Cistanche Total Glikositlerin Adriamisin Tarafından İndüklenen Farelerin Miyokardiyal Toksisitesi Üzerindeki Koruyucu Etkisi

Daha fazla bilgi için:ali.ma@wecistanche.com

Yulia Yiming'

[Sincan Uygur Özerk Bölgesi Bilim ve Teknoloji Komisyonu Doğa Bilimleri Vakfı tarafından desteklenen proje (96814)]

[Yazarın profili, Eliya Yiming (1964-), kadın (Uygur), usta. Öğretim Görevlisi, Araştırma yönü: Kardiyovasküler farmakoloji. ],

Wang Xiaowen', Wang Xuefei', Heiliman Yilahong 2, Xie Yaoyun 2, Du Niansheng 3

(Sincan Tıp Üniversitesi|Farmakoloji Bölümü, Eczacılık Fakültesi, Elektron Mikroskopisi Anabilim Dalı, Temel Tıp Bilimleri Okulu, Doğal İlaçların Kimyası Anabilim Dalı, Eczacılık Fakültesi, Urumçi 830054, Xinjiang)

Soyut:koruyucu etkisini ve mekanizmasını araştırmakcistanche glikozitler(GC'ler) farelerde doksorubisin (Dox) kaynaklı miyokardiyal hasar üzerinde. Fang Xie: NIH farelerinde intraperitoneal Dox (17.5 mg/kg) enjeksiyonunun neden olduğu bir akut miyokardiyal hasar modeli, miyokardiyal süperoksit dismutazın (SOD) aktivitesini belirlemek için kullanıldı; selenyum-glutatyon peroksidaz (Se-GSH-Px) aktivitesi; malondialdehit (MDA), serum kreatin fosfokinaz (CPK) aktivitesi içerir. Elektron mikroskobu, kardiyomiyositlerin ultrastrüktürel değişikliklerini inceler. Sonuçlar: Dox'un intraperitoneal enjeksiyonundan 48 saat sonra farelerin miyokardında önemli hasara neden olabilir. Miyokardiyal SOD ve Se-GSH-Px aktivitesi azaldı, MDA içeriği arttı, serum CPK aktivitesi arttı ve miyokardiyal doku ultrastrüktür hasarı oluştu. cistanche glikozitler(62,5, 125.0, 2500,0 mg/kg)miyokardiyal SOD, Se-GSH-Px aktivitesini artırabilir. MDA içeriğini azaltın ve CPK salınımını azaltın. Miyokardiyal ultrastrüktür hasarını azaltın.Jie Uzun: Cistanche toplam glikozitlerdoksorubisinin neden olduğu miyokardiyal hasar üzerinde belirli bir koruyucu etkiye sahiptir. Mekanizması, miyokardiyal SOD ve Se-GSH-Px aktivitesini koruması, serbest radikalleri temizlemesi ve lipid peroksidasyonunu önlemesiyle ilişkili olabilir.

Anahtar Kelimeler: doksorubisin; cistanche'nin toplam glikoziti; kardiyotoksisite; lipid peroksidasyonu; kreatin kinaz; üst yapı

Doksorubisin (Dox), çeşitli malign tümörler üzerinde iyi bir etkiye sahip olan, ancak akut ve kronik miyokard toksisitesi nedeniyle Dox'un klinik pratikte geniş uygulamasını sınırlayan bir tür soğan antibiyotiğidir. Dox'un anti-tümör etkisinin DNA replikasyonu ve RNA sentezini etkilemek olduğu ve kardiyotoksisitesinin semi-adriamisin tarafından indüklenen lipid peroksidasyon hasarı ile ilişkili olduğu bilinmektedir. Bu nedenle, anti-tümör aktivitesini korurken Dox'un kardiyotoksisitesini antagonize etmek için serbest radikal süpürücüler ve antioksidanlar bulmak önemlidir. Toplamözleri cistancheçıkarılan aktif maddelerdircistanche. İlgili araştırmalar göstermiştir ki cistanche glikozitler fare dokuları üzerinde antioksidan etkileri vardır, cistanche glikozitlerlipofuscin içeriğini önemli ölçüde azaltabilir (3), cistanche glikozitlersıçan miyokard iskemisi üzerinde koruyucu etkileri vardır(3) ve cistanche glikozitleranti-lipid peroksidasyonu ve anti-radyasyon etkileri vardır. koruyucu etkisini ve mekanizmasını araştırmak cistanche glikozitlerfarelerde Dox kaynaklı miyokard hasarı üzerine.

Cistanche tubulosa faydaları ve yan etkileri ürünleri için tıklayın

1 Malzeme ve yöntemler

1.1 İlaçlar ve Reaktifler

cistanche glikozitler-den çıkarılırCistanche otukuzey Xinjiang'da ve ana bileşenler ekinezya, ergot etoksilatlar, vb.'dir (Xinjiang Tıp Üniversitesi, Eczacılık Fakültesi, Doğal Tıp Kimyası Bölümü tarafından sağlanır); tetra metoksi propan (TMP Sigma Company); Adriamisin (Dox, Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.); E Vitamini (Vit E, Şanghay Yan'an İlaç Fabrikası); diğer reaktifler yurt içinde üretilir.

1.2 Deneysel ekipman

721 tipi spektrofotometre (Shanghai No. 3 Analitik Alet Fabrikası); OLYMPUS mikroskobu (Japonya'da üretilmiştir); JEM-100CXII transmisyon elektron mikroskobu (Japonya'da üretilmiştir)? PHS-250 tipi asitlik ölçer (Shanghai Lei Manyetik Enstrüman Fabrikası).

1.3 Hayvan gruplaması ve yönetimi

NIH fareleri, Sincan Endemik Hastalıklar Enstitüsü Hayvan Deneysel Merkezi tarafından sağlanmaktadır. Tıbbi laboratuvar hayvanı sertifika numarası {{0}} No'dur. (24±2) g ağırlığında, yarı erkek ve yarı dişi 138 NIH faresi seçildi. Rastgele 6 gruba ayrıldı (her grupta 23): (1) kontrol grubu: normal salin (NS) 20 ml/kg; (2) Dox yaralanma grubu: NS 20 ml/kg; (3) Vit E grubu: Vit E 100 mg/kg; (4) GC'ler i grubu: GC'ler 62,5 mg/kg; (5) GC'ler i grubu: GC'ler 125.0 mg/kg; (6) GCS1 grubu: GC'ler 25.0 mg/kg, yukarıdaki grupların her biri günde bir kez intragastrik uygulama yoluyla verildi. Dox yaralanma grubu, Vit E grubu, GC'ler|grubu, GCs I grubu, GCs I grubu intraperitoneal olarak Dox 17.5 mg/kg NS ve GC'ler 48 saat süreyle enjekte edildikten sonra 4. gün, gözbebekleri alınıp kan alındı, serum hazırlandı ve hemen hayvanlar, kalbi çıkarmak için kurban edildi, NS ile durulandı, filtre kağıdı ile kurutuldu ve tartıldı. Sualtı banyosu koşullarında, NS ile miyokardiyal homojenat hazırlandı, 3 500 r/dak, 30 dakika santrifüjlendi ve süpernatant, biyokimyasal göstergeleri ölçmek için alındı. Her grupta 3 fare vardı ve kalpleri alınarak elektron mikroskobu örnekleri yapıldı.

1.4 Biyokimyasal göstergelerin belirlenmesi

Miyokardiyal süperoksit dismutaz (SOD) aktivitesini belirlemek için pirogallol otooksidasyon yöntemi kullanıldı; miyokardiyal selenyum-glutatyon peroksidaz (Se-GSH-Px) aktivitesini belirlemek için DTNB yöntemi kullanıldı Miyokardiyal lipid peroksidasyon ürünü malondialdehit (MDA) içeriğini belirlemek için TBA yöntemini kullanın; protein miktar tayini, serum kreatin fosfokinaz (CPK) aktivitesini belirlemek için CPK yöntemi olarak adlandırılan CBB-SDS yöntemini kullanır.

1.5 Miyokard dokusunun elektron mikroskobu

Kalbin apeksi yüzde 4 glutaraldehit ve yüzde 1 asitle sabitlendi, asetonla kurutuldu, Epon 812'ye gömüldü ve JEM-100CX I kurşun-uranyum elektron boyaması ile transmisyon elektron mikroskobu altında gözlemlendi.

1.6 İstatistiksel işleme

Tüm veriler Wang Shi tarafından temsil edilmektedir. Deneysel veriler varyans homojenliği için test edildikten sonra istatistiksel işleme için F testi ve q testi kullanılır. Denetim düzeyi a=0.05.

2 Sonuç

2.1 Etkisicistanche glikozitlerDox ile yaralanmış miyokardın biyokimyasal indeksleri Tablo 1'de gösterilmiştir.

2. 1- 1 Etkisicistanche glikozitlerDox hasarlı miyokardın SOD aktivitesi üzerine.

Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, Dox yaralanma grubu miyokardiyal SOD aktivitesini yüzde 41,1 oranında azalttı (PV0,01). Dox yaralanma grubuyla karşılaştırıldığında, yüzde 30,9, yüzde 33,2, yüzde 36,5 ve yüzde 34,9 arttı (tüm P<0.01), the="" gcs1="" group="" was="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05) ve kalan grupların tümü kontrol grubundan daha düşüktü.

2.1.2 GC'lerin Dox ile hasar görmüş miyokardiyal Se-GSH-Px aktivitesi üzerindeki etkisi.

Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, Dox yaralanma grubu miyokardiyal Se-GSH-Px aktivitesinde yüzde 26.2'lik bir azalmaya sahiptir (P<0.01), gcs,="" gcs,="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" the="" gcs,="" group,="" and="" vit="" e="" group="" increased="" by="" 19.2%,="" 21.1%,="" 25.0%,="" and="" 26.1%="" respectively=""><0.01), which="" were="" all="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0 . 05).

2.1.3 Etkisicistanche glikozitler on the MDA content of the Dox-injured myocardium was reduced by 16.7%, 17.3%, 18.6%, and 17.3% respectively compared with the Dox-injured group (Fall V0.01), which were all close to the Control group (P>0.05).

2.1.4 Dox ile yaralanmış farelerde GC'lerin serum CPK aktivitesi üzerindeki etkisi.

Dox yaralanma grubundaki serum CPK aktivitesi yüzde 87.3 arttı (<0.01),>cistanche glikozitler I, cistanche glikozitlergrubu ve Vit Dox yaralanma grubuyla karşılaştırıldığında, E grubu yüzde 26,6, yüzde 33,1, yüzde 37,4 ve yüzde 36,7 azaldı (tümü F<0.01), which="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" control="">

2.2 Fare miyokardının elektron mikroskobu

2.2.1 Kontrol grubunda miyokardiyal lif sarkomu intakt, miyofibriller düzenli, sarkomer bantları net yapılandırılmış, mitokondri düzgün düzenlenmiş, yapı normal ve nükleer yapı normaldi.

2.2.2 Dox yaralanma grubu

Miyokard liflerinin üst yapısında bariz değişiklikler olduğu, miyokard hücrelerinin şiştiği, intrasitoplazmik sarkomerin büyüdüğü, parlak bandın genişlediği, bazı bölgelerde anormal kasılma bantlarının ortaya çıktığı ve Z çizgisi materyalinin arttığı görülebilir. Mitokondri yaygın olarak şişmiş, hiperplastik, seyrek düzenlenmiş, kırılmış ve vakuollüydü. Sarkoplazmik retikulum genişler, ikincil lizozomlar artar ve fokal dejenerasyon görülebilir. Çekirdeğin hacmi artar ve perinükleer boşluk genişler.

2. 2.3 Kalpteki miyokard liflerinin şişmesi cistanche glikozitlerBen grubu azaltıldı.

Sarkomer yapısı temelde normaldir, ancak sarkomer hala kontrol grubundan daha geniştir. Mitokondri şişmesi azaldı, matrisin yoğunluğu arttı, mitokondri yoğunluğu arttı ve bireysel mitokondri hala değişti. Sitoplazmada artan ikincil lizozomlar.

2.2.4 Miyokardiyal lif yapısı cistanche glikozitlerBen, ben temelde normale döndüm.

Miyofibriller düzgün bir şekilde düzenlenmiştir, sarkomerin yapısı normaldir ve mitokondri yapısı normale döner.

3 Tartışma

Dox, geniş bir anti-tümör spektrumu ve güçlü etki özelliklerine sahip bir tür soğan antibiyotiğidir. Bununla birlikte, Dox, ilacın erken evresinde çeşitli aritmiler, doza bağımlı ve geç evrede konjestif kalp yetmezliği gibi ciddi miyokardiyal toksisiteye neden olabilir ve bu da klinik uygulamasını sınırlar. Dox'un miyokardiyal toksisiteye neden olan ana mekanizması, miyokardiyal hasara neden olan aşırı reaktif oksijen serbest radikallerinin üretilmesidir. Dox'un miyokardiyal dokuya afinitesi, diğer dokulardan önemli ölçüde daha yüksektir. Dox, miyokardiyal hücrelere girdikten sonra, oksijen molekülleri üzerinde etki ederek onları süperoksit anyon serbest radikallerine (Oksit) dönüştürmek için hidrojen peroksit (H2O2) üretimi ile birlikte yarı-dox'a dönüşür. Haber-Weiss Dox yaralanma grubunda Ol ve H2O2'nin MDA içeriği kontrol grubuna göre yüzde 25,8 arttı (P<0.01), and="" the="">cistanche glikozitler |, cistanche glikozitler 1, cistanche glikozitler group, and Vit E group were reduced by 16.7% compared with the Dox injury group. , 17. 3%, 18. 6% and 17. 3% (Fall V0.01), which are all close to the control group (P>{{0}}.05). Reaksiyon veya Fenton reaksiyonu, hidroksil radikalleri (OH • ) üretir. 0$ ve OH • Büyük miktarda birikim dokularda ve hücre zarlarında lipid peroksidasyonuna neden olabilir ve biyolojik makromoleküllere zarar verebilir.

Deneyde, farelere 48 saat intraperitoneal Dox (17.5 mg/kg) enjeksiyonundan sonra fare miyokardındaki SOD ve Se-GSH-Px aktivitelerinin önemli ölçüde azaldığı ve lipid peroksidasyon ürünü içeriğinin önemli ölçüde azaldığı gözlemlendi. MDA önemli ölçüde arttı. Yüksek, serum CPK aktivitesi artar. Elektron mikroskobu altında, kalp kasının üst yapısı hasar gördü, mitokondrinin bariz şişmesi, mitokondrinin yırtılması, vakuol dejenerasyonu, matris yoğunluğunun azalması ve sarkoplazmik retikulumun genişlemesi olarak kendini gösterdi.

GC'lerin tüm doz grupları, Dox ile hasar görmüş farelerin kalp kasındaki serbest radikal süpürücü enzimler SOD ve Se-GSH-Px'in aktivitelerini önemli ölçüde artırabilir, MDA içeriğini azaltabilir ve CPK salınımını azaltabilir. öneriliyorcistanche glikozitler vücuttaki serbest radikal süpürücü enzimlerin aktivitesini artırarak Dox'un neden olduğu lipid peroksidasyon hasarını azaltabilir. Cistanche glikozitler, gruplar miyokardiyal liflerin üst yapısını Dox hasarından önemli ölçüde korur.Modern kemilüminesans analiz teknolojisi ile in vitro olarak tespit edildi ve bulunducistanche glikozitleretkili bir şekilde ortadan kaldırılabilir. Yalnızca OH • ve H2O2 gibi aktif oksijen radikalleri doğrudur. Bir ganglionun süpürücü etkisi özellikle önemlidir "⑵. Cistanche glikozitlerinin miyokardda semi-doks tarafından indüklenen OR'yi temizleyebilmesi, böylece serbest radikallerin zincir reaksiyonunu kesintiye uğratması ve lipid peroksidasyon zincirinin bir blokörü olarak hareket etmesi önerilmektedir.

Bu deneyde, Vit E pozitif kontrol olarak kullanıldı. Sonuçlar, Vit E'nin farelerde Dox kaynaklı akut miyokardiyal hasar üzerinde belirli bir koruyucu etkiye sahip olduğunu gösterdi. Miyokardiyal MDA içeriğini azaltabilir ve SOD ve Se-GSH-Px aktivitelerini artırabilir. Literatüre göre [13], Raporlar tutarlıdır.

Ana bileşeni cistanche glikozitlerfenetilamindirve yapısı Vit E'ye benzer, yani bir fenolik hidroksil grubuna ve bir hidroksil grubuna sahiptir. Bu nedenle, tahmin edilmektedir ki cistanche glikozitlermoleküler yapısının fenolik hidroksil grubu üzerindeki hidrojen atomlarını lipit radikaline (LOO -) sağlayabilir, bu da onu lipo hidroperoksite (LOOH) dönüştürür, bu da daha sonra GSH-Px tarafından toksik olmayan hidroksile ayrıştırılır. Biyofilmdeki doymamış yağ asitlerinin serbest radikaller tarafından peroksidasyonunu önleyerek Dox'un kardiyomiyositlere verdiği zararı azaltır. Mekanizma derinlemesine incelenmeyi beklemektedir.

Referanslar:

[1]Başer RL, Yeşil MD. Tedavinin bir komplikasyonu: antrasiklin kardiyotoksisitesinin önlenmesi için stratejiler [J ]. Kanser Sırtı Rer, 1993,19; 57.

[2]Doroshow JH. Duyulan sıçanlarda antrasiklin antibiyotiklerinin oksijen radikali oluşumu üzerindeki etkisi [J] Cancer Res, 1983,43; 460.

[3] Wang Xiaowen, Li Linlin, Mu Hu Yati, et al. Roxuanrong'un fare dokuları üzerindeki antioksidan etkisi]·Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1998,23(9):554-556.

[4] Mao Xinming, Wang Xiaowen, Li Linlin, et al. Rou Nu Rong Xi'nin sıçanlarda miyokardiyal iskemi üzerindeki koruyucu etkisi □], Chinese Herbal Medicine, 1999, 30(2): 118-120.

[5] Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Toplam et külü macununun [J] anti-lipid peroksidasyonu ve anti-radyasyon etkisi. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997, 22(6): 364-367.

[6] Zou Guolin, Gui Xingfen, Zhong Xiaoling, vb. Bir SOD belirleme yöntemi-pyrogallol kendi kendine oksidasyon yönteminin iyileştirilmesi [J]. Biyokimya ve Biyofizikte İlerleme, 1986, 4:17,

[7] Xia Yiming, Zhu Lianzhen. Kan ve dokularda glutatyon peroksidaz aktivitesinin belirlenmesi. Birinci yöntem DTNB doğrudan yöntemi [J], Hijyen Araştırması, 1987, 16(4): 29-32.

[8] Chen Shunzhi, Jin Youyu. Üç lipid peroksit TBA renk geliştirme yönteminin karşılaştırılması. Klinik Laboratuvar Bilimi Dergisi. 1984, 2(4); 8-10.

[9]Macart M♦ Gerbaut L. Varas proteinlerine karşı iyi bir duyarlılığa izin veren coomassie blue boya bağlama yönteminde bir gelişme: Serebrospinal sıvıya uygulama [J ], Clin Chem Açta, 1982,112:93.

[10] Xu Shuyun, Bian Ruyuan, Chen Xiu, Farmakolojik Deney Metodolojisi [M]. 2. baskı, Pekin: Halkın Tıbbi Yayınevi, 1991.922.

[11]Halliwell B, Gutteridge JMC. Biyoloji ve tıpta serbest radikaller CM J. 2. baskı. New York Oxford University Press * 1989.543-550.

L12]Wang Xiaowen, Jiang Xiaoyan, Eliya Yiming, et al. OH -[J]'nin neden olduğu DNA hasarı üzerinde serbest radikallerin temizlenmesi ve koruyucu etkileri. Çin Eczacılık Dergisi, 2001,36(1):29 -31.

[13]Wu Yuling, Xu Guangyuan. Adriamisin[J] tarafından indüklenen farelerde akut kardiyotoksisite ve Vit E'nin koruyucu etkisi üzerine deneysel çalışma. Dalian Tıp Üniversitesi Dergisi, 1991, 13(1): 22-27.