Cistanche Deserticola'nın Toplam Glikozitleri ve Polisakkaritleri Osteoporozu Önler

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Fujiang Wang 1, Pengfei Tu, Kewu Zeng *, Yong Jiang **

ÖZ

Etnofarmakolojik alaka düzeyi:Geleneksel Çin tıbbı Cistanche Deserticola YC Ma, "böbreği güçlendirme ve kemiği güçlendirme" etkisine sahiptir. Bununla birlikte, C. Deserticola'nın spesifik aktif ekstreleri ve osteoporotik tedavisi için mekanizmalar net değildir.

Çalışmanın amacı:Osteoporoz tedavisi için C. Deserticola'nın etkili bileşen ekstraktlarını ve potansiyel mekanizmalarını belirlemek istedik.

Malzemeler ve yöntemler:Grubumuz, yaşlanma ile hızlandırılmış fare eğilimli 6 (SAMP6) farelerinde toplam glikozitler (TG'ler), polisakaritler (PS'ler) ve oligosakkaritler (OS'ler) dahil olmak üzere anti-osteoporotik aktiviteye sahip C. Deserticola'nın özlerini araştırdı. Kemik yapısı oluşumunu ve kalsiyum birikimlerini araştırmak için Goldner's Trichrome, Van Gieson's (VG), Safranin O-Fast Green boyaması ve von Kossa boyaması yapıldı. Biyokimyasal belirteçleri saptamak için serum toplandı. Mikro-CT ile kemik mikro mimarisi tespit edildi. Kemik morfogenetik proteini-2 (BMP-2), osteokalsin (OCN), osteoprotegerin (OPG), nükleer faktör-κ B ligandının (RANKL) reseptör aktivatörü, p-glikojen sentetaz kinaz{{11 }} (p-GSK-3) ve p- -katenin western blotlama ve immünohistokimya ile analiz edildi.

Sonuçlar:TG'ler ve PS'ler kemik histopatolojik hasarlarını iyileştirdi, yeni kemik, kollajen lif ve kondrosit oluşumunu teşvik etti ve kalsiyum birikimlerini hızlandırdı. Ayrıca, kemik döngüsünün biyobelirteçlerini önemli ölçüde değiştirdiler ve kemik mikromimarisini etkili bir şekilde iyileştirdiler. Diğer mekanizma çalışması, TG'lerin ve PS'lerin RANKL, p- -katenin ifadelerini önemli ölçüde azalttığını ve ayrıca BMP-2, OCN, OPG ve p-GSK{{ ifadesini yukarı doğru düzenlediğini gösterdi{{ 4}} (Ser9).

Çözüm:Bu çalışmanın bulguları, TG'ler ve PS'lerin, SAMP6 farelerinde osteoklastojenik kemik oluşumunu destekleyebileceğini ve kemik mikroyapı hasarını iyileştirebileceğini ve bunların osteoporoz üzerindeki terapötik etkisinin, Wnt/-katenin sinyal yolunu aktive etmek yoluyla olduğunu göstermektedir.

Cistanche olabilirosteoklastojenik kemiği teşvik etmekoluşturma ve iyileştirmekemik mikroyapı hasarı.

1. Giriş

Osteoporoz, yaşlı bireylerde yaygın olarak görülen ve insanlığın sağlığını ciddi şekilde tehlikeye atan bir hastalıktır (Ye ve ark., 2020). Osteoporoz hastaları kırıktan önce tamamen asemptomatik olabilir, bu nedenle osteoporozun etkili bir şekilde önlenmesi ve tedavisi çok önemlidir (Tella ve Gallagher, 2014).

Araştırmalar, artan kemik rezorpsiyonunun ve azalan kemik oluşumunun, kemiğin yeniden şekillenmesinde bir dengesizliğe yol açarak osteoporoza yol açtığını göstermektedir (Sims ve Gooi, 2008). Osteoblastlar ve osteoklastlar, kemik oluşumu ve emilimi için kritik olan iki hücre tipidir. wnt/-katenin yolu, kemik dokusunun büyümesi, gelişmesi ve bakımı için esastır (Cadigan ve Nusse, 1997) ve ayrıca beagle köpek kemik iliği stromal hücrelerinin (BMSC'ler) farklılaşmasının düzenlenmesinde önemli bir rol oynar (Jing ve ark. , 2018). GSK-3 -katenin'in bozulmasını önler. -Katenin daha sonra çekirdeğe girer ve daha sonra T-hücre faktörü/lenfoid-arttırıcı bağlama faktörü ile birleşebilir ve Wnt hedef genlerinin ekspresyonunu düzenler. Bu arada, Wnt/ -katenin sinyalinin, RANKL'ın doğal bir antagonisti olan OPG'nin üretimini ve salgılanmasını uyararak osteoklast farklılaşmasını azalttığı (Glass ve diğerleri, 2005) bulunmuştur (Lacey ve diğerleri, 1998). OPG, kemik oluşumu ve kemik erimesinde önemli bir düzenleyici rol oynar. Her durumda, osteoklastlarda -katenin'in silinmesi, osteoklast sayısını ve kemik rezorpsiyonunu arttırır ve kemik kütlesini azaltır (Wei ve ark., 2011). Kemik erimesi inhibitörleri ve kemik oluşumu hızlandırıcıları esas olarak osteoporoz tedavisinde kullanılır. Halihazırda kullanılan ilaçların klinikte doğru etkinliği olan yan etkilerinin de aşikar olduğu göz önüne alındığında, yan etkisi daha az olan ilaçların aranması acildir.

Cistanche Deserticola YC Ma (C. Deserticola), böbrek yetmezliği, kadın kısırlığı ve yaşlılık kabızlığı gibi çeşitli hastalıkların tedavisi için yaygın olarak kullanılan tonik geleneksel Çin şifalı bitkisi Cistanches Herba, Çin'deki Roucongrong'un kaynak bitkilerinden biridir. Çin'de 1000 yıldan fazla (Ulusal Farmakope Komitesi, 2020). Geleneksel Çin tıbbı (TCM), "böbrek baskın kemikler" ve "böbreği güçlendiren kemiklerin güçlendirilmesi" teorilerine göre, C. Deserticola osteoporozu tedavi etmek için kullanıldı. Çalışmalar, C. Deserticola'nın serum alkalin fosfataz (ALP), osteokalsin ve kalsiyum iyonu seviyelerini iyileştirebileceğini, sıçanların osteoblastlarında BMP-2 ekspresyonunu destekleyebileceğini göstermiştir (Gang ve diğerleri, 2018). Ayrıca çalışmalar, C. Deserticola'nın RANKL ile indüklenen osteoklastogenezise karşı koruyucu etkiler gösterdiğini göstermiştir (Zhang ve ark., 2019). C. Deserticola'nın osteoporoz üzerinde terapötik bir etkisi olmasına rağmen, spesifik aktif bileşenleri çok net değildir. Osteoporoz ve ilgili mekanizmaların tedavisi için C. Deserticola'nın etkili bileşen tiplerini keşfetmek büyük önem taşımaktadır.

Bu nedenle, C. Deserticola'dan farklı türde kimyasal bileşenler içeren ekstraktların SAMP6 fareleri üzerinde bazı yararlı etkilerinin olup olmadığını belirlemek için bu çalışmayı gerçekleştirdik. Bulgu sonuçları, C. Deserticola'nın klinik uygulaması için doğru kılavuzlar verebilir ve osteoporoz tedavisi için C. Deserticola'nın maddi temelini ortaya çıkarabilir.

2. Malzemeler ve yöntemler

2.1. kimyasallar ve tepkimeler

Cistanche Deserticola YC Ma, Mandela Biotechnology Co., Ltd'den (Alashan, İç Moğolistan, Çin) satın alındı ​​ve ardından yazarlardan bir kişi onları tanımladı (PF Tu). TG'ler, PS'ler ve OS'ler daha önce bahsedilen yöntem olarak hazırlandı (Gao ve diğerleri, 2015). Her ekstrenin bileşen analizi, rapora göre HPLC kullanılarak gerçekleştirilmiştir. (Li ve diğerleri, 2019; Wang ve diğerleri, 2020). H&E, Goldner'ın trikrom boyaması, Van Gieson'ın (VG) boyaması ve Safranin O-Fast Green kitleri Boster'dan (Hubei, Çin) satın alındı. Tavşan anti-fare BMP-2 (ab14933), OCN (ab93876), OPG (ab183910) ve RANKL (ab216484) Abcam'dan (Cambridge, İngiltere) satın alındı. Hücre Sinyalleme Teknolojisi, tavşan anti-fare p-GSK-3 (Ser9) (#5558), GSK3 (#12456), -katenin (#13727) ve p- -katenin (# 4176). İkincil antikorlar, Zhongshan Golden Bridge Biotechnology'den (Pekin, Çin) satın alındı.

Yüksek kaliteli cistanche özüitibarenChengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd

2.2. Hayvanlar

5-aylık dişi yaşlanma hızlandırmalı fare/dirençli 1 (SAMR1) ve SAMP6 fareleri, Vital River Laboratory Animal Technology'den (Pekin, Çin) elde edildi. Tüm hayvan manipülasyonları, Pekin Üniversitesi Sağlık Bilimleri Merkezi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından yayınlanan yönergelere uygun olarak gerçekleştirildi.

2.3. İlaç uygulaması

Fareler rastgele olarak aşağıdaki beş gruba ayrıldı: SAMR1 grubu (normal salin, n=10); SAMP6 grubu (normal salin, n =10); TG grubu (400 mg/kg, n=10); PSs grubu (400 mg/kg, n=10) ve OSs grubu (400 mg/kg, n=10) (Gao ve diğerleri, 2015). Tüm ilaçlar 12 hafta boyunca ig ve günlük olarak uygulandı.

2.4. Goldner'ın trikrom boyaması, H&E boyaması, SafraninO-Fast Green boyaması ve Van Gieson'un (VG) boyaması

12 hafta sonra, femurlar hızla çıkarıldı ve yüzde 10 etilen diamin tetraasetik asit (EDTA) kullanılarak 7 gün 4 ◦C'de sabitlendi. Daha sonra, femurlar bir dilim (5 um) halinde kesildi ve üreticinin talimatları izlenerek Goldner Trichrome, Van Gieson (VG), SafraninO-Fast Green ve H&E boyama ile boyandı. Görüntüler ışık mikroskobu (Leica, Solms, Almanya) ile gözlemlendi.

2.5. BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr ve Pyr seviyelerinin ölçümü

Kemik gla proteini (BGP), kemiğe özgü alkalin fosfataz (BALP), prokollajen tip 1 N-terminal propeptid (P1NP), prokollajen tip I C-terminal propeptid (PICP), alkalin fosfataz (ALP), S–C konsantrasyonları -Tip-I-kollajen (S-CTX), tatrate-dirençli asit fosfataz (TRACP), tip-I-kollajen (U-CTX) U-C-telopeptidi, tip-I- U-N-telopeptidi kollajen (U-NTX), D-piridinolin (D-Pyr) ve piridinolin (Pyr), enzime bağlı immünosorban tahlili (Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd, Jiangsu, Çin) ile belirlendi.

2.6. Von Kossa boyama

Femur dilimleri, yoğun bir güneş ışını altında 30 dakika boyunca yüzde 1 gümüş nitrata daldırıldı ve daha sonra üç kez deiyonize su ile yıkandı. Daha sonra, reaksiyona girmemiş gümüşü çıkarmak için 5 dakika boyunca yüzde 5 sodyum tiyosülfat ilave edildi. Kalsiyum fosfat tuzları siyah boyama olarak görüntülendi. Femur kalsiyum içeriğini nicel olarak analiz etmek için Image-Pro Plus yazılımı sürüm 6.0 ve Adobe Photoshop uygulandı.

2.7. Mikro bilgisayarlı tomografi analizi

Tüm femur örnekleri bir mikro-CT tarayıcı (PerkinElmer, MA, ABD) ile 9 μm çözünürlükte tarandı. Kemik mineral yoğunluğu (BMD), kemik hacmi/toplam hacim (BV/TV), trabeküler sayı (Tb. N), trabeküler ayrılma (Tb. Sp), trabeküler kalınlık (Tb. Th) ve doku mineral yoğunluğu (TMD). Üç boyutlu görüntüler CTVox yazılımı (PerkinElmer, MA, ABD) kullanılarak yeniden oluşturuldu.

2.8. Tetrasiklin ve kalsein birikimi

Her hayvana, ötanaziden önce 13. gün ve 3. gün sırasıyla 25 mg/kg tetrasiklin ve 5 mg/kg kalsein intraperitoneal olarak verildi. Tetrasiklin ve kalsein birikimi, Vectra® Polaris™ Otomatik Kantitatif Patoloji Görüntüleme Sistemi (PerkinElmer, MA, ABD) kullanılarak incelenmiştir. Tetrasiklin ve kalsein arasındaki mesafe, Image-Pro Plus yazılım sürümü 6.0 ile gözlemlenebilir.

2.9. Western blot analizi

Femur dokuları homojenize edildi ve RIPA lizis tamponunda lize edildi. Protein konsantrasyonu, bir bisinkoninik asit (BCA) Protein tahlil reaktif kiti (Beijing TransGen Biotech, Beijing, Çin) kullanılarak belirlendi. Toplam proteinler yüzde 10 veya yüzde 12 SDS-PAGE jellerine yüklendi ve daha sonra bir nitroselüloz zara aktarıldı. Membran bloke edildi ve daha sonra gece boyunca primer antikorlar ve GAPDH (Los Angeles, ABD) ile 4 ◦C'de inkübe edildi, ardından sekonder antikor ile inkübasyon yapıldı. Protein analizi bantları, Tanon 5200 Multi (Şangay, Çin) kullanılarak analiz edildi.

2.10. immünohistokimyasal analiz

Femur doku kesitleri primer antikorlarla 4 ◦C'de inkübe edildi. BMP-2, OCN, OPG ve RANKL'a karşı poliklonal antikorlar sırasıyla 1:200 ve 1:100'e seyreltildi. Sekonder antikor fare anti-tavşan IgG (1:200) 37 ◦C'de 1 saat. Vectra® Polaris™ Otomatik Kantitatif Patoloji Görüntüleme Sistemini Kullanma (PerkinElmer, MA, ABD). Proteinin ifadesini nicel olarak analiz etmek için Image-Pro Plus yazılım sürümü 6.0 ve Adobe Photoshop uygulandı.

2.11. istatistiksel analiz

Sonuçlar ortalama ± standart sapma olarak ifade edilir. Farklı gruplar karşılaştırılırken tek yönlü ANOVA yapıldı. İstatistiksel analiz için SPSS yazılım versiyonu 22.0 kullanıldı ve P < 0.05="" istatistiksel="" olarak="" anlamlı="" kabul="">

cistanche reddit

3. Sonuçlar

3.1. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde kemik histopatolojik hasarlarını iyileştirir ve kollajen lif ve kondrosit oluşumunu teşvik eder

Femur patolojik hasarı H&E boyama ile gözlemlenebilir. SAMR1 grubundaki kemiğin histomorfolojik yapıları düzenli olarak düzenlenmiştir. Ancak SAMP6 grubunda yukarıda bahsedilen kemik yapıları hasar görmüştür. TG'ler ve PSs gruplarındaki morfoloji değişiklikleri, SAMP6 grubundakilerden daha azdı. Bununla birlikte, OS tedavi grubu, morfoloji değişiklikleri için önemli bir iyileşme göstermedi (Şekil 1A). Kemik yapı oluşumunu ortaya çıkarmak için Goldner's Trichrome, Van Gieson's (VG) ve Safranin O Fast Green boyaması yapıldı. Sonuçlar, TGs ve PSs gruplarındaki yeni kemik, kollajen lif ve kondrositlerin SAMP6 grubuna kıyasla iyileştiğini gösterdi. Bununla birlikte, OS tedavi grubu, kemik yapısı değişiklikleri için önemli bir iyileşme göstermedi (Şekil 1B-D).

Şekil 1. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde histopatolojik hasarı iyileştirir.

3.2. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde kemik döngüsünün biyobelirteçlerini değiştirir

Osteoporoz meydana geldiğinde, serum BGP ve PICP gibi kemik oluşumu biyobelirteçlerinin seviyeleri önemli ölçüde azalacaktır. Buna karşılık, serum TRACP ve S-CTX dahil olmak üzere kemik rezorpsiyonuyla ilişkili biyobelirteç seviyeleri önemli ölçüde arttı (Şekil 2). Cesaret verici bir şekilde, TG'ler ve PS'ler grupları BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr ve Pyr düzeylerini tersine çevirebilir, ancak işletim sistemleri bunu yapamazdı.

Şekil 2. SAMP6 farelerinde TG'ler ve PS'lerin kemik döngüsünün biyolojik belirteçleri üzerindeki etkileri.

3.3. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde yeni kemik oluşumunu ve kalsiyum birikimini teşvik eder

Fosfat minerallerinin kemik oluşumu ve birikiminin TG'ler, PS'ler ve OS'ler tedavisi ile desteklenip desteklenmediğini test etmek için tetrasiklin kalsein etiketlemesi ve Von Kossa boyaması yapıldı. Sonuçlar, SAMP6 farelerinde yeni kemik oluşumunun SAMR1 farelerindekinden önemli ölçüde düşük olduğunu, TG'ler ve PS'lerin ise yeni kemik oluşumunu önemli ölçüde desteklediğini gösterdi (Şekil 3A). Von Kossa boyaması, TG'ler ve PS'ler tedavi gruplarında çok fazla kalsiyum biriktiğini ortaya çıkardı (Şekil 3B).

Şekil 3. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde yeni kemik oluşumunu ve mineral birikimini destekler.

3.4. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde kemik mikro mimarisini iyileştirir

Kemik mikro mimarisi mikro-CT ile tespit edildi. SAMR1 fareleri ile karşılaştırıldığında, SAMP6 fareleri daha fazla bozulan mikro mimariye sahipken, 12 hafta boyunca TG'ler ve PS'ler ile tedavi edilen farelerde kemik durumu iyileştirildi (Şekil 4). Ayrıca BMD, BV/TV, Tb.N ve Tb endekslerinin de olduğunu bulduk. Th ve Tb indeksleri düşürüldü. SAMP6 farelerinde, SAMR1 farelerine kıyasla Sp ve TMD arttı. TG'ler ve PS'ler BMD, BV/TV, Tb'yi önemli ölçüde artırdı. N, Tb. Th ve azalmış Tb. SAMP6 fareleri ile karşılaştırıldığında Sp ve TMD. Ancak, OSs grubunda önemli bir değişiklik gözlenmedi.

3.5. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde BMP-2, OCN, OPG ve RANKL ifadelerini değiştirir

BMP-2, OCN, OPG ve RANKL'ın protein ifadelerini inceledik. TG'ler ve PS'ler, BMP-2, OCN ve OPG'nin dikkate değer bir şekilde düzenlenmesini indüklerken, RANKL ifadesi aşağı doğru düzenlenir (Şekil 5). Ancak, OS terapi grubunda anlamlı bir fark yoktu.

Şekil 4. TG'ler ve PS'lerin kemik mineral yoğunluğu ve kemik mikromimarisi üzerindeki etkileri.

3.6. TG'ler ve PS'ler, SAMP6 farelerinde p-GSK-3 (Ser9) ve p- -katenin ifadelerini değiştirir

Osteoblastogenezi destekleyen TG'ler ve PS'lerin mekanizmalarını anlamak için, SAMP6 farelerinin kemik dokularında p-GSK-3 (Ser9) ve p- -katenin ifadeleri Western blot kullanılarak ölçüldü (Şekil 6). Sonuçlar, SAMP6 grubu ile karşılaştırıldığında, TG'ler ve PSs tedavilerinin, p-GSK-3 (Ser9) ifadesini belirgin şekilde iyileştirdiğini ve femurdaki p- -katenin ifadesini azalttığını gösterdi. Ancak, OS tedavi grubu önemli bir değişiklik göstermedi.

4. Tartışma

Mevcut çalışmada, C. Deserticola'dan osteoporoza karşı etkili bileşenleri bulmak için SAMP6 ve SAMR1 fareleri kullanılmıştır. Terapötik etkilerin yanı sıra olası mekanizmaları değerlendirmek için C. Deserticola'dan üç ekstrakt kullanıldı. Ayrıca RANKL, OPG, OCN ve BMP-2'nin ekspresyonları ile diğer kemik erime düzenleyicileri de analiz edildi. SAMP6 grubuyla karşılaştırıldığında, TG'ler ve PS'ler, kemiğin histopatolojik hasarını iyileştirebilir ve ayrıca yeni kemik, kollajen lifi, kondrosit ve kalsiyum birikimini teşvik edebilir. Bu arada, her ikisi de kemik döngüsünün biyobelirteçlerini değiştirebilir ve kemik mikro yapısını etkili bir şekilde iyileştirebilir. Bununla birlikte, OS tedavisi için hiçbir koruyucu etki gözlenmedi.

Şekil 5. TG'ler ve PS'ler BMP-2, OCN ve OPG ifadelerini teşvik eder ve RANKL ifadesini azaltır.

TCM'ler, osteoporoz gibi birçok hastalığın semptomlarını hafifletmek için yaygın olarak kullanılmıştır. osteoporoz dahil olmak üzere çeşitli hastalıkların semptomlarını hafifletir. Genellikle böbrekleri canlandırmak ve böbrek özünü korumak için kullanılan düzinelerce doğal Çin şifalı bitkisinden çok sayıda anti-osteoporotik biyoaktif bileşik tanımlanmıştır (Xu ve diğerleri, 2017; Liu ve diğerleri, 2018). C. Deserticola, böbrek yetmezliğinin tedavisi için nispeten yüksek bir güvenliğe ve çok çeşitli terapötik işlevlere sahiptir. Birçok araştırma çalışması, C. Deserticola ekstraktlarının osteoporoz üzerindeki terapötik etkilerini keşfetmiştir (Li ve diğerleri, 2012; Liang ve diğerleri, 2013; Song ve diğerleri, 2018).

Çok potansiyelli mezenkimal kök hücrelerin (MSC'ler) farklılaşmasından olan kemik oluşturan osteoblastlar ve kemik emen osteoklastlar, kısa ömürlü terminal olarak farklılaşmış hücrelerdir (Teitelbaum ve Ross, 2003). Her ikisinin de sürekli olarak kök hücre kaynaklı yenileriyle değiştirilmesi gerekir (Long, 2011). Kemik dokularının farklılaşmasında hayati bir rol oynayan Wnt/ -katenin sinyal yolu, çok potansiyelli MSC'lerin osteoblastlara yönlendirilmesini ve farklılaşmasını teşvik ederek osteoblast üretimini uyarır (Rodda ve McMahon, 2006). Ek olarak, Wnt'ler olgun osteoblastların apoptozunu önler ve böylece hem -katenin bağımlı hem de bağımsız yollarla yaşam sürelerini uzatır (Almeida ve diğerleri, 2005). Bu nedenle, Wnt/ -katenin sinyal yolu, osteoporoz patogenezinin aydınlatılmasında önemli bir rol oynar. Mevcut deneyde, farklı C. Deserticola ekstraktlarından elde edilen anti-osteoporotiklerin etkinliğini incelemek için SAMP6 fareleri kullanıldı. TG'ler ve PS'ler, RANKL ve p- -katenin seviyelerini önemli ölçüde aşağı regüle etti ve BMP-2, OCN, OPG ve p-GSK-3 ifadelerini yukarı düzenledi. Özetle, TG'lerin ve PS'lerin SAMP6 fareleri üzerindeki terapötik etkisi, esas olarak Wnt/-katenin sinyal yolunu aktive etmek yoluyla olmuştur.

Osteoklastların aşırı emilimi osteoporozun önemli bir nedeni olduğundan, osteoklastların aktivasyonu ve farklılaşması ile bağlantılı faktörler, kemik kaybını önlemeye yönelik önemli amaçlar olarak kabul edilebilir (Takatsuna ve ark., 2005). Çalışmamızda, RANKL ekspresyonu belirgin bir şekilde aşağı regüle edildi, aynı zamanda OPG seviyesi TG'ler ve PS'ler tarafından yukarı regüle edilebildi. Kemik oluşumu ve osteoblast hücre farklılaşmasının yeniden şekillenmesi sürecinin temel olarak artan BMP-2 ve OPN ifadeleriyle karakterize edildiği iyi belgelenmiştir (Canalis, 2009). Bu çalışmada, C. Deserticola'nın TG'leri ve PS'lerinin BMP-2 ve OPG ekspresyonlarını artırdığını ve kemik mineralizasyonunu iyileştirdiğini bulduk. Bu nedenle, TG'ler ve PS'ler, BMP-2 ve OPN'yi yükselterek ve RANKL'ı azaltarak kemik oluşumuna aracılık eder.

Kemik oluşumu belirteçleri, kemik yapıcı hücrelerin aktivitesini yansıtır, aynı kemik rezorpsiyonu belirteçleri, osteoklastların aktivitesini yansıtır. Mikromimari, değişen kemik döngüsü belirteçlerinin bir sonucu olarak bozulur. Çalışmamızda kemik erime belirteçleri (S-CTX, TRACP, U-CTX, D-Pyr, U-NTX, Pyr), TG'ler ve PSs gruplarında, tersine kemik oluşum belirteçleri (BGP, BALP) önemli ölçüde azaldı. , P1NP, PICP, ALP) önemli ölçüde artar. Dolayısıyla, C. Deserticola'nın TG'leri ve PS'lerinin osteoporotik kemiğin rekonstrüksiyonunu desteklediği görülebilir.

Wnt/ -katenin yolu, osteoblast farklılaşma belirteçlerinin ve mineralizasyonun ekspresyonunu uyarır, aynı zamanda osteoblastlarda ana osteojenik faktör BMP-2'nin ekspresyonunu aktive eder (Zhang ve diğerleri, 2013). Ek olarak, -katenin osteoblastta OPG ekspresyonunu arttırır, bu da kemik rezorpsiyonunu inhibe ederek dolaylı olarak osteoklast farklılaşmasını baskılar (Baron ve Kneissel, 2013). Mevcut çalışmamız, TG'lerin ve PS'lerin p-GSK-3'yı önemli ölçüde yukarı regüle ettiğini ve p- -katenin seviyesini aşağı regüle ettiğini göstermektedir. Bu sonuçlar, TG'lerin ve PS'lerin anti-osteoporotik üzerindeki fonksiyonunun Wnt/ -katenin sinyal yolunu aktive ederek düzenlendiği sonucunu desteklemektedir.

Önceki HPLC analizimiz, ekinakozit, cistanosid A, akteozit, izoakteozit ve 2′-asetillakteozit dahil olmak üzere beş feniletanoid glikozitin TG'lerdeki ana bileşenler olduğunu gösterdi (Li ve diğerleri, 2019; Shi ve diğerleri, 2019). Yukarıdaki beş feniletanoid glikozitin yapılarının tümü, C. Deserticola'nın antioksidan özelliğinden sorumlu olan fenolik hidroksil grupları bakımından zengindi (Chen ve diğerleri, 2016). Antioksidan sistemin iyileştirilmesinin kemik kaybını önleyebileceği, dolayısıyla bu feniletanoid glikozitlerin anti-osteoporotik aktiviteden sorumlu C. Deserticola'nın potansiyel aktif bileşenleri olabileceği bildirilmiştir. Ekinakozid ve akteozidin, kemik kalitesini ve toplam femur BMD'sini iyileştirme, kemik oluşumunu teşvik etme ve kemik emiliminin inhibisyonu gibi osteoporozun tipik patolojik özelliklerini iyileştirebileceğine dair raporlar vardır (Chen ve ark., 2020). Ek olarak, ekinakozid çarpıcı bir anti-osteoporotik etkiye sahiptir (Li ve ark., 2013). Önceki çalışmalar, cistanosid A'nın NF-κB'yi inhibe ederek ve PI3K/Akt yollarını aktive ederek kemik oluşumunu destekleyebileceğini ve kemik emilimini önleyebileceğini gösterdi (Xu ve diğerleri, 2017). C. Deserticola polisakkaritlerinin anti-osteoporotik etkisi bildirilmemiştir. Bununla birlikte, diğer çalışmalar, astragalus polisakkaritlerinin RANKL ekspresyonunu baskılayabildiğini, serum OPG seviyesini artırabildiğini ve son olarak osteoklast farklılaşmasını engelleyebileceğini göstermiştir (Huo ve Sun, 2016; Hwang ve diğerleri, 2018). C. Deserticola'nın OS'leri esas olarak mannitol, betain, fruktoz, glukoz ve sukrozdan oluşur (Shi ve diğerleri, 2019), bunlar anti-osteoporotik aktivite için bir rapora sahip değildir, bu nedenle OS'lerin osteoporoz üzerinde terapötik bir etkisi yoktur. Özetle, TG'ler ve PS'ler, anti-osteoporozun etkisi için C. Deserticola'daki aktif bileşenlerdir.

Cistanche herba takviyeleri tozusahipanti-osteoporoz etkisi.

Daha fazla bilgi için lütfen buraya tıklayın.

5. Sonuçlar

Sonuç olarak, C. çölicola'dan gelen TG'ler ve PS'ler, OS'leri değil, Wnt/-katenin sinyal yolunu düzenleyerek SAMP6 farelerinde kemik oluşumunu artırabilir. Gelecekte, TG'ler ve PS'ler, osteoporoz için umut verici kemik koruyucu terapötik ajanlar haline gelebilir.