Nörodejeneratif Hastalıklar İçin Çok Hedefli Terapötik Ajanlar Olarak Doğal Olarak Türetilmiş Alkaloidlerin Potansiyeli

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Soyut:alkaloidlerbitkilerden, mantarlardan ve deniz süngerlerinden türetilebilen bir ikincil metabolit sınıfıdır. Kanser, diyabet ve nörodejeneratif hastalıklar dahil olmak üzere kronik hastalıkların yönetimi için sürekli bir ilaç kaynağı olarak bilinirler. Örneğin, galantamin ve huperzin AalkoloidŞu anda nörodejeneratif hastalığın semptomatik tedavisi için kullanılan türevler. Nörodejeneratif hastalıkların etiyolojisi poligenik ve çok faktörlüdür ve bunlarla sınırlı olmamak üzere enflamasyon, oksidatif stres ve protein agregasyonu dahildir. Bu nedenle, polifarmakoloji modülasyon özelliklerine sahip doğal ürün bazlı alkaloidler, daha fazla ilaç geliştirme için veya daha az ölçüde nörodejenerasyonu yönetmek için nutrasötikler olarak potansiyel olarak faydalıdır. Bu derleme, nörodejeneratif hastalıklar için doğal olarak türetilen alkaloidler hakkındaki son gelişmeleri tartışmayı ve özetlemeyi amaçlamaktadır.

Anahtar Kelimeler:alkoloidler; çok hedefli ajan; kolinesteraz; sinir koruyucu; nöroinflamasyon; nörogenez; amiloid-beta; tau proteini; uyuşturucu benzerliği

Engel olmakAlzheimerile hastalıkcistanche

Yew Rong Kong 1,†, Kai Ching Tay 1,†, Yi Xiang Su 1, Choon Kwang Wong 1, Wen Nee Tan 2,* ve Kooi Yeong Khaw

1 Biyofonksiyonel Molekül Keşif Araştırma Grubu (BMEX), Eczacılık Fakültesi, Monash Üniversitesi Malezya, Jalan Lagoon Selatan, Bandar Sunway 47500, Malezya

2 Kimya Bölümü, Uzaktan Eğitim Okulu, Universiti Sains Malaysia, Penang 11800, Malezya

1. Giriş

nörodejeneratifhastalıklarçoğunlukla tedavi edilemez olan ve merkezi sinir sisteminde ilerleyici hafıza kaybı ve/veya nöronal hücre ölümü ile karakterize edilen bir grup kronik hastalık olarak sınıflandırılır. Bazı örnekler arasında Alzheimer hastalığı (AH) ve Parkinson hastalığı (PD) bulunur ve bu hastalıklar için yönetim planları, hastalığın ilerlemesini durdurmayan yalnızca semptomatik tedavilerdir [1,2]. Bu hastalıkların çoğu yaşla yakından ilişkilidir. Her nörodejeneratif hastalık, bilişsel işlev bozukluğu ve günlük işlevsellikte bozulma gibi çeşitli klinik belirtilerle ilişkilidir [3]. 2016 yılında yaklaşık 43,8 milyon kişi bunama ve 6,1 milyon kişi Parkinson hastalığından mustaripti ve sayıları her yıl artmaya devam ediyor [4,5]. AD, tüm demans vakalarının yaklaşık yüzde 75'ini oluşturur, bu nedenle demansın en yaygın şekli olarak kabul edilir [6,7].

AD semptomları hafıza kaybını içerir ve ajitasyon, ilgisizlik, saldırganlık, halüsinasyon, yanlış inançlar ve bilişsel işlev bozukluğu olarak kendini gösteren ileri bir aşamaya ilerleyebilir; sonunda, şiddetli AD hastaları temel fizyolojik fonksiyonların kaybından ve enfeksiyonlardan kaynaklanan komplikasyonlardan ölmektedir [8-10]. AD için tedavi seçenekleri donepezil, rivastigmin ve galantamin dahil kolinesteraz inhibitörleri ve memantin adlı bir N-metil-D-aspartat reseptörü (NMDA) antagonisti ile sınırlıdır. Kolinesteraz inhibitörleri, merkezi sinir sisteminde kolinerjik nöronal aktiviteyi artırmak için asetilkolinin parçalanmasını engellerken, memantin, aşırı glutamatın neden olduğu nörotoksisiteyi engeller [11]. PD, harekette yavaşlama ve istirahat tremoru, postural instabilite veya kas sertliği gibi aşağıdaki semptomlardan en az birinin varlığı ile karakterizedir. PD genellikle levodopa ve dopamin agonistleri dahil dopaminerjik sinir aktivitesini artıran ilaçların yanı sıra katekol-O-metiltransferaz (COMT) inhibitörleri ve monoamin oksidaz B (MAO-B) inhibitörleri gibi dopamin metabolizmasını baskılayan ilaçlarla yönetilir [12]. Her iki durumun da hastalığın ilerlemesini durduran veya hasarı tersine çeviren bir tedavisi yoktur. AD, etiyolojisi amiloid-beta birikimi, tau proteininin hiperfosforilasyonu, eksitotoksisite, oksidatif stres ve nöroinflamasyon ile ilişkili olduğundan çok faktörlü bir hastalıktır [7,13]. PD, Lewy cisimciklerini oluşturan ubikuitin ve alfa-sinüklein (-Syn) gibi hücre içi agrega içeren proteinlerin birikmesi ile ilişkiliyken, substantia nigra pars compacta'da (SNpc) dopaminerjik nörodejenerasyon ve nöroinflamasyon [12,14].

Cistanche bitkisi hafızayı geliştirebilir

AD ve PD arasındaki diğer bir benzerlik, her iki hastalığın da nöroinflamasyonla ilişkili olmasıdır. AD'deki amiloid-beta plakları ve PD'deki alfa-sinüklein agregatları tarafından indüklenen nöroinflamasyon, sırasıyla kolinerjik ve dopaminerjik nöronların kaybını önemli ölçüde kötüleştirir [11,14]. Mevcut tedavi seçenekleri yalnızca semptomatik rahatlama sağladığından, devam eden araştırmalar nörodejeneratif hastalıklar için çok hedefli terapötik seçenekleri belirlemeye odaklanmaktadır. Doğal ürünler, üretken bir terapötik ipucu kaynağıdır. Örneğin, doğal olarak elde edilenalkoloidlertıbbi bitkilerden huperzin A ve galantamin dahil olmak üzere, AD yönetiminde potansiyelleri keşfedilmiş ve araştırılmıştır [15]. Bugüne kadar, nörodejeneratif hastalıkların yönetiminde çok hedefli bir modülasyon yaklaşımına yönelik bir paradigma kayması, çoklu hedefleme özelliklerine sahip yaygın karakteristik doğal ürün türevleri ile uyumludur. Bu derleme, alkaloid bazlı kolinesteraz inhibitörleri hakkında son literatür hakkında bir güncelleme sağlar ve bunların hayvan modellerinde in vivo etkinlikleri olup, bunların nörodejeneratif bozuklukla ilgili deneysel modellerde nöroproteksiyon, nöroinflamasyon, nörojenez, tau patolojisi ve amiloid- mekanizmalarını vurgulamaktadır. beta birikimi. İlaç geliştirmedeki engellerden biri, ilaca benzer özellikleri içerir. Bu nedenle, alkaloid bazlı bileşiklerin fizikokimyasal özelliklerinin bir analizi de yapılır.

2. Doğal Ürün Türevli Alkaloitlerin Kolinesteraz İnhibitör Potansiyeli

Acetylcholinesterase enzyme (AChE) is predominantly found in the cholinergic synapses while butyrylcholinesterase enzyme (BuChE) is a non-substrate-specific enzyme that can be found throughout the body including in glial cells. Low levels of AChE and high levels of BuChE have been reported as AD progress [16]. Acetylcholinesterase enzyme inhibitors (AChEi) including galanthamine (1) and donepezil are drugs that have been approved by the Food and Drug Agency (FDA) to manage AD. Archie is used to enhance acetylcholine (ACh), a neurotransmitter responsible for cognition at a homeostatic level in the brain [17–19]. Therefore, chemical compounds able to inhibit the AChE enzyme or both AChE and BuChE enzymes (dual inhibitor) are considered essential in the management of the progression of AD. In this review, all naturally occurring alkaloids are categorized by their inhibitory activities in IC50. By definition, IC50 is a measure of the potency that one chemical substance has to inhibit a specific biological or biochemical function [11]. The inhibition in three categories (IC50 ≤ 10 µM, 10–50 µM, and >50 uM) Şekil 1'de sunulmuştur.

İndol alkaloitleri, beş üyeli nitrojen içeren bir pirol halkasına kaynaşmış altı üyeli bir aromatik halka içeren heterojen sekonder metabolitlerin en büyük grubu arasındadır [36]. Rauvolfiya refleksinden gelen rescinnaminin (3) bir ikili kolinesteraz inhibitörü (IC50 AChE 11.01 µM; BuChE 8.06 µM) gibi davrandığı rapor edilmiştir [20]. Monoterpen indol alkaloidleri, bir indol parçasına kaynaşmış bir monoterpenoid birimi içeren moleküller olarak tanınır. Nauclea Officinalis'ten izole edilen monoterpen indol alkaloidleri (4-6) seçici BuChE inhibe edici aktiviteye sahiptir. Augustine (4), nüklein (5) ve Augustine (6), 1.03 ila 7.70 uM aralığında bir IC50 ile BuChE'yi inhibe ettiği kanıtlanmıştır. Kinetik bir çalışma, 4'ün Ki değeri 6.12 µM olan karma modlu bir inhibitör olduğunu göstermiştir [21].

-karbolin alkaloidleri, orto pozisyonunda piridinin C-3 ve C-4 ile kaynaşmış bir indol parçası oluşturur [37]. Peganum harmala'nın on karbolin alkaloidinin (7-16), IC50 değerleriyle kolinesteraz inhibitör aktivitelerine sahip olduğu bildirildi<10 µm.="" harmol="" (8),="" harmalol="" (13),="" deoxyvasicine="" (15),="" and="" vaccine="" (16)="" were="" potent="" inhibitors="" of="" buche="" with="" ic50="" values="" in="" the="" range="" of="" 0.04="" to="" 0.66="" µm.="" however,="" harmine="" was="" the="" most="" potent="" ache="" inhibitor="" with="" an="" ic50="" of="" 1.21="" µm="" among="" the="" indole="" alkaloids.="" a="" preliminary="" structure-activity="" relationship="" study="" showed="" that="" multiple="" substitutions="" at="" the="" indole="" ring="" and="" saturation="" of="" the="" pyridine="" ring="" were="" essential="" for="" the="" cholinesterase="" inhibition="" effects="" [22].="" 3-ethyl-12-methoxy-β-="" carboline="" (17)="" and="" 6,12-dimethoxy-3-ethyl-β-carboline="" (18)="" from="" picrasma="" quassinoids="" were="" reported="" as="" possessing="" ache="" inhibitory="" properties="">

Şekil 2, toplam 55 alkaloidin AChEi olarak tanımlandığını, 24 alkaloidin ise BuChEi olarak tanımlandığını ortaya koymaktadır. Esasen, 16 alkaloidin, 10 uM'ye eşit veya daha düşük IC50 değerlerinde her iki enzimi de inhibe ettiği gösterilmiştir. Tablo 1, bitkilerden izole edilen biyoaktif alkaloidleri, kolinesteraz inhibitör aktiviteleri ile birlikte listelerken, Şekil 3 ve 4, alkaloidlerin 1-61 kimyasal yapılarını göstermektedir.

İzokinolin alkaloidleri, doğal kaynaklardan elde edilen çeşitli alkaloid sınıfları arasındadır. Temel iskeletleri olarak bir izokinolin veya bir tetrahidroizokinolin halkasından oluşurlar [38]. Tavsiye (19), hem AChE hem de BuChE için 0.15 ve 0.88 µM IC50 değerleri ile en güçlü ikili kolinesteraz inhibitörüydü. Ranitidin (20), sırasıyla 0.65 µM ve 5.73 µM IC50 değerleri ile hem AChE hem de BuChE'ye karşı 19'dan daha zayıf inhibitör aktiviteye sahipti [24]. Moleküler yapıların karşılaştırılmasıyla, 19 ve 20 pozisyonlarının 7'sinde bir üçüncül amin bulunur ve hem AChE hem de BuChE'ye yüksek bağlanma afinitesinden sorumludur. Berberin klorür (21) ve 13-alkilberberin (22) 19 ve 20'den biraz farklı moleküler yapılara sahip Coptis Chinensis'in rizomlarından türetilen diğer iki izokinolin alkaloiddir. Hem 21 hem de 22'nin BuChE'ye karşı IC50 > 10 uM olmasına rağmen, 21, IC50 değeri 1,1 µM olan AChE'ye karşı, IC50 değeri 5,6 µM olan 22'ye göre daha güçlü bir inhibitör aktivite sergilemiştir [25]. Her iki alkaloidin moleküler yapıları karşılaştırıldığında, 22 yapısında 13. pozisyonda bir metil grubunun varlığının hem AChE hem de BuChE'ye karşı azaltılmış inhibitör aktiviteden sorumlu olduğu görülmektedir.

Aporfin ve proaporfin alkaloidleri doğal olarak izokinolinden türetilir. Genellikle Annonaceae, Lauraceae, Magnoliaceae ve Menispermaceae familyalarında yayılış gösterirler [39]. Stephania Epigaea [26], Illigera aromatic [40], Beilschmiedia sp. [27], Monimiaceae ve Magnoliaceae [41], bir dizi aporfin ve proaporfin tipi alkaloidin izolasyonu ile sonuçlanmıştır. Bunlar arasında epinastin B (23), dehidrodicentrin (24), romaine (25), doktrin (26), 2-hidroksi-9-metoksiaporfin (27), laurotetanin (28), liriodenin (29), oreobeilin (30), boldin (31), secoboldin (32), asimilobin (33), (S)-3-metoksinordomestisin (34) ve izoboldin (35)'in önemli AChE inhibitör aktiviteleri sergilediği bildirilmiştir [26,27] .

Amaryllidaceae alkaloidleri olarak da bilinen likorin tipi alkaloidler, büyük bir izokinolin alkaloid grubuna aittir. Amaryllidaceae familyasının bitkilerinde bulunurlar. Birçok likorin tipi alkaloid izole edilmiştir, çoğunlukla soğan ve yapraklarda yoğunlaşmıştır [42]. Galantin (36) ve Zephyranthes carinata'dan 1 dahil olmak üzere likorin tipi alkaloidler, AChE'ye karşı AChE inhibe edici aktivite gösterdi [28].

Steroidal alkaloidler, bitkilerden elde edilen önemli alkaloid sınıflarından biridir. Halkada veya yan zincirde bulunan bir nitrojen atomu ile temel bir steroidal omurgaya sahiptirler [43]. Holarrhena pubescens kaynaklı üç yeni steroidal alkaloid Mokluangins A–C'nin (37-39) 1.44 ila 4.09 µM aralığında AChE inhibitör aktivitesine sahip olduğu rapor edilmiştir, burada C-3'deki ikame AChE modülasyonunda anahtar görevi görür inhibitör aktivite [29]. İzosteroidal alkaloidler, C-27 iskelet tipine ait temsili steroidal alkaloidlerden biridir [43]. Potansiyel kolinesteraz inhibitör aktiviteleri için Fritillaria walujewii'den yedi izosteroidal alkaloid (40-46) rapor edilmiştir. Tortifoline (40), Walujewine C (41), Sinpeinin A (42), Walujewine A (46) ve Walujewine E'nin (44) AChE'yi 5,8 ila 9,8 µM IC50 değerleriyle inhibe ettiği, tüm bileşiklerin ise inhibe ettiği kanıtlanmıştır. BuChE 46 dışında 10 µM'den azdır. 43, 45 ve 46 dışında tüm bileşiklerin ikili kolinesteraz inhibitörleri olduğu sonucuna varılabilir [30].

satılık cistanche

Piroloiminokinon alkaloidleri esas olarak deniz organizmalarından izole edilir. Önemli piroloiminokinon alkaloidleri arasında diskorhabdinler, prognoz, bazilyonlar, wakayinler ve Camarones bulunur [44]. Antarctic Latrunculia sp.'den Discorhabdins G (47) ve B (48). süngerler, sırasıyla 1.3 ve 5.7 µM IC50 değerleri ile AChE inhibe edici aktiviteler sergiledi [31]. Lycopodium alkaloidleri, Lycopodiaceae bitkilerinde yaygın olarak bulunan ilginç bir alkaloid sınıfıdır. Kinolizin, piridin ve -piridon tipi alkaloidlerden oluşurlar [45]. Genellikle, likopodium alkaloidleri C16 iskeletlerinden oluşur ve bazen dimer olarak var olduklarında C32 iskeletlerine sahiptirler [46]. İzole likopodium alkaloidleri arasında huperzin A (2), AD tedavisinde iyi bilinen bir AChE inhibitörü olarak ortaya çıkmıştır [45]. Squarrose A (49) ve pirolhuperzin A (50), bilinen 2 ve 12-epilikodolin N-oksit (51) ile birlikte Huperzia squarrosa'dan yeni Lycopodium alkaloidleri olarak izole edildi. Bulgulara göre, huperzin A AChE inhibisyonu için en güçlüydü ve bunu 49, 50 ve 51 izledi [32]. Aynı bitki üzerinde yapılan bir devam çalışmasında, H. squarrosa AChE inhibitör potansiyeline sahip yeni bir lycopodium alkaloid olarak 52 vermiştir [33].

Likodin tipi alkaloidler, likopodium alkaloidleri sınıfına aittir. Genellikle bir piridin veya piridin halkası olmak üzere dört halkadan oluşurlar. Likodin tipi alkaloitlerin AChE inhibitör aktivite gösterdiği bilinmektedir [46]. Lycopodiastrum casuarinoides kaynaklı Lycocasuarinin D (53), Lycocasuarinin A (54), N-demethylhuperzinin (55) ve huperzine C (56) dahil olmak üzere likodin tipi alkaloidler üzerinde yapılan bir çalışmada, bunların kolinesteraz inhibisyon potansiyelleri için rapor edilmiştir. 50 ve 51, 0.22 ve 4.74 µM IC50 değerleri ile AChE inhibisyonu gösterirken, 55 ve 56 ikili kolinesteraz inhibitörleriydi [34].

Flavoalkaloidler, pirolidinon, pirrolidin, indol, piperidin, piperidin ve aminoglikozit gibi nitrojen içeren halkalarla kaynaşmış flavonoidlerin temel bir iskeletinden oluşan benzersiz bir alkaloid alt sınıfıdır [47]. Bugüne kadar, 100'den az doğal olarak oluşan lezzet keloidleri rapor edilmiştir, ancak bunların geniş bir biyoaktivite yelpazesi gösterdikleri bulunmuştur [35,47]. Yakın tarihli bir çalışmada, Camellia sinensis'ten beş yeni sinnamoillenmiş lezzet keloid izole edildi. Bileşikler 3-O-sinamoylepikateşin (57), (−)-6-(5"' S) olarak biliniyordu.

N-etil-2-pirrolidinon-3-O-sinnamoylepikateşin (58), (−)-6-(5"'R)-N-etil-2-pirolidinon{{1{{ 30}}}} O-sinamoylepikateşin (59), (−)-8-(5"'S)-N-etil-2-pirolidinon-3-O-sinnamoylepikateşin (60) ve (− )-8-(5"'R)-N-etil-2-pirrolidinon-3-O-sinnamoylepikateşin (61). Tüm aroma keloidleri, 0.126 ila 1.040 µM arasında değişen IC50 ile önemli AChE inhibe edici aktivite gösterdi Çalışma, AChE inhibitör aktivitelerinde C-6 pozisyonunun çok önemli olduğunu ortaya koydu [35].

3. Nörodejeneratif Hastalıklarda Alkaloitlerin Çok Hedefli Modülasyon Potansiyeli

Onlarca yıldır araştırmacılar, örneğin Alzheimer hastalığı için amiloid hipotezine dayanan sekretaz inhibitörlerinin keşfi gibi nörodejeneratif hastalıkların ilerlemesini potansiyel olarak değiştirebilecek ilaçları keşfetmeye odaklandılar. Ne yazık ki, adayların hiçbiri klinik denemelerin son aşamasında hastalığın ilerlemesini iyileştiren umut verici sonuçlar göstermedi. Kolinesteraz inhibitörleri, hastalığın yönetimi için ilaçlar olarak kalmıştır ve daha ileri çalışmalar, kolinesteraz aktivitelerine ek olarak nörodejeneratif durumların yönetimi için alkaloitlerin potansiyelini araştırmak için harekete geçirilmiştir [48]. Bilişsel işlevi geliştirmeye yardımcı olan güçlü antikolinesteraz özelliklerine sahip olmasına rağmen, Tablo 1'deki potansiyel kolinesteraz inhibe edici aktivitelere sahip alkaloidler üzerinde bir araştırma yaptık ve bu alkaloidlerin birçok başka hedef üzerinde hareket etme potansiyelini bildiren birkaç çalışma derledik, bu bileşiklerin çok hedefli modülasyon potansiyeline genel bir bakış sağlamak. Bununla birlikte, daha az kolinesteraz inhibitör aktivitesine sahip bileşiklerin, nörodejeneratif hastalıklardaki diğer bazı hedefler için potansiyel olarak yararlı olmadığı göz ardı edilemez. Bu bölüm esas olarak Alzheimer hastalığı (AH) ve Parkinson hastalığı (PD) üzerine odaklanmaktadır. Bu alkaloitlerin etki ettiği mekanizmaların toplamı, nöroproteksiyon, nöroinflamasyon, nörojenez, amiloid-beta agregasyonu (A) ve tau hiperfosforilasyonunu içerir.

3.1. nöroproteksiyon

Nöroproteksiyon, nöronların kaybını ve ardından oksidatif stres, mitokondriyal disfonksiyon, protein agregasyonu, inflamasyon, eksitotoksisite ve hücre apoptozunda azalma dahil olmak üzere çeşitli yollar yoluyla nörodejeneratif hastalıkların ilerlemesini yavaşlatır [49].

Çeşitli çalışmalar harmane (7), harmol (8), harmin (9), harmalin (12) ve harmalol'ün (13) indol -karbolin sınıfına (Tablo 1) ait olduğunu ve nöronal hasara karşı nöroprotektif potansiyel sergilediğini göstermiştir. Bir In Vitro çalışması, 7'nin, azalmış hücre canlılığını azaltarak nöroblastom hücrelerinde H2O2-indüklenen toksisiteye karşı koruduğunu gösterdi [50]. Bu model, nörodejeneratif hastalık gelişiminde rol oynayan oksidatif stresin neden olduğu nöronal yaralanmalarla ilişkilidir.

12 kemirgenlerde titremeyi indüklemek için yaygın olarak kullanılır, 50 µM konsantrasyonda tek başına dopaminerjik PC12 hücreleri üzerinde olumsuz bir etki bulunmamıştır, aynı metaboliti harmalol 13 için de [51]. Sonuç, yalnızca 12 ve 13'te PC12 hücrelerine hiçbir toksisite uygulanmadığını gösteren diğer iki çalışma ile örtüşmektedir [52,53]. MPP plus, Parkinson hastalığında (PD) rol oynayan dopaminerjik nöronlar için bir nörotoksindir. 7'nin 1-Metil-4- fenilpiridinyum (MPP plus ) etkilerini baskılamadaki rolü, baskılanmış mitokondriyal transmembran potansiyeli (MMP), sitokrom c salınımı, kaspaz-3 aktivasyonu, reaktif oksijen türleri ( ROS) ve GSH seviyeleri In Vitro [51–53]. Dopamin oksidasyonu, nörodejenerasyona katkıda bulunan endojen nörotoksinleri oluşturmak için farklı basamakları başlatır [54,55]. 12 durumunda, beyin mitokondri Ex Vivo üzerinde uygulanan dopamin oksidasyonunun toksik etkilerini dengelediği gösterilmiştir. Bu, 12'nin tioredoksin redüktaz aktivitesini koruyarak ve tiyol oksidasyonunu ve dolayısıyla dopamin oksidasyon ürünü oluşumunu inhibe ederek antioksidan özelliklerine atfedilir [56]. Ek olarak, 9 ve 12, süperoksit dismutaz [57] ve glutatyon peroksidaz (GPx) gibi antioksidan enzimleri In Vitro'da yukarı regüle ederken, diğer çalışmalarda ROS yükselmesini ve tiyol oksidasyonunu azaltarak, nöroprotektif bir etki üretmek için gelişmiş bir antioksidan savunma mekanizmasına yol açtılar. [52,53,58,59].

Ek olarak, 9'u astrogliyal hücrelerde ve vücutta glutamat taşıyıcı-1 (GLT-1) protein seviyelerini ve GLT-1 ve glutamat aspartat taşıyıcısına (GLAST) bağımlı glutamat alımını düzenleyerek nöroprotektif etkiler göstermiştir. Amyotrofik lateral sklerozun transgenik bir fare modeli olan SOD1G93A farelerinin kortikal dokusu [60]. Bu glutamat taşıyıcıları, eksitatör bir nörotransmitter olan glutamatın hücre dışı düşük konsantrasyonunu korur ve bu sayede birikimi eksitotoksisiteye katkıda bulunur [61]. Ayrıca, yakın tarihli bir sistematik inceleme, 9'un hafızayı ve öğrenmeyi geliştirdiğini ve klinik öncesi deneysel modellerde hipokampus üzerinde nöroprotektif etkiler gösterdiğini gösterdi [62]. İddiaya göre GLT-1 upregülasyonu, ROS azalması, beyin kaynaklı nörotrofik faktör (BDNF) yükselmesi ile ilgiliydi ve anti-inflamatuar etkilere sahipti. PD bağlamında, 9, yakın zamanda -sinüklein In Vitro üzerindeki bozunma etkisi için araştırılmıştır. Ubikuitin-proteazom sistemi (UPS), proteazom proteolitik aktivitesi yoluyla -sinükleini ortadan kaldıran sistemlerden biridir ve 9'un protein kinaz A (PKA) fosforilasyonu yoluyla proteolitik aktiviteyi arttırdığı ve dolayısıyla UPS için -sinüklein klirensini arttırdığı gösterilmiştir [63, 64].

9'un bir metaboliti olan 13, daha önce bahsedilen çalışmaların sonuçlarına ilgi çekici bir bileşik olarak dahil edildi ve 13'ün oksidatif stres, MMP ve apoptozu In Vitro [51-53] modüle ederek nöroproteksiyon sağladığı bulundu. Bu bulgular, ROS ve tiyol oksidasyonunda azalma, GSH düzeylerinde artış ve MMP kaybında zayıflama gösterdi [51-53,65]. 13'ün hücre ölümüne aracılık eden iki süreç olan sitokrom c ve kaspaz-3 aktivasyonu üzerindeki etkisi de araştırıldı ve 13'ün her ikisini de azalttığı [51,66].

Bir izokinolin alkaloidi olan berberin klorürün (21) (Tablo 1) nörodejenerasyon üzerindeki koruyucu etkileri üzerine yapılan araştırmalar son yıllarda popülerlik kazanmaktadır. Bir in vivo çalışmada, farelerde PD'yi modelleyen 6-hidroksidopamin (6-OHDA) ile uyarılmış nörotoksisite üzerinde 21'in ön tedavisi, apomorfin kaynaklı rotasyonları ve Nissl lekeli substantia nigra pars compacta kaybını önemli ölçüde azalttı ( SNpc) nöronları ve SNpc dopaminerjik nöronlarda tirozin hidroksilaz immünoreaktivitesinin azalmasını hafifletti [67]. Bir In Vitro çalışması, 21'in Akt/GSK, Akt/GSK3 /Nrf-2 ve PI3K/Akt/Nrf2 sinyal kaskadlarını aktive ederek, p-CREB'yi artırarak, NGF'yi uyararak ve oksidatif stres aracılı nörodejenerasyona karşı nöroprotektif özellikler uyguladığını gösterdi. BDNF salınımı, NF-κB nükleer translokasyonunun azaltılması, TNF , COX-2, IL-1B, NF-κB'nin baskılanması ve kaspaz-1, kaspaz-3, Bax, Bcl-2 yükselmesi, siklin D1 ve p53 [68]. Önceki çalışmalarla aynı sonuçların yanı sıra, Deng ve ekibi, ROS üretiminin 21 azaldığını ve In Vitro'da MMP azalmasını tersine çevirdiğini bildirdi ve rotenon kaynaklı nörotoksisitede 21'in PI3K/Akt yolu aktivasyonu tarafından uygulanan nöroprotektif etki önerdi [69]. 21'in ayrıca PC-12 hücrelerini PI3K/AKT/mTOR aracılı mitofajiyle oksidatif hasardan koruduğu kanıtlanmıştır [70]. Wallerian benzeri dejenerasyon (WLD), akson distalinden yaralanma bölgesine uzanan bir aksonal dejenerasyondur ve nörodejeneratif hastalıklarda ortaya çıkar [71]. İlginç bir şekilde, 21'in, WLD için önemli bir aracı olan ve yüzde 70'lik bir birincil taramadan yüzde inhibisyon sağlayan, Steril Alfa ve Toll İnterlökin Reseptör Motifi içeren protein 1'in (SARM1) rekabetçi olmayan bir inhibitörü olduğu bulunmuştur [72] . Aynı çalışma, bulguları doğrulamak için bakteri ve Expi293 hücrelerinin SAM1−2TIR alanı üzerindeki inhibisyon aktivitesini daha da test etti ve sırasıyla 110 ± 10 µM ve 77 ± 5 µM IC50 değerleri elde etti. Ek olarak 21, bir PD modeline karşı koruyucu olduğu bulunan bir protein olan CYP2J2'yi Peroksizom proliferatörle aktive olan reseptör alfa (PPAR- ) In Vitro'nun stimülasyonu yoluyla arttırdı [73]. Bir in vivo çalışma, 21'in aminolevulinik asit dehidrataz (δ-ALA-D) inhibisyonunu önlediğini ve streptozotosin kaynaklı demansta NTPDase, ADP, 50 -nükleotidaz ve ADA aktivite kaybını azaltarak purinerjik iletim üzerindeki hasarı önlediğini göstermiştir. bu iletimin düzenlenmesi, bellek işlemede rol oynar [74,75]. Bununla birlikte, belirli nöronal hücrelerdeki δ-ALA-D aktivitesi, mevcut sınırlı çalışmalar nedeniyle daha fazla araştırmayı garanti eder.

satılık cistanche

Glial yarı kanal aktivitesinin uyarılması, daha sonra nöronal ölümü indükleyen ATP ve glutamat salınımını arttırırken, Retikülon-3 (RTN3) AD beyninde toplanır ve distrofik nöritlerin gelişimini kolaylaştırır [76,77]. Bir aporfin alkaloidi (Tablo 1) olan Boldine'nin (31), boşluk kavşak iletişimini etkilemeden astroglial hemichannel aktivitesini azalttığı, ATP ve glutamat salınımını azalttığı bildirildi. Bir in vivo çalışma, 31'in nöronal oksidatif strese ve amiloid-beta (A) plaklarını çevreleyen nöritik distrofilere karşı korunduğunu gösterdi; burada APP/PS1 farelerinde daha küçük ve daha az RTN3 immünoreaktif distrofik nörit (RIDN'ler) gözlendi [78]. Başka bir çalışmada, 31 ayrışmış H2O2, dopamin oksidasyonuyla demir ve EDTA aracılı deoksiriboz bozunmasını ve melanin oluşumunu azalttı, MMP kaybını azalttı, sitokrom C yükselmesini, tioredoksin redüktaz aktivitesinin kaybını, dopamin tarafından indüklenen tiyol oksidasyonunu inhibe etti ve {{15} }OHDA ve PC-12 hücre canlılığı kaybı ve dopamin tarafından indüklenen kaspaz-3 aktivasyonu [79].

Bir in vivo çalışma, bir -karbolin alkaloidi olan deoksivasisinin (15), 15 mg kg-1 dozunda nöronları oksidatif stresin neden olduğu hasardan koruduğunu göstermiştir (Tablo 1). Çalışma, glutatyon peroksidaz (GPx) miktarının, 15'in uygulanmasıyla önemli ölçüde arttığını ve ardından beyindeki antioksidan savunma mekanizmasını güçlendirdiğini gösterdi. Ek olarak, 15, beyin kaynaklı nörotrofik faktörü (BDNF) 45 mg kg-1'de yükselterek sinirlerin hayatta kalmasını arttırma yeteneğine sahipti [80].

3.2. nöroinflamasyon

Yıllar içinde nörodejeneratif durumların patolojisini araştırmak için çalışmalar yapılmış ve altta yatan mekanizmalardan birinin nöroinflamasyon olduğu bulunmuştur. Bağışıklık hücresi işlevindeki bir kusur, merkezi sinir sisteminde (CNS) iltihaplanmayı başlatabilir ve sonunda sinir hasarına neden olabilir. Özellikle akut inflamasyon beyne faydalı olabilir. Tersine, kronik inflamasyon, tau proteini ve amiloid-beta (A) agregasyonunun hiperfosforilasyonunu teşvik ederek beyne zarar verebilir. Bu mekanizmalar, interlökin 1 (IL-1) ve interlökin 6 (IL-6) gibi proinflamatuar aracılar tarafından aktive edilebilir. Enflamasyon, AD ve PD gibi nörodejeneratif durumların patolojisi ile yakından ilişkili olduğundan, nöroinflamasyonu önleyebilen alkaloidler, nöroinflamasyonu iyileştirebilir ve aynı zamanda koşulları yönetmeye yardımcı olabilir [81-83].

9 ve 12'nin nöroinflamasyona karşı koyma yeteneğine sahip olduğu vurgulandı. Tümör nekroz faktör-alfa (TNF- ) ve miyeloperoksidaz (MPO) gibi inflamatuar sitokinlerin ve nitrik oksit (NO) gibi aracıların üretimini azaltabildikleri öne sürülmüştür. Özellikle 7 ve 12, MPO'ya karşı sırasıyla 0.08 µM ve 0.26 µM IC50 gösterdi, bu nedenle nöroinflamasyonu önlemek için bir ajan olarak dahil olma potansiyellerini kanıtladı [58,59]. Ek olarak, bir in vivo çalışma, 9'un kimyasal olarak indüklenen diyabetik sıçanlarda 20 mg kg-1'de bilişsel eksiklikleri önemli ölçüde iyileştirdiğini öne sürdü. Çalışma, diabetes mellitusun bilişsel işlev bozukluğu ile yakından ilişkili olduğunu ve her ikisinin de iltihaplanma ile ilişkili olduğunu öne sürdü. Diyabetik sıçanlara 9 verildiğinde, NLRP3 inflamatuar aktivitesi baskılandı, bu da beyin kaynaklı nörotrofik faktörün (BDNF) ekspresyonunda bir artışa yol açtı ve ardından bilişsel yeteneği geliştirdi [84]. Ek olarak, bir in vivo çalışma, 9'un oral alımdan hemen sonra kan-beyin bariyerini (BBB) ​​geçebildiğini bildirdi [85].

Başka bir -karbolin alkaloidi 15, nöroinflamasyonu çeşitli yollarla inhibe edebilmiştir. Bir in vivo çalışma, 15'in 5 1, 15 ve 45 mg kg-1 konsantrasyonlarında -GABA miktarını artırabildiğini ve beyindeki glutamat miktarını azaltabildiğini kanıtlamıştı. -GABA, TNF- salınımını engelleyerek astrositler ve mikroglia tarafından başlatılan nöroinflamasyonu inhibe etme görevi gören hayati bir nörotransmiterdir. Ayrıca, iltihaplanmayı teşvik eden bir sitokin olan TNF- üretimi de, 5-45 mg kg-1 konsantrasyonlarda 15 ile tedavi edildiğinde konsantrasyona bağlı bir düzende önemli ölçüde aşağı regüle edildi [80].

21, AD koşullarını iyileştirmek için birden fazla hedefe etki eder. 21'in etki mekanizmalarından biri, nöroinflamasyonu [86] azaltmaktır. Örneğin, bir in vivo çalışma, COX-2, IL-12, IL-6, IL-1 ve TNF- dahil proinflamatuar mediatörlerde azalma olduğunu bildirdi. 21'in AD sıçan beyninde uygulanması [87]. Ayrıca, bir in vivo çalışma, 21'in 50 mg kg-1'de p65 alt parça ekspresyonunu ve fosforilasyonunu engellediğini bildirdi. p65, inflamatuar protein üretimini modüle etmede hayati olan NF-κB heterodimerinin bir alt parçasıdır [88]. Ek olarak, bir in vivo çalışma ayrıca 21'in IL-6, TNF ve p38 MAPK sinyal kaskadlarını baskılayarak nöroinflamasyonu önleyebildiğini bildirmiştir [89].

3.3. nörogenez

Yetişkin nörojenezi, bir insanın yaşamı boyunca nöronlar üretmek için hipokampusun subgranüler bölgesinde (SGZ) ve subventriküler bölgesinde (SVZ) meydana gelen bir süreçtir. Yetişkin nörogenezindeki bir kusur, potansiyel olarak Alzheimer hastalığı (AH), Parkinson hastalığı (PD) ve Huntington hastalığı (HD) gibi nörodejeneratif durumlara neden olabilir [90]. Örneğin, bir in vivo çalışma, erişkin nörogenez bozukluğunun, nörotoksik nörofibriler yumaklar ve A plaklarının oluşumundan önce bile erken AD hastalığı evresinde başlamış olabileceğini bildirmiştir [91,92].

Bir In Vitro çalışması, 8, 9 ve 12'nin SGZ ve SVZ'den kültürlenen progenitör hücreler üzerinde test edildiğinde başarılı bir şekilde nörojenezi indüklediğini ileri sürdü. Ayrıca insan vücudundaki 9'un metabolizması ana ürün olarak 8'i üretti. Bu -karbolin alkaloidleri ayrıca nöronal hücre uzmanlaşmasını indükleyebiliyordu ve bu, MAP-2 ve Tuj-1 ifadesinin varlığıyla kanıtlandı. Çalışma, bu -karbolin alkaloitlerinin nörojenez potansiyelinin, monoamin oksidaz [70] ve DYRK1A'ya [93] karşı inhibe edici aktivitelerine atfedildiğini öne sürdü.

Aporfin alkaloitlerinin (Tablo 1) PC-12 hücreleri üzerindeki nörogenez potansiyelini araştıran bir In Vitro çalışması, asimilobinin (33) PC-12 hücrelerinde nörit büyümesini önemli ölçüde uyardığını, ancak bunun üzerinde belirgin bir etkisi olmadığını gösterdi. Hücre bölünmesi ve uzmanlaşması için gerekli olan proteinleri kodlayan mRNA ifadesi. Buna ek olarak, çalışma ayrıca 33'ün kan-beyin bariyerini (BBB) ​​yüksek oranda geçirebildiğini ve bu da onu nörodejeneratif durumların yönetimi için potansiyel bir ilaç adayı haline getirdiğini bildirdi [94].

3.4. Amiloid Beta'nın Toplanması

Amiloid beta (A ), amiloid öncü proteinin (APP) -sekretaz ve -sekretaz tarafından enzimatik olarak parçalanmasından kaynaklanan bir üründür ve A'nın AD gelişiminde rol oynadığı ileri sürülmektedir. A, çoğunlukla 40-42 amino asitten oluşan ve nörotoksik A plakları oluşturmak üzere agregasyona duyarlı bir peptittir. Beyinde bir kez A plakları biriktiğinde, anormal sinaptik ve nöronal aktiviteler gelişecek, beyne zarar verecek ve bilişsel eksiklikler ve kademeli hafıza kaybı gibi semptomlar üretecektir [95,96].

Bu nedenle, A'nın kümelenmesini önlemek, AD'nin ilerlemesini geciktirmeye yardımcı olabilir. Bitki kaynaklı alkaloitler tarafından sergilenen antikolinesteraz aktivitesinin yanı sıra, bazıları A agregasyonunu inhibe etme yeteneğine sahiptir. Tavsiye (19) ve nizatidin (20) izokinolin alkaloidlerdir (Tablo 1) ve A'nın oligomerizasyonunu inhibe etme kabiliyetine sahiptirler.

Bir In Vitro çalışması, sırasıyla 5,56 ve 1,89 uM IC50 değerlerinden A'ya doğru görüldüğü gibi, 19 ve 20'nin A agregasyonuna karşı orta yoğunlukta baskılama gösterdiğini bildirdi. Aslında, hem 19 hem de 20'nin, nörodejeneratif koşullarda yer alan çoklu hedeflere karşı en önemli inhibisyon aktivitesine sahip olduğu ve Zanthoxylum Rididum'dan ekstrakte edilen diğer izokinolin alkaloidleri ile karşılaştırıldığında benzer moleküler yapılara sahip oldukları da öne sürülmüştür. Bu nedenle, çok hedefli aktiviteleriyle ilişkili moleküler yapı iskelesinin araştırılması teşvik edilir [24]. Ek olarak, 21 üzerinde yıllarca çalışılmış ve bir inceleme bunun ERK1/2 ve mitojenle aktive olan protein kinaz (MAPK) sinyal kaskadlarını engellediğini ve sonuç olarak -sekretazı-1 (BACE-1) deaktive ettiğini bildirmiştir. azalan A nesli [86]. Aslında 21, ağızdan tüketildikten sonra etkinliğini ve güvenliğini araştıran çalışmalar kabul edilebilir sonuçlar bildirdiğinden, Çin'de ağızdan tüketilen tezgah üstü bir ürün olarak pazarlanmaktadır. 1 ve 21 ile karşılaştırılabilir olan antikolinesteraz aktivitesinin yanı sıra, A oluşumunu azaltarak A agregasyonunu azaltma yeteneğine de sahipti. Bir in vivo çalışma, 21'in bir AD beyninde -sekretaz aktivitesini önemli ölçüde inhibe edebildiğini ve sonuç olarak A oluşumunu yüzde 40'a kadar azalttığını ve AD semptomlarını iyileştirdiğini bildirdi. -sekretaz'a karşı baskılayıcı etkinin yanı sıra, başka bir in vivo çalışma, 21'in A 42'nin stabilitesini, morfolojisini ve çözünürlüğünü değiştirerek A 42 agregasyonunu bozmak için A 42'nin nörotoksik potansiyelini azaltan A 40 aktivitesini artırdığını bildirdi [87,97]. Bu ifade, 50 ve 100 mg/kg/gün konsantrasyonlarında 21'in Pen-2, Aph-1 ve PS1 -sekretaz kısımlarını aşağı regüle edebildiğini iddia eden bir in vivo çalışma tarafından daha da desteklenmektedir. ve -sekretaz, sonuç olarak A üretimini bastırır. Ek olarak, 21'in aynı konsantrasyonlarda -sekretaz aktivitesini önemli ölçüde arttırdığı gösterilmiştir [98]. Bir In Vitro çalışması ayrıca 21'in A'nın oligomerizasyonunu ve fibril oluşumunu inhibe edebildiğini ileri sürdü [99].

3.5. Tau Hiperfosforilasyon

Tau proteini (τ), nöronal mikrotübüllerin stabilize edilmesinde ve dolayısıyla bir nöronun yapısını ve besinlerin hücre içinde taşınmasını desteklemede hayati bir rol oynar. Çift özgüllük tirozin fosforilasyonu ile düzenlenmiş kinaz 1A (DYRK1A), glikojen sentaz kinaz-3 (GSK-3 ), Ca2 artı /kalmodulin ile aktifleştirilmiş protein kinaz II ve sikline bağımlı kinazı içeren kinazlar-5 (Cdk5) tau hiperfosforilasyonunu indükleyebilir. Tau proteininin hiperfosforilasyonu, fosforile edilmiş tau proteinlerinin, eşleştirilmiş sarmal filament tau'nun nörofibriler yumaklarını oluşturmak üzere kümelenmesine yol açar. Sonuç olarak, artık bir nöron içindeki mikrotübülleri desteklemezler ve sonunda nöronal apoptoza ve dolayısıyla nörodejenerasyona yol açarlar [100].

9'un DYRK1A'ya karşı önleyici aktivitelere sahip olduğu ve bunun da tau proteini hiperfosforilasyonunu engellediği bulundu. 9'un yaklaşık 80 nM IC50 ile güçlü bir DYRK1A inhibitörü olduğu bir In Vitro çalışmasıyla kanıtlanmıştır. 9, DYRK1A'yı deaktive etti, dolayısıyla serin 396 üzerindeki tau fosforilasyonunu baskıladı, ardından tau proteininin üç fosforile edilmiş formunun hepsini azalttı. Harmine (9) fosforile tau miktarını azaltarak tau'nun bir nörondaki mikrotübülleri destekleme işlevini koruyarak nöron ölümünü önledi. Bununla birlikte, aşırı tau proteini tükenmesi nedeniyle 9'un 8 µM'nin üzerindeki konsantrasyonlarda nörotoksik olabileceği bildirilmiştir [100].

9'un yanı sıra 21, tau proteininin hiperfosforilasyonunu da engelleyebildi. 21'in tau hiperfosforilasyonunu azaltmak için gerçek mekanizması üzerinde daha fazla araştırma yapılması gerekmesine rağmen, iki In Vitro çalışması, 21'in, 20 ve 25 µg mL-1 konsantrasyonlarında kalikülin A tarafından uyarılan tau proteininin hiperfosforilasyonunu önleyebildiğini göstermiştir. GSK-3 aktivitesini azaltarak ve protein fosfataz 2A'nın aktivitesini yükselterek. Ek olarak, tau fosforilasyonunun tersine çevrilmesi, Ser262'de [86,101,102] 21 tarafından indüklendi. Bir in vivo çalışma ayrıca 21'in antioksidan özelliklerinin bir AD beyninde tau proteininin aşırı ekspresyonunu ve tau hiperfosforilasyonunu inhibe etmeye yardımcı olabileceğini bildirdi [87].

4. Alkaloitlerin Fizikokimyasal Analizi

Şekil 5, bu incelemeye dahil edilen alkaloitlerin fizikokimyasal özelliklerinin analizini göstermektedir. Bileşiklerin çoğunun moleküler ağırlığı 500 Da'nın altındaydı. Daha yüksek moleküler ağırlıklı bileşikler, 44, 45 ve aroma alkaloidlerini (58-61) içeriyordu. Hidrojen bağı bağışı, dönebilen bağlar ve topolojik polar yüzey alanı (TPSA) için Lipinski kuralını yalnızca bir bileşik ihlal eder. İlginç bir şekilde, bu incelemeye dahil edilen tüm bileşikler, Log P ve hidrojen bağı alıcısı (HBA) için Lipinski kuralını izledi. 32 bileşik yüksek çözünürlüğe, 15 bileşik orta çözünürlüğe ve 7 bileşik düşük çözünürlüğe sahip olarak sınıflandırıldı.

5. Yöntem

2011–2020 yılları arasında literatürde kolinesteraz inhibitör aktiviteleri için bildirilen tüm doğal olarak türetilmiş alkaloidler bu çalışmaya dahil edildi. Sentetik alkaloidler, gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi (GC-MS) ve sıvı kromatografisi-kütle spektrometrisi LCMS ile geçici olarak tanımlanan alkaloidler, kolinesteraz inhibitörleri için rapor edilen bu çalışmada hariç tutulmuştur. Şekil 1, IC50'si 10 uM'den az veya buna eşit olan AChE ve BuChE inhibitörlerinin yüzde 38'inin ve yüzde 18.7'sinin bu incelemeye dahil edildiğini göstermektedir. Sonuç olarak, 1 ve 2 hariç IC50'si 10 µM'ye eşit veya daha az olan 61 bileşik metne dahil edildi ve amiloid-beta inhibitörü, tau hiperfosforilasyonu inhibitörü, nöro-enflamasyon, nörojenez ve nöroprotektif dahil olmak üzere hastalık değiştirme potansiyeli için incelemeye dahil edildi. Etkileri. 59 alkaloidin (galantamin ve huperzin A hariç) fizikokimyasal özellikleri tahmin edilmiştir (Instant JChem 17.10.0, 2020 ChemAxon Ltd. ).

6. Sonuçlar

Artan kanıtlar, doğal olarak türetilmiş alkaloitlerin nörodejeneratif hastalık modülatörleri olarak önemini göstermiştir. Alkaloidler, AChE inhibitörlerinin ana kaynağı olmasına rağmen, önemli sayıda ikili kolinesteraz inhibitörü ve BuChE inhibitörü keşfedilmektedir. Bu derlemede belgelenen birkaç alkaloidin, nöronları nöroinflamasyon, oksidatif stres, eksitotoksisite, apoptoz, A birikimi ve tau fosforilasyonu gibi zararlı mekanizmalara karşı koruduğunu ve Alzheimer ve Parkinson hastalıklarının tedavisi için geliştirilebileceğini belirtmek ilginçtir. Spesifik olarak, 9 ve 21, bu hastalıkların ilerlemesinin yönetiminde potansiyel modülatörlerdir. Bununla birlikte, bu alkaloidlerin nörodejeneratif hastalıklarda kullanılacak dozajı belirsiz kalmıştır. Fizikokimyasal analiz, alkaloitlerin çoğunluğunun Lipinski'nin uyuşturucuya yatkınlık kurallarına uyduğunu ortaya çıkardı. Kan-beyin bariyeri, bileşiklerin beyne nüfuz etmesini koruyan önemli bir faktördür ve buna daha fazla dikkat gösterilmesini gerektirir. Anlaşılır bir şekilde, düşük ekstraksiyon verimi gibi doğal olarak türetilmiş bileşiklerin aksaklıkları, potansiyel adayların terapötik liderlere dönüşmesini durdurmuştur. Uygulanabilir terapötikler olarak kullanışlılıklarını geliştirmek için daha fazla geliştirmeye ihtiyaç vardır.