavonoid üzerinde çalışmışlardır. & Rolfe. Araştırmacılar, prenilatlanmış izoflavonlardan beşinin nötrofil elastazına karşı güçlü inhibisyon aktivitesine sahip olduğunu, IC50 değerlerinin 1.9-12.0 µM arasında değiştiğini, oleanolik asidin IC50 değerinin ise 28.4 µM olduğunu bildirdi. Başka bir çalışmada Ergene Öz ve ark. 34, Ononis spinoza L.'nin köklerinden izole edilen beş izoflavonoidin hiyalüronidaz, kollajenaz ve elastaz'a karşı in vitro inhibitör aktivitesini araştırdı. İzoflavonların hiyalüronidaz inhibe edici aktivitesinin yüzde 22.{29}}.58 arasında olduğu rapor edilirken, aynı konsantrasyonda tannik asit yüzde 88.32 inhibisyon gösterdi. Kollajenaz inhibisyonu sonuçları yüzde 20.41- 28.49 arasında hesaplandı ve elastaz inhibisyonu yüzde 20.47-46.88 olarak ölçüldü. EGCG her iki tahlil için referans olarak kullanılmış ve aynı konsantrasyondaki inhibisyon aktiviteleri sırasıyla yüzde 41.18 ve yüzde 84.64 olarak ölçülmüştür. Başka bir çalışma, doğrudan M. pomifera'dan izole edilen pomiferinin topikal tedavilerini araştırdı. 15 Pomiferin, M. pomifera meyvelerinde bulunan ve moleküler yapısı osajin'inkine fazlasıyla benzeyen, prenile edilmiş bir izoflavonoiddir. Araştırmacılar, pomiferinin, referans bileşik olan retinolden üstün veya eşdeğer olan kollajen ve elastini artırarak güçlü ECM proteini stimülasyon aktivitesi sergilediğini bildirdiler. Bahsedilen tüm çalışmalar, izoflavonların bu enzimlerin orta ila güçlü inhibitörleri olduğunu ve doğal yaşlanma karşıtı malzemeler olarak önemli potansiyele sahip olduğunu ortaya koydu.

Bu çalışmada MPM'nin in vitro hiyalüronidaz, kollajenaz ve elastaz inhibitör aktiviteleri antiaging potansiyelinin belirlenmesi için araştırıldı. Hem MPM hem de referans bileşik EGCG için iki zaman noktasında, örneğin 20 ve 40 dakika) kollajenaz inhibisyon tahlili için karşılaştırmalı bir tahlil yapıldı. Sonuçlar, kollajenaz inhibisyon aktivitesinin zamanla arttığını gösterdi. 1 mg/mL MPM, yüzde 84,55 ± 1,99 inhibisyon gösterirken, 20 dakikalık inkübasyondan sonra 25{{4{44}}} µg/mL EGCG, yüzde 84,66 ± 1,83 gösterdi. 4{67}} dakika MPM ve EGCG kollajenazı sırasıyla yüzde 94.68 ± 2.42 ve yüzde 94.98 ± 2.81 oranında inhibe ettikten sonra, inhibitör biyoaktivite zaman içinde güçlendirildi. Literatürle uyumlu olarak MPM, elastaz'a karşı önemli inhibisyon aktivitesi sergiledi. Sonuçlar dört kez (5, 10, 20 ve 30 dakika) ölçüldü ve zaman içinde artış gösterdi (Şekil 2). EGCG (250 µg/mL) referans olarak kullanıldı ve inhibisyon aktivitesi her zaman noktasında arttı (yüzde 44,07 ± 0,00 , yüzde 52,19 ± 0,00 yüzde , 64,69 ± 0,{41) }} yüzde ve sırasıyla 86.21 ± 0.00 yüzde). Bu arada, 1 mg/mL konsantrasyonundaki MPM, 5 dakikadan 30 dakikaya yüzde 34,70 ± 0,57'den yüzde 97,40 ± 1,04'e yükselen daha yüksek geliştirme ve inhibisyon aktivitesi sergiledi. Benzer şekilde, 1 mg/mL MPM, hiyalüronidaz enzimini 40 dakikalık inkübasyondan sonra önemli ölçüde inhibe etti. 40 dakikanın ardından yüzde 83,91 ± 2,36 inhibisyon ölçüldü, bu 80 dakikalık inkübasyonun ardından inhibisyon oranı yüzde 97,19 ± 0,45'e yükseltildi. Tüm enzim inhibisyon deneyleri göz önüne alındığında, sonuçlar MPM'nin değerli bir doğal yaşlanma önleyici ajan olabileceğini ve çeşitli yaşlanma karşıtı ürünlerin içeriğinde kullanılabileceğini belirgin bir şekilde gösterdi; böylece M. pomifera ekstra ekonomik önem kazanabilir.

Antioksidan potansiyelinin belirlenmesi

Çok sayıda eksojen ve endojen faktör, çeşitli mekanizmalar yoluyla cildin yaşlanmasına neden olur. Bu faktörlerin çoğu, derinin ECM'sinde ROS oluşumundan doğrudan veya dolaylı olarak etkilenir.35 Deri, vücudumuzun dış kısmını kapladığı için günlük hayatta önemli miktarda UV ışınımı ile karşılaşır. Bu nedenle, güneş yanığı, hiperpigmentasyon ve cilt karsinojenezi gibi cilt problemlerinin çoğu UV radyasyonunun doğrudan etkilerinden kaynaklanır veya bunlarla ilişkilidir. Aynı şekilde, fotoyaşlanma, tehlikeli özelliklerinin ek bir sonucudur.36 Dahası, UV ışığı, ROS oluşumuna ve dolayısıyla cilt dokusunda fotoyaşlanmaya yol açan en önemli mekanizmalardan biri olan oksidatif strese neden olur.37 Aşırı olduğu varsayılmıştır. ROS oluşumu erken cilt yaşlanmasına neden olur, önemli bir antioksidan kapasitesi olan ajanlar, UV radyasyonunun tehlikeli etkilerine karşı değerli bir araç olabilir. Buna göre klinik çalışmalar, topikal antioksidan kullanımının cilt üzerinde koruyucu bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir.38

Topikal antioksidan kullanımı ile cilt yaşlanmasının ertelenmesi arasındaki bağlantıdan sonra, önceki literatürde iyi kurulmuş olan MPM'nin in vitro antioksidan potansiyelinin incelenmesi, topikal olarak uygulandığında anti-aging potansiyeli olduğu için değerli bilgiler sağlar. Daha önceki literatür, yüksek sayıda izoflavonoid içeren ekstraktların değerli antioksidanlar olabileceğini göstermiştir. Önceki bir çalışmada, F. macrophylla ekstraktının izoflavonoid açısından zengin bir özü, ROS.39 Santos ve Silva4{{10}}'i temizleyerek UVB'nin neden olduğu cilt hasarını azaltmıştır. flavonoid kısmı ve prenil yan zincirinin ilave etkisi. M. pomifera ekstraktlarının ve izoflavonoidlerinin antioksidan potansiyeli önceki bir çalışmada değerlendirildi. Sonuçlar, pomiferin ve etil asetat fraksiyonlarının daha yüksek aktivite göstermesine rağmen, hidroalkolik ekstraktın ve saf osajinin DPPH, FRAP ve TOAC testlerinde önemli aktivite gösterdiğini göstermiştir.41 Bu çalışma için, DPPH radikal süpürme aktivitesi, FRAP, CUPRAC ve TOAC testleri MPM'nin in vitro antioksidan potansiyelinin kapsamlı bir şekilde belirlenmesi için gerçekleştirilmiştir (Tablo 2). MPM, IC50 değerinin 1998'de ölçüldüğü yerde önemli DPPH radikal yakalama etkinliği sergiledi.86 ± {{2{26}}}.02. FRAP ve TOAC deneyleri ayrıca, sırasıyla 0,191 ± 0,01 mM FeSO4 /DE ve 114,43 ± 0,02 AAE/g DE olmak üzere kayda değer metal indirgeme aktivitesi ile sonuçlandı. Bu bulgular, Orhan ve ark.41 tarafından yayınlanan bir önceki çalışma ile tutarlıydı. CUPRAC testi, bildiğimiz kadarıyla ilk kez M. pomifera meyve özleri üzerinde gerçekleştirilmiştir. Buna bağlı olarak MPM, sonuçların 73,928 ± 0,01 AAE/g DE olarak ölçüldüğü CUPRAC testinde kayda değer bakır indirgeme aktivitesi gösterdi. Toplam antioksidan kapasite analizleri göz önüne alındığında, MPM'nin umut verici bir anti-aging ajan olduğunu söylemek mümkündür.

Fenolik profil ve HPTLC analizi

İzoflavonoidler, antioksidan, antikanser ve jinekolojik sorunlara karşı dikkate değer çeşitli biyolojik aktivitelerden sorumlu bitki bileşenleri olarak bilinen fenolik maddelerdir.42 Önceki çalışmalar, prenile izoflavonoidlerin M. pomifera meyvelerindeki başlıca fenolik bileşikler olduğunu göstermiştir.43 Çok sayıda çalışma osajin tanımlamıştır. ve pomiferin, M. pomifera meyvelerinin başlıca bileşenleri olarak biyolojik aktivitelerden sorumludur.12 Osajin ve pomiferin, yalnızca bir hidroksil grubu ile farklılık gösteren, oldukça benzer prenillenmiş izoflavonoidlerdir.44 Önceki raporlar, osajin ve pomiferin içerikleri için çelişkili sonuçlar göstermiştir. M. pomifera meyvelerinin. Kartal ve ark.45 Türkiye'nin Ankara ilinden toplanan M. pomifera'da osajin ve pomiferin tayini için bir LC-MS yöntemi geliştirmiştir. Sonuçlar, meyve örneklerinin farklı kısımlarında pomiferin içeriğinin osajin içeriğinden biraz daha yüksek olduğunu göstermiştir. Başka bir çalışmada, Ortabatı ve Güney Amerika'nın farklı bölgelerinden M. pomifera meyve örnekleri toplanmış ve yeni bir HPLC analiz yöntemi ile osajin ve pomiferin içerikleri ölçülmüştür. Sonuçlar, coğrafi farklılıkların numunelerdeki izoflavonoid miktarlarında önemli değişikliklere yol açtığını göstermiştir.46 Tsao ve ark.47 Kanada'dan toplanan meyvelerin osajin ve pomiferin içeriğini belirlemişler ve pomiferin içeriğinin osajin içeriğinden biraz daha yüksek olduğunu bulmuşlardır. Buna karşılık, Hwang ve ark.48, çeşitli ekstraktlarda osajin miktarlarının pomiferin miktarlarından daha yüksek olduğunu bulan birkaç çalışmayı özetlemiştir. M. pomifera meyvelerinin osajin ve pomiferin içeriklerinin, kesinlikle benzer kimyasal yapılarından dolayı coğrafi farklılıklar ve ekstraksiyon teknikleri ile istisnai olarak değişken olduğu iddia edilebilir. Bu çalışma için, MPM miktarı, bilgimize göre ilk kez HPTLC analizi ile ölçüldü. Analiz sonuçları, Uşak ilinden toplanan MPM'nin baskın bileşeninin osajin olduğunu, örneğin yüzde 0,22'sinin osajin olduğunu göstermiştir (Tablo 1). Ayrıca, MPM'nin fenolik profilinin daha ileri değerlendirmesini elde etmek için toplam fenolik ve toplam flavonoid içerik analizleri yapılmıştır. Sonuçlar, MPM'nin aşağıdaki gibi kayda değer fenolik ve flavonoid içeriğine sahip olduğunu gösterdi; Sırasıyla 113,92 ± 2,26 mg GAE/g ve 66,41 ± 0,74 mg QE/g. Fenolik profil değerlendirmesinin sonuçları, MPM'nin yeni bir doğal yaşlanma karşıtı ajan olarak öne çıkan bir aday olabileceğini gösterdi.

ÇÖZÜM

M. pomifera meyvelerinin topikal uygulamalarını araştıran çalışmalar nispeten yeni olmasına rağmen, bu yöndeki ilgi cesaret verici raporlarla artmaktadır. Bu nedenle, bu çalışma, M. pomifera meyve özütünün olası yaşlanma karşıtı potansiyelinin kapsamlı bir değerlendirmesini tanımlamayı amaçlamıştır. Bildiğimiz kadarıyla izoflavonoid içeriğinin belirlenmesinde ilk kez M. pomifera meyvelerinde HPTLC analizi ve toplam fenolik profili belirlemek için in vitro çalışmalar yapılmıştır. Sonuçlar, osajin'in numunelerin ana bileşeni olduğunu gösterdi. Ek olarak, ekstraktın in vitro antioksidan potansiyeli dört farklı analizle değerlendirildi ve sonuçlar, MPM'nin önemli bir antioksidan potansiyeli olduğunu gösterdi. Ayrıca yaşlanma süreci ile ilgili enzimlere karşı inhibitör aktivitesi ölçülmüş ve MPM'nin önemli enzim inhibisyon aktivitesine sahip olduğu görülmüştür. Sonuç olarak, bu çalışma yeni cilt bakım ürünlerinin üretimine yol açabilecek bilgiler sunmaktadır.

etik

Etik Kurul Onayı:Çalışma için etik kurul onayı gerekmemektedir.

Bilgilendirilmiş Onam:Gerekli değil.

Hakem değerlendirmesi:Dışarıdan hakemli.

Yazarlık Katkıları

Konsept: THB, TBŞ., HB, Tasarım: THB, İ.KC, EC, Veri Toplama veya İşleme: THB, İ.KC, HB, Analiz veya Yorumlama: THB, İ.KC, Literatür Arama: THB, TBŞ., Yazma: THB, EC

Çıkar çatışması:Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemiştir.

Finansal açıklama:Bu çalışma Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi Bilimsel Projeler Komisyonu tarafından desteklenmiştir (no: 2020/02/07).

REFERANSLAR

1. Hwang E, Park SY, Yin CS, Kim HT, Kim YM, Yi TH. Panax ginseng ve Crataegus pinnatifida karışımının insan dermal fibroblastlarında ve sağlıklı insan cildinde antiaging etkileri. J Ginseng Arş. 2017;41:69-77.

2. Ganceviciene R, Liakou AI, Theodoridis A, Makrantonaki E, Zouboulis CC. Cilt yaşlanma karşıtı stratejiler. Dermatoendokrinol. 2012;4:308-319.

3. Lee H, Hong Y, Tran Q, Cho H, Kim M, Kim C, Kwon SH, Park S, Park J, Park J. A new role for the ginsenoside RG3 in antiaging via mitochondria function in ultraviyole ışınlanmış insan dermal fibroblastlar. J Ginseng Arş. 2019;43:431-441.

4. Rouvrais C, Bacqueville D, Patrick B, Haure MJ, Duprat L, Coutanceau C, Castex-Rizzi N, Duplan H, Mengeaud V, Bessou-Touya S. Retinaldehit, delta-tokoferol glukozit ve glisilglisin antiaging özelliklerinin değerlendirilmesi oleamid kombinasyonu. J Invest Dermatol. 2017;137(Ek 2):S303.

5. Bravo K, Alzate F, Osorio E. Antioksidan ve yaşlanma karşıtı aktiviteye sahip potansiyel bileşiklerin kaynağı olarak seçilmiş yabani ve ekili And bitkilerinin meyveleri. End. Bitkileri Prod. 2016;85:341-352.

6. Yepes A, Ochoa-Bautista D, Murillo-Arango W, Quintero-Saumeth J, Bravo K, Osorio E. Umut verici bir cilt yaşlanma karşıtı ajan kaynağı olarak mor çarkıfelek meyvesi tohumları (Passiflora edulis f. edulis Sims): enzimatik , antioksidan ve çok düzeyli hesaplamalı çalışmalar. Arap J Chem. 2021;14:102905.

7. Rittié L, Fisher GJ. UV ışığına bağlı sinyal basamakları ve cilt yaşlanması. Yaşlanma Res Rev. 2002;1:705-720.

8. Duque L, Bravo K, Osorio E. Seçilmiş ekili şifalı bitkilerde uygulanan bütüncül bir yaşlanma karşıtı yaklaşım: farklı mekanizmalarla cildin ışıkla korunmasına bir bakış. End. Bitkileri Prod. 2017;97:431-439.

9. Manjia NJ, Njayou NF, Joshi A, Upadhyay K, Shirsath K, Devkar VR, Moundipa FP. Kamerun Harungana madagascariensis Lam'daki şifalı bitkilerin yaşlanma karşıtı potansiyeli. ve Psorospermum aurantiacum Engl. in vitro ultraviyole B ışığına bağlı cilt hasarını önler. Eur J Integr Med. 2019;29:100925.

10. Pujimulyani D, Suryani CL, Setyawati A, Handayani RAS, Arumwardana S, Widowati W, Maruf A. Curcuma mangga Val'in kozmetik potansiyelleri. MMP1, MMP3 ve MMP13'e karşı insan BJ fibroblastlarında ekstrakt. Heliyon. 2020;6:e04921.

11. Stavropoulou MI, Stathopoulou K, Cheilari A, Benaki D, Gardikis K, Chinou I, Aligiannis N. Yunan propolis örneklerinin NMR metabolik profili: fitokimyasal bileşimlerinin karşılaştırmalı değerlendirmesi ve yaşlanma karşıtı ve antioksidan özelliklerinin araştırılması. J Pharm Biomed Anal. 2021;194:113814.

12. Filip S, Djarmati Z, Lisichkov K, Csanadi J, Jankov RM. Süper kritik sıvı ekstraksiyonu ile elde edilen Maclura (Maclura pomifera) ekstraktlarının izolasyonu ve karakterizasyonu. End. Bitkileri Prod. 2015;76:995-1000.

13. Saloua F, Eddine NI, Hedi Z. Osaj portakalının kimyasal bileşimi ve profil özellikleri Maclura pomifera (Rafin.) Schneider tohumu ve tohum yağı. End. Bitkileri Prod. 2009;29:1-8.

14. Veselá D, Kubínová R, Muselík J, Zemlicka M, Suchý V. Osajin ve pomiferinin Antioksidatif ve EROD aktiviteleri. Fitoterapi. 2004;75:209-211.

15. Gruber JV, Holtz R, Sikkink SK, Tobin DJ. Topikal pomiferin tedavilerinin in vitro ve ex vivo incelenmesi. Fitoterapi. 2014;94:164-171.

16. Bozkurt İ, Dilek E, Erol HS, Çakır A, Hamzaoğlu E, Koç M, Keleş ON, Halici MB. Maclura pomifera kaynaklı pomiferinin indometazin kaynaklı mide ülseri üzerindeki etkilerinin araştırılması: sıçanlarda deneysel bir çalışma. Med Chem Arş. 2017;26:2048-2056.

17. Kurt-Celep İ, Celep E, Akyüz S, İnan Y, Barak TH, Akaydın G, Telci D, Yesilada E. Hypericum Olympic L., DNA hasarını düzeltir ve insan derisinde UVB tarafından indüklenen MMP-9 aktivasyonunu önler fibroblastlar. J Etnofarmakol. 2020;246:112202.

18. Bardakçı H, Çevik D, Barak TH, Gözet T, Kan Y, Kırmızıbekmez H. Sekonder metabolitler, fitokimyasal karakterizasyon ve farklı ekstraktların antioksidan aktiviteleri Sideritis congesta PH Davis et Hub.- Mor. Biyokimya Sist Ekl. 2020;92:104120.

19. Celep E, Seven M, Akyüz S, İnan Y, Yeşilada E. Sideritis trojan Bornm'un enzim inhibisyonu, fenolik profil ve antioksidan kapasitesi üzerine ekstraksiyon yönteminin etkisi. Güney Afrika J Bot. 2019;121:360–365.

20. Bardakcı H, Barak TH, Özdemir K, Celep E. Ticari Tilia platyphyllos Scop. infüzyonlar. J Res Ecz. 2020;24:133-141.

21. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yeşilada E. Viburnum opulus L. (Avrupa kızılcık) meyve özlerinin fenolik içeriğinin biyoyararlanımı ve antioksidan aktivitesi üzerine in vitro insan sindiriminin etkisi. End. Bitkileri Prod. 2019;131:62-69.

22. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yeşilada E. Sambucus ebulus L. meyve özlerinden elde edilen fenoliklerin biyoyararlanımının ve antioksidan aktivitesinin in vitro insan sindirim simülasyonu. Gıda Biyosci. 2020;37:100711.

23. Ersoy E, Eroğlu Özkan E, Boğa M, Yılmaz MA, Mat A. LC-MS/MS ile fitokimyasal bileşime odaklanan üç Hypericum türünün anti-aging potansiyeli ve anti-tirozinaz aktivitesi. End. Bitkileri Prod. 2019;141:111735.

24. Lee KK, Kim JH, Cho JJ, Choi JD. 150 bitki ekstraktının elastaz aktivitesi üzerindeki inhibitör etkileri ve antiinflamatuar etkileri. Int J Cosmet Sci. 1999;21:71-82.

25. Itoh S, Yamaguchi M, Shigeyama K, Sakaguchi I. Chaenomeles sinensis'ten elde edilen ekstrelerin yaşlanma karşıtı potansiyeli. Kozmetik 2019;6:21.

26. Kolaylı S, Can Z, Yıldız Ö, Şahin H, Karaoğlu SA. Farklı unifloral derecelerde kestane (Castanea sativa Mill.) balının anti hiyalüronidaz, antifriz, antioksidan, antimikrobiyal ve fizikokimyasal özelliklerinin karşılaştırmalı bir çalışması. J Enzyme Inhib Med Chem. 2016;31(Ek 3):96-104.

27. Korkmaz B, Horwitz MS, Jenne DE, Gauthier F. İnsan hastalıklarında terapötik hedefler olarak nötrofil elastaz, proteinaz 3 ve katepsin G. Pharmacol Rev. 2010;62:726-759.

28. Akazaki S, Nakagawa H, Kazama H, Osanai O, Kawai M, Takema Y, Imokawa G. Yeni bir üç boyutlu morfometrik analizle değerlendirilen cilt kırışıklıklarında yaşa bağlı değişiklikler. Br J Dermatol. 2002;147:689- 695.

29. Barla F, Higashijima H, Funai S, Sugimoto K, Harada N, Yamaji R, Fujita T, Nakano Y, Inui H. Alkil galatların hiyalüronidaz ve kolajenaz üzerindeki engelleyici etkileri. Biosci Biotechnol Biochem. 2019;73:2335-2337.

30. Chung JH, Kang S, Varani J, Lin J, Fisher GJ, Voorhees JJ. İn vivo yaşlı insan derisinde hücre dışı sinyalle düzenlenen kinazın azalması ve stresle aktive olan MAP kinaz aktivitelerinin artması. J Invest Dermatol. 2000;115:177-182.

31. Addotey JN, Lenger's I, Jose J, Gampe N, Béni S, Petereit F, Hensel A. Ononis spinosa L. kök ekstraktından insan hiyalüronidazı-1 ve norneolignan klitorienolakton B üzerinde inhibe edici etkilere sahip izoflavonoidler. Fitoterapi. 2018;130:169-174.

32. Kim KJ, Xuan SH, Park SN. Glycyrrhiza uralensis Fisher'dan izole edilen bir izoflavonoid olan Licoricidin, insan dermal fibroblastlarının UVA kaynaklı fotoyaşlanmasını önler. Int J Cosmet Sci. 2017;39:133-140.

33. Kim JY, Wang Y, Uddin Z, Song YH, Li ZP, Jenis J, Park KH. Flemingia philippinensis'in köklerinden rekabetçi nötrofil elastaz inhibe edici izoflavonlar. Bioorg Kimya 2018;78:249-257.

34. Ergene Öz B, Saltan İşcan G, Küpeli Akkol E, Süntar İ, Bahadır Acıkara Ö. Ononidis kökünden yara iyileştirici maddeler olarak izoflavonoidler. J Etnofarmakol. 2018;211:384-393.

35. Azevedo Martins TE, de Oliveira Pinto CAS, de Oliveira AC, Robles Velasco MV, Gorriti Guitiérrez AR, Cosquillo Rafael MF, Huamani Tarazona JP, Retuerto-Figueroa MG. Topikal antioksidanların sağlıklı cildi korumaya katkısı-bir inceleme. Bilim Ecz. 2020;88:27.

36. Krutmann J, Schroeder P. İnsan derisinin fotoyaşlanmasında mitokondrinin rolü: kusurlu santral modeli. J Araştırma Dermatol Symp Proc. 2009;14:44-49.

37. Dong KK, Damaghi N, Picart SD, Markova NG, Obayashi K, Okano Y, Masaki H, Grether-Beck S, Krutmann J, Smiles KA, Yarosh DB. UV kaynaklı DNA hasarı, insan derisinde MMP-1 salınımını başlatır. Uzman Dermatol. 2008;17:1037-1044.

38. Oresajo C, Pillai S, Manco M, Yatskayer M, McDaniel D. Antioksidanlar ve cilt: formülasyonu ve etkinliği anlamak. Dermatol Ter. 2012;25:252-259.

39. Chiang HM, Chiu HH, Liao ST, Chen YT, Chang HC, Wen KC. Isoflavonoidrich fleming macrophylla özü, reaktif oksijen türlerini temizleyerek ve MAP kinazı ve MMP ekspresyonunu inhibe ederek UVB'nin neden olduğu cilt hasarını azaltır. Kanıta Dayalı Tamamlayıcı Alternatif Med. 2013;2013:696879.

40. Santos CMM, Silva AMS. Prenilflavonoidlerin antioksidan aktivitesi. moleküller. 2020;25:696.

41. Orhan İE, Sezer Şenol F, Demirci B, Dvorska M, Smejkal K, Zemlicka M. Bazı doğal ve yarı sentetik flavonoid türevlerinin ve Maclura pomifera (Rafin.) Schneider (osaj portakalı) ekstraktlarının ve esansiyelinin antioksidan potansiyeli yağ bileşimi. Türkçe J Biochem. 2016;41:403-411.

42. Křížová L, Dadáková K, Kašparovská J, Kašparovský T. Isoflavones. moleküller. 2019;24:1076.

43. Su Z, Wang P, Yuan W, Grant G, Li S. Phenolics from the fruit of Maclura pomifera. Nat Ürün Komün. 2017;12:1743-1745.

44. Orazbekov Y, İbrahim MA, Mombekov S, Srivedavyasasri R, Datkhayev U, Makhatov B, Chaurasiya ND, Tekwani BL, Ross SA. Maclura pomifera'dan prenillenmiş flavonoidlerin izolasyonu ve biyolojik değerlendirmesi. Kanıta Dayalı Tamamlayıcı Alternatif Med. 2018;2018:1370368.

45. Kartal M, Abu-Asaker M, Dvorska M, Orhan I, Zemlicka M. Maclura pomifera (Rafin.) Schneider'de pomiferin ve osajin, majör izoflavonların analizi için LC-DAD-MS yöntemi. Kromatografi 2009;69:325-329.

46. ​​Darji K, Miglis C, Wardlow A, Abourashed EA. Midwest ve Güney Amerika Birleşik Devletleri'nden gelen osage portakalında izoflavon seviyelerinin HPLC tayini. J Tarım Gıda Kimyası 2013;61:6806-6811.

47. Tsao R, Yang R, Young JC. Osaj portakalında antioksidan izoflavonlar, Maclura pomifera (Raf.) Schneid. J Tarım Gıda Kimyası 2003;51:6445-6451.

48. Hwang HS, Winkler-Moser JK, Tisserat B, Harry‐O'kuru RE, Berhow MA, Liun SX. Depolama sırasında soya fasulyesi yağı ve balık yağındaki osage portakal ekstraktının antioksidan aktivitesi. J Am Oil Chem Soc. 2021;98:73-87.

【Daha fazla bilgi için:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】