Gastrodia Elata Blume Ekstresinin Murin B16F10 Melanomunda Alfa Melanosit Uyarıcı Hormona Bağlı Melanogenez Üzerindeki İnhibitör Etkisi
May 17, 2023
ARKA PLAN/HEDEFLER:Geleneksel bir bitkisel ilaç olan Gastrodia elata Blume (GEB), doğu tıbbında çok çeşitli nörolojik bozuklukların (örn. felç ve inme) ve cilt problemlerinin (örn. atopik dermatit ve egzama) tedavisinde kullanılmıştır. Bu çalışma, GEB ekstraktının murin B16F10 melanomunda melanogenez aktivitesini inhibe edip etmediğini araştırmak için tasarlanmıştır.
İlgili araştırmalara göre cistanche, "ömrü uzatan mucizevi bitki" olarak bilinen yaygın bir bitkidir. Ana bileşeni, antioksidan, antienflamatuar ve bağışıklık fonksiyonunun teşviki gibi çeşitli etkilere sahip olan kistanosiddir. Cistanche ve cilt beyazlatma arasındaki mekanizma, cistanche glikozitlerinin antioksidan etkisinde yatmaktadır. İnsan derisindeki melanin, tirozinaz tarafından katalize edilen tirozinin oksidasyonu ile üretilir ve oksidasyon reaksiyonu oksijenin katılımını gerektirir, bu nedenle vücuttaki oksijensiz radikaller melanin üretimini etkileyen önemli bir faktör haline gelir. Cistanche, bir antioksidan olan ve vücuttaki serbest radikallerin oluşumunu azaltabilen ve böylece melanin üretimini engelleyen cistanoside içerir.
Cistanche Tubulosa Eki'ne tıklayın
Daha fazla bilgi için:
david.deng@wecistanche.com WhatsApp:86 13632399501
GİRİİŞ
İnsan ten rengi, genetik ve başta melanin miktarı ve türü olmak üzere birçok faktörden etkilenir. Melanin, melanositlerin melanozomlarında üretilir ve cildin güneş ışığına, strese ve melanin uyarıcı faktörlere [örneğin, alfa-melanosit uyarıcı hormon (-MSH) maruz kalmasına yanıt olarak epidermisin bazal tabakasındaki melanositlerden keratinositlere aktarılır. , nitrik oksit ve endotelin-1] [1,2]. Örneğin, -MSH, tirozinaz, tirozinaz ile ilişkili protein (Trp)1 ve Trp2 [1] gibi melanosite özgü enzimlerin güçlü bir indükleyicisi olan mikroftalmi ile ilişkili transkripsiyon faktörü (MITF) indüksiyonu yoluyla melanogenezi teşvik eder [1]. Melanin üretimi birincil olarak, mikofenolat tarafından tirozinin 3,4-dihidroksifenilalanin'e (L-DOPA) hidroksilasyonunu ve difenolaz tarafından L-DOPA'nın dopakinona oksidasyonunu katalize eden, melanogenez için hız kireçleyici enzim olan tirozinaz tarafından düzenlenir. bu, hem eumelanin hem de feomelanin biyosentezi için ortak bir adımdır. Sonraki adımlar, eumelanin (kahverengi/siyah pigment) üretmek için iki ilave melanosite özgü enzim, Trp1 ve Trp2 (dopakrom tautomeraz olarak da bilinir) ve feomelanin (kırmızı/sarı) üretmek için sistein/glutatyon ile ilişkili enzimatik olmayan adımı içerir. pigment), sırasıyla. Hidrokinon [3,4], kojik asit [5], askorbik asit [6] ve arbutin [7] gibi tirozinaz inhibitörleri, hiperpigmentasyon bozukluklarını tedavi etmek için kullanılmıştır, ancak son zamanlarda insanlarda çeşitli yan etkilere sahip oldukları bildirilmiştir [1, 2]. Sonuç olarak, yan etkiler olmadan depigmentasyonu indükleyebilen doğal kaynaklardan daha güvenli ve daha etkili melanojenik inhibitörlerin bulunmasına çok dikkat edilir.
Klorofil içermeyen bir orkide bitkisi olan Gastrodia elata Blume (GEB), çimlenmesi ve büyümesi/olgunlaşması için sırasıyla simbiyotik mantarlar, Mycena osmundicola ve Armillaria mellea'ya ihtiyaç duyar [8,9]. GEB, nörodejeneratif bozuklukları (örn. felç, vertigo, inme, epilepsi ve demans) tedavi etmek için doğuya özgü bir tıbbi ilaç olarak kullanılmıştır [9,10]. GEB'den çeşitli biyoaktif bileşikler izole edilmiştir, en önemlileri gastrodin, 4-hidroksibenzil alkol, 4-hidroksibenzaldehit, vanilin, vanilil alkol ve vanilik asit gibi fenolik bileşiklerdir [{{6 }}]. Yakın zamanda, GEB'nin biyoaktif bileşiklerinin tirozinaz aktivitesi [13-16] için inhibe edici bir potansiyele sahip olduğu bildirilmiştir. Ayrıca, son çalışmalar GEB'de ergotionin (Ergo) [8,11] ve diosgenin [17] tanımlamıştır. Ergo esas olarak mantarlarda bulunur [18,19], diosgenin ise yabani yamda bulunur [20]. Her ikisi de, güçlü antioksidan aktiviteleri nedeniyle 2010 yılında yaşlanma karşıtı kremlerde bulunan ilk 10 bitkisel bileşen arasında listelenmiştir [21], bu da GEB'nin tıbbi gıdaların yanı sıra fonksiyonel bir kozmetik ajan olarak kullanılabileceğini düşündürmektedir.
Dondurularak kurutulmuş ve buharla kurutulmuş GEB'nin [22] bileşimi, kimyasal bileşenleri [11,12,23] ve antioksidan [12], anti-platelet ve anti-trombotik [24] etkileri hakkında raporlar olmasına rağmen, çok az GEB ekstraktının B16F10 melanomunda melanin sentezi ve ilgili enzimleri üzerindeki inhibitör etkileri bilinmektedir. GEB, biyoaktif bileşikleri ve antioksidan özellikleri nedeniyle nörolojik bozukluklar ve cilt problemleri için geleneksel bir ilaç olarak kullanıldığından, murin B16F10 melanomunda melanin içeriği ve tirozinaz aktivitesinin yanı sıra transkripsiyon faktörlerinin ve düzenleyici enzimlerin moleküler seviyelerini analiz ettik.
MALZEMELER VE YÖNTEMLER
Gastrodia elata Blume (GEB) ekstraktının hazırlanması
Hücre kültürü
Hücre canlılığı deneyi
B16F10 hücreleri, bir 24-kuyulu plakaya 4 x 104 hücre/oyuk yoğunlukta kaplanmıştır. Yüzde 100 birleşik hücreler, 200 nM -MSH (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, ABD) ile veya onsuz muameleden sonra 24 saat boyunca 0-25 mg/mL GEB ekstresi ile ön muameleye tabi tutuldu. Ortam, bir 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5- difeniltetrazolyum bromür (MTT; Amresco, Solon, OH, ABD) ile değiştirildi ) boya solüsyonu [fosfat tamponlu salin (PBS) içinde 5 mg/mL] 37 derecede 3 saat. Süpernatan boşaltıldı ve formazan tuzları 500 uL izopropanol içinde çözüldü. Absorbans, bir spektrofotometre (Gen5.2; Biotek, Winooski, VT, ABD) kullanılarak 570 nm'de ölçülmüştür.
melanin içerik analizi
B16F10 hücreleri, 24 saat boyunca 200 nM -MSH ile veya onsuz muameleden sonra 72 saat boyunca 0-5 mg/mL GEB ekstresi veya 400 ug/mL arbutin (bir pozitif kontrol; Sigma-Aldrich) ile muamele edildi. Hücreler, 1X PBS ile iki kez yıkandı, ardından radyoimmünopresipitasyon testi (RIPA) lizis tamponunda (Thermo Scientific, Rockford, IL, ABD) lizis ve 14,000 rpm'de 25 derecede 10 dakika santrifüjleme yapıldı. Topak (yaklaşık 105 hücre), 80 derecede 2 saat boyunca yüzde 10 dimetil sülfoksit içeren 1 mL İN NaOH içinde çözündürüldü. Süpernatanın absorbansı 470 nm'de ölçüldü. Numunelerdeki melanin konsantrasyonu, sentetik bir melanin (Sigma-Aldrich) standart eğrisinden elde edildi. Her numune, Pierce® BCA yöntemi (Thermo Scientific) kullanılarak toplam hücresel protein içeriğine normalleştirildi.
Tirozinaz aktivitesinin ölçümü
B16F10 hücreleri, 24 saat boyunca 200 nM -MSH ile veya onsuz tedaviden sonra 72 saat boyunca 0-5 mg/mL GEB ekstresi veya 400 ug/mL arbutin (bir pozitif kontrol) ile muamele edildi. Hücreler iki kez 1X PBS ile yıkandı, ardından RIPA lizis tamponunda (Thermo Scientific) parçalandı ve 15,{10}} rpm'de 20 dakika 4 derecede santrifüjlendi. Süpernatan (100 uL) kuyucuklu bir plakaya yerleştirildi ve 100 uL 5 mM L-DOPA ile karıştırıldı ve 37 derecede 2 saat inkübe edildi. Absorbans 420 nm'de ölçülmüştür. Her numune, Pierce® BCA yöntemi (Thermo Scientific) kullanılarak toplam hücresel protein içeriğine normalleştirildi.
Gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonunun analizi (gerçek zamanlı PCR)
B16F10 hücreleri, 24 saat boyunca 200 nM -MSH ile veya onsuz tedaviden sonra 72 saat boyunca 0-5 mg/mL GEB ekstresi veya 400 ug/mL arbutin (bir pozitif kontrol) ile muamele edildi. Hücrelerin toplam RNA'sı, bir Trizol reaktifi (Invitrogen, Carlsbad, CA, ABD) ve bir RNA ekstraksiyon kiti (RNase Mini kiti; Qiagen, Hilden, Almanya) kullanılarak izole edildi. Toplam RNA (2 ug), bir ters transkripsiyon ana ön karışımı (ELPIS, Daejeon, Kore) kullanılarak ters kopyalandı. Gerçek zamanlı PCR (LightCycler 96; Roche, Indianapolis, IN, ABD) şu primerler kullanılarak gerçekleştirilmiştir: murin MITF ileri 5'-GGCCAAGGCAGAGCAACTT-3', geri 5'-GCCCATGGTGGCAAGCT-3'; tirozinaz ileri 5'-ATAGGTGCATTGGCTTCTGG-3', geri 5'-CCAACGATCCCATTTTTTCTT-3'; Trp1 ileri 5'-GAGTGACATCCTGTGGCTCA-3', geri 5'-CGATACCCTGGGAACACTTT-3'; Trp2 ileri 5'-GCATCTGTGGAAGGGTTGTT-3', geri 5'-ACTCCTTCCTGAATGGGACC-3'; gliseraldehit 3-fosfat dehidrogenaz (GAPDH) ileri 5'-TCAATGAAGGGGTCGTTGAT-3', geri 5'-CGTCCCGTAGACAAAATGGT-3'. İfade seviyeleri, GAPDH'ninkine normalleştirildi.
Western blot analizi
istatistiksel analiz
SONUÇLAR
Gastrodia elata Blume'nin (GEB) B16F10 hücrelerinde hücre canlılığı üzerindeki etkileri
GEB ekstraktının potansiyel toksisitesini incelemek için, önce 200 nM -MSH ile veya onsuz tedaviden sonra 24 için B16F10 hücrelerini çeşitli konsantrasyonlarda (0-25 mg/mL) GEB ekstraktı ile inkübe ederek GEB sitotoksisitesini değerlendirdik. H. -MSH stimülasyonundan bağımsız olarak, düşük GEB konsantrasyonları (0.5-5 mg/mL) hücre canlılığını engellemezken, daha yüksek konsantrasyonlar (10-25 mg/mL) toksisiteyi önemli ölçüde indükledi (Şekil 1). 10 ve 25 mg/mL GEB'de hücre canlılığı, tedavi edilmemiş kontrolün sırasıyla yüzde 85,9'u ve yüzde 68,7'siydi. -MSH stimülasyonundan sonra 10 ve 25 mg/mL GEB'de hücre canlılığı, tedavi edilmemiş kontrolün sırasıyla yüzde 89.9'u ve yüzde 65.3'üydü. Bu nedenle, sonraki deneylerde 0-5 mg/mL'lik bir konsantrasyon kullanıldı.
Gastrodia elata Blume'nin (GEB) B16F10 Hücrelerinde melanin sentezi ve tirozinaz aktivitesi üzerindeki etkisi
GEB ekstraktının melanogenez aktivitesini değerlendirmek için, hem -MSH ile muamele edilmemiş hem de -MSH ile muamele edilmiş B16F10 hücrelerinde melanin içeriğini ölçtük. Hücreler, 24 saat boyunca -MSH ile/bunsuz ön işleme tabi tutuldu, ardından 72 saat boyunca 0-5 mg/mL veya 400 ug/mL arbutin dozlarında GEB özütü ile muamele edildi. GEB tedavisi, -MSH ile tedavi edilen gruplarda ve tüm -MSH ile tedavi edilmeyen gruplarda daha yüksek dozlarda (2-5 mg/mL) doza bağlı bir şekilde hücresel melanin içeriğini önemli ölçüde azalttı. -MSH tek başına melanin içeriğini kontrole kıyasla yüzde 180 artırdı ve GEB tedavisi, -MSH ile indüklenen hiperpigmentasyon durumunda melanin sentezini -MSH ile tedavi edilmemiş gruplara kıyasla doza bağlı bir şekilde belirgin şekilde inhibe etti (Şekil 2).
Tirosinaz, melanin sentezinin hız sınırlayıcı enzimi olduğundan, GEB ekstraktının B16F10 hücrelerinde hücresel tirozinaz aktivitesi üzerindeki inhibe edici etkisini belirledik. -MSH, B16F10 hücrelerinde tirozinaz aktivitesini yüzde 171,2 oranında indükledi. -MSH tedavisinden bağımsız olarak, GEB ekstresi tirozinaz aktivitesini önemli ölçüde inhibe etti. Arbutin, hem -MSH ile tedavi edilmemiş hem de -MSH ile tedavi edilmiş gruplarda tedavi edilmemiş kontrole kıyasla yüzde 35-40 oranında önemli ölçüde inhibe edilen, tirozinaz yolu yoluyla melanin sentezinin bir inhibitörü olarak iyi bilinir [7] (Şekil 3) . GEB ekstraktının 2 ve 5 mg/mL'deki melanin içeriği ve tirozinaz aktiviteleri, 400 ug/mL arbutininkine benzerdi; GEB ekstraktı ile azalan hücresel tirozinaz aktivitesi ile ilişkilidir (Şekil 3).
Gastrodia elata Blume'nin (GEB) B16F10 hücrelerinde MITF, tirozinaz, Trp1 ve Trp2'nin mRNA seviyeleri ve protein ekspresyonu üzerindeki etkileri
Melanin sentezinin GEB ekstresi tarafından inhibisyonunun melanogenezle ilişkili gen ekspresyonu ile ilişkili olup olmadığını belirlemek için, MITF, tirozinaz, Trp1 ve Trp2'nin mRNA seviyelerini incelemek için gerçek zamanlı PCR gerçekleştirdik. Tüm bu genlerin mRNA seviyeleri, hem -MSH ile muamele edilmemiş hem de -MSH ile muamele edilmiş gruplarda doza bağlı bir şekilde GEB ekstraktı ile azalma eğilimindeydi, ancak -MSH ile muamele edilmemiş hücrelerde ihmal edilebilir düzeydeydi. MITF, tirozinaz, Trp1 ve Trp2'nin moleküler seviyeleri düşük GEB konsantrasyonlarında (0.5-1 mg/mL) inhibe edildi ve daha yüksek konsantrasyonlarda (2-5 mg) belirgin şekilde fakat önemli ölçüde inhibe edilmedi /mL) -MSH ile işlenmemiş hücrelerde. -MSH, bu genlerin mRNA seviyelerini belirgin bir şekilde indükledi, ancak GEB özü bunu düşürdü. -MSH ile tedavi edilen hücrelerde bile, daha düşük GEB özü dozları MITF, tirozinaz, Trp1 ve Trp2 mRNA seviyelerini düşürme eğilimindeyken, daha yüksek GEB özü dozları tüm bu genlerin mRNA düzeylerini önemli ölçüde inhibe etti. GEB ekstraktının daha yüksek dozlardaki inhibisyon seviyeleri, kozmetikte iyi bilinen bir cilt beyazlatıcı bileşen olan arbutine benzerdi (Şekil 4).
Ayrıca, bu transkripsiyon faktörünün ve melanojenik enzimlerin protein ekspresyonunu western blot analizi ile değerlendirdik. -MSH tedavisi, doza bağlı bir şekilde geri kazanılan tüm bu genlerin mRNA seviyelerinin yanı sıra protein ekspresyonunu da önemli ölçüde indükledi. GEB ekstraktının daha düşük dozları, MITF, tirozinaz, Trp1 ve Trp2'nin -MSH ile indüklenen protein ekspresyonunu azaltma eğilimindeyken, daha yüksek dozlar, doza bağlı bir şekilde -MSH ile tedavi edilmiş B16F10 hücrelerinde tüm bu belirteçleri önemli ölçüde inhibe etti. GEB ekstraktının daha yüksek dozlardaki inhibisyon seviyeleri, arbutin kadar etkiliydi (Şekil 5).
TARTIŞMA
Bu çalışmada, GEB ekstraktının, murin B16F10 melanom hücrelerinde melanogeneze ve bununla ilgili MITF, tirozinaz, Trp1 ve Trp2 gibi enzimlerin aktivitesine ve moleküler ifadesine karşı inhibe edici aktiviteye sahip olduğunu bulduk. 0.5-5 mg/mL dozlarında GEB ekstraktı, doza bağlı bir şekilde melanogenez ile ilişkili belirteçleri inhibe etti. GEB ekstraktının düşük dozları (0.5-1 mg/mL) melanogenezi, tirozinaz aktivitesini, mRNA seviyelerini ve MITF, tirozinaz, Trp1 ve Trp2'nin protein ifadesini azaltma eğilimindeyken, daha yüksek dozlar ({{12} } mg/mL) GEB ekstraktı, hem -MSH ile işlenmemiş hem de -MSH ile işlenmiş B16F10'da doza bağlı bir şekilde tüm bu işaretleyici hücreleri önemli ölçüde inhibe etti. GEB ekstraktının daha yüksek konsantrasyonlardaki bu inhibe edici etkileri, 400 ug/mL arbutininkine benzerdi.
Melanin, melanozomlarda L-tirozinden oluşur ve deri, saç ve gözlerin karakteristik rengini belirler [1]. Melanin ultraviyole (UV) ışığa ve strese karşı koruyucu bir rol oynamasına rağmen, melanin pigmentinin aşırı üretimi ve birikmesi hiperpigmentasyona ve memelilerde çiller, yaşlılık lekeleri ve melazma gibi çeşitli cilt problemlerine neden olur [25]. Bu nedenle, melanogenez inhibisyonu, cilt depigmentasyonu ve aydınlatmasının tıbbi ve kozmetik tedavileri için bir endişe konusu olmuştur. -MSH'nin melanokortin-1 reseptörüne (MC1R) bağlanması, siklik adenozin monofosfatı (cAMP) arttırır ve ardından MITF'yi aktive eder. MIFT, yapısal olarak yüzde 40-45 benzer kimliği paylaşan tirozinaz, Trp1 ve Trp2 dahil olmak üzere melanojenik enzimlerin ekspresyonunu etkili bir şekilde yukarı regüle eder [1,2]. Hepsinden önemlisi, tirozinaz inhibisyonu cilt hipopigmentasyonuna ulaşmada en yaygın yaklaşımdır çünkü bu enzim pigmentasyonun hız sınırlayıcı adımını katalize eder. Hem Trp1 hem de Trp2, melaninin sonuç olarak biyosentezinde yer alır [1,2].
Lee ve ark. [26], tirozinaz ve DOPA oto-oksidasyonunun inhibitör aktivitelerini ölçerek kozmetik kullanım için 100 bitki özünü taradı ve Gastrodia elata, Chaenomeles speciosa, Dryopteris crassirrhizoma, Glycyrrhizaglabra, Morusalba, Myristicafragrans, Rheum palmatum ve Sophora gibi birçok bitki özütünün olduğunu bildirdi. japonica, mantar tirozinaz aktivitesinin inhibisyonunu göstermiştir. Chen ve ark. [2] ayrıca 78 şifalı bitkiyi taradı ve GEB rizomunun tirozinaz aktivitesini inhibe etme potansiyeline sahip olduğunu buldu. GEB, nörodejeneratif bozuklukları tedavi etmek için oryantal bir tıbbi ilaç olarak kullanılmasına rağmen, bu tarama çalışmalarından GEB'nin bir tirozinaz inhibitörü olarak kullanılması olasılığı yüksektir.
Yakın tarihli bir çalışmada [9], çeşitli kromatografi teknikleri kullanılarak 64 GEB bileşeni rapor edilmiştir. Bunlar arasında en önemli fenolik bileşikler gastrodin [4-( -d-glukopiranosiloksi) benzil alkol], 4-hidroksi benzil alkol (4-HBA), 4-hidroksi- benzaldehit, vanilin (4-hidroksi-3-metoksibenzaldehit), vanilil alkol (4-(hidroksimetil)-2-metoksifenil) ve vanilik asit (4-hidroksi{{14) }}metoksibenzoik asit) [8-12]. GEB'de son zamanlarda yeni doğal bileşikler bulunmuştur; bis (4- hidroksifenil) sülfit [2], Ergo [8] ve diosgenin [17]. GEB'in hidrokinon ve majör fenolik bileşiklerinin yapısı oldukça benzerdir [27]. Hidrokinonun Hidroksil grubu (-OH), 4-HBA'da [27] bir hidroksimetil grubu (-CH2OH) ve 4-hidroksibenzaldehitte bir karbonil grubu (-CHO) ile ikame edilir. Sırasıyla vanilil alkol oluşturmak için hidrokinona ve vanilin oluşturmak için 4-hidroksibenzaldehite bir metoksi grubu (-OCH3) eklenir. Vanilik asit, vanilinin oksitlenmiş bir şeklidir.
Son çalışmalar, bu bileşiklerin çoğunun, B16 [14,28] ve HM3KO melanom hücrelerinde [13], normal insan sünnet derisi fibroblastlarında [29] ve in vivo zebra balığı modellerinde [2,29] mantar tirozinazına ve melanogeneze karşı inhibe edici aktivite gösterdiğini bildirdi. Örneğin, bütanolle ekstrakte edilmiş GEB'den [14] izole edilmiş fenolik fraksiyon, tirozinaz, Trp1 ve Trp2'nin yanı sıra bu enzimlerin mRNA ve protein ekspresyonunu azaltarak melanogenez üzerinde inhibe edici etkiler göstermiştir. Gastrodin [15] ve 4-HBA [16], B16 melanom hücrelerinde tirozinaz aktivitesini inhibe ederek melanogenezi baskıladı. Gastrodin ve 4-HBA'nın hidroksil grupları, öncelikle tirozinazın aktif bölgesindeki histidin kalıntılarıyla etkileşime girerek tirozinaz aktivitesinin inhibisyonuna yol açtı [30]. 4-HBA'nın fenolik OH'sinden gelen oksijen, bir nükleofilik saldırı ile tirozinazın katalitik aktivitesini etkiler [31]. Vanillik asit ve vanilil alkolün hidroksi ve metoksi grupları, tirozinazın [32] difenenolaz aktivitesinin ve özellikle vanilil alkoldeki CH2OH'nin -COOH'ye (vanillik asit) dönüştürülmesinin inhibitörleri olarak işlev görür, bu da tirozinaz inhibisyonunda belirgin bir artışa yol açar [32 ]. Origanum vulgare'den izole edilen vanilik asit, -MSH ile uyarılan B16F10 hücrelerinde MC1R, MITF, Trp1 ve Trp2'nin ekspresyonunu azaltmanın yanı sıra hücresel tirozinaz aktivitesini, DOPA oksidaz ve melanin içeriğini azalttı. Vanilin, tirozinaz aktivitesinin inhibisyonunu ifade etmemiştir [29]. Son zamanlarda, GEB'den izole edilen doğal bir ürün olan bis(4-hidroksi benzil)sülfid, bis'in (4-hidroksi benzil)sülfit kükürt atomunu koordine ederek insan epidermal melanositlerinde ve zebra balığı modellerinde melanin sentezini bloke etmek için güçlü bir rekabetçi tirozinaz inhibitörü görevi gördü ({{ Hesaplamalı moleküler modelleme yoluyla tirozinazın aktif bölgesindeki bakır iyonları ile 33}}hidroksi benzil) sülfit [2]. Bu sonuçlar, GEB'nin çeşitli fenolik bileşiklerinin, tirozinazın aktif bölgesindeki bakır iyonları ve/veya histidin kalıntıları ile etkileşerek tirozinaz inhibitörleri olarak hareket edebileceğini göstermektedir.
Ergo ve diosgenin, 2010 yaşlanma karşıtı kremlerde ilk 10 botanik içerikten biri olarak seçildi [21]. Ergo, yakın zamanda GEB'de [8] bulunan, suda çözünür doğal bir tiyol amino asittir [18,19]. Fizyolojik pH'ta Ergo, tiyol (-SH) formundan ziyade esas olarak tiyonda (= S) bulunur [19]. Yavaş bozunması, disülfid oluşumuna karşı direnci ve oto-oksidasyonu onu glutatyondan daha kararlı hale getirir [18,19]. Ergo'da kükürt ikameli imidazol halkasının varlığı, mantar tirozinaz aktivitesini doza bağımlı bir şekilde inhibe etmiştir [33]. Yabani yam (Dioscorea villosa) ekstraktından elde edilen başka bir bileşik olan diosgenin depigmente edici bir etkiye sahiptir ve bu nedenle melazma, melanodermatit ve güneş lentigoda kullanılabilir [34]. Melanom hücreleri üzerinde yürütülen bir araştırma, pigment giderici etkinin, hücresel fosfatidilinositol- 4,5-bifosfat 3-kinaz yolunun aktivasyonu ile ilişkili olduğunu göstermiştir; bu da diosgenin'in etkili bir inhibitör olabileceğini düşündürmektedir. hiperpigmentasyon [34]. Ek olarak, anti-kollajenaz aktiviteyi indükleyerek anti-inflamatuar ve anti-aging özelliklere sahiptir [35].
Melanogenezin düzenlenmesinde yer alan en az üç olası sinyal yolu vardır; cAMP'ye bağlı, Wnt ve hücre dışı sinyalle düzenlenen kinaz sinyal yolları [1]. Tüm bu sinyal yolları, MITF ekspresyonu ve/veya aktivitesi [1] yoluyla melanogenez ile ilişkili enzimleri, yani tirozinaz, Trp1 ve Trp2'yi düzenler. GEB tarafından melanogenezin baskılanmasında bu sinyal yollarının potansiyel katılımı gelecekte araştırılmaya devam etmektedir.
ÇIKAR ÇATIŞMASI
REFERANSLAR
Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
